miR-1268重组慢病毒质粒构建及其在人前体脂肪细胞中的表达验证

目的构建miR-1268重组慢病毒质粒,观察其在人前体脂肪细胞HPA中的表达情况。方法从NCBI Gen Bank数据库查找miR-1268的DNA序列,用Primer 5.0软件设计PCR引物,以HPA细胞的DNA为模板进行PCR扩增;克隆慢病毒表达载体,进而包装成空载慢病毒和miR-1268过表达慢病毒;HPA细胞分别感染空载慢病毒和miR-1268过表达慢病毒,荧光定量PCR检测miR-1268表达水平。结果测序结果表明,miR-1268前体序列与Gen Bank上的序列完全相同。与空载慢病毒感染的HPA细胞比较,miR-1268过表达慢病毒感染的HPA细胞miR-1268上调2.5倍。结论成功构建miR-1268重组慢病毒质粒,感染的HPA细胞高表达miR-1268。