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miR-143-5p和miR-335-5p在宫颈癌组织中的表达及临床意义
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作者 陈菁 刘岩 +2 位作者 姜文静 刘羽 杨晨曦 《疑难病杂志》 CAS 2024年第6期675-680,共6页
目的分析微小核糖核酸-143-5p(miR-143-5p)和miR-335-5p在宫颈癌组织中的表达及其临床意义。方法选择2018年7月—2020年6月康复大学青岛中心医院/青岛市中心医院肿瘤妇科二科手术治疗的宫颈癌患者120例,随访期间失访5例,根据随访结果将... 目的分析微小核糖核酸-143-5p(miR-143-5p)和miR-335-5p在宫颈癌组织中的表达及其临床意义。方法选择2018年7月—2020年6月康复大学青岛中心医院/青岛市中心医院肿瘤妇科二科手术治疗的宫颈癌患者120例,随访期间失访5例,根据随访结果将患者分为预后良好组78例和预后不良组37例;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测宫颈癌组织及其癌旁组织中miR-143-5p、miR-335-5p的相对表达量;多因素Logistic回归分析影响宫颈癌患者预后的因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-143-5p、miR-335-5p预测宫颈癌患者预后的价值。结果癌组织中miR-143-5p、miR-335-5p水平低于癌旁组织(t/P=22.710/<0.001、22.950/<0.001);FIGO分期为Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤中低分化、有淋巴结转移的宫颈癌患者癌组织中miR-143-5p、miR-335-5p水平低于FIGO分期为Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤高分化、无淋巴结转移的患者(miR-143-5p:χ^(2)/P=3.041/0.003、3.573/0.001、3.443/0.001;miR-335-5p:χ^(2)/P=5.769/<0.001、2.890/0.005、2.738/0.007);预后不良组癌组织miR-143-5p、miR-335-5p水平低于预后良好组(t/P=3.718/<0.001、3.150/0.002);预后良好组患者FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移比例高于预后不良组(χ^(2)/P=18.261/<0.001、9.635/0.002);FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期是影响宫颈癌患者预后的危险因素[OR(95%CI)=4.105(1.484~11.353)],而miR-143-5p高、miR-335-5p高是其保护因素[OR(95%CI)=0.196(0.084~0.458)、0.220(0.088~0.549)];癌组织miR-143-5p、miR-335-5p及二者联合预测宫颈癌患者预后的AUC分别为0.743、0.726、0.879,二者联合优于各自单独预测价值(Z/P=2.346/0.019、2.601/0.009)。结论miR-143-5p、miR-335-5p在宫颈癌组织中呈下调表达,二者联合预测宫颈癌患者预后的价值较高。 展开更多
关键词 宫颈癌 微小核糖核酸-143-5p 微小核糖核酸-335-5p 预后
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Circular RNA LPAR3通过miR-143-5p/USP14通路调控食管癌细胞糖酵解的研究
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作者 查建栋 徐志渊 陈文琦 《医学分子生物学杂志》 CAS 2023年第4期332-338,共7页
目的探究调控食管癌细胞糖酵解的机制。方法逆转录实时定量PCR(quantitative real-time,qRT-PCR)法分别检测环状RNA溶血磷脂酸受体(circular RNA lysophosphatidic acid receptor 3,CircLPAR3),微小RNA-143-5(microRNA-143-5p,miR-143-... 目的探究调控食管癌细胞糖酵解的机制。方法逆转录实时定量PCR(quantitative real-time,qRT-PCR)法分别检测环状RNA溶血磷脂酸受体(circular RNA lysophosphatidic acid receptor 3,CircLPAR3),微小RNA-143-5(microRNA-143-5p,miR-143-5p)和泛素特异性蛋白酶14(ubiquitin-specific protease 14,USP14)的表达水平;使用Seahorse XF 24细胞外通量分析仪测量细胞外酸化率(extracellular acidification rate,ECAR)和耗氧率(oxygen comsumpition rate,OCR);Western印迹法检测糖酵解途径关键酶HK2的表达水平;使用Starbase数据库预测CircLPAR3与miR-143-5p以及miR-143-5p与USP14的靶向结合位点,双荧光素酶试验验证CircLPAR3和miR-143-5p以及miR-143-5p与USP14的靶向关系。结果与正常人食管上皮细胞(normal human esophageal epithelial cells,Het-1A)组比较,食管癌细胞系中CircLPAR3高表达,且KYSE450细胞系的表达最高,同时miR-143-5p低表达而USP14高表达。与Het-1A组比较,KYSE450组HK2的蛋白表达水平增加,同时细胞ECAR增加,整体糖酵解OCR减少;敲低CircLPAR3的表达导致细胞HK2的蛋白表达水平减少,ECAR减少,整体糖酵解OCR增加;在抑制CircLPAR3的表达情况下,抑制miR-143-5p的表达能够部分逆转细胞的糖酵解途径;双荧光素酶实验验证了CircLPAR3和miR-143-5p的靶向关系,以及miR-143-5p和USP14的靶向关系。结论CircLPAR3能够通过调控miR-143-5p/USP14通路调节食管癌细胞糖酵解途径。 展开更多
关键词 环状RNA溶血磷脂酸受体 微小RNA-143-5 泛素特异性蛋白酶14 食管癌 糖酵解
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miR-143-5p对镉致肾细胞凋亡的调控作用及其机制 被引量:2
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作者 陈志敏 谷大为 +3 位作者 周明 严淑 石惠 蔡云清 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期490-495,共6页
目的 :探讨mi R-143-5p对镉诱导LLC-PK1细胞凋亡的调控作用及其机制。方法 :通过基因芯片技术筛选出由镉引起的差异表达mi RNAs,并用实时定量PCR方法验证基因芯片结果的可靠性;应用Lipofectamine 2000瞬时转染mi R-143-5p的模拟物和抑... 目的 :探讨mi R-143-5p对镉诱导LLC-PK1细胞凋亡的调控作用及其机制。方法 :通过基因芯片技术筛选出由镉引起的差异表达mi RNAs,并用实时定量PCR方法验证基因芯片结果的可靠性;应用Lipofectamine 2000瞬时转染mi R-143-5p的模拟物和抑制剂建立mi R-143-5p高表达和低表达的模型,并结合q RT-PCR技术验证转染效果;Hoechst 33258染色和Annexin V-PI双染法检测细胞凋亡;生物信息学分析结合实时定量PCR和Western blot验证mi R-143-5p靶基因的表达;Western blot分析mi R-143-5p对细胞凋亡相关通路的调控作用。结果:镉可增强LLC-PK1细胞的mi R-143-5p表达水平(P<0.01);转染mi R-143-5p模拟物或抑制剂后,与对照组(mi R-NC)比较,mi R-143-5p表达明显上调或下调(P<0.01);mi R-143-5p的过表达可促进LLC-PK1细胞凋亡(P<0.01);mi R-143-5p在AKT3的m RNA和蛋白水平上发挥靶向调控作用;mi R-143-5p过表达能抑制pAkt和p-Bad蛋白表达,促进caspase-9和caspase-3蛋白上调。结论 :mi R-143-5p可能通过作用于靶基因AKT3,并抑制Akt/Bad信号通路,促进镉诱导LLC-PK1细胞的凋亡。 展开更多
关键词 凋亡 mir-143-5p AKT
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miR-143-5p靶向AGR2在肝癌细胞增殖和凋亡中的作用 被引量:1
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作者 任松 杨林青 +1 位作者 潘龙飞 田红卫 《山西医科大学学报》 CAS 2022年第11期1376-1384,共9页
目的探讨miR-143-5p在肝癌细胞增殖和凋亡中的作用及其机制。方法qRT-PCR检测正常肝细胞HL-7702和肝癌细胞(BEL-7402、HepG2、SMMC-7721、MHCC-97H和Hep3B)中的miR-143-5p表达。选取肝癌细胞BEL-7402和HepG2,将每株肝癌细胞分别分为:mim... 目的探讨miR-143-5p在肝癌细胞增殖和凋亡中的作用及其机制。方法qRT-PCR检测正常肝细胞HL-7702和肝癌细胞(BEL-7402、HepG2、SMMC-7721、MHCC-97H和Hep3B)中的miR-143-5p表达。选取肝癌细胞BEL-7402和HepG2,将每株肝癌细胞分别分为:mimics-NC组(转染阴性对照mimics-NC)和miR-143-5p mimics组(转染miR-143-5p mimics)。采用MTT法、克隆形成实验、流式细胞术和Western blot分别检测mimics-NC组和miR-143-5p mimics组细胞增殖能力、克隆形成能力、凋亡率和凋亡相关基因(Bax、Caspase-3和Bcl-2)的表达。通过靶基因预测网站RNA22预测miR-143-5p的靶基因。双荧光素酶报告基因验证miR-143-5p和靶基因前梯度蛋白2(AGR2)关系。qRT-PCR和Western blot检测mimics-NC组和miR-143-5p mimics组肝癌细胞BEL-7402和HepG2中AGR2的表达水平。再将肝癌细胞BEL-7402和HepG2分别分为:si-NC组和si-AGR2组,分别转染阴性对照si-NC和si-AGR2。采用MTT、克隆形成实验和流式细胞术分别检测si-NC组和si-AGR2组细胞增殖能力、克隆形成能力和凋亡率。结果肝癌细胞BEL-7402、HepG2、SMMC-7721、MHCC-97H和Hep3B中的miR-143-5p表达明显低于正常肝细胞HL-7702(P<0.01)。与mimics-NC组相比,miR-143-5p mimics组BEL-7402和HepG2细胞增殖能力和克隆形成能力明显降低(P<0.01),凋亡率明显上升(P<0.01)。与mimics-NC组相比,miR-143-5p mimics组BEL-7402和HepG2中Bax和Caspase-3表达明显上升(P<0.01),Bcl-2表达明显下降(P<0.01)。靶基因预测网站和双荧光素酶报告基因验证AGR2是miR-143-5p的靶基因。与mimics-NC组相比,miR-143-5p mimics组靶基因AGR2的表达明显下降(P<0.01)。与si-NC组相比,si-AGR2组BEL-7402和HepG2细胞增殖能力和克隆形成能力明显下降(P<0.01),凋亡率明显上升(P<0.01)。结论miR-143-5p可能通过靶向AGR2抑制肝癌细胞的增殖,促进肝癌细胞的凋亡。 展开更多
关键词 肝癌细胞 mir-143-5p 细胞增殖 细胞凋亡
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缺氧胃癌癌细胞衍生的外泌体转移miR-143-5p促进胃癌侵袭、转移 被引量:3
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作者 刘伟 胡永波 +2 位作者 白少华 穆磊 李珊 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2021年第12期1331-1338,共8页
目的分析胃癌细胞释放外泌体在缺氧诱导胃癌进展中的作用和分子调控机制。方法通过超速离心法提取胃癌细胞培养基中外泌体,利用电子显微镜、免疫印迹法对外泌体进行鉴定,RT-PCR分析外泌体、胃癌细胞中miR-143-5p水平。构建miR-143-5p an... 目的分析胃癌细胞释放外泌体在缺氧诱导胃癌进展中的作用和分子调控机制。方法通过超速离心法提取胃癌细胞培养基中外泌体,利用电子显微镜、免疫印迹法对外泌体进行鉴定,RT-PCR分析外泌体、胃癌细胞中miR-143-5p水平。构建miR-143-5p antagomir/angomir分别抑制、增强胃癌细胞中miR-143-5p的表达。双萤光素酶报告基因验证miR-143-5p与下游SMDT1 mRNA的偶联。利用细胞划痕愈合实验分析胃癌细胞迁移、侵袭能力变化,细胞克隆形成实验分析胃癌细胞增殖能力变化。结果缺氧诱导胃癌细胞HGC、AGS高分泌外泌体促进了常氧胃癌细胞的增殖克隆、迁移和侵袭能力增加。缺氧诱导胃癌细胞及外泌体高表达miR-143-5p,并且通过外泌体转导并促使常氧胃癌细胞的miR-143-5p上调。在线数据库Starbase中胃癌组织miR-143-5p呈明显高表达趋势,而且与胃癌患者不良预后明显正相关。萤光素酶报告基因预测并证实了miR-143-5p与抑癌基因SMDT1 mRNA的偶联结合,并且竞争性抑制SMDT1 mRNA转录表达。富含miR-143-5p的缺氧缓解外泌体被常氧胃癌细胞内吞,并通过抑制SMDT1表达,可间接激活PI3K/Akt途径促进了这些常氧胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移。相反,通过转染miR-143-5p antagomir抑制miR-143-5p表达,或使用PI3K抑制剂LY294002阻断PI3K/Akt通路可有效抑制缺氧胃癌细胞衍生的外泌体介导的促癌作用。结论胃癌中的缺氧微环境可能促进肿瘤细胞释放富含miR-143-5p的外泌体,进而被常氧胃癌细胞以内吞方式吸收并最终促进癌细胞的侵袭、克隆增殖。 展开更多
关键词 外泌体 胃癌 mir-143-5p SMDT1 双荧光素酶报告
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LncRNA cancer susceptibility 20 regulates the metastasis of human gastric cancer cells via the miR-143-5p/MEMO1 molecular axis 被引量:2
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作者 Ke-Shu Shan Wei-Wei Li +4 位作者 Wang Ren Shuai Kong Li-Pan Peng Hong-Qing Zhuo Shu-Bo Tian 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2022年第16期1656-1670,共15页
BACKGROUND Gastric cancer(GC)is considered as one of the most widespread malignancies.Emerging evidence has shown that lncRNAs can function as important oncogenes or tumor suppressors during GC progression.AIM To inve... BACKGROUND Gastric cancer(GC)is considered as one of the most widespread malignancies.Emerging evidence has shown that lncRNAs can function as important oncogenes or tumor suppressors during GC progression.AIM To investigate the effect and mechanism of lncRNA cancer susceptibility 20(CASC20)in the proliferation and metastasis of GC cells.METHODS Data mining and clinical samples were used to evaluate the expression of CASC20 in GC and adjacent tissues.CASC20 was down-regulated in GC cells by shortinterfering RNA.Cell proliferation was evaluated by CCK-8 assay,and cell migration and invasion were detected by wound healing and Transwell assays.The expressions of proteins related to epithelial-mesenchymal transition were detected by western blot assay.RESULTS The expression of CASC20 was increased in GC tumor tissues and various GC cell lines.High CASC20 expression was correlated with a high risk of lymphatic metastasis and poor prognosis in GC patients.In vitro assays showed that silencing CASC20 reduced cell proliferation,migration,and invasion in GC cells.Mechanistic studies revealed that CASC20 exhibits oncogenic functions by regulating MEMO1 expression through competitive endogenous binding to miR-143-5p,leading to induction of epithelial-mesenchymal transition.CONCLUSION Our findings indicate that CASC20 serves as a tumor promoter by regulating metastasis in GC via the miR-143-5p/MEMO1 axis.CASC20 may be a potential therapeutic target for GC. 展开更多
关键词 Gastric cancer LncRNA Cancer susceptibility 20 mir-143-5p MEMO1 Epithelialmesenchymal transition
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缺氧环境下miR-143-5p/HIF-1α信号轴调控人牙髓干细胞促血管生成潜能的机制研究
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作者 孟紫君 何璇 +3 位作者 庞彩凤 刘春萍 黄春艳 陈文霞 《临床误诊误治》 CAS 2022年第10期106-112,共7页
目的探讨氯化钴诱导的化学缺氧对人牙髓干细胞促血管生成潜能的影响及miR-143-5p/缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)信号轴在其中的作用。方法体外分离培养人牙髓干细胞,流式细胞术检测细胞表面标志物。使用含不同浓度氯化钴(0、50、100、200μ... 目的探讨氯化钴诱导的化学缺氧对人牙髓干细胞促血管生成潜能的影响及miR-143-5p/缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)信号轴在其中的作用。方法体外分离培养人牙髓干细胞,流式细胞术检测细胞表面标志物。使用含不同浓度氯化钴(0、50、100、200μmol/L)的培养基处理细胞24 h或48 h。通过CCK-8和Transwell小室实验检测缺氧对人牙髓干细胞增殖和迁移的影响;qRT-PCR检测miR-143-5p及HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达;Western Blot检测细胞HIF-1α蛋白表达;ELISA检测培养液上清中VEGF浓度。构建过表达miR-143-5p慢病毒(miR-143-5p mimics)、过表达阴性对照(mimics-NC)、沉默miR-143-5p慢病毒(miR-143-5p inhibitor)、沉默阴性对照(inhibitor-NC)载体转染人牙髓干细胞,qRT-PCR检测miR-143-5p及HIF-1α、VEGF mRNA表达。结果原代培养人牙髓干细胞表面抗原CD29、CD90呈阳性表达,CD34、CD45呈阴性表达。50μmol/L组和100μmol/L组细胞增殖活性高于对照组(P<0.01)。50μmol/L组、100μmol/L组和200μmol/L组细胞迁移能力均高于对照组,且100μmol/L组和200μmol/L组高于50μmol/L组(P<0.01)。miR-143-5p表达随着氯化钴浓度的升高而降低(P<0.01);HIF-1α、VEGF mRNA与蛋白表达水平随氯化钴浓度的升高而升高(P<0.01)。与转染mimics-NC比较,转染miR-143-5p mimics人牙髓干细胞HIF-1α、VEGF mRNA表达水平降低(P<0.05,P<0.01);与转染inhibitor-NC比较,转染miR-143-5p inhibitor人牙髓干细胞HIF-1α和VEGF mRNA表达水平升高(P<0.01)。结论氯化钴诱导的化学缺氧可促进人牙髓干细胞血管生成潜能,该作用呈浓度依赖性,miR-143-5p/HIF-1α信号轴可能参与调控该作用机制。 展开更多
关键词 人牙髓干细胞 氯化钴 缺氧诱导因子- 血管内皮生长因子 mir-143-5p
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MiR-143-5p调节MAPK/ERK途径对大鼠肺纤维化模型肺组织中炎症反应的影响 被引量:1
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作者 王平 王攀 《解剖学研究》 CAS 2022年第3期208-212,共5页
目的 探索MiR-143-5p通过MAPK/ERK途径改善肺纤维化大鼠模型气道炎症反应的效果及机制。方法 6~8周龄雌性Sprague-Dawley大鼠45只随机分为对照组、造模组、miR-143-5P组每组15只。造模组和miR-143-5P组给予博来霉素5 mg/kg气管注射,对... 目的 探索MiR-143-5p通过MAPK/ERK途径改善肺纤维化大鼠模型气道炎症反应的效果及机制。方法 6~8周龄雌性Sprague-Dawley大鼠45只随机分为对照组、造模组、miR-143-5P组每组15只。造模组和miR-143-5P组给予博来霉素5 mg/kg气管注射,对照组给予等量的生理盐水气管注射;造模后第8天miR-143-5P组给予agomiR-143-5P,对照组和造模组给予agomiR-NC。观察大鼠一般情况、存活率。检测大鼠呼吸频率(F)、潮气量(TV)、呼气峰流量(PEF)、吸气峰流量(PIF)和呼气时间(TE),ELISA法检测支气管肺泡灌洗液中炎症因子TNF-α和IL-1β的水平,对肺组织进行HE染色,Western blot检测大鼠肺组织中p-ERK和ERK的蛋白表达。结果 miR-143-5P组大鼠一般情况改善,生存率有所提高。肺功能检测提示F、TV、PEF、PIF和TE均较造模组改善(P<0.05),而吸气时间(TI)与造模组相比差异无统计学意义(P>0.05);HE染色提示miR-143-5P组肺组织病理变化较造模组改善;造模组和miR-143-5P组大鼠支气管肺泡灌洗液中炎症因子TNF-α和IL-1β的水平高于对照组(P<0.05),而miR-143-5P组均低于造模组(P<0.05);Western blot法检测p-ERK和ERK蛋白表达水平并计算p-ERK/ERK比率发现,造模组和miR-143-5P组p-ERK/ERK比率高于对照组(P<0.05),而miR-143-5P组低于造模组(P<0.05)。结论 miR-143-5P可能通过抑制MAPK/ERK信号通路改善PF大鼠模型的肺功能,减轻气道的炎症反应。 展开更多
关键词 肺纤维化 mir-143-5p 丝裂原活化蛋白激酶 细胞外调节蛋白激酶
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灵芝提取物通过miR-143-3p对Aβ_(25~35)诱导的神经细胞损伤的影响
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作者 马玲 钟利国 +1 位作者 崔裕如 刘彬 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第6期1485-1489,共5页
目的 探讨灵芝提取物对β淀粉样蛋白(Aβ)_(25~35)诱导的神经细胞损伤的影响及其可能的作用机制。方法 采用Aβ_(25~35)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞PC12建立阿尔茨海默病(AD)细胞模型,不同浓度的灵芝提取物处理PC12细胞,anti-miR-NC、anti-m... 目的 探讨灵芝提取物对β淀粉样蛋白(Aβ)_(25~35)诱导的神经细胞损伤的影响及其可能的作用机制。方法 采用Aβ_(25~35)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞PC12建立阿尔茨海默病(AD)细胞模型,不同浓度的灵芝提取物处理PC12细胞,anti-miR-NC、anti-miR-143-3p分别转染至PC12细胞后进行Aβ_(25~35)处理24 h,miR-NC、miR-143-3p mimics分别转染至PC12细胞后加入10 mg/L灵芝提取物与Aβ_(25~35)处理24 h;采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡;采用试剂盒检测丙二醛(MDA)的水平和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性;采用实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-143-3p表达量。结果 Aβ_(25~35)作用条件下,灵芝提取物可明显降低细胞凋亡率、MDA水平、miR-143-3p表达量(P<0.05),明显升高细胞活力和SOD、CAT的活性,且呈剂量依赖性(P<0.05);转染anti-miR-143-3p后Aβ_(25~35)诱导的PC12细胞活力和SOD、CAT活性明显升高,细胞凋亡率及MDA水平明显降低(P<0.05);转染miR-143-3p mimics可明显逆转灵芝提取物对Aβ_(25~35)诱导的PC12细胞增殖、凋亡及氧化应激的作用。结论 灵芝提取物可通过抑制miR-143-3p表达减轻Aβ_(25~35)诱导的PC12细胞损伤。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 pC12细胞 灵芝提取物 mir-143-3p 细胞增殖 凋亡 氧化应激
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hsa-circ-002179靶向miR-143-3p调控自噬-凋亡平衡在胃癌5-氟尿嘧啶化疗耐药性中的作用研究
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作者 陶克龙 张振兴 +1 位作者 徐关根 陶锋 《浙江中西医结合杂志》 2024年第1期21-27,共7页
目的探究hsa-circ-002179靶向miR-143-3p调控自噬-凋亡平衡对胃癌的5-氟尿嘧啶(5-Fu)化疗耐药性的影响。方法通过5-Fu处理AGS细胞构建5-Fu耐药细胞模型(AGS/5-Fu),采用CCK8法检测5-Fu对AGS和AGS/5-Fu细胞活性的影响,采用荧光定量PCR(qRT... 目的探究hsa-circ-002179靶向miR-143-3p调控自噬-凋亡平衡对胃癌的5-氟尿嘧啶(5-Fu)化疗耐药性的影响。方法通过5-Fu处理AGS细胞构建5-Fu耐药细胞模型(AGS/5-Fu),采用CCK8法检测5-Fu对AGS和AGS/5-Fu细胞活性的影响,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中hsa-circ-002179和miR-143-3p的表达;通过流式细胞术和Western blot分别检测细胞凋亡水平与自噬相关蛋白LC3、Beclin-1和p62的表达。同时,通过软件预测hsa-circ-002179与miR-143-3p的结合位点,并采用RIP和双荧光素酶实验验证其结合作用。结果与对照组比较,耐药组的细胞活性[(172.33±9.53)%比(106.00±6.16)%,P<0.01]和自噬水平升高、凋亡率(20.5%比43.8%,P<0.01)降低,hsa-circ-002179表达升高[(4.46±0.34)比(1.05±0.66),P<0.01];转染si-002179后,耐药细胞活性降低[(80.00±2.45)%比(102.67±7.13)%,P<0.05],而凋亡水平升高(31.3%比21.8%,P<0.05)。RIP和双荧光素酶报告实验证实hsa-circ-002179与miR-143-3p直接结合,且与对照组比较,耐药细胞中miR-143-3p的表达降低[(0.38±0.05)比(1.04±0.07),P<0.01]。并且,hsa-circ-002179能够调控miR-143-3p的水平。同时,miR-143-3p抑制剂处理能够升高转染si-002179后的耐药细胞自噬水平。自噬抑制剂处理降低了耐药细胞的自噬水平和细胞活性,升高凋亡水平;在此基础上转染OE-002179则升高自噬水平和细胞活性,降低凋亡水平,进一步转染miR-143-3p模拟物可以逆转以上变化。结论hsa-circ-002179靶向miR-143-3p可能可以调控自噬-凋亡平衡,进而影响胃癌细胞的5-Fu化疗耐药性。 展开更多
关键词 hsa-circ-002179 mir-143-3p 自噬 凋亡 胃癌 5-Fu 化疗耐药性
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miR-143-3p和miR-509-5p在儿童肺炎支原体肺炎疾病程度及预后评估中的应用价值
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作者 杨肖翠 刘清华 +2 位作者 程效增 黄薇 李静 《安徽医学》 2024年第1期74-78,共5页
目的分析微小核糖核酸-143-3p(miR-143-3p)与微小核糖核酸-509-5p(miR-509-5p)在肺炎支原体肺炎患儿血清中的表达水平,及其与疾病严重程度和预后的关系。方法选取2020年5月至2022年4月邯郸市妇幼保健院收治的肺炎支原体肺炎患儿135例(... 目的分析微小核糖核酸-143-3p(miR-143-3p)与微小核糖核酸-509-5p(miR-509-5p)在肺炎支原体肺炎患儿血清中的表达水平,及其与疾病严重程度和预后的关系。方法选取2020年5月至2022年4月邯郸市妇幼保健院收治的肺炎支原体肺炎患儿135例(肺炎支原体肺炎组),根据疾病严重程度分为轻症组84例和重症组51例,另选取同期体检健康儿童130例作为对照组,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清miR-143-3p与miR-509-5p水平;对肺炎支原体肺炎患儿进行肺功能检测,测定呼吸频率(RR)、潮气量(VT)、呼气时间(Te)、达峰时间(TPTEF)、达峰容积(VPTEF),计算TPTEF/Te、VPTEF/VT;采用Pearson法分析肺炎支原体肺炎患儿RR、VT、TPTEF/Te、VPTEF/VT与血清miR-143-3p、miR-509-5p的相关性;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-143-3p和miR-509-5p对重症肺炎支原体肺炎以及预后不良的预测价值。结果肺炎支原体肺炎组miR-143-3p水平为(0.25±0.04),miR-509-5p为(0.37±0.04),均低于对照组(P<0.05);与轻症组相比,重症组肺炎支原体肺炎患儿RR升高,VT、TPTEF/Te、VPTEF/VT、血清miR-143-3p及miR-509-5p水平均降低(P<0.05);肺炎支原体肺炎患儿血清miR-143-3p、miR-509-5p与VT、TPTEF/Te、VPTEF/VT均呈正相关(P<0.05);血清miR-143-3p、miR-509-5p预测重症肺炎支原体肺炎的曲线下面积为0.820(灵敏度为82.4%,特异度为83.3%)、0.849(灵敏度为72.5%,特异度为92.9%);血清miR-143-3p、miR-509-5p预测预后不良的曲线下面积为0.735(灵敏度为79.6%,特异度为63.0%)、0.859(灵敏度为81.5%,特异度为87.3%)。结论肺炎支原体肺炎患儿血清miR-143-3p、miR-509-5p水平降低,二者均对疾病严重程度和预后具有判别价值,有望作为临床病情评估以及预后判断的指标。 展开更多
关键词 肺炎支原体肺炎 严重程度 微小核糖核酸-143-3p 微小核糖核酸-509-5p
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circ0000799经miR-1287-5p/GPX4轴调控铁死亡促进三阴乳腺癌脑转移 被引量:1
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作者 刘庆 宋彩露 +2 位作者 刘凌蕊 许嫒淇 莫运仙 《中南医学科学杂志》 CAS 2024年第1期6-11,共6页
目的探索circ0000799经miR-1287-5p/GPX4轴对铁死亡促进三阴乳腺癌脑转移的影响机制。方法检测circ0000799在乳腺癌细胞系及乳腺癌组织中的表达。沉默亲代三阴乳腺癌细胞MDA-MB-231和子代脑转移细胞MDA-MB-231-BM中circ0000799的表达。... 目的探索circ0000799经miR-1287-5p/GPX4轴对铁死亡促进三阴乳腺癌脑转移的影响机制。方法检测circ0000799在乳腺癌细胞系及乳腺癌组织中的表达。沉默亲代三阴乳腺癌细胞MDA-MB-231和子代脑转移细胞MDA-MB-231-BM中circ0000799的表达。比较各组细胞生长、侵袭能力、脑转移结节数目。使用双荧光素酶报告基因实验验证circ0000799、miR-1287-5p、GPX4调控关系。检测circ0000799对铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)表达和总谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽比的影响。结果与人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)或癌旁组织比较,circ0000799在三阴乳腺癌细胞系及乳腺癌组织中上调,且在子代三阴乳腺癌细胞系及脑转移灶中上调最为显著(P<0.05)。与sh-circCTR组比较,sh-circ0000799组细胞生长、侵袭能力降低(P<0.05)。sh-circCTR组、sh-circ0000799组、sh-circ0000799+RSL3组脑转移结节数量依次降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示,circ0000799可与miR-1287-5p相互作用,miR-1287-5p可与GPX4相互作用。与sh-circCTR组比较,sh-circ0000799组miR-1287-5表达增加,总谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽比和GPX4表达降低(P<0.05)。与miR-CTR组比较,miR-1287-5p组GPX4 mRNA表达降低(P<0.05)。结论circ0000799在三阴乳腺癌中高表达且可能通过miR-1287-5p/GPX4轴促进三阴乳腺癌脑转移。 展开更多
关键词 三阴乳腺癌 脑转移 circ0000799 铁死亡 mir-1287-5p/GpX4
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新风胶囊抑制软骨细胞炎症和细胞外基质降解:基于调控miR-502-5p/TRAF2/NF-κB轴
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作者 周巧 刘健 +3 位作者 万磊 朱艳 齐亚军 胡月迪 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期108-118,共11页
目的探讨新风胶囊(XFC)对白介素(IL)-1β诱导的软骨细胞功能的影响及作用机制。方法构建IL-1β诱导的软骨细胞炎症模型;SD大鼠灌胃制备XFC含药血清。细胞增殖实验(CCK-8)和流式细胞术筛选最佳XFC含药血清浓度;双荧光素酶报告分析miR-502... 目的探讨新风胶囊(XFC)对白介素(IL)-1β诱导的软骨细胞功能的影响及作用机制。方法构建IL-1β诱导的软骨细胞炎症模型;SD大鼠灌胃制备XFC含药血清。细胞增殖实验(CCK-8)和流式细胞术筛选最佳XFC含药血清浓度;双荧光素酶报告分析miR-502-5p和TRAF2的靶向关系。构建miR-502-5p抑制表达质粒(inhibitor)及阴性对照组,转染至软骨细胞中。分为对照组(NC),IL-1β组,XFC组,IL-1β+NC-inhibitor,IL-1β+miR-502-5pinhibitor,IL-1β+miR-502-5pinhibitor+XFC最佳含药血清组,酶联免疫吸附试验(ELASA)检测IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-4、IL-10的水平。逆转录PCR(RT-PCR)、蛋白质免疫印迹实验(WB)、免疫荧光法检测Ⅱ型胶原α1(COL2A1)、基质金属蛋白酶13(MMP13)、软骨蛋白聚糖抗体(ADAMTS5)和miR-502-5p/TRAF2/NF-κB基因的表达。结果与NC组相比,IL-1β组中软骨细胞活力下降,细胞凋亡率升高,且miR-502-5p、IL-4、IL-10和COL2A1表达下降,IL-1β、TNF-α和ADAMTS5、MMP13、TRAF2、NF-κB p65表达升高(P<0.05)。筛选得出20%XFC为最佳含药血清浓度。与IL-1β组相比,XFC含药血清干预后,软骨细胞活力升高,细胞凋亡率下降,IL-1β、TNF-α、ADAMTS5、MMP13、TRAF2、NF-κBp65表达下降,miR-502-5p、IL-4、IL-10和COL2A1表达升高(P<0.05)。与NC-inhibitor相比,转染miR-502-5p inhibitor后,IL-1β、TNF-α、ADAMTS5、MMP13、TRAF2、NF-κB p65表达升高,miR-502-5p、IL-4、IL-10和COL2A1表达下降;与miR-502-5pinhibitor相比,将miR-502-5pinhibitor转染的软骨细胞和最佳XFC含药血清共培养后,XFC含药血清能逆转miR-502-5p抑制状态对软骨细胞炎症和ECM的影响。结论XFC抑制软骨细胞炎症、细胞外基质降解,减轻IL-1β诱导的软骨细胞损伤,其机制可能是通过调节miR-502-5p/TRAF2/NF-κB轴。 展开更多
关键词 mir-502-5p 骨关节炎 新风胶囊 炎症 细胞外基质
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circLRP6调节miR-31-5p/HMGA1轴对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响
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作者 许峥嵘 任卫东 +3 位作者 谷君 张志英 邓文娟 左丽娟 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第3期246-251,共6页
目的分析circLRP6调节miR-31-5p/高迁移率族蛋白A1(HMGA1)轴对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响。方法体外培养人肾小管上皮HK-2细胞,分为对照组、高糖组、高糖+si-NC组、高糖+si-circLRP6组、高糖+si-circLRP6+miR-NC组、高糖+si-ci... 目的分析circLRP6调节miR-31-5p/高迁移率族蛋白A1(HMGA1)轴对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响。方法体外培养人肾小管上皮HK-2细胞,分为对照组、高糖组、高糖+si-NC组、高糖+si-circLRP6组、高糖+si-circLRP6+miR-NC组、高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor组、高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor+si-NC组、高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor+si-HMGA1组,对照组置于含5.5 mmol/L葡萄糖的DMEM培养基内培养,其余各组置于含25 mmol/L葡萄糖的DMEM培养基内培养,并通过Lipofectamine 2000将相应质粒转染至HK-2细胞内,实时定量PCR测定细胞circLRP6、miR-31-5p、HMGA1 mRNA水平,试剂盒测定细胞上清液白细胞介素-6(IL-6)水平、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平、乳酸脱氢酶(LDH)活性以及丙二醛(MDA)含量;流式细胞仪观察细胞凋亡;Western blotting测定细胞HMGA1、Bax、Bcl-2蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验分析miR-31-5p与circLRP6、HMGA1的靶向关系。结果与对照组相比,高糖组HK-2细胞circLRP6水平升高,细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、LDH、MDA、细胞凋亡率、Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(均P<0.05);与高糖组相比,高糖+si-circLRP6组HK-2细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、LDH、MDA、细胞凋亡率、Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(均P<0.05);与高糖+si-circLRP6组相比,高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor组HK-2细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、LDH、MDA、细胞凋亡率、Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(均P<0.05);与高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor组相比,高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor+si-HMGA1组HK-2细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、LDH、MDA、细胞凋亡率、Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(均P<0.05)。miR-31-5p与circLRP6、HMGA1均具有靶向关系。结论沉默circLRP6可能通过上调miR-31-5p,抑制HMGA1表达,对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤发挥保护作用。 展开更多
关键词 高糖 肾小管 circLRp6 mir-31-5p 高迁移率族蛋白A1
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安罗替尼通过调控miR-16-5p/PD-1轴抑制人非小细胞肺癌细胞系增殖并促进凋亡
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作者 梁香存 魏小雨 +2 位作者 梁健 王庆 耿广 《基础医学与临床》 CAS 2024年第4期503-512,共10页
目的 探讨安罗替尼对非小细胞肺癌细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制。方法 将非小细胞肺癌细胞系A549和H1299分别采用安罗替尼、miR-16-5p激动剂和/或PD-1过表达载体进行处理。CCK-8实验和EDU实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;... 目的 探讨安罗替尼对非小细胞肺癌细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制。方法 将非小细胞肺癌细胞系A549和H1299分别采用安罗替尼、miR-16-5p激动剂和/或PD-1过表达载体进行处理。CCK-8实验和EDU实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;RT-qPCR检测miR-16-5p相对表达量;Western blot检测程序性细胞死亡-1蛋白(PD-1)的表达。双荧光素酶报告实验确定miR-16-5p和PD-1的靶向关系。用A549细胞构建裸鼠成瘤模型,检测安罗替尼对体内肿瘤生长的影响。结果 安罗替尼在A549和H1299细胞中以剂量依赖的方式显著增加miR-16-5p表达,同时降低PD-1表达,并且抑制细胞增殖,促进细胞凋亡(P<0.05)。miR-16-5p过表达可抑制细胞增殖,促进细胞凋亡(P<0.05)。miR-16-5p能靶向PD-1,且负调控PD-1表达。siRNA下调PD-1表达后明显抑制细胞增殖,并促进细胞凋亡(P<0.05)。过表达PD-1则可逆转安罗替尼介导的miR-16-5p对A549和H1299细胞的促增殖和抗凋亡作用(P<0.05)。体内实验证实,安罗替尼能够明显抑制肿瘤生长(P<0.05)。结论 安罗替尼可有效抑制非小细胞肺癌细胞增殖,促进细胞凋亡,减少体内肿瘤生长,其作用机制与miR-16-5p/PD-1信号轴相关。 展开更多
关键词 安罗替尼 非小细胞肺癌 mir-16-5p pD-1 细胞增殖
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miR-222-5p靶向WNK2基因促进肝细胞癌生长
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作者 石鑫 陈虎 +1 位作者 王威 张敬坡 《中国老年学杂志》 北大核心 2024年第3期627-633,共7页
目的 探讨miR-222-5p对肝细胞癌(HCC)生长的影响及其分子机制。方法 实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-222-5p和WNK2 mRNA在HCC组织、癌旁组织及正常肝细胞系L02、不同HCC细胞系Hep3B、HepG2、HuH-7中表达;生物信息学预测和双... 目的 探讨miR-222-5p对肝细胞癌(HCC)生长的影响及其分子机制。方法 实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-222-5p和WNK2 mRNA在HCC组织、癌旁组织及正常肝细胞系L02、不同HCC细胞系Hep3B、HepG2、HuH-7中表达;生物信息学预测和双荧光素酶验证miR-222-5p和WNK2靶向关系;取生长密度达50%~60%的HepG2癌细胞,分为miR-222-5p NC组、miR-222-5p mimics组、miR-222-5p inhibitor组、miR-222-5p NC+pSUPER-si NC组、miR-222-5p NC+pSUPER-si WNK2组、miR-222-5p inhibitor+pSUPER-si NC组、miR-222-5p inhibitor+pSUPER-si WNK2组、miR-222-5p NC+pcDNA组、miR-222-5p NC+pcDNA-WNK2组、miR-222-5p mimics+pcDNA组、miR-222-5p mimics+pcDNA-WNK2组,另取未转染L02正常肝细胞和HepG2癌细胞。24 h后,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖率;平板克隆法检测克隆形成能力;裸鼠成瘤实验检测细胞在动物体内成瘤能力;Western印迹法检测WNK2蛋白表达水平。结果 与癌旁组织及正常肝细胞相比,HCC组织及各细胞系中miR-222-5p表达水平明显升高,WNK2 mRNA和蛋白水平明显降低(P<0.05)。与miR-222-5p NC组相比,miR-222-5p mimics组miR-222-5p表达水平、增殖活性、克隆形成数和成瘤能力明显升高(P<0.05),miR-222-5p inhibitor组miR-222-5p表达水平、增殖活性、克隆形成数和成瘤能力明显降低,WNK2蛋白表达水平升高(P<0.05)。miR-222-5p和WNK2存在靶向关系。与miR-222-5p NC+pcDNA组相比,miR-222-5p NC+pcDNA WNK2组细胞增殖活性、克隆形成数和成瘤能力明显降低(P<0.05);miR-222-5p mimics+pcDNA组增殖活性、克隆形成数和成瘤能力明显升高(P<0.05)。与miR-222-5p NC+pcDNA WNK2组相比,miR-222-5p mimics+pcDNA WNK2组细胞增殖活性、克隆形成数和成瘤能力明显升高(P<0.05)。与miR-222-5p mimics+pcDNA组相比,miR-222-5p mimics+pcDNA WNK2组细胞增殖活性、克隆形成数和成瘤能力明显降低(P<0.05)。结论 过表达miR-222-5p可能通过靶向抑制WNK2表达促进肝癌HepG2细胞的增殖、克隆形成和成瘤能力,促进HCC生长。 展开更多
关键词 mir-222-5p 肝细胞癌 克隆形成 细胞增殖
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miR-214-5p通过DNMT1介导的AXIN2基因DNA甲基化修饰在皮肤基底细胞癌中的作用机制
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作者 熊斯颖 邵蕾 +2 位作者 杨艳 高爱莉 揭丽云 《新疆医科大学学报》 CAS 2024年第1期27-32,共6页
目的探讨皮肤基底细胞癌中轴抑制蛋白2(Axis inhibition protein 2,AXIN2)基因启动子甲基化对基因转录的影响及miR-214-5p通过靶向DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase1,DNMT1)对AXIN2甲基化率的调控机制。方法收集2022年1月-2023年6... 目的探讨皮肤基底细胞癌中轴抑制蛋白2(Axis inhibition protein 2,AXIN2)基因启动子甲基化对基因转录的影响及miR-214-5p通过靶向DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase1,DNMT1)对AXIN2甲基化率的调控机制。方法收集2022年1月-2023年6月在广州市皮肤病防治所就诊治疗的102例皮肤基底细胞癌(Cutaneous basal cell carcinoma,BCC)患者作为研究对象,提取癌组织和癌旁正常组织标本及基线资料。焦磷酸测序法检测AXIN2基因启动子区甲基化率。实时荧光定量PCR检测AXIN2、DNMT1基因mRNA和miR-214-5p的表达水平。将miR-214-5p模拟物(mimic)、抑制物(inhibitor)及其阴性对照(mimic NC和inhibitor NC)分别对基底细胞癌A431细胞进行转染,48 h后检测DNMT1基因mRNA表达水平和AXIN2基因甲基化率。结果BCC癌组织的AXIN2基因甲基化率显著高于癌旁正常组织(t=5.128,P<0.001),AXIN2基因mRNA相对表达水平显著低于癌旁正常组织(t=7.826,P<0.001),DNMT1基因mRNA表达水平显著高于癌旁正常组织(t=4.838,P<0.001),miR-214-5p表达水平显著低于癌旁正常组织(t=5.426,P<0.001)。BCC癌组织的AXIN2基因甲基化率与其mRNA表达水平呈负相关(r=-0.793,P<0.001),DNMT1基因mRNA水平与AXIN2基因甲基化率呈正相关(r=0.814,P<0.001),miR-214-5p表达水平与DNMT1基因mRNA水平呈负相关(r=-0.747,P<0.001)。双荧光素酶报告基因实验结果证实,DNMT1是miR-214-5p的靶基因。细胞转染后,与mimic NC、inhibitor和inhibitor NC比较,mimic的DNMT1基因mRNA水平、AXIN2基因甲基化率显著降低(P<0.001);而inhibitor的DNMT1基因mRNA水平和AXIN2基因甲基化率相较于其他三组明显上升(P<0.001)。结论miR-214-5p可通过调控下游靶蛋白DNMT1表达,影响AXIN2基因的DNA甲基化率,调控AXIN2基因的表达水平,参与皮肤基底细胞癌的发生机制。 展开更多
关键词 基底细胞癌 mir-214-5p DNA甲基化转移酶1 轴抑制蛋白2 启动子区甲基化
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miR-340-5p靶向调控ARID1A对甲状腺癌活性、迁移和侵袭的影响
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作者 段飞 陈羿 +1 位作者 查官金 段训凰 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第6期1480-1485,共6页
目的 探讨miR-340-5p靶向调控富含AT的相互作用结构域(ARID)1A对甲状腺癌活性、迁移和侵袭的影响。方法 通过实时荧光定-聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western印迹检测miR-340-5p和ARID1A在甲状腺癌细胞中表达水平。通过噻唑蓝(MTT)和Transw... 目的 探讨miR-340-5p靶向调控富含AT的相互作用结构域(ARID)1A对甲状腺癌活性、迁移和侵袭的影响。方法 通过实时荧光定-聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western印迹检测miR-340-5p和ARID1A在甲状腺癌细胞中表达水平。通过噻唑蓝(MTT)和Transwell实验检测转染miR-340-5p抑制物后癌细胞活性、迁移和侵袭变化。双荧光素酶报告基因检测miR-340-5p和ARID1A的靶向结合关系。最后通过同时敲低miR-340-5p和ARID1A的回复实验验证miR-340-5p调控ARID1A影响癌症发展。结果 miR-340-5p在甲状腺癌细胞中明显高表达,ARID1A表达明显较低(P<0.05)。通过抑制BCPAP细胞中miR-340-5p表达明显减少了癌细胞活性、迁移和侵袭水平。miR-340-5p和ARID1A具有直接靶向结合关系。敲降ARID1A能够明显逆转miR-340-5p抑制物对BCPAP细胞活性、迁移和侵袭的抑制作用。结论 miR-340-5p是甲状腺癌中的促癌基因,ARID1A为miR-340-5p的靶标下游,miR-340-5p通过靶向调控ARID1A促进甲状腺癌细胞活性、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 甲状腺癌 mir-340-5p 富含AT的相互作用结构域(ARID)1A 细胞活性 转移
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miR-210-5p对小鼠脂肪干细胞成骨分化的影响及作用机制分析
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作者 郑世雄 杨巍 刘合亮 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期127-133,共7页
[目的]观察miR-210-5p在小鼠脂肪干细胞增殖和成骨分化中的作用并探讨其作用机制.[方法]将小鼠脂肪干细胞分空白对照组、miR-210-5p模拟物阴性对照组、miR-210-5p模拟物组、miR-210-5p抑制物阴性对照组和miR-210-5p抑制物组,采用CCK-8... [目的]观察miR-210-5p在小鼠脂肪干细胞增殖和成骨分化中的作用并探讨其作用机制.[方法]将小鼠脂肪干细胞分空白对照组、miR-210-5p模拟物阴性对照组、miR-210-5p模拟物组、miR-210-5p抑制物阴性对照组和miR-210-5p抑制物组,采用CCK-8细胞计数法检测细胞增殖能力,茜素红染色观察钙盐矿化结节形成能力,用实时荧光定量PCR检测miR-210-5p水平及成骨分化标志物BMP2、Smad1、Smad5和Runx2 mRNA表达水平,进而用蛋白免疫印迹法检测BMP2、Smad1、Smad5和Runx2蛋白表达水平.[结果] miR-210-5p模拟物组细胞增殖活力显著升高(P<0.01),矿化结节显著增加,BMP2、Smad1、Smad5和Runx2 mRNA和蛋白表达水平显著上调(P<0.01);miR-210-5p抑制物组细胞增殖活力显著降低(P<0.01),矿化结节显著降低,BMP2、Smad1、Smad5和Runx2 mRNA和蛋白表达水平显著下调(P<0.01).[结论] miR-210-5p可能通过调控BMP2/Smad信号通路促进小鼠脂肪干细胞增殖和成骨分化. 展开更多
关键词 mir-210-5p BMp2/Smad信号通路 小鼠脂肪干细胞 成骨分化
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CircBICD2调节miR-218-5p/RhoA轴对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响
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作者 谢耕耘 安晓燕 王佳 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期97-103,共7页
目的:探讨环状RNA(CircRNA)·BICD2调节miR-218-5p/Ras同源基因家族成员A·(RhoA)轴对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响。方法:qRT-PCR、Western·blot分别检测OSCC组织、癌旁组织、人口腔上... 目的:探讨环状RNA(CircRNA)·BICD2调节miR-218-5p/Ras同源基因家族成员A·(RhoA)轴对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响。方法:qRT-PCR、Western·blot分别检测OSCC组织、癌旁组织、人口腔上皮细胞系HOEC及OSCC细胞系HSC-4、CAL-27、SCC-15中Circ·BICD2、miR-218-5p表达及Rho·A蛋白表达;将SCC-15细胞分为Ct组(A,未转染对照)、si-NC组(B)、si-Circ·BICD2组(C)、miR-NC组(D)、miR-218-5p组(E)、si-Circ·BICD2+anti-NC组(F)、si-Circ·BICD2+anti-miR-218-5p组(G),qRT-PCR检测细胞中Circ·BICD2、miR-218-5p表达;·CCK-8法和平板克隆实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;·Western·blot检测Rho·A、E-cadherin、Vimentin、N-cadherin表达;双荧光素酶验证Circ·BICD2与miR-218-5p、miR-218-5p与Rho·A的关系。结果:在OSCC组织和细胞中,Circ·BICD2、Rho·A蛋白高表达,miR-218-5p低表达,在SCC-15细胞中miR-218-5p相对表达量最低,Circ·BICD2表达及Rho·A蛋白相对表达量最高(P<0.05)。后续实验取SCC-15细胞为研究对象;与B组比较,C组Circ·BICD2、Rho·A蛋白表达降低,miR-218-5p表达升高(P<0.05);与D组比较,E组miR-218-5p表达上调,Rho·A蛋白表达下调(P<0.05);与C组、F组相比,G组miR-218-5p表达降低,Rho·A蛋白表达升高(P<0.05)。下调Circ·BICD2或过表达miR-218-5p均可抑制SCC-15细胞增殖和EMT,促进细胞凋亡;下调miR-218-5p减弱了沉默Circ·BICD2对SCC-15细胞增殖、EMT的抑制作用以及对细胞凋亡的促进作用;·Circ·BICD2靶向调控miR-218-5p/Rho·A轴。结论:沉默Circ·BICD2可能通过上调miR-218-5p来抑制Rho·A表达,抑制SCC-15细胞增殖、EMT,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 BICD2 mir-218-5p 口腔鳞状细胞癌 增殖 上皮间质转化
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