益肾祛痹通络方对肾虚寒湿痹阻型CIA大鼠miR-150-5p/SOCS1轴的调控作用

目的探究益肾祛痹通络方对肾虚寒湿痹阻型胶原诱导关节炎大鼠的治疗作用及对miR-150-5p、细胞因子信号抑制因子1(suppressor of cytokine signaling,SOCS 1)的影响。方法20只SPF级SD大鼠,随机选取6只为正常对照组,另外14只构建肾虚寒湿痹阻型胶原诱导关节炎大鼠模型,成功10只,随机分为模型组、治疗组,各5只。治疗组予益肾祛痹通络方(0.2g/ml)灌胃治疗,每日1次,共2周。模型组及对照组均予生理盐水灌胃处理。HE染色观察踝关节软骨组织病变情况;免疫组化检测踝关节中vimentin的表达水平;qPCR检测踝关节组织中的miR-150-5p、SOCS1 mRNA表达水平;ELISA检测血清中TNF-α、IL-6的表达水平。结果与对照组比较,模型组关节炎指数明显升高(P<0.05),HE染色表明踝关节明显狭窄,软骨损伤明显,滑膜组织增生,炎症细胞浸润;踝关节中vimentin、miR-150-5p水平升高(P<0.05),SOCS1 mRNA的表达水平无明显变化(P>0.05);血清中TNF-α、IL-6的表达水平明显升高(P<0.05)。与模型组比较,治疗组关节炎指数明显降低(P<0.05),HE染色表明关节腔未见明显狭窄,滑膜组织增生现象减少,软骨表面光滑,炎症细胞浸润降低,踝关节损伤明显改善。踝关节vimentin、miR-150-5p水平明显降低(P<0.05),SOCS1mRNA水平明显升高(P<0.05);血清中TNF-α、IL-6水平明显降低(P<0.05)。结论益肾祛痹通络方可能通过调控miR-150-5p/SOCS1通路,抑制细胞因子表达,改善关节炎症。

miR-150-5p、miR-135b在糖尿病肾病患者中的表达及意义

目的探讨外周血miR-150-5p、miR-135b水平与糖尿病肾病(DN)患者尿白蛋白排泄率(UAER)、预后的关系。方法采用前瞻性研究方法,选取2019年1月至2021年10月延安大学附属医院收治的85例DN患者作为DN组[男46例,女39例,年龄(46.28±4.41)岁,2型糖尿病(T2DM)病程(7.24±2.31)年],另纳入76例单纯T2DM患者作为T2DM组[男40例,女36例,年龄(44.95±6.13)岁,T2DM病程(6.98±3.28)年],80例健康体检者作为对照组[男43例,女37例,年龄(45.74±5.68)岁]。收集3组患者临床资料及外周血miR-150-5p、miR-135b水平,Spearman分析各指标与UAER相关性,绘制受试者操作特征曲线(ROC)及曲线下面积(AUC),分析各指标预后的预测效能,采用相对危险度(RR)及95%置信区间(CI)分析各指标对预后的影响。结果DN组外周血miR-150-5p、miR-135b水平>T2DM组>对照组[(3.36±0.68)比(1.03±0.62)比(0.78±0.21)、(3.96±0.51)比(1.24±0.48)比(0.66±0.12)],差异均有统计学意义(F=560.11、1519.26,均P<0.05);DN组UAER>300 mg/24 h患者外周血miR-150-5p、miR-135b水平>UAER 30~300 mg/24 h患者>UAER<30 mg/24 h患者[(4.10±0.92)比(3.42±0.64)比(2.73±0.51)、(5.40±0.87)比(3.87±0.61)比(3.02±0.49)],差异均有统计学意义(F=23.53、78.25,均P<0.05);DN患者外周血miR-150-5p、miR-135b水平与UREA呈正相关(r=0.783、0.835,均P<0.05);随访12个月,15例发生终末期肾病(ESRD),发生ESRD患者外周血miR-150-5p、miR-135b水平均高于未发生ESRD患者[(4.41±0.55)比(3.14±0.38)、(4.67±0.61)比(3.81±0.42)],差异均有统计学意义(t=10.67、6.53,均P<0.05);外周血miR-150-5p、miR-135b、联合预测DN并发ESRD的AUC分别为0.733、0.829、0.944。外周血miR-150-5p、miR-135b高水平患者并发ESRD的RR分别为低水平的3.619倍、10.889倍,其95%CI分别为1.105~11.856、1.503~78.872。结论外周血miR-150-5p、miR-135b水平与DN患者UAER呈正相关,联合检测可作为预测DN并发ESRD的重要辅助手段,为临床诊治提供可靠数据支持。

miR-150-5p靶向ZEB1调控EMT对子宫内膜癌细胞恶性生物学行为的影响

目的探讨微小RNA-150-5p(miR-150-5p)是否可靶向锌指E盒结合蛋白1(ZEB1)调控子宫内膜癌(EC)细胞上皮间质转化(EMT)进而影响癌细胞的恶性生物学行为。方法RT-qPCR技术检测正常子宫内膜和EC组织中、子宫内膜上皮细胞系hEEC及EC细胞系Ishikawa和HEC-1-A中miR-150-5p相对表达量。过表达miR-150-5p,MTT法、菌落形成实验、伤口愈合实验和Transwell实验分别评估Ishikawa细胞活力、克隆形成、迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告基因实验验证miR-150-5p与ZEB1的靶向关系;RT-qPCR检测miR-150-5p及ZEB1 mRNA相对表达量;Western blot技术检测ZEB1、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达量。结果与正常子宫内膜组织比较,EC组织中miR-150-5p相对表达量降低(P<0.05);与hEEC细胞比较,HEC-1-A细胞和Ishikawa细胞中miR-150-5p相对表达量降低(P<0.05),Ishikawa细胞中最低(P<0.05)。与空白组比较,miR-150-5p mimics组细胞490 nm处吸光度值、细胞菌落数、迁移数和侵袭数、ZEB1 mRNA和蛋白相对表达量及N-cadherin、Vimentin和MMP-9蛋白相对表达量显著降低,miR-150-5p相对表达量、E-cadherin蛋白相对表达量显著升高(P<0.05)。经生物信息学分析,ZEB1被预测为miR-150-5p的潜在靶基因。结论miR-150-5p可靶向ZEB1抑制癌细胞的恶性生物学行为,其作用机制可能与调控EC细胞EMT进展有关。

MiR-150-5p inhibits cell proliferation and metastasis by targeting FTO in osteosarcoma

Background:Osteosarcoma(OS),recognized as the predominant malignant tumor originating from bones,necessitates an in-depth comprehension of its intrinsic mechanisms to pinpoint novel therapeutic targets and enhance treatment methodologies.The role of fat mass and obesity-associated(FTO)in OS,particularly its correlation with malignant traits,and the fundamental mechanism,remains to be elucidated.Materials and Methods:1.The FTO expression and survival rate in tumors were analyzed.2.FTO in OS cell lines was quantified utilizing western blot and PCR.3.FTO was upregulated and downregulated separately in MG63.4.The impact of FTO on the proliferation and migration of OS cells was evaluated using CCK-8,colony formation,wound healing,and Transwell assays.5.The expression of miR-150-5p in OS cells-derived exosomes was identified.6.The binding of miR-150-5p to FTO was predicted by TargetScan and confirmed by luciferase reporter assay.7.The impact of exosome miR-150-5p on the proliferation and migration of OS cells was investigated.Results:The expression of FTO was higher in OS tissues compared to normal tissues correlating with a worse survival rate.Furthermore,the downregulation of FTO significantly impeded the growth and metastasis of OS cells.Additionally,miR-150-5p,which was downregulated in both OS cells and their derived exosomes,was found to bind to the 3′-UTR of FTO through dual luciferase experiments.Exosomal miR-150-5p was found to decrease the expression of FTO and inhibit cell viability.Conclusions:We identified elevated levels of FTO in OS,which may be attributed to insufficient miR-150-5p levels in both the cells and exosomes.It suggests that the dysregulation of miR-150-5p and its interaction with FTO could potentially promote the development of OS.

乳腺癌患者组织中miR-150-5p表达及临床意义

目的探讨乳腺癌患者组织中微小RNA-150-5p(miR-150-5p)表达及临床意义。方法前瞻性选取河南省洛阳市妇幼保健院2019年12月至2022年5月收治86例乳腺癌患者为对象,收集患者年龄、乳腺癌家族遗传史、肿瘤直径大小、疾病类型等一般资料,并测量所有患者癌组织与癌旁正常组织miR-150-5p水平。结果乳腺癌患者癌组织miR-150-5p水平高于癌旁正常组织(P<0.001)。miR-150-5p高水平组肿瘤直径大小、Ⅲ~Ⅳ期占比高于低水平组(P<0.05)。86例乳腺癌患者中共发生复发转移11例(12.79%),其中miR-150-5p低水平组3例,高水平组8例。logistic回归分析结果显示,miR-150-5p水平与乳腺癌复发转移有关(P<0.05)。结论乳腺癌患者癌组织中miR-150-5p呈异常高表达,可能是患者预后不良的指标之一。miR-150-5p水平与肿瘤直径、分期有关。

甲状腺癌中血清miR-150-5p表达水平与临床病理特征的关系

目的探讨甲状腺癌组织miR-150-5p表达水平及对甲状腺癌鉴别诊断的辅助价值。方法选取82例甲状腺癌患者作为病理组,选取82例体检健康者作为对照组。比较甲状腺癌组织、血清中的miR-150-5p表达,分析组织、血清中的miR-150-5p表达与甲状腺癌患者临床特征的关系。结果甲状腺癌组织中miR-150-5p表达水平低于癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。病例组血清中miR-150-5p水平低于对照组(P<0.05)。不同临床分期、分化程度、淋巴结转移、肿瘤直径情况的患者组织、血清中的miR-150-5p表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。组织中miR-150-5p表达与临床分期(r_(s)=-0.497)、淋巴结转移(r_(s)=-0.315)、肿瘤直径(r_(s)=-0.444)呈负相关(P<0.05);miR-150-5p表达与分化程度(r_(s)=0.404)呈正相关(P<0.05)。血清中miR-150-5p表达与临床分期(r_(s)=-0.455)、淋巴结转移(r_(s)=-0.306)、肿瘤直径(r_(s)=-0.433)呈负相关(P<0.05);miR-150-5p表达与分化程度(r_(s)=0.420)呈正相关(P<0.05)。结论甲状腺癌患者组织、血清中的miR-150-5p均呈低表达,其与临床分期、分化程度、淋巴结转移、肿瘤直径紧密相关。

miR-150-5p在妇科恶性肿瘤的研究进展

微小RNA(microRNA,miRNA)是一类内源性的非编码单链RNA分子,其可以与靶基因RNA 的碱基互补配对,从而诱导靶基因RNA降解或抑制蛋白质翻译,参与机体的病理生理过程。其中miR-150-5p在肿瘤中的异常表达提示其与肿瘤的发生发展密切相关。本文对miR-150-5p在妇科三大恶性肿瘤中的作用机制进行综述,为开发新型的癌症筛查及肿瘤诊治标志物提供理论依据。

血清miR-150-5p、miR-196a、miR-21-5p水平与宫颈癌患者病理参数的相关性

目的:探讨血清微小RNA-150-5p(miR-150-5p)、微小RNA-196a(miR-196a)、微小RNA-21-5p(miR-21-5p)水平与宫颈癌患者病理参数的相关性。方法:选取2020年1月至2023年1月该院收治的130例宫颈癌患者设为宫颈癌组,82例癌前病变患者设为癌前病变组,同期130名健康体检者设为对照组。比较三组血清miR-150-5p、miR-196a、miR-21-5p水平,并分析其与宫颈癌患者病理参数的相关性。结果:宫颈癌组、癌前病变组血清miR-150-5p、miR-196a、miR-21-5p水平均高于对照组,且宫颈癌组高于癌前病变组,差异有统计学意义(P<0.05);不同年龄、肿瘤直径、病理类型宫颈癌患者血清miR-150-5p、miR-196a、miR-21-5p水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);低分化、国际妇产科联盟(FIGO)分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、浸润深度>1/2宫颈癌患者血清miR-150-5p、miR-196a、miR-21-5p水平均高于中高分化、FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移、浸润深度≤1/2宫颈癌患者,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,血清miR-150-5p、miR-196a、miR-21-5p水平与宫颈癌患者FIGO分期、淋巴结转移、浸润深度均呈正相关(r>0,P<0.05),与分化程度呈负相关(r<0,P<0.05)。结论:血清miR-150-5p、miR-196a、miR-21-5p水平与宫颈癌患者FIGO分期、淋巴结转移、浸润深度均呈正相关,与分化程度呈负相关。

下调miR-150-5p调控PI3K/AKT信号通路抑制体外糖尿病肾病足细胞模型凋亡的机制研究

目的:探讨下调miR-150-5p调控PI3K/AKT信号通路对体外糖尿病肾病足细胞模型凋亡的影响和机制。方法:以小鼠足细胞MPC5作为研究对象,分成Control(空白对照)、Model(高糖处理)、Anti-NC(转染inhibitor control后高糖处理)、Anti-miR-150-5p组(转染miR-150-5p inhibitor后高糖处理),Realtime PCR方法测定细胞中miR-150-5p表达,MTT方法测定细胞增殖变化,PI单染法检测细胞周期变化,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡变化,Western blot法检测细胞中C-Caspase-3、cyclinD1、p-AKT、p-PI3K蛋白表达。PI3K/AKT抑制剂LY294002处理转染miR-150-5p inhibitor后的足细胞,给予高糖处理,检测细胞增殖、周期和凋亡变化。结果:与Control组比较,Model组细胞中miR-150-5p表达水平升高,细胞增殖能力下降,细胞凋亡率升高,细胞G1期比例升高,细胞中C-Caspase-3蛋白表达水平升高,cyclinD1蛋白表达水平下降,p-AKT/AKT、p-PI3K/PI3K表达水平下降。与Anti-NC组比较,Anti-miR-150-5p组细胞中miR-150-5p表达水平降低,细胞增殖能力升高,细胞凋亡率降低,细胞G1期比例降低,细胞中C-Caspase-3蛋白表达水平降低,cyclinD1蛋白表达水平升高,p-AKT/AKT、p-PI3K/PI3K表达水平升高。PI3K/AKT抑制剂LY294002逆转miR-150-5p inhibitor对高糖条件下足细胞增殖、周期和凋亡影响。结论:下调miR-150-5p通过促进PI3K/AKT信号通路激活减少体外糖尿病肾病足细胞模型细胞凋亡。

血清miR-23a、miR-150、miR-150-5p水平与糖尿病性骨质疏松症的相关性

目的分析微小核糖核酸(miR)-23a、miR-150、miR-150-5p水平与糖尿病性骨质疏松症(DOP)的相关性。方法选取2020年3月至2022年3月于医院就诊的糖尿病患者200例,随访2年,将发生DOP、未发生DOP的患者分别纳入DOP组、无DOP组。比较两组一般资料及血清miR-23a、miR-150、miR-150-5p水平;经Pearson相关性分析法分析血清miR-23a、miR-150、miR-150-5p水平与骨密度的相关性;经Logistic回归模型分析DOP的影响因素。结果DOP发生率为28.89%;DOP组血清miR-23a、miR-150、miR-150-5p水平均高于无DOP组(P<0.05);Pearson相关性分析显示,糖尿病患者血清miR-23a、miR-150、miR-150-5p水平与骨密度均呈负相关(P<0.05);logistic回归模型分析显示,年龄、体质量指数(BMI)、miR-23a、miR-150、miR-150-5p是DOP的影响因素(P<0.05)。结论DOP患者中血清miR-23a、miR-150、miR-150-5p水平升高,三者均与骨密度均呈负相关,且均是DOP发生的影响因素。

miR-150-5p通过P53调控Wnt信号通路诱发冠心病的研究

目的探究微小RNA-150-5p(miR-150-5p)在冠心病发生发展中的作用。方法利用miRDB数据库进行miR-150-5p的靶基因预测,将预测结果导入DAVID在线工具进行靶基因KEGG功能富集分析。将SD大鼠分为实验组和对照组,每组各12只,分别以高脂饮食喂养和冠脉接扎法建立冠心病大鼠模型。同时对空白组以假手术处理。实验组静脉注射miR-150-5p类似物,连续3 d给药后使用WB检测wnt信号通路相关蛋白GSK-3α、p-GSK-3α、GSK-3β、p-GSK-3β及P53表达量。对照组静脉注射300μg对照miRNA类似物,给药时间、检测时间和检测指标同实验组。结果 miR-150-5p调控的靶基因集与Wnt信号通路、癌症发生、内分泌调节等分子途径和细胞行为相关。miR-150-5p对GSK-3α、p-GSK-3α、GSK-3β、p-GSK-3β的表达量几乎没有影响。与空白组及对照组相比,miR-150-5p明显下调实验组p53的蛋白表达量。结论 miR-150-5p通过抑制下游靶基因P53来调控Wnt信号通路参与细胞增殖与凋亡,可能为诱发冠心病的潜在机制。

miR-150-5p通过调控DDR1表达对缺氧缺糖诱导的大鼠皮质神经细胞损伤的影响

目的:探讨miR-150-5p对缺氧缺糖(OGD)诱导的大鼠皮质神经细胞损伤的影响及分子机制。方法:设置OGD组、正常对照(Con)组、miR-NC组、miR-150-5p组、anti-miR-NC组、anti-miR-150-5p组、OGD+miR-NC组、OGD+miR-150-5p组、OGD+si-NC组、OGD+si-DDR1组、OGD+miR-150-5p+pcDNA组、OGD+miR-150-5p+pcDNA-DDR1组。RT-qPCR检测miR-150-5p和DDR1 mRNA表达;Western blot检测盘状结构域受体1(DDR1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达;MTT检测细胞存活率;乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测LDH释放率;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验验证miR-150-5p和DDR1靶向关系。结果:OGD诱导的大鼠皮质神经细胞中miR-150-5p呈低表达,DDR1呈高表达,细胞存活率降低,LDH释放率升高,细胞凋亡率升高,Bcl-2表达降低,Bax表达升高(P<0.05)。过表达miR-150-5p或抑制DDR1表达可促进细胞存活,抑制LDH释放和细胞凋亡。miR-150-5p靶向调控DDR1,DDR1过表达逆转miR-150-5p过表达对OGD诱导的大鼠皮质神经细胞损伤的保护作用。结论:过表达miR-150-5p通过下调DDR1保护缺氧缺糖诱导的大鼠皮质神经细胞损伤。

MiR-150-5p靶向HIF1α调控结直肠癌细胞西妥昔单抗耐药的相关机制研究

目的探讨miR-150-5p调控结直肠癌西妥昔单抗敏感性可能的机制。方法将miR-150-5p的模拟物、miR-150-5p的对照组分别转染到结直肠癌细胞株HTC8细胞中,然后加入300 mg/L的西妥昔单抗。首先通过RT-qPCR检测转染之后miR-150-5p在各组的表达水平,然后运用CCK-8分别比较HTC8细胞在转染miR-150-5p模拟组、转染miR-150-5p对照组以及西妥昔单抗+miR-150-5p模拟物组的细胞增殖情况。RT-qPCR检测各组缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor-1 alpha,HIF-1α)的mRNA水平,Western blot检测各组HIF1α的蛋白水平。流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况。双荧光素酶报告基因实验验证miR-150-5p与HIF-1α之间作用。结果过表达miR-150-5p加西妥昔单抗处理组显著抑制细胞株HTC8的增殖(P<0.05)并促进其凋亡(P<0.05),进一步降低HIF1αmRNA和蛋白的表达(P<0.05),双荧光素酶报告基因实验证明HIF-1α是miR-150-5p的直接作用靶点。结论MiR-150-5p可能通过靶向HIF-1α调控HTC8细胞的增殖与凋亡,同时miR-150-5p可增加结肠癌细胞对西妥昔单抗的敏感性。

miR-150-5p靶向GHSR调控结直肠癌细胞HT-29凋亡的研究

目的:探讨miR-150-5p是否靶向GHSR调控结直肠癌细胞HT-29的凋亡。方法:TargetScan在线分析miR-150-5p与GHSR的相关性;将GHSR的3端非编码区克隆进pMir-Glo miRNA载体,利用双荧光素酶报告系统检测miR-150-5p是否靶向调控GHSR;在缺氧以及过表达或敲低miR-150-5p的情况下,通过Western Blot检测GHSR/AMPK/Sirt1/PGC-1α/UCP2通路蛋白表达量和细胞凋亡标志蛋白的表达量。使用Annexin-V染色检测结直肠癌细胞HT-29的凋亡水平。结果:miR-150-5p靶向GHSR的3’-UTR的66-72的位置。缺氧条件下,敲低miR-150-5p后,GHSR、Sirt1、UCP2、p-AMPK、PGC-1α的表达量和细胞凋亡相关蛋白BCL2的表达量均上升(P<0.05)、BAX、Cleaved caspase3表达量和细胞凋亡水平均下降(P<0.05);缺氧条件下,过表达miR-150-5p后,GHSR、Sirt1、UCP2、p-AMPK、PGC-1α的表达量和细胞凋亡相关蛋白BCL2的表达量均下降(P<0.05)、BAX和Cleaved caspase3表达量上升(P<0.05),细胞凋亡水平上升(P<0.05)。结论:缺氧条件下miR-150-5p通过靶向GHSR的mRNA调控GHSR/AMPK/Sirt1/PGC-1α/UCP2通路来促进结直肠癌细胞HT-29的凋亡。

miR-150-5p在糖尿病肾病模型小鼠肾组织中的表达和对小鼠足细胞MPC5损伤的影响及其机制

目的:探讨微小RNA-150-5p(miR-150-5p)在糖尿病肾病(DN)模型小鼠肾组织中的表达和对高糖诱导的小鼠足细胞MPC5损伤的作用,并阐明其作用机制。方法:20只昆明小鼠随机分为对照组(n=8,正常饲养)和DN组[n=12,高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)构建DN模型],采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组小鼠肾组织中miR-150-5p表达水平,采用免疫组织化学法和免疫荧光法观察2组小鼠肾组织中脑酸溶性蛋白1(BASP1)表达情况。采用不含干扰素-γ(IFN-γ)的培养基培养MPC5细胞2周,使其分化成熟,分为对照组和高糖处理(HG)组,HG组采用30 mmol·L^(-1) D-葡萄糖分别处理MPC5细胞12、24、48和72 h,采用RT-qPCR法和Westernboltting法分别检测MPC5细胞中miR-150-5p和BASP1 mRNA及蛋白表达水平。采用生物信息学方法和双荧光素酶报告基因实验评估miR-150-5p与BASP1是否具有靶向关系。将miR-阴性对照(NC)、miR-150-5p模拟物(mimic)、miR-150-5p mimic+阴性对照质粒(pc-DNA3.1-SC)和miR-150-5p mimic+BASP1过表达质粒(pc-DNA3.1-BASP1)分别转入已分化成熟的MPC5细胞,分为正常条件+miR-NC(Con+NC)组、HG条件+miR-NC(HG+NC)组、HG条件+miR-150-5p mimic(HG+mimic)组、HG条件+miR-150-5p mimic+pc-DNA3.1-SC(HG+mimic+SC)组和HG条件+miR-150-5p mimic+pc-DNA3.1-BASP1(HG+mimic+BASP1)组;采用CCK-8法检测各组MPC5细胞活性,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组MPC5细胞中活性氧(ROS)水平和乳酸脱氢酶(LDH)活性,采用流式细胞术检测各组MPC5细胞凋亡率。结果:与对照组比较,DN组小鼠肾组织中miR-150-5p表达水平明显降低(P<0.01),BASP1蛋白表达量明显增加,且BASP1与足细胞存在共定位。与对照组比较,HG组MPC5细胞中BASP1蛋白表达水平明显升高(P<0.01),miR-150-5p表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。BASP1是miR-150-5p的直接靶点。与Con+NC组比较,HG+NC组MPC5细胞活性明显降低(P<0.01),ROS水平、LDH活性和细胞凋亡率均明显升高(P<0.01);与HG+NC组比较,HG+mimic组和HG+mimic+SC组MPC5细胞活性明显升高(P<0.01),ROS水平、LDH活性和细胞凋亡率均明显降低(P<0.01);与HG+mimic+SC组比较,HG+mimic+BASP1组MPC5细胞活性明显降低(P<0.01),ROS水平、LDH活性和细胞凋亡率均明显升高(P<0.01)。结论:miR-150-5p表达降低可能是DN模型中足细胞损伤的机制之一。过表达miR-150-5p可通过靶向BASP1抑制HG诱导的足细胞损伤。

结直肠癌患者血清miR-150-5p和miR-200b-3p水平及临床意义

目的结直肠癌患者血清微小RNA(miR)-150-5p和miR-200b-3p水平及临床意义。方法回顾性选择2020年6月至2022年11月在沧州市人民医院就诊的结直肠癌患者116例为结直肠癌组,同时选取同期在本院治疗的结肠息肉患者60例作为结直肠良性肿瘤组,选择同期在本院行健康体检者60名为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测受试者血清miR-150-5p、miR-200b-3p水平;采用Pearson相关性分析对结直肠癌患者血清miR-150-5p与miR-200b-3p表达水平的相关性进行分析;分析结直肠癌患者血清miR-150-5p、miR-200b-3p水平与病理特征的关系;采用受试者操作特征(ROC)曲线分析血清miR-150-5p、miR-200b-3p表达水平对结直肠癌的诊断价值。结果结直肠癌组、结直肠良性肿瘤组血清miR-150-5p、miR-200b-3p水平均显著低于对照组,且结直肠癌组血清miR-150-5p、miR-200b-3p水平均显著低于结直肠良性肿瘤组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,结直肠癌患者血清miR-150-5p与miR-200b-3p表达水平呈正相关(r=0.562,P<0.05)。结直肠癌患者血清miR-150-5p、miR-200b-3p水平与分化程度、淋巴结转移、TNM分期、浸润深度有关(P<0.05),其中低分化、有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、浸润深度T 3~T 4的结直肠癌患者血清miR-150-5p、miR-200b-3p水平显著低于中高分化、无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、浸润深度T_(1)~T_(2)的患者(P<0.05)。血清miR-150-5p、miR-200b-3p单独及联合诊断结直肠癌的曲线下面积(AUC)分别为0.800、0.828、0.893,联合诊断AUC显著高于单独预测AUC(P<0.05)。结论结直肠癌患者血清miR-150-5p、miR-200b-3p水平降低,二者可作为诊断结直肠癌发生的辅助指标。

血清长链非编码RNA XIST联合miR-150-5p早期预测脓毒症并发急性肺损伤的价值

目的探讨血清长链非编码RNA XIST(lncRNA XIST)联合微小RNA(miR)-150-5 p对脓毒症患者并发急性肺损伤(ALI)的早期预测价值。方法收集2022年9月—2024年1月福建医科大学孟超肝胆医院收治的102例脓毒症患者作为研究对象,根据入院48 h氧合指数将其分为观察组32例(脓毒症并发ALI)和70例脓毒症对照组(脓毒症未并发ALI);选取30例同期健康体检者作为健康对照组。收集患者的基本临床资料,记录急性生理学与慢性健康状况Ⅱ(APACHEⅡ)评分。采用qRT-PCR检测血清lncRNA XIST和miR-150-5 p表达水平。比较组间差别,分析主要指标的相关性,采用二元logistic回归分析脓毒症患者并发ALI的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分别评估lncRNA XIST、miR-150-5 p及两者联合对脓毒症患者并发ALI的早期预测价值。结果与健康对照组比较,观察组和脓毒症对照组血清lncRNA XIST相对表达量均升高,miR-150-5 p相对表达量均降低,且观察组变化更明显,差别均有统计学意义(P<0.01)。血清lncRNA XIST、miR-150-5 p与APACHEⅡ评分的相关性均有统计学意义(r=0.518,r=-0.492,均为P<0.01)。二元logistic回归分析显示,高APACHEⅡ评分、lncRNA XIST高表达、miR-150-5 p低表达是脓毒症患者并发ALI的独立危险因素(P<0.05)。lncRNA XIST、miR-150-5 p单独预测脓毒症患者并发ALI的曲线下面积(AUC)分别为0.725(95%CI:0.628~0.809)和0.706(95%CI:0.608~0.792),联合预测的AUC为0.916(95%CI:0.844~0.962),优于各自单一预测效能,且具有较高的灵敏度(96.9%)和特异度(81.4%)。结论血清lncRNA XIST联合miR-150-5 p在预测脓毒症患者并发ALI方面具有一定的临床价值,可作为早期预警指标。

miR-150-5p在非酒精性脂肪性肝纤维化中的表达及靶基因的生物信息学分析

目的通过对miR-150-5p进行靶基因预测及生物信息学分析,为miR-150-5p靶基因相关实验验证提供数据支持,并为深入研究miR-150-5p在非酒精性脂肪性肝纤维化中的调控机制及生物学功能提供理论指导。方法将健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为2组,模型组10只采用胆碱-蛋氨酸缺乏饲料喂养制备非酒精性脂肪性肝纤维化模型,正常组10只采用胆碱-蛋氨酸充足的饲料喂养,均饲养8周。采用microRNA(miRNA)芯片检测2组小鼠肝组织中miR-150-5p表达水平,选择TargetScan、PicTar及miRanda靶基因预测软件预测miR-150-5p靶基因的交集作为分析的基因集合,分别进行功能富集分析,应用DAVID数据库进行靶基因信号转导通路富集分析。结果模型组小鼠肝组织中miR-150-5p表达水平显著高于正常组(P<0.05),miR-150-5p靶基因集合分别富集在ATP结合、嘌呤核苷酸结合以及蛋白酶的活性等分子功能(P均<0.05),主要参与磷脂代谢、蛋白质氨基酸的磷酸化和去磷酸化、血管再生与重建及促凋亡等生物学过程(P均<0.05),靶基因信号转导通路显著富集于胰岛素信号通路、MAPK信号通路、TGF-β信号通路等信号转导通路中。结论miR-150-5p参与了非酒精性脂肪性肝纤维化发生发展过程,为非酒精性脂肪性肝纤维化新型诊断标志物与治疗靶点的研究提供了理论依据。

miR-150-5p抑制TLR-5/NF-κB p65信号通路对大脑中动脉阻塞模型大鼠的神经保护效应

背景:缺血性脑梗死的病变组织中发生炎症反应,且miR-150-5p表达明显下降,miR-150-5p是否经Toll样受体5/核因子κB途径抑制炎症因子释放并减轻缺血性脑梗死组织损伤尚不清楚。目的:探讨微小RNA-150-5p(miR-150-5p)在大鼠缺血性脑梗死中的作用及初步机制。方法:①构建大脑中动脉阻塞模型大鼠,建模后将大鼠分为5组:对照组、miR-150-5p agomir组、agomir control、miR-150-5p antagomir组和antagomir control组;②对照组大鼠给予生理盐水脑室注射,后4组大鼠脑室分别给予miR150-5p agomir(miR150-5p激动剂)、agomir阴性对照、miR150-5p antagomir(miR150-5p抑制剂)和antagomir阴性对照;③干预7 d后进行神经功能缺损程度(mNNS)评分,磁共振检测法测量脑梗死体积,苏木精-伊红染色观察脑组织病理学变化,qRT-qPCR法、ELISA法和免疫印迹法检测分别检测脑组织中miR-150-5p、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、Toll样受体5和核因子κB p65表达情况,通过检索生物信息学网站Targetscan预测miR-150-5p与Toll样受体5的结合位点,荧光素酶试验验证二者的靶向关系。结果与结论:①与对照组比较,miR-150-5p agomir组大鼠神经功能损伤评分、脑组织中白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平及Toll样受体5、核因子κB p65蛋白表达明显降低(P<0.05);miR-150-5p antagomir组生理评分及生化指标均明显升高(P<0.05);②苏木精-伊红染色显示,对照组神经细胞排列紊乱、轮廓模糊不清,神经细胞明显变性坏死;上述病理变化在miR-150-5p agomir组明显减轻,而在miR-150-5p antagomir组中明显加重。而agomir control组和antagomir control组与对照组各指标比较差异均无显著差异(P>0.05);③TargerScan网站预测结果和荧光素酶报告基因分析显示,miR-150-5p与Toll样受体5存在靶向结合位点;④结果证实,miR-150-5p可抑制缺血所致脑损伤过程中Toll样受体5/核因子κB p65炎性信号通路,降低炎性反应,从而减轻神经功能损害,发挥保护作用。

miR-150-5p在卵巢癌中的表达及其生物学功能研究

目的探讨微小RNA-150-5p(miR-150-5p)在卵巢癌组织中的表达水平及其通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路对卵巢癌细胞增殖和凋亡能力的影响。方法选取2016年4月-2018年12月于武警上海总队医院妇科就诊的82例卵巢癌患者作为研究对象,患者年龄22~65周岁,平均(43.5±6.8)岁。采用qRT-PCR检测病变组织及其相应癌旁组织中miR-150-5p的表达水平。以人卵巢癌SKOV3细胞株作为空白对照组,转染miR-150-5p抑制剂的人卵巢癌SKOV3细胞株作为miR-150-5p抑制剂组,转染阴性对照质粒的人卵巢癌SKOV3细胞株作为阴性对照组,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡,生物信息学网站Targetscan预测miRNA-150-5p与PI3K的靶向结合情况,荧光素酶试验验证miR-150-5p与PI3K的靶向关系,Western blotting检测Cleaved caspase-3、PI3K、Akt、磷酸化蛋白激酶B(Phosphorylated protein kinase,p-Akt)p-Akt蛋白的表达。结果82例卵巢癌患者病变组织及相应癌旁组织中miR-150-5p的相对表达水平分别为(1.64±0.10)和(0.99±0.08),差异有统计学意义;空白对照组和阴性对照组中miR-150-5p的表达差异无统计学意义,miR-150-5p抑制剂组中miR-150-5p的相对表达量为(0.11±0.03),明显低于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义。空白对照组和阴性对照组24 h、48 h和72 h细胞增殖率的差异无统计学意义,而miR-150-5p抑制剂组24 h、48 h和72 h细胞增殖率的差异分别为(9.61±1.32)%、(24.54±3.61)%和(33.78±3.72)%,同一时间点均明显低于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义。空白对照组和阴性对照组48 h细胞凋亡率的差异无统计学意义,而miR-150-5p抑制剂组的细胞凋亡率为(16.65±2.93)%,明显高于空白对照组[(0.74±0.10)%]和阴性对照组[(1.79±0.21)%],差异有统计学意义。荧光素酶报告基因分析证实miR-150-5p与PI3K存在靶向结合位点。miR-150-5p抑制剂组PI3K、p-Akt蛋白表达低于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义;Cleaved caspase3蛋白表达高于空白对照组和阴性对照组(P<0.01);结论miR-150-5p在卵巢癌中作促癌基因,其调控作用可能与PI3K/Akt信号通路有关。