多发性骨髓瘤组织中miR-29c、miR-195表达水平变化及其与临床病理特征及预后的关系

目的 探讨多发性骨髓瘤(MM)组织中miR-29c、miR-195表达水平变化及其与临床病理特征及预后的关系。方法 选取75例MM患者作为病例组,另选取同期就诊的75例骨髓象检查为正常的非血液系统疾病患者作为对照组。采用实时荧光定量PCR(q-PCR)检测骨髓组织中miR-29c、miR-195表达水平,根据检测平均值将miR-29c、miR-195分为高水平组和低水平组,分析miR-29c、miR-195表达水平与临床病理特征及预后的相关性。结果 病例组骨髓组织miR-29c、miR-195表达水平低于对照组(P<0.05)。miR-29c低水平组中ISS分期Ⅲ期及血清白蛋白水平<35 g/L的患者占比高于高水平组(P<0.05);miR-195低水平组中ISS分期Ⅲ期及血清白蛋白水平<35 g/L的患者占比高于高水平组(P<0.05);miR-29c低水平组的生存期低于高水平组(P<0.05),miR-195低水平组的生存期低于高水平组(P<0.05)。miR-29c、miR-195表达水平与ISS分期呈负相关(P<0.05),与血清白蛋白、生存期呈正相关(P<0.05)。结论miR-29c、miR-195均在MM患者骨髓组织中低表达,且低表达miR-29c、miR-195患者的生存期较短。miR-29c、miR-195表达水平与ISS分期呈正相关,与血清白蛋白、生存期呈负相关。

吉非替尼联合调强放疗治疗老年中晚期非小细胞肺癌效果及对血清miR-224、miR-195表达作用

目的 探讨吉非替尼联合调强放疗治疗老年中晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的效果及对血清miR-224、miR-195表达作用。方法 选取了河南省肿瘤医院(郑州大学附属肿瘤医院)在2018年2月至2020年2月期间收治的老年中晚期NSCLC患者92例随机分为研究组组和对照组,每组各46例。对照组予以调强放疗,研究组予以吉非替尼联合调强放疗,比较研究组与对照组疗效、不良反应、治疗后1年、2年、3年生存率与治疗前后血清肿瘤标志物指标[细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、鳞状细胞癌抗原(SCC)、癌胚抗原(CEA)]、免疫功能指标(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))、miR-224、miR-195水平。结果 研究组治疗后DCR较对照组高,差异有统计学意义(χ^(2)=5.392,P<0.05);研究组与对照组治疗后血清CYFRA21-1、SCC、CEA水平较治疗前降低,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(t=9.364、9.391、9.822,P<0.05);研究组治疗后血清CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平较治疗前提高,且高于对照组,差异有统计学意义(t=4.667、4.913、2.923,P<0.05);研究组与对照组治疗后血清miR-224水平较治疗前降低,且研究组低于对照组(t=4.378,P<0.05),两组miR-195水平较治疗前提高,且研究组高于对照组,差异有统计学意义(t=2.787,P<0.05);研究组治疗后2年、3年生存率高于对照组(χ^(2)=4.142、4.022,P<0.05)。结论 吉非替尼联合调强放疗应用于老年中晚期NSCLC可提高治疗效果,调节miR-224、miR-195表达,延长患者生存期。

长链非编码RNA FGD5-AS1调节miR-195-5p/PIM1轴对高糖诱导的心肌细胞损伤的影响

目的探讨长链非编码RNA FGD5反义RNA1(lncRNA FGD5-AS1)调节miR-195-5p/PIM1轴对高糖诱导的心肌细胞损伤的影响。方法将大鼠心肌细胞H9c2及人心肌细胞随机分为对照组、模型组、lncRNA FGD5-AS1过表达组、miR-195-5p inhibitor组、阴性对照组、lncRNA FGD5-AS1过表达+miR-195-5p mimics组,分组处理后检测其lncRNA FGD5-AS1、miR-195-5p和PIM1表达、增殖、凋亡、促炎性细胞因子水平。结果与对照组相比,模型组细胞lncRNA FGD5-AS1、PIM1 mRNA及蛋白表达、存活率,增殖率降低(P<0.05);miR-195-5p表达,凋亡率,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平升高(P<0.05);过表达lncRNA FGD5-AS1可逆转模型组细胞上述变化,上调miR-195-5p可减弱过表达lncRNA FGD5-AS1的逆转作用。结论过表达lncRNA FGD5-AS1可通过下调miR-195-5p增强PIM1表达,从而抑制高糖诱导的心肌细胞炎症反应,促进细胞存活,减轻细胞凋亡。

CircOGDH通过调控miR-195-5p/PGAM5轴对氧糖剥夺/复糖复氧诱导的小胶质细胞损伤的影响

目的:探讨环状RNA OGDH(CircOGDH)通过调控miR-195-5p/磷酸甘油酸变位酶5(PGAM5)轴对氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)诱导的小胶质(MG)细胞损伤的影响。方法:将体外培养的HMC3细胞分为:NC组(正常培养)、OGD/R、si-NC组、si-CircOGDH组、mimic NC组、miR-195-5p mimic组、si-CircOGDH+inhibitor NC组、si-CircOGDH+miR-195-5p inhibitor组。除NC组外,剩余组在转染对应物质前构建OGD/R模型。qRT-PCR法测定CircOGDH、miR-195-5p、PGAM5 mRNA表达水平;测定各组细胞增殖、凋亡、活性氧(ROS)及炎性因子水平;Western blot检测Cleaved caspase-3、Bax表达;双荧光素酶基因实验检测CircOGDH与miR-195-5p、PGAM5与miR-195-5p之间的靶向关系。结果:与NC组对比,OGD/R组miR-195-5p表达、OD450值均降低,CircOGDH、PGAM5 mRNA表达、凋亡率、ROS及炎性因子水平、Cleaved caspase-3、Bax蛋白表达均升高(P<0.05);对比OGD/R组和si-NC组,si-CircOGDH组miR-195-5p表达、OD450值均升高,CircOGDH、PGAM5 mRNA表达、凋亡率、ROS及炎性因子水平、Cleaved caspase-3、Bax蛋白表达均降低(P<0.05);miR-195-5p mimic组分别与OGD/R组、mimic NC组对比,CircOGDH无显著差异(P>0.05),miR-195-5p表达、OD450值均升高,PGAM5 mRNA表达、凋亡率、ROS及炎性因子水平、Cleaved caspase-3、Bax蛋白表达均降低(P<0.05);与si-CircOGDH+inhibitor NC组对比,si-CircOGDH+miR-195-5p inhibitor组CircOGDH差异不显著(P>0.05),miR-195-5p表达、OD450值均降低,PGAM5 mRNA表达、凋亡率、ROS及炎性因子水平、Cleaved caspase-3、Bax蛋白表达均升高(P<0.05)。双荧光素酶基因实验显示miR-195-5p和CircOGDH、PGAM5均存在靶向关系。结论:沉默CircOGDH可促进OGD/R诱导的HMC3细胞增殖,抑制其炎症反应和凋亡,可能与调控miR-195-5p/PGAM5轴有关。

LncRNA RUNX1-IT1对恶性多形性腺瘤miR-195/CyclinD1的调控作用探讨

目的 :探讨恶性多形性腺瘤(malignant pleomorphic adenoma, MPA)细胞中长链非编码RNA(long non-coding RNA, LncRNA)RUNX1-IT1对微小RNA-195(microRNA-195, miR-195)/细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的调控作用。方法:收集手术切除的MPA组织及癌旁组织,检测LncRNA RUNX1-IT1、miR-195、CyclinD1 mRNA的表达水平,分析三者与MPA临床病理的关系。培养MPA细胞系SM-AP1,转染阴性对照(NC)siRNA、LncRNA RUNX1-IT1 siRNA、miRNC、miR-195抑制物,检测细胞增殖水平A490及miR-195、CyclinD1的表达水平,分析LncRNA RUNX1-IT1靶向miR-195、miR-195靶向CyclinD1的关系。采用SPSS 21.0软件包对数据进行统计学分析。结果 :MPA中LncRNA RUNX1-IT1、CyclinD1的表达水平显著高于癌旁组织,miR-195的表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05)。LncRNA RUNX1-IT1与miR-195呈负相关、与CyclinD1呈正相关,miR-195与CyclinD1呈负相关。肿瘤直径≥3 cm、复发、远处转移的MPA癌组织中,LncRNA RUNX1-IT1、CyclinD1表达更高(P<0.05),miR-195表达更低(P<0.05)。敲低LncRNA RUNX1-IT1后,SM-AP1细胞的A490水平、CyclinD1表达水平降低,miR-195表达水平增加(P<0.05)。LncRNA RUNX1-IT1通过直接靶向作用于SM-AP1细胞中的miR-195,miR-195通过直接靶向作用于SM-AP1细胞中的CyclinD1。抑制miR-195后,敲低LncRNA RUNX1-IT1降低A490水平及CyclinD1表达水平的作用减弱(P<0.05)。结论:LncRNA RUNX1-IT1可能通过调控miR-195/CyclinD1表达,参与MPA的发生、发展。

miR-195及miR-21-3p在老年重症急性胰腺炎中的表达及相关性

选取新疆医科大学第一附属医院2020年2月—2022年3月收治的老年重症急性胰腺炎患者102例作为研究对象,按照不同疾病严重程度分为轻度组(n=45)及重度组(n=57),同时选择健康受试者50例作为对照组,全部人员均接受了荧光定量法检测,对3组人员的miR-195及miR-21-3p表达水平进行测量;对比轻度组与重度组急性生理与慢性健康评估(APACHEⅡ)评分、RANSON系统评分;采用Spearman相关性探讨APACHEⅡ及RANSON分别与微小RNA-195(miR-195)及微小RNA-21-3p(miR-21-3p)表达水平相关性;将老年重症急性胰腺炎患者按照不同预后分为死亡组(n=21)及生存组(n=36),采用ROC曲线分析miR-195及miR-21-3p对老年重症急性胰腺炎的预测价值。结果显示,轻度组与重度组的miR-195及miR-21-3p表达水平均明显高于对照组,重度组的miR-195及miR-21-3表达水平均明显高于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05)。重度组与轻度组相比,APACHEⅡ评分及RANSON评分均较高,差异有统计学意义(P<0.05)。采用Spearman相关性分析,APACHEⅡ及RANSON评分分别与miR-195及miR-21-3p表达水平均呈现出了明显的正相关性(P<0.05)。死亡组与生存组相比miR-195及miR-21-3p表达水平较高,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析可见,miR-195及miR-21-3p分别用于预测重度急性胰腺炎患者曲线下面积分别为0.932、0.901。miR-195及miR-21-3p在老年重症急性胰腺炎患者中呈现出了异常升高的表达水平,与疾病严重程度呈现出了正相关性;miR-195及miR-21-3p在预测老年重症急性胰腺炎不良预后上具有一定的应用价值。

LncRNA SNHG16通过调控miR-195-5p/MYB促进胃癌细胞增殖及迁移

目的探讨lncRNA SNHG16(SNHG16)对胃癌细胞增殖、迁移的影响及其分子调控机制。方法基于在线数据库检索SNHG16在胃癌组织中的表达情况并筛选SNHG16的下游靶基因。通过生物信息学方法分析、双荧光素酶报告基因实验验证SNHG16与miR-195-5p间相互作用关系。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测SNHG16、miR-195-5p和MYB在胃癌细胞(HGC-27、MKN-28)中的表达情况;敲低SNHG16检测miR-195-5p或MYB表达;过表达miR-195-5p检测MYB表达;蛋白质印迹分析(Western blot)检测各组中MYB的蛋白表达水平。敲低SNHG16或过表达miR-195-5p,通过细胞增殖及划痕实验分别检测胃癌细胞(HGC-27、MKN-28)增殖及迁移能力。结果LncRNA SNHG16在胃癌组织及胃癌细胞(HGC-27、MKN-28、MKN-45、NCI-N87)中表达升高。双荧光素酶报告基因实验结果显示,将psiCHECK2-SNHG16-WT和miR-195-5p mimic同时转染进HGC-27中,显著抑制了HGC-27细胞的荧光素酶活性。qRT-PCR及WB实验结果显示:敲低HGC-27、MKN-28细胞中SNHG16可上调miR-195-5p并抑制MYB在转录及翻译水平的表达;过表达HGC-27、MKN-28细胞中miR-195-5p可抑制MYB表达。CCK8增殖实验及细胞划痕实验结果表明:敲低SNHG16或过表达miR-195-5p均可抑制HGC-27、MKN-28细胞的增殖和迁移。结论LncRNA SNHG16可通过miR-195-5p调节MYB在胃癌细胞中的表达,SNHG16高表达可促进胃癌细胞增殖和迁移。

血清FIB、D-Dimer及miR-195对下肢深静脉血栓的联合诊断效能

探讨血清纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(DD)及mi R-195水平联合诊断下肢深静脉血栓(DVT)的敏感度、特异度及准确度。收集2018年2月—2021年2月雅安市中医医院收治的224例下肢障碍患者,以X线数字减影血管造影(DSA)检查结果为诊断依据,将224例患者分为DVT组(n=142)和非DVT组(n=82),测定两组血清FIB、DD及mi R-195水平;同时观察血清FIB、DD、mi R-195水平及其联合检测对DVT的敏感度、特异度和准确度;FIB、DD及mi R-195水平诊断价值采用受试者工作特征(ROC)曲线分析。血清FIB、DD及mi R-195联合诊断DVT的敏感度为94.37%,准确度为96.43%,显著高于血清FIB、DD及mi R-195的单独检测,差异有统计学意义(P<0.05);血清FIB、DD及mi R-195联合诊断DVT的特异度为100%,与血清FIB、DD及mi R-195单独检测相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Kappa结果显示,血清DD、FIB及mi R-195联合诊断的Kappa值为0.93,一致性最好,其次为血清DD单独检测(Kappa=0.74)、血清FIB单独检测(Kappa=0.64)和血清mi R-195单独检测(Kappa=0.57)。DVT组血清FIB、DD及mi R-195水平显著高于非DVT组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清mi R-195诊断DVT的曲线下面积为0.675(95%CI:0.606~0.744,P<0.05);血清FIB诊断DVT的曲线下面积为0.744(95%CI:0.677~0.811,P<0.05);血清DD诊断DVT的曲线下面积为0.893(95%CI:0.851~0.935,P<0.05);血清mi R-195、FIB、DD联合检测诊断DVT的曲线下面积为0.933(95%CI:0.899~0.966,P<0.05)。血清FIB、DD及mi R-195水平联合诊断对DVT诊断敏感度高、准确度精准,与金标准DSA检查的一致性较好,可为临床诊断DVT提供参考,提高诊断的准确性。

miR-195靶向FOXK1介导Wnt/β-catenin信号通路调控胃癌细胞侵袭转移的分子机制

目的探究微小RNA(miR)-195靶向叉头盒蛋白K1(FOXK1)介导Wnt/β-catenin信号通路调控胃癌细胞侵袭转移的分子机制。方法选择140例胃癌组织和癌旁正常组织,其中男性77例,女性63例;年龄46~73岁,平均年龄55.34岁(标准差3.68岁)。检测其中miR-195、FOXK1和β-catenin的表达水平。通过Pearson检验分析相关性。通过双荧光素酶报告验证miR-195与FOXK1的相关性。将人胃癌细胞分为4组:对照组、miR-195组、FOXK1组和miR-195+FOXK1组。通过转染miR-195类似物和/或FOXK1质粒来提高miR-195和/或FOXK1的水平。检测各组细胞增殖、侵袭能力,以及β-catenin转录和蛋白表达水平。结果胃癌组织中miR-195水平显著低于正常组织,而FOXK1和β-catenin表达水平显著高于正常组织(P<0.05)。FOXK1与β-catenin正相关,miR-195分别与FOXK1和β-catenin负相关(P<0.05)。验证结果显示miR-195与FOXK1的靶向结合(P<0.05)。miR-195组FOXK1蛋白、增殖、侵袭、β-catenin mRNA和蛋白水平显著低于对照组(P<0.05)。FOXK1组FOXK1蛋白、增殖、侵袭、β-catenin mRNA和蛋白水平显著高于对照组(P<0.05)。miR-195+FOXK1组FOXK1蛋白、增殖、侵袭、β-catenin mRNA和蛋白水平高于miR-195组并低于FOXK1组(P<0.05)。结论miR-195可通过靶向FOXK1抑制Wnt/β-catenin通路,抑制胃癌细胞的侵袭和转移。

血清miR-195在宫颈鳞状细胞癌诊断中的临床意义

目的探讨miR-195表达水平作为宫颈鳞状细胞癌肿瘤标志物的临床价值。方法收集2016年9—11月中国医科大学附属盛京医院中的21例确诊且初诊为早期(Ⅰ_(a1)~Ⅱ_(a2)期)宫颈鳞状细胞癌患者的血清标本为观察组,同期健康志愿者22名为对照组,运用荧光定量PCR方法检测miR-195在宫颈鳞状细胞癌患者和健康志愿者血清中的表达程度,探讨其作为宫颈鳞状细胞癌肿瘤标志物的临床价值。结果观察组血清miR-195表达水平高于对照组,差异有统计学意义(t=4.342,P<0.001)。血清miR-195诊断宫颈鳞状细胞癌的ROC曲线下面积为0.675(95%CI:0.569~0.781,P=0.001),截断值为29.86时的敏感性和特异性分别为71.43%、60.71%。结论血清miR-195有可能作为宫颈鳞状细胞癌的一项肿瘤标志物,对宫颈鳞状细胞癌的发病情况具有提示作用。

An Investigation of the Effects of B7-H4 Gene rs10754339 and miR-125a Gene rs12976445 on Cancer Susceptibility

Objective To investigate the effects of the B7-H4 gene rs10754339 and miR-125a gene rs12976445 on cancer susceptibility through a case-control study and meta-analysis.Methods A total of 1,490 cancer patients(lung/gastric/liver/:550/460/480)and 800 controls were recruited in this case-control study.The meta-analysis was performed by pooling the data from previous related studies and the present study.Results The results of this study showed that in the Hubei Han Chinese population,the rs10754339gene was significantly associated with the risk of lung and gastric cancer but not liver cancer,and the rs12976445 gene was significantly associated with the risk of lung cancer but not liver or gastric cancer.The meta-analysis results indicated that rs10754339 and rs12976445 contributed to cancer susceptibility in the Chinese population and also revealed a significant association between rs10754339and breast cancer risk,as well as between rs12976445 and lung cancer risk.Conclusion The B7-H4 gene rs10754339 and miR-125a gene rs12976445 may be the potential genetic markers for cancer susceptibility in the Chinese population,which should be validated in future studies with larger sample sizes in other ethnic populations.

miR-195-5p靶向PAPPA对肺癌A549细胞增殖、迁移的影响及分子机制

目的探讨微小RNA-195-5p(miR-195-5p)靶向妊娠相关血清蛋白(PAPP)A对肺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移的影响和分子机制。方法将A549细胞分为miR-NC组、miR-195-5p组、si-NC组、si-PAPPA组、miR-195-5p+pcDNA组、miR-195-5p+pcDNA-PAPPA组。实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肺癌A549细胞miR-195-5p与PAPPA mRNA表达,CCK-8检测A549细胞增殖活性,Western印迹检测PAPPA蛋白表达,Transwell检测细胞侵袭能力,划痕实验检测迁移能力,双荧光色素酶试验验证miR-195-5p与PAPPA的靶向关系。结果与人支气管黏膜上皮细胞BEAS-2B相比,miR-195-5p在肺癌A549细胞中的表达明显降低,PAPPA mRNA及蛋白表达明显增高(P<0.05)。过表达miR-195-5p后A549细胞的增殖、侵袭及迁移能力明显降低(P<0.05);与si-NC组相比,沉默PAPPA后A549细胞增殖、侵袭和迁移能力显著降低(P<0.05);PAPPA是miR-195-5p的靶基因;过表达PAPPA后部分逆转miR-195-5p对A549细胞增殖、侵袭及迁移的抑制作用。结论miR-195-5p在肺癌中表达减低,具有抑制肺癌细胞增殖、侵袭及迁移的作用,其分子机制是通过靶向PAPPA而发挥作用。

血清miR-195-5p和DRD1在妊娠期糖尿病合并高血压孕妇中的表达水平及意义

目的探讨血清miR-195-5p和DRD1在妊娠期糖尿病合并高血压孕妇中的表达水平及意义。方法前瞻性选取2022年2月至2023年1月在本院定期产前检查并分娩的GDM患者269例,根据患者是否并发HDP,将患者分为GDM组(n=171)和GDM-HDP组(n=98),另选取正常健康的孕妇100例作为对照组。采用葡萄糖氧化酶法测定空腹血糖,qRT-PCR检测血清中miR-195-5p和DRD1相对表达水平,观察对照组、GDM组及GDM-HDP组的miR-195-5p、DRD1及空腹血糖水平;观察不同疾病严重程度血清miR-195-5p、DRD1及空腹血糖水平;Logistic回归模型分析GDM合并HDP的影响因素;Spearman秩相关分析血清miR-195-5p、DRD1和空腹血糖的相关性,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清miR-195-5p、DRD1在GDM合并HDP中的诊断价值。结果与对照组相比,GDM组和GDM-HDP组中miR-195-5p的水平明显降低(P<0.001),DRD1及空腹血糖水平明显升高(P<0.001);与GDM组相比,GDM-HDP组中miR-195-5p的水平显著降低(P<0.001),DRD1及空腹血糖水平显著升高(P<0.001);GDM-HDP组患者血清中miR-195-5p水平明显高于轻度子痫前期、重度子痫前期患者,轻度子痫前期患者血清miR-195-5p水平显著高于重度子痫前期患者(P<0.001);GDM-HDP组患者血清中DRD1及空腹血糖水平明显低于轻度子痫前期、重度子痫前期患者,轻度子痫前期患者血清DRD1及空腹血糖水平显著低于重度子痫前期患者(P<0.001);miR-195-5p是GDM合并HDP发生的保护因素(P<0.001),而DRD1和空腹血糖是GDM合并HDP发生的危险因素(P<0.001);miR-195-5p与空腹血糖呈负相关(r=-0.276,P<0.001),DRD1与空腹血糖呈正相关(r=0.309,P<0.001);血清miR-195-5p诊断GDM合并HDP的AUC值为0.826,95%CI为0.769~0.883,血清DRD1诊断GDM合并HDP的AUC值为0.884,95%CI为0.837~0.929,miR-195-5p和DRD1联合诊断AUC值为0.952,95%CI为0.924~0.981,miR-195-5p和DRD1联合检测的AUC值、灵敏度、准确性明显高于miR-195-5p和DRD1单独检测,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论GDM合并HDP患者血清中miR-195-5p明显降低,DRD1显著升高,与GDM合并HDP发生密切相关,且miR-195-5p和DRD1联合检测诊断GDM合并HDP时具有较高的临床价值。

补中益气汤加减辅助治疗脑梗死恢复期患者的临床疗效、预后与同型半胱氨酸、胰岛素样生长因子-1、miR-195水平的相关性研究

目的探讨同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)、胰岛素样生长因子-1(Insulin-like growth factor-1,IGF-1)、miR-195与脑梗死恢复期患者应用补中益气汤加减辅助治疗疗效及预后的关系。方法选取2018年1月—2021年1月期间驻马店市中医收治的脑梗死恢复期患者118例作为研究对象,均给予补中益气汤加减辅助治疗14 d,根据临床疗效分为治愈组24例、显效组39例、有效组46例、无效组9例;另对患者进行1年随访,通过改良Rankin评分量表(ModifiedRankin Scale,mRS)评估患者预后情况,mRS评分≤2分为预后良好组96例,mRS评分>2分为预后不良组22例。比较各组不同疗效Hcy、IGF-1、miR-195水平,采用Spearman法分析脑梗死恢复期患者血清Hcy、IGF-1及miR-195水平与疗效的相关性,多因素Logistic回归分析脑梗死恢复期补中益气汤加减辅助治疗预后的影响因素,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析Hcy、IGF-1及miR-195预测脑梗死恢复期补中益气汤加减辅助治疗预后不良的价值。结果118例患者经治疗后治愈的有24例,显效有39例,有效有46例,无效有9例,临床总有效率为92.37%(P<0.05)。与无效组比较,治愈组、显效组、有效组患者的Hcy、miR-195均更低、IGF-1均更高,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析结果显示,Hcy、miR-195与疗效呈负相关,IGF-1与疗效呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,Hcy、miR-195是脑梗死恢复期补中益气汤加减辅助治疗预后不良的独立危险因素,而IGF-1是保护因素(P<0.05);ROC曲线分析显示,Hcy、IGF-1及miR-195及三者联合检测的曲线下面积(AUC)分别为0.865、0.802、0.782、0.903。结论Hcy、IGF-1及miR-195水平与脑梗死恢复期补中益气汤加减辅助治疗疗效密切相关,且对预后具有一定的预测价值,可作为疗效及预后不良的预测因子。

葛根素对缺氧复氧损伤H9C2心肌细胞的保护作用及其与miR-195表达、Parthanatos死亡的相关性

目的:研究葛根素对于心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用及其与miR-195表达及与PARP-1依赖性细胞死亡(Parthanatos)的相关性。方法:培养H9C2心肌细胞,分4组,分别为:正常对照组(Control)、缺氧复氧组(Hypoxia Reoxygenation,HR)、转染组(Transfection Group,TG)、葛根素组(Puerarin Group,PG),其中HR组、TG组、GP组均构建心肌细胞缺氧复氧模型,转染组预先转染沉默miR-195表达,葛根素组预先给药,浓度为50μmol/L,检测心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)的释放,细胞活力检测,通过qPCR法检测Parthanatos主要基因凋亡诱导因子(AIF)与多聚ADP核糖聚合酶-1(PARP-1)的表达。结果:相较于HR组,TG组与PG组细胞活力均提高,LDH含量均下降(均P<0.05);相较于正常组,HR组miR-195、AIF、PARP-1的表达显著上升(均P<0.05),TG组、PG组相较于HR组,miR-195、AIF、PARP-1的表达均显著降低(均P<0.05)。结论:H9C2心肌细胞H/R损伤过程中主要发生Parthanatos死亡,葛根素可能通过抑制miR-195的表达降低Parthanatos死亡。

miR-195在胃癌中的表达及其对胃癌细胞株增殖的影响

探究miR-195在胃癌细胞中的表达情况及其在胃癌细胞株的增殖、凋亡中发挥的作用。方法 将正常胃黏膜细胞GES-1作为对照,分别测定miR-195在胃癌细胞和正常细胞中的表达水平;将mimics转染BGC-823细胞后,检测其凋亡情况及Notch1、cleaved caspase3和Hes1蛋白表达情况。结果 miR-195在胃癌细胞SGC-7901、BGC-823和MNK-28中的表达水平均明显低于正常胃黏膜细胞GES-1(P<0.05);凋亡检测完成后,空转染组BGC-823的凋亡率为(7.22±1.05)%,过表达组凋亡率为(17.83±1.14)%,对照组则为(7.16±1.09)%,过表达组细胞凋亡率明显高于其他两组(P<0.05);对照组和空转染组各蛋白表达情况无明显差异(P>0.05),过表达组Notch1和Hes1蛋白表达较低且cleaved caspase3表达较高。结论 miR-195在胃癌细胞中的表达水平偏低,将其表达水平上调则会产生胃癌细胞凋亡被促进且增殖被抑制的情况,分析其原因为miR-195上调一方面抑制了Notch1信号通路,另一方面促进了cleaved caspase3表达水平的升高。

急性心肌梗死患者血浆miR-195、sST2、Myo、CatS的检测价值

目的分析急性心肌梗死(AMI)患者血浆微小RNA-195(miR-195)、可溶性生长刺激表达因子2(sST2)、肌红蛋白(Myo)和组织蛋白酶S(CatS)的检测价值。方法选择2019年4月至2020年10月平阳县人民医院收治的AMI患者105例作为观察组,另择同期本院健康体检者94名作为对照组。检测并比较两组对象血浆miR-195、sST2、Myo和CatS水平。随访6个月,根据预后情况将患者分为预后不良组24例和预后良好组81例。对两组患者血浆miR-195、sST2、Myo和CatS水平进行比较,分析血浆miR-195、sST2、Myo和CatS对AMI患者预后的预测价值。结果观察组患者血浆miR-195、sST2、Myo和CatS水平高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。经Pearson相关分析显示,血浆miR-195、sST2、Myo和CatS之间均呈正相关(均P<0.05)。预后不良亚组患者血浆miR-195、sST2、Myo和CatS水平高于预后良好亚组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。单因素及多因素Cox回归分析显示,血浆miR-195、sST2、Myo和CatS水平异常升高均是导致AMI患者预后不良的危险因素(均P<0.05)。血浆miR-195、sST2、Myo和CatS 4者联合判断AMI患者预后的AUC值、灵敏度均高于单一检测(均P<0.05)。结论血浆miR-195、sST2、Myo和CatS的高表达与AMI患者预后不良相关。

有氧运动激活BDNF/miR-195/Bcl-2信号通路抑制CUMS抑郁小鼠海马神经细胞凋亡

目的:探讨有氧运动激活慢性不可预知应激性刺激(Chronic Unpredictable Stress,CUMS)抑郁小鼠海马BDNF/miR-195/Bcl-2信号通路改善海马功能的作用。方法:8周龄雄性健康KM小鼠,随机数字法分为空白对照组(CG)、CUMS抑郁模型组(MG)和抑郁+有氧运动组(EG),每组12只。13种慢性不可预知应激刺激28天建立CUMS抑郁模型,EG组在建模成功后适应性运动1周后,采用小动物跑台进行8周的有氧运动训练。训练结束后测定各组小鼠的神经行为评分,ELISA法测定血清BDNF,免疫组化法进行海马组织BDNF的定位表达,TUNEL检测海马组织细胞凋亡率,RTPCR检测凋亡相关miRNA与m RNA的表达水平,western blot检测海马BDNF蛋白表达水平。结果:CUMS抑郁小鼠海马功能显著降低,神经行为学评分下降,血清BDNF含量降低,造模效果显著。mRNA与miRNA高度相关的基因涉及到miR-195与BDNF,且两者的差异表达量与有氧运动相关,RT-PCR检测模型组小鼠海马组织Bax、Caspase-3表达上调,Bcl-2表达下降。有氧运动可有效改善抑郁小鼠海马功能,上调海马组织BDNF与Bcl-2的表达水平,下调miR-195和Bax的表达水平,抑制Caspase-3的活化,降低海马细胞凋亡率,且海马miR-195表达水平与BDNF表达呈显著负相关。结论:CUMS抑郁小鼠海马miR-195上调通过靶向抑制Bcl-2的表达水平促进海马细胞凋亡。有氧运动可显著上调抑郁小鼠海马BDNF的表达水平,抑制miR-195在小鼠海马细胞中的促凋亡作用,下调Bax、Caspase-3的表达,发挥抗凋亡作用。这一作用可能与BDNF/miR-195/Bcl-2信号通路的激活有关。

缺氧预处理通过激活MALAT1靶向抑制miR-195促进骨髓间充质干细胞的生存和血管形成

背景:研究表明,缺氧预处理能够促进骨髓间充质干细胞生存和血管形成,但具体机制未完全明确。长链非编码RNA-MALAT1(MALAT1)和microRNA-195(miR-195)均被证实与骨髓间充质干细胞生存和血管形成密切相关,MALAT1促进骨髓间充质干细胞生存和血管形成,而miR-195是骨髓间充质干细胞生存和血管形成的负向调节因子。目的:体外探讨缺氧预处理是否通过激活MALAT1靶向抑制miR-195进而提高骨髓间充质干细胞生存和促血管形成能力。方法:将体外培养的骨髓间充质干细胞分为以下6组:常氧组(体积分数为20%O2)、缺氧组(体积分数为1%O2)、缺氧+si-MALAT1组、缺氧+si-MALAT1对照组、缺氧+miR-195组和缺氧+miR-195对照组,其中缺氧+si-MALAT1组和缺氧+si-MALAT1对照组细胞分别转染MALAT1 siRNA以及scramble阴性对照,再进行缺氧处理,缺氧+miR-195组和缺氧+miR-195对照组细胞分别转染miR-195模拟物及阴性对照,再进行缺氧处理。各组培养24 h后检测细胞增殖、凋亡以及血管腔样结构形成情况,qRT-PCR检测MALAT1和miR-195的表达。在上述基础上,通过生物信息学网站RegRNA 2.0预测MALAT1与miR-195的潜在结合位点,将MALAT1野生型和突变型质粒分别与miR-195模拟物以及阴性对照在293T细胞中共转染,通过检测各组萤光素酶活性对MALAT1与miR-195的靶向关系进行验证。结果与结论:①与常氧组相比,缺氧组细胞生存力显著增强,凋亡率明显减少,血管腔样结构数量增多(P<0.01),MALAT1表达升高,miR-195表达降低(P<0.01);②与缺氧组和缺氧+si-MALAT1对照组比较,缺氧+si-MALAT1组细胞生存力显著降低,凋亡率明显增加,血管腔样结构数量减少(P<0.01),MALAT1表达下降,miR-195表达升高(P<0.01);与缺氧组和缺氧+miR-195对照组比较,缺氧+miR-195组细胞生存力显著降低,凋亡率明显增加,血管腔样结构数量减少(P<0.01),MALAT1表达明显下降,miR-195表达升高(P<0.01);③双萤光素酶检测结果显示:与miR-195对照组和空白对照组相比,miR-195组MALAT1野生型报告基因的萤光素酶活性显著降低,下降约63%(P<0.01),而miR-195组、miR-195对照组以及空白对照组的萤光素酶活性在MALAT1突变型中均无明显差异性(P>0.05);④结果表明,缺氧预处理能够通过激活MALAT1靶向抑制miR-195提高骨髓间充质干细胞的生存和促血管形成能力。

miR-195-5p靶向FGF2抑制子宫内膜癌HEC-1B细胞恶性生物学行为

目的:探讨miR-195-5p通过靶向FGF2抑制子宫内膜癌HEC-1B细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的分子机制。方法:HEC-1B细胞培养与转染完成后分为4组:HEC-1B组、miR-195-5p mimic组、p LV-FGF2组和miR-195-5p+FGF2组。q RT-PCR检测细胞miR-195-5p和FGF2 m RNA水平,荧光素酶实验验证miR-195-5p与FGF2的靶向关系,Western blotting检测FGF2表达水平,CCK-8法检测HEC-1B细胞增殖水平,流式细胞术检测HEC-1B细胞凋亡率,Transwell实验检测HEC-1B细胞侵袭能力,划痕实验检测HEC-1B细胞迁移能力。结果:与HEC-1B组相比,miR-195-5p mimic组miR-195-5p表达升高、FGF2 m RNA水平下降(均P<0.01);miR-195-5p可直接靶向FGF2。与HEC-1B组相比,miR-195-5p mimic组FGF2的蛋白表达水平下降,p LV-FGF2组FGF2的蛋白水平明显上升,且miR-195-5p+FGF2组FGF2的蛋白表达水平低于p LV-FGF2组(均P<0.01)。miR-195-5p mimic组细胞增殖水平低于HEC-1B组,p LV-FGF2组细胞增殖水平高于HEC-1B组(均P<0.01)。与HEC-1B组相比,miR-195-5p mimic组细胞凋亡率增加,p LV-FGF2组细胞凋亡率降低,且miR-195-5p+FGF2组细胞凋亡率高于p LV-FGF2组(均P<0.01)。与HEC-1B组相比,miR-195-5p mimic组每个视野下的侵袭细胞数和划痕愈合率下降,p LV-FGF2组每个视野下的侵袭细胞数和划痕愈合率上升,且miR-195-5p+FGF2组每个视野下的侵袭细胞数和划痕愈合率低于p LV-FGF2组(均P<0.01)。结论:miR-195-5p通过靶向FGF2抑制子宫内膜癌HEC-1B细胞的增殖、侵袭和迁移并促进细胞凋亡,其作为子宫内膜癌的治疗靶点。