circPTPRA与miR-1252在胃癌中的表达及其对细胞生物学行为的影响

目的探讨circPTPRA与miR-1252在胃癌中的表达及其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法取术中切除的胃癌组织与癌旁组织(距癌组织>5 cm处的组织)进行实验,随后采用qRT-PCR检测胃癌组织、癌旁组织中circPTPRA与miR-1252的表达情况。体外培养人胃癌细胞HGC-27,分别转染pcDNA、pcDNA-circPTPRA、si-NC、si-circPTPRA、anti-miR-NC、anti-miR-1252、共转染pcDNA-circPTPRA和miR-NC、共转染pcDNA-circPTPRA和miR-1252 mimics。CCK-8实验检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期;Transwell小室实验检测细胞迁移,Transwell Matrigel体外侵袭实验检测细胞侵袭;双荧光素酶报告基因实验检测circPTPRA与miR-1252的靶向关系;Western blot检测MMP-2、MMP-9蛋白表达量。结果与癌旁组织比较,胃癌组织中circPTPRA的表达量显著降低(P<0.05),miR-1252的表达量显著升高(P<0.05)。与转染pcDNA组比较,转染pcDNA-circPTPRA组细胞活力显著降低,G0/G1期细胞比例显著升高,S期细胞比例显著降低,细胞迁移数及侵袭数显著减少,MMP-2、MMP-9蛋白的表达水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。circPTPRA能够靶向结合miR-1252;转染pcDNA-circPTPRA组miR-1252的相对表达量显著降低(P<0.05);转染si-circPTPRA组miR-1252的相对表达量显著升高(P<0.05)。与转染anti-miR-NC组比较,转染anti-miR-1252组细胞活力显著降低,G0/G1期细胞比例显著升高,S期细胞比例显著降低,细胞迁移及侵袭数显著减少,MMP-2、MMP-9蛋白表达水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与共转染pcDNA-circPTPRA和miR-NC组比较,共转染pcDNA-circPTPRA和miR-1252 mimics组细胞活力显著升高,G0/G1期细胞比例显著降低,S期细胞比例显著升高,迁移及侵袭细胞数显著增多,MMP-2、MMP-9蛋白表达水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论circPTPRA过表达可通过负向调控miR-1252而抑制胃癌细胞增殖、迁移、侵袭及诱导细胞周期阻滞。

miR-1252通过靶向调控TGF-β1-PI3K/Akt通路对高糖诱导的心肌纤维化的保护作用的机制

为了探讨miR-1252对高糖诱导的心肌纤维化的保护作用的机制,本研究通过小鼠的心脏的组化切片分析miR-1252敲除对糖尿病和正常小鼠心肌纤维化的影响,并且通过Western-blotting实验研究miR-1252调控高糖诱导的心肌纤维化的信号通路。结果表明:糖尿病且miR-1252敲除的小鼠心肌纤维化程度最高,且miR-1252敲除的成纤维细胞TGF-β1表达增高,TGF-β1能上调LOX、Akt和p-Akt蛋白的表达,但是需要PI3K蛋白的存在。本研究结果初步说明,miR-1252能通过调控TGF-β1-PI3K/Akt信号通路抑制高糖诱导的心肌纤维化,且LOX是miR-1252主要的调控蛋白之一。

肉桂醛抑制高糖诱导的心肌纤维化的机制研究

目的探讨肉桂醛在高血糖诱导的心肌纤维化进程中的保护作用以及可能的调控信号通路等机制。方法高糖饲养持续喂养乳鼠12周并肉桂醛处理心肌纤维化细胞48小时(对照组无肉桂醛处理),麻醉处死乳鼠取出心脏,并进行病理包埋切片、HE染色,CCK8法检测细胞的增殖情况;分离乳鼠心肌成纤维细胞,分别在含5.6 m M正常葡糖糖和25 m M高葡萄糖培养基培养24h后,用流式Annexin-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;设计miR-1252特异性引物,运用q PCR检测其在各组处理心肌成纤维细胞的表达水平。结果低糖培养条件下,心肌细胞排列整齐,结构完整;高糖培养破坏细胞形态,结构组织紊乱;流式Annexin-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,发现高糖能显著诱导心肌成纤维细胞的凋亡,而CA能抑制心肌成纤维细胞的凋亡。miR-1252在高糖诱导的心肌成纤维细胞的表达水平要显著低于正常组和CA组。结论肉桂醛可以改善高糖毒性对乳鼠心肌细胞的损伤,抑制心肌成纤维细胞的凋亡,可能是通过刺激miR-1252的表达的机制改善心肌纤维化。