circ-SKA3通过miR-1303调控TLR4轴在动脉粥样硬化中的作用

[目的]探究环状RNA纺锤体与动粒相关蛋白3(circ-SKA3)通过miR-1303调控Toll样受体4(TLR4)轴在动脉粥样硬化(As)中的作用。[方法]收集2019年4月—2022年4月收治的30例As患者经颈动脉内膜剥脱术切除的颈动脉斑块及病变血管组织、对应斑块旁正常组织与静脉血,另收集30例健康对照者静脉血。微阵列分析、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、荧光原位杂交(FISH)实验检测circ-SKA3在As患者斑块组织和对照样本、血浆外泌体、人脐静脉内皮细胞(HUVEC)、As模型小鼠主动脉组织中的表达和定位。通过生物信息学、双荧光素酶报告基因检测、RNA免疫共沉淀等方法验证circ-SKA3、miR-1303、TLR4之间的相互关系。通过CCK-8、细胞划痕实验、Transwell实验、血管形成实验检测HUVEC增殖、迁移、血管形成能力,蛋白质印迹法检测TLR4轴相关蛋白表达。油红O染色、HE染色、Masson染色观察As模型小鼠主动脉组织病变情况,免疫组织化学、免疫荧光检测As模型小鼠主动脉组织TLR4的表达情况。[结果]As患者斑块组织、血浆外泌体、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)处理的HUVEC和As模型小鼠主动脉组织中circ-SKA3、TLR4的表达水平上调(P<0.05),miR-1303的表达水平下调(P<0.05)。功能分析表明,circ-SKA3在体外实验中促进HUVEC损伤,在体内实验中促进As进展。机制分析表明,circ-SKA3可通过海绵吸附miR-1303促进TLR4表达,抑制circ-SKA3/miR-1303/TLR4轴可抑制As病变形成。[结论]circ-SKA3在As患者颈动脉斑块、血浆外泌体、ox-LDL处理的HUVEC和As模型小鼠主动脉中的表达显著增高,circ-SKA3/miR-1303/TLR4轴可促进体内外As模型发展。

非小细胞肺癌患者肿瘤组织和血浆中miR-1303水平表达研究

目的探讨微小核糖核酸(micro-ribonucleic acid,miR)-1303在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者肿瘤组织和外周血中的表达及其临床意义。方法回顾性选取2017年1月~2019年10月在武警湖北省总队医院内一科收治的NSCLC患者67例纳入病例组,均经术后病理确诊为NSCLC,另选取同期体检的30例健康受试者纳入对照组。收集NSCLC患者手术切除后的肿瘤组织和癌旁组织以及所有受试者的外周血,采用实时荧光聚合酶链反应(real time fluorescence polymerase chain reaction,RT-PCR)检测组织及血浆中miR-1303的表达水平,分析miR-1303与临床病理特征的关系;Pearson分析血浆和组织中miR-1303的相关性;绘制受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)评价血浆miR-1303对NSCLC诊断的效能。结果与癌旁组织相比,NSCLC肿瘤组织中miR-1303(1.883±0.658 vs 1.512±0.263)表达水平明显升高,差异具有统计学意义(t=4.286,P<0.01)。与对照组比较,NSCLC患者血浆miR-1303(1.413±0.552 vs 1.012±0.214)水平明显升高,差异具有统计学意义(t=9.138,P<0.01)。Pearson相关性分析,NSCLC患者血浆miR-1303和肿瘤组织中的miR-1303水平呈正相关(r=0.319,P=0.022)。ROC曲线显示,当血浆miR-1303截断值为1.583时,诊断NSCLC的敏感度和特异度分别为0.701,0.967,曲线下面积为0.870(95%CI:0.752~0.921)。miR-1303>1.583和miR-1303≤1.583组患者在淋巴结转移、TNM分期方面比较差异具有统计学意义(t=4.264,8.412,均P<0.01)。结论NSCLC患者血浆和肿瘤组织中的miR-1303水平明显上调,且与临床分期及淋巴结转移有关,可作为NSCLC辅助诊断及病情监测的新指标。