circ_0001955靶向miR-1243调控肝癌BEL-7402细胞增殖、凋亡及EMT的机制研究

目的:探讨circ_0001955调控miR-1243对肝癌BEL-7402细胞增殖、凋亡及上皮间质转化(EMT)的机制研究。方法:肝癌BEL-7402细胞分为si-NC组、si-circ_0001955组、miR-NC组、miR-1243组、si-circ_0001955+anti-miR-NC组、si-circ_0001955+anti-miR-1243组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测circ_0001955和miR-1243的表达水平;MTT检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot法检测蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测circ_0001955和miR-1243的靶向关系。结果:与癌旁组织比较,肝癌组织中circ_0001955表达水平升高,miR-1243表达水平降低(P<0.05)。抑制circ_0001955表达后,肝癌细胞BEL-7402活性降低,凋亡率升高,E-cadherin蛋白表达水平升高,Vimentin蛋白表达水平降低(P<0.05)。circ_0001955靶向调控miR-1243;miR-1243过表达后,细胞活性降低,细胞凋亡率升高,Vimentin表达水平降低,E-cadherin表达水平升高(P<0.05)。干扰miR-1243表达逆转了抑制circ_0001955表达对肝癌BEL-7402细胞增殖、凋亡和EMT的作用。结论:抑制circ_0001955表达可能通过调控miR-1243抑制肝癌BEL-7402细胞增殖及EMT,促进细胞凋亡。

miR-1243通过靶向hnRNPA2B1调控肝癌HepG2细胞增殖和迁移

目的:探讨miR-1243通过靶向调控核不均一核糖核蛋白A2/B1(hnRNPA2B1)表达对肝癌HepG2细胞增殖、迁移的影响及其分子机制。方法:用q PCR和WB法检测40例肝癌组织及其癌旁组织(2019年1月至2021年8月在武汉市第三医院首义院区手术切除标本)和正常人肝细胞QSG-7701与肝癌细胞HepG2、Hep3b、HuH-7中miR-1243、hnRNPA2B1 m RNA水平及hnRNPA2B1、cyclin D1、MMP-2蛋白水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-1243和hnRNPA2B1的靶向关系。HepG2细胞分为对照组(不转染)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-1243 mimic组(转染miR-1243 mimic)、miR-1243 mimic+pcDNA3.1组(转染miR-1243 mimic和pcDNA3.1)、miR-1243 mimic+pc-hnRNPA2B1组(转染miR-1243 mimic和pc-hnRNPA2B1)后进行相应转染;WB法检测肝癌组织及细胞和转染后各组细胞的hnRNPA2B1、cyclin D1、MMP-2蛋白表达水平;CCK-8法检测转染后各组HepG2细胞的增殖能力;划痕愈合实验检测转染后各组HepG2细胞的迁移能力。结果:与癌旁组织或正常人肝细胞QSG-7701相比,肝癌组织和肝癌细胞中miR-1243呈低表达、hnRNPA2B1 mRNA及其蛋白呈高表达(均P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果证实miR-1243与hnRNPA2B1间存在靶向关系,且miR-1243通过靶向hnRNPA2B1负调控其表达。转染miR-1243 mimic后HepG2细胞中hnRNPA2B1蛋白表达、细胞增殖能力、划痕愈合率及cyclin D1、MMP-2蛋白表达均显著降低(均P<0.05);而同时过表达hnRNPA2B1和miR-1243可逆转过表达miR-1243对HepG2细胞增殖、迁移的抑制作用。结论:miR-1243通过靶向hnRNPA2B1表达调控肝癌HepG2细胞的增殖和迁移。

组织miR-1243、LGR5、miR-146a在PTC肿瘤恶性生物学特征评估中价值

目的探讨组织微小RNA-1243(miR-1243)、富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5(LGR5)、微小RNA-146a(miR-146a)在甲状腺乳头状癌(PTC)肿瘤恶性生物学特征评估中的价值。方法选取2017年1月至2020年8月本院收治的104例PTC患者组织为癌组织组,并取其癌旁组织作为癌旁组织组。采用分化程度、T分期、淋巴结转移评估PTC恶性生物学特征,采用实时荧光定量PCR检测癌组织、癌旁组织的miR-1243、miR-146a表达,采用免疫组化检测LGR5表达,比较癌组织、癌旁组织的miR-1243、LGR5、miR-146a表达,并对数据进行统计学分析。结果癌组织miR-1243表达低于癌旁组织,LGR5、miR-146a表达高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);癌组织LGR5阳性率显著高于癌旁组织,差异均有统计学意义(62.50%vs4.81%,P<0.05);miR-1243与LGR5(r=-0.570,P<0.001)、miR-146a(r=-0.708,P<0.001)呈负相关,LGR5与miR-146a呈正相关(r=0.726,P<0.001);miR-1243与T分期、淋巴结转移呈负相关(P<0.05);LGR5、miR-146a与T分期、淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。结论组织miR-1243、LGR5、miR-146a可作为评估PTC肿瘤恶性生物学特征的分子标志物,为PTC靶向治疗、临床决策等提供重要参考信息。