STAT3 miR-146-b反馈回路抑制IL-6的NF-κB信号轴调控结直肠癌细胞的干性机制

目的:探究STAT3 miR-146-b反馈回路抑制IL-6的NF-κB信号轴调控结直肠癌细胞的干性机制。方法:用Dulbecco改良的Eagle培养基(DMEM)培养结直肠癌细胞HCT116和正常人结肠上皮细胞CCD 841 CoN细胞。通过免疫荧光检测IL-6和NF-κB信号轴。通过Western blot检测p-STAT3、p-JAK2和miR-146-b蛋白表达水平。通过Transwell分析法检测细胞迁移能力,通过TUNEL染色检测细胞凋亡。通过CCK-8评估不同处理组细胞活力。通过Western blot检测EMT间充质标志物波形蛋白(Vimentin,VIM),SNAIL和ZEB1及上皮标志物E-钙粘蛋白(CDH1)水平。通过PCR检测CRC标志物CD44、CD133、NANOG和Lgr5mRNA的表达。结果:与对照组相比,CRC组IL-6和NF-κB表达水平均升高(P<0.05),而IL-6抑制剂组较CRC组IL-6和NF-κB表达水平均降低(P<0.05)。与对照组相比,CRC组p-STAT3、p-JAK2和miR-146-b蛋白含量均升高(P<0.05),而IL-6抑制剂组较CRC组p-STAT3、p-JAK2和miR-146-b蛋白含量均降低(P<0.05)。与对照组相比,CRC组细胞迁移能力增加,细胞凋亡降低(P<0.05),而IL-6抑制剂组较CRC组细胞迁移能力降低,细胞凋亡增加(P<0.05)。与对照组相比,CRC组0 h细胞活力无差异(P>0.05),24、48和72 h细胞活力均增加(P<0.05),而IL-6抑制剂组较CRC组0 h细胞活力无差异(P>0.05),24、48和72 h细胞活力均降低(P<0.05)。与对照组相比,CRC组VIM、SNAIL和ZEB1蛋白含量均升高,CDH1蛋白含量降低(P<0.05),而IL-6抑制剂组较CRC组VIM、SNAIL和ZEB1蛋白含量均降低,CDH1蛋白含量升高(P<0.05)。与对照组相比,CRC组CD44、CD133、NANOG和Lgr5 mRNA的表达均升高(P<0.05),而IL-6抑制剂组较CRC组CD44、CD133、NANOG和Lgr5 mRNA的表达均降低(P<0.05)。结论:STAT3 miR-146-b反馈回路抑制IL-6的NF-κB信号轴调控结直肠癌细胞的干性。IL-6/STAT3/miR-146-b轴可以作为CRC的诊断标记,并为结肠癌治疗提供治疗靶标。

miR-146a和miR-146b在卵巢癌的表达及其临床意义

目的探讨miR-146a和miR-146b在卵巢癌癌组织及配对的癌旁组织中的表达,及其与临床病理特征的相关性。方法收集2013年1月至2015年10月我院38例卵巢癌和配对的癌旁组织,运用RT-PCR的方法检测38对卵巢癌癌组织及其癌旁组织miR-146a和miR-146b的表达,分析其与卵巢癌临床病理特征的相关性及其临床意义。结果荧光定量PCR显示卵巢癌癌组织中miR-146a和miR-146b的平均表达量(6.74±2.74)和(6.34±2.14)比癌旁组织的平均表达量(7.08±1.70)和(7.26±2.59)明显下调(均P<0.05)。miR-146a和miR-146b的表达与卵巢癌淋巴结转移之间存在负相关(均P<0.05)。结论 miR-146a和miR-146b的表达下调在卵巢癌的发生发展中可能发挥重要的作用。