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Linc01419调控miR-34a-5p/E2F3轴促进膀胱癌细胞增殖与侵袭
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作者 向威 吕磊 +2 位作者 郑福鑫 袁敬东 吴维 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第16期2921-2929,共9页
目的:探讨长链非编码RNA Linc01419对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及作用机制。方法:通过UALCAN软件(https://ualcan.path.uab.edu/)分析TCGA数据库中Linc01419在膀胱癌组织与正常膀胱组织中的表达差异;采用实时荧光定量聚合酶链反应(rea... 目的:探讨长链非编码RNA Linc01419对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及作用机制。方法:通过UALCAN软件(https://ualcan.path.uab.edu/)分析TCGA数据库中Linc01419在膀胱癌组织与正常膀胱组织中的表达差异;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测Linc01419在不同膀胱癌细胞系、22例经病理证实为膀胱癌的手术患者的肿瘤组织及癌旁正常膀胱组织中的表达水平;应用细胞增殖/毒性检测(cell counting kit-8,CCK-8)实验和Transwell小室侵袭实验检测敲低Linc01419表达对膀胱癌细胞增殖与侵袭的影响;采用双荧光素酶报告基因检测法分析Linc01419与miR-34a-5p及miR-34a-5p与E2F3之间的靶向调控关系。结果:UALCAN数据库分析显示相较正常膀胱组织,Linc01419在膀胱癌组织中显著高表达(P<0.001);RT-qPCR分析结果显示相较癌旁正常膀胱组织,Linc01419在22例膀胱癌组织中表达明显上调(P<0.001),与UALCAN数据库分析结果一致;Linc01419在4株膀胱癌细胞中的表达明显高于正常膀胱上皮细胞(P<0.01);敲低Linc01419表达,可显著抑制膀胱癌细胞的增殖、侵袭及N-cadherin、PCNA蛋白的表达,而显著促进E-cadherin的蛋白表达(P<0.05);miR-34a-5p过表达对膀胱癌细胞具有类似的抑制作用;双荧光素酶报告基因实验、RIP及Pull-down实验证实Linc01419可靶向结合miR-34a-5p,而后者进一步介导了对E2F3的靶向调控;抑制miR-34a-5p表达,可显著削弱Linc01419沉默对膀胱癌细胞生物学行为及E-cadherin、N-cadherin、PCNA、E2F3表达的影响。结论:Linc01419在膀胱癌中异常高表达,其通过调控miR-34a-5p/E2F3轴促进膀胱癌细胞增殖和侵袭,很可能是膀胱癌发生、发展过程中的一个重要环节。 展开更多
关键词 膀胱癌 Linc01419 mir-34a-5p E2F3
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LncRNA-CASC2竞争性结合miR-193a-5p调控GSDMD焦亡通路逆转非小细胞肺癌顺铂耐药的分子机制
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作者 罗世程 肖冬平 +3 位作者 黄秀玲 左炜 胡向东 邓志辉 《中国当代医药》 2024年第1期10-14,共5页
目的探讨LncRNA-CASC2竞争性结合miR-193a-5p调控GSDMD焦亡通路逆转非小细胞肺癌顺铂耐药的分子机制。方法选用非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系A549进行研究,建立耐药株A549/DDP,通过CCK8检测细胞对顺铂的敏感性验证耐药细胞株是否成功建立... 目的探讨LncRNA-CASC2竞争性结合miR-193a-5p调控GSDMD焦亡通路逆转非小细胞肺癌顺铂耐药的分子机制。方法选用非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系A549进行研究,建立耐药株A549/DDP,通过CCK8检测细胞对顺铂的敏感性验证耐药细胞株是否成功建立。利用PCR检测CASC2在A549和A549/DDP细胞中的表达情况以及对GSDMD2、miR-193a-5p表达的影响。通过生物信息学软件预测LncRNA-CASC2与miR-193a-5p、miR-193a-5p与GSDMD结合位点,利用荧光素酶报告基因分析CASC2与miR-193a-5p、miR-193a-5p与GSDMD靶向关系,Western blot检测LncRNA-CASC2竞争性结合miR-193a-5p调控GSDMD焦亡通路的蛋白表达变化。结果A549/DDP细胞的半抑制浓度值是A549细胞的10倍以上,表明已成功构建耐药细胞株A549/DDP。A549/DDP中CASC2表达较细胞A549降低(P<0.05)。CASC2 mimics可抑制细胞中miR-193a-5p表达,同时GSDMD表达上调(P<0.05)。CASC2与miR-193a-5p、miR-193a-5p与GSDMD具有明显靶向关系(P<0.05)。结论非小细胞肺癌细胞中LncRNA-CASC2、miR-193a-5p低表达与GSDMD的高表达,与非小细胞肺癌化疗耐药性密切相关,LncRNA-CASC2与miR-193a-5p相互作用调控GSDMD,促进肿瘤细胞耐药。 展开更多
关键词 LncRNa-CASC2 mir-193a-5p GSDMD 耐药
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T2DM患者血清miR-199a-3p水平与DR的相关性研究
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作者 张玮琼 王建伟 +1 位作者 王晶莹 接传红 《中国中医眼科杂志》 2024年第8期723-729,736,共8页
目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清miR-199a-3p水平与糖尿病视网膜病变(DR)的相关性。方法纳入2021年9月—2022年8月在中国中医科学院眼科医院诊断为T2DM的患者81例(162只眼),根据是否发生DR分为DR组51例(102只眼)和非DR组30例(60只眼),... 目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清miR-199a-3p水平与糖尿病视网膜病变(DR)的相关性。方法纳入2021年9月—2022年8月在中国中医科学院眼科医院诊断为T2DM的患者81例(162只眼),根据是否发生DR分为DR组51例(102只眼)和非DR组30例(60只眼),选择同期来院体检的健康者30例(60只眼)作为对照组。分别采集对照组体检时,DR组、非DR组患者入院后的静脉血5 mL。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)方法检测3组血清miR-199a-3p相对表达量,并检测血清生化指标。分析血清miR-199a-3p水平与DR发生的相关性,并评估对DR发生的影响价值。结果(1)生化指标:3组空腹血浆葡萄糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)水平比较,差异均有统计学意义(F_(FPG)=88.218、F_(HbA1c)=92.815、F_(ALT)=28.522、F_(AST)=19.647、F_(TG)=27.680,均P=0.000)。非DR组FPG、HbAlc、ALT水平均高于对照组,差异均有统计学意义(t_(FPG)=10.302、t_(HbA1c)=9.977,均P=0.000;tALT=2.924,P=0.015);AST、TG水平与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。DR组所有生化指标水平均高于对照组和非DR组,差异均有统计学意义(对照组:t_(FPG)=15.123、t_(HbAlc)=15.275、t_(ALT)=7.357、t_(AST)=6.649、t_(TG)=7.898,均P=0.000;非DR组:t_(FPG)=3.929、t_(HbAlc)=3.772,均P=0.001;t_(AST)=3.591,P=0.002;tALT=4.410、t_(TG)=4.210,均P=0.000)。(2)血清miR-199a-3p水平:3组间血清miR-199a-3p水平比较,差异有统计学意义(F=25.100,P=0.000);非DR组、DR组血清miR-199a-3p水平均高于对照组,差异均有统计学意义(t^(T2DM)=2.147,P=0.035;t_(DR)=6.517,P=0.000);DR组血清miR-199a-3p水平高于非DR组,差异有统计学意义(t=4.606,P=0.000)。(3)DR分期对指标的影响:PDR期与NPDR期患者血清miR-199a-3p水平比较,PDR期低于NPDR期,差异有统计学意义(t=7.272,P=0.000)。PDR期与NPDR期患者生化指标比较,PDR期FPG、HbAlc、ALT、AST、TG水平均高于NPDR期,差异均有统计学意义(t_(FPG)=4.444、t_(HbAlc)=4.074、t_(ALT)=3.818,均P=0.000;t_(AST)=2.172,P=0.035;t_(TG)=3.587,P=0.001)。(4)相关性分析:DR患者血清miR-199a-3p水平与T2DM病程、FPG、HbAlc、ALT、AST、TG均呈负相关(r_(T2DM)病程=-0.368,P=0.008;r_(HbA1c)=-0.456,P=0.001;r_(AST)=-0.416,P=0.002;r_(ALT)=-0.405,P=0.003;r_(FPG)=-0.472、r_(TG)=-0.488,均P=0.000)。T2DM患者血清miR-199a-3p水平预测发生DR时,ROC曲线下面积为0.783,有统计学意义(P=0.000),血清miR-199a-3p水平对诊断DR有一定的预测性能,ROC曲线最佳临界点的约登指数为0.475,灵敏度为0.867,特异度为0.608。结论T2DM患者血清miR-199a-3p的表达与DR的发生密切相关,且与DR的病程、血糖变化和脂质代谢指标相关,可能成为T2DM患者发生DR的潜在生物学标志。 展开更多
关键词 2型糖尿病 糖尿病视网膜病变 mir-199a-3p
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红景天苷调控miR-20a-5p/TIMP2轴对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖和迁移的影响
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作者 朱光昭 方璐 +1 位作者 严婕 李琴 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第5期803-809,共7页
目的探讨红景天苷调控miR-20a-5p/金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP2)轴对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)功能和活化的影响。方法以HFLS-RA细胞为研究对象,将HFLS-RA细胞分为肿瘤坏死因子-α(TNF-α)组、对照组、红景天苷组、miR-... 目的探讨红景天苷调控miR-20a-5p/金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP2)轴对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)功能和活化的影响。方法以HFLS-RA细胞为研究对象,将HFLS-RA细胞分为肿瘤坏死因子-α(TNF-α)组、对照组、红景天苷组、miR-20a-5p抑制物阴性对照(inhibitor NC)组、miR-20a-5p抑制物组、红景天苷+miR-20a-5p模拟物阴性对照(mimic NC)组、红景天苷+miR-20a-5p模拟物组。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测HFLS-RA细胞中miR-20a-5p表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HFLS-RA细胞上清液中白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平;细胞计数试剂盒8(CCK-8)法、5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EdU)染色检测HFLS-RA细胞增殖;划痕实验检测HFLS-RA细胞迁移;免疫印迹实验(Western blot)检测HFLS-RA细胞中TIMP2、细胞周期素D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶(MMP)-9蛋白表达;双荧光素酶验证miR-20a-5p与TIMP2的关系。结果与对照组比较,TNF-α组miR-20a-5p表达、IL-1β、IL-6水平、吸光度(OD_(450))值、EdU阳性细胞率、划痕愈合率及CyclinD1、MMP-9蛋白上调,TIMP2蛋白下调(P<0.05);与TNF-α组相比,红景天苷组miR-20a-5p表达、IL-1β、IL-6水平、OD_(450)值、EdU阳性细胞率、划痕愈合率及CyclinD1、MMP-9蛋白下调,TIMP2蛋白上调(P<0.05);与inhibitor NC组、TNF-α组相比比较,miR-20a-5p抑制物组miR-20a-5p表达、IL-1β、IL-6水平、OD_(450)值、EdU阳性细胞率、划痕愈合率及CyclinD1、MMP-9蛋白下调,TIMP2蛋白上调(P<0.05);与红景天苷+mimic NC组、红景天苷组相比,红景天苷+miR-20a-5p模拟物组miR-20a-5p表达、IL-1β、IL-6水平、OD_(450)值、EdU阳性细胞率、划痕愈合率及CyclinD1、MMP-9蛋白表达升高,TIMP2蛋白表达降低(P<0.05)。miR-20a-5p与TIMP2存在靶向调控关系。结论红景天苷可能通过调控miR-20a-5p/TIMP2抑制TNF-α诱导的HFLS-RA细胞增殖、迁移及炎症反应。 展开更多
关键词 红景天苷 mir-20a-5p 金属蛋白酶组织抑制剂-2 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞 增殖 迁移
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miR-130a-5p靶向Runx2对牙槽骨成骨细胞增殖和分化的影响及其调控机制研究
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作者 张义林 侯旭 +2 位作者 汪莉 朗么磋 李相宜 《中国美容医学》 CAS 2024年第6期51-55,共5页
目的:探究miR-130a-5p靶向Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)对牙槽骨成骨细胞(Alveolar osteoblast,AOB)增殖、凋亡、成骨分化的影响及其机制。方法:将AOB分为NC组、miR-NC组、miR-130a-5p组、miR-130a-5p... 目的:探究miR-130a-5p靶向Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)对牙槽骨成骨细胞(Alveolar osteoblast,AOB)增殖、凋亡、成骨分化的影响及其机制。方法:将AOB分为NC组、miR-NC组、miR-130a-5p组、miR-130a-5p+Runx2组和miR-130a-5p+SHH组。双荧光素酶报告验证miR-130a-5p对Runx2、Sonic hedgehog(SHH)的调控关系;CCK-8及EdU染色检测细胞增殖能力;AnnexinV-FITC/PI法检测细胞凋亡能力;ALP染色、茜素红染色检测细胞成骨分化能力;RT-qPCR检测miR-130a-5p、Runx2、SHH、神经胶质瘤关联癌基因同源物1(Gli1)mRNA水平;Western Blot检测增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、Ki67、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 related X protein,Bax)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(Osteocalcin,OCN)、骨形态发生蛋白2(Bone morphogenetic protein 2,BMP2)、Runx2、SHH、Gil1水平。结果:miR-130a-5p靶向调控Runx2、SHH。过表达miR-130a-5p后,细胞24 h、48 h、72 h OD值及EdU阳性率降低,细胞凋亡率升高,成骨分化能力降低,miR-130a-5p、Bax蛋白水平升高,Runx2、PCNA、Ki67、Bcl-2、ALP、OCN、BMP2蛋白及SHH、Gil1 mRNA和蛋白水平均降低(P<0.05)。过表达miR-130a-5p和Runx2或过表达miR-130a-5p和SHH可减弱过表达miR-130a-5p对细胞增殖、凋亡、成骨分化的影响。结论:miR-130a-5p靶向Runx2抑制AOB增殖和成骨分化,并促进AOB凋亡,其可能通过抑制SHH信号通路发挥作用。 展开更多
关键词 mir-130a-5p Runt相关转录因子2 牙槽骨成骨细胞 Sonic hedgehog信号通路 增殖 分化 调控机制
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miR-30a-5p靶向E2F7阻滞A549细胞周期并抑制其增殖
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作者 鲍祯 乔亚红 《河南医学研究》 CAS 2024年第17期3106-3113,共8页
目的探究miR-30a-5p靶向E2F7调控非小细胞肺癌细胞周期和增殖的机制。方法通过荧光定量(qRT-PCR)验证miR-30a-5p在非小细胞肺癌A549细胞与人正常肺上皮细胞BEAS-2B中的相对表达水平。在线软件预测了miR-30a-5p的靶基因及其靶向结合位点... 目的探究miR-30a-5p靶向E2F7调控非小细胞肺癌细胞周期和增殖的机制。方法通过荧光定量(qRT-PCR)验证miR-30a-5p在非小细胞肺癌A549细胞与人正常肺上皮细胞BEAS-2B中的相对表达水平。在线软件预测了miR-30a-5p的靶基因及其靶向结合位点,双荧光素酶报告基因实验进一步验证miR-30a-5p和E2F7 mRNA 3’UTR区域的靶向关系。其次在A549细胞中分别转染miR-30a-5p模拟物(miR-30a-5p mimics)和miR-30a-5p抑制剂(miR-30a-5p inhibitor),应用CCK-8细胞计数试剂盒检测A549细胞增殖情况,流式细胞术检测A549细胞凋亡和细胞周期。qRT-PCR和免疫印迹检测细胞周期相关基因和肺腺癌相关基因的mRNA和蛋白表达水平。结果miR-30a-5p在A549细胞中表达水平低于BEAS-2B,且miR-30a-5p靶向结合与E2F7 mRNA 3’UTR 514-520位点,抑制E2F7表达。转染miR-30a-5p mimics抑制A549细胞增殖,并促进A549凋亡。将A549细胞周期阻滞在G 1期。调控肺腺癌相关基因TFDP3、CDK1、E2F8、CCNA2和CDC6的mRNA和蛋白表达水平。结论非小细胞肺癌A549细胞中miR-30a-5p通过靶向负调控E2F7的表达,调控TFDP3、CDK1、E2F8、CCNA2和CDC6的mRNA和蛋白表达,抑制A549细胞增殖和细胞周期。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 mir-30a-5p E2F7 基因表达 细胞周期 凋亡
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炙甘草汤通过miR-181a-5p靶向SPHK2调控心肌纤维化改善糖尿病心肌病 被引量:1
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作者 王天宇 丁君灿 +1 位作者 程心怡 胡鹏飞 《浙江中西医结合杂志》 2024年第1期14-20,33,共8页
目的探究炙甘草汤对糖尿病心肌病(DCM)模型大鼠心肌纤维化的影响以及调控机制。方法雄性Sprague Dawley(SD)大鼠30只,10只大鼠作为对照组;20只通过高糖高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)构建DCM模型大鼠,造模后按随机数字表法分成DC... 目的探究炙甘草汤对糖尿病心肌病(DCM)模型大鼠心肌纤维化的影响以及调控机制。方法雄性Sprague Dawley(SD)大鼠30只,10只大鼠作为对照组;20只通过高糖高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)构建DCM模型大鼠,造模后按随机数字表法分成DCM组、炙甘草汤组。炙甘草汤组予2 mL/100 g炙甘草汤(1 g/mL)灌胃,对照组及DCM组予等量生理盐水灌胃,连续给药4周,每天1次。灌胃给药结束后,HE染色观察DCM模型大鼠心肌组织的病理改变,Masson染色观察DCM模型大鼠的心肌纤维化情况。提取大鼠乳鼠心肌成纤维细胞,分为对照组、高糖组、炙甘草汤组、miRNA-NC组、miR-181a-5p模拟物组、miR-181a-5p拮抗剂组、炙甘草汤+miRNA-NC组和炙甘草汤+miR-181a-5p拮抗剂组并进行相应处理。通过高糖(30 mmol/L)诱导心肌成纤维细胞增殖模型。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠心肌组织和心肌成纤维细胞中的α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)和鞘氨醇激酶2(SPHK2)蛋白表达。实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测miR-181a-5p、CollagenⅠ和CollagenⅢ的相对表达水平。细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测心肌成纤维细胞的细胞活力。TargetScan数据库预测miR-181a-5p与SPHK2的结合序列。双荧光素酶报告基因实验验证miR-181a-5p与SPHK2的靶向关系。结果与对照组比较,DCM组大鼠血糖水平显著升高[(30.40±3.48)mmol/L比(5.08±0.17)mmol/L,P<0.01],心肌细胞肥大、排列紊乱、成纤维细胞增生伴炎症细胞浸润,炙甘草汤组大鼠上述情况均得到改善。与对照组比较,DCM组大鼠心肌组织α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ、SPHK2蛋白水平升高,miR-181a-5p水平显著下降[(0.45±0.20)比(1.00±0.12),P<0.01];而炙甘草汤喂养能够逆转上述表达水平变化。与对照组比较,高糖组心肌成纤维细胞的细胞活力[(194.03±25.59)%比(100.00±11.00)%,P<0.01]、CollagenⅠ[(3.73±0.81)比(1.00±0.17),P<0.01]、CollagenⅢ[(3.93±0.97)比(1.00±0.24),P<0.01]、α-SMA蛋白、SPHK2蛋白水平升高,miR-181a-5p水平显著下降[(0.41±0.18)比(1.00±0.21),P<0.01];与高糖组比较,炙甘草汤组心肌成纤维细胞的细胞活力[(147.63±25.80)%比(194.03±25.59)%,P<0.01]、CollagenⅠ[(1.91±0.58)比(3.73±0.81),P<0.01]、CollagenⅢ[(2.02±0.45)比(3.93±0.97),P<0.01]、α-SMA蛋白、SPHK2蛋白水平降低,miR-181a-5p水平显著升高[(0.69±0.17)比(0.41±0.18),P<0.01]。与miRNA-NC比较,心肌成纤维细胞转染miR-181a-5p模拟物后miR-181a-5p表达显著升高[(2.82±0.86)比(1.00±0.28),P<0.01],SPHK2表达下降;而转染miR-181a-5p拮抗剂后miR-181a-5p表达显著下降[(0.29±0.09)比(1.00±0.28),P<0.01],SPHK2表达升高。TargetScan数据库分析发现,miR-181a-5p与SPHK2的3’UTR存在结合序列。双荧光素酶报告基因实验证实,miR-181a-5p和SPHK2存在靶向作用。与炙甘草汤+miRNA-NC组比较,炙甘草汤+miR-181a-5p拮抗剂组心肌成纤维细胞CollagenⅠ[(2.95±0.67)比(1.89±0.26),P<0.01]、CollagenⅢ[(2.99±0.74)比(1.85±0.63),P<0.01]、细胞活力[(78.57±10.64)%比(59.75±8.08)%,P<0.01]、α-SMA蛋白、SPHK2蛋白水平升高,miR-181a-5p水平显著降低[(0.77±0.17)比(2.89±0.57),P<0.01]。结论炙甘草汤可能通过miR-181a-5p靶向SPHK2调控心肌纤维化来实现对DCM的改善作用。 展开更多
关键词 大鼠 糖尿病心肌病 心肌成纤维细胞 炙甘草汤 mir-181a-5p SPHK2
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miR-378a-3p靶向NUAK2抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭
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作者 陈建彬 王泰人 《肿瘤防治研究》 CAS 2024年第6期432-439,共8页
目的探讨微小RNA-378a-3p(miR-378a-3p)影响乳腺癌细胞发展的机制。方法基于TCGA数据库分析miR-378a-3p在乳腺癌细胞中的表达情况;利用starBase、miRDB、miRWalk数据库对miR-378a-3p进行靶基因预测,双荧光素酶报告实验验证miR-378a-3p对... 目的探讨微小RNA-378a-3p(miR-378a-3p)影响乳腺癌细胞发展的机制。方法基于TCGA数据库分析miR-378a-3p在乳腺癌细胞中的表达情况;利用starBase、miRDB、miRWalk数据库对miR-378a-3p进行靶基因预测,双荧光素酶报告实验验证miR-378a-3p对NUAK家族激酶2(NUAK2)的靶向调控;qRT-PCR和Western blot检测miR-378a-3p和NUAK2在乳腺癌细胞中mRNA和蛋白的表达情况;细胞增殖实验检测乳腺癌细胞的增殖能力;细胞划痕实验和侵袭实验分别检测乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力。凋亡和周期实验检测乳腺癌细胞的凋亡率和细胞周期分布。结果miR-378a-3p在乳腺癌细胞中显著下调,过表达miR-378a-3p抑制了乳腺癌细胞的增殖,迁移和侵袭。miR-378a-3p靶向下调NUAK2的表达。结论miR-378a-3p通过靶向抑制NUAK2的表达,从而抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 乳腺癌 mir-378a-3p NUAK2 增殖 迁移 侵袭
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MiR-219a-5p exerts a protective function in a mouse model of myocardial infarction
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作者 ZULONG SHENG YANRU HE +3 位作者 JUNYAN CAI YUQIN JI YUYU YAO GENSHAN MA 《BIOCELL》 SCIE 2024年第9期1369-1377,共9页
Background:Myocardial infarction(MI)is known worldwide for its important disabling features,including myocarditis and cardiomyocyte apoptosis.It is believed that microRNA(miRNA)has a role in the cellular processes of ... Background:Myocardial infarction(MI)is known worldwide for its important disabling features,including myocarditis and cardiomyocyte apoptosis.It is believed that microRNA(miRNA)has a role in the cellular processes of apoptosis and myocarditis,and miR-219a-5p has been found to suppress the inflammatory response.However,unknown is the precise mechanism by which miR-219a-5p contributes to MI.Methods:We measured the expression of miR-219a-5p and evaluated its effects on target proteins,inflammatory factors,and apoptosis in a mouse model of MI.Echocardiography was utilized to examine the MI clinical index,and triphenyl tetrazolium chloride staining was employed to analyze the infarcted region.Enzyme-linked immunosorbent assay and Western blotting measured serum and molecular markers in heart tissues.To quantify the association with miR-219a-5p and ATPase sarcoplasmic/endoplasmic reticulum Ca^(2+) transporting 2(ATP2A2),the luciferase activity assay and Pearson’s correlation analysis were employed.Results:MiR-219a-5p exhibited low expression in a mouse model of MI,and its amplification prevented both apoptotic and inflammatory reactions.Specifically,miR-219a-5p targeted ATP2A2.Conclusion:In a mouse model of MI,miR-219a-5p exerted a potent protective effect via direct targeting of ATP2A2. 展开更多
关键词 mir-219a-5p Ca^(2+) transporting 2 Myocardial infarction Inflammatory response APOPTOSIS
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lncRNA MIR4435-2HG靶向miR-376a-3p调控胆管癌细胞生物学行为的机制研究
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作者 刘文东 张嘉麟 余紫丹 《局解手术学杂志》 2024年第1期30-35,共6页
目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)MIR4435-2HG(MIR4435-2HG)对胆管癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响及其对微小RNA-376a-3p(miR-376a-3p)的调控作用。方法 qRT-PCR法检测人肝内胆管上皮细胞HIBEpic与人胆管癌细胞RBE中MIR4435-2HG、mi... 目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)MIR4435-2HG(MIR4435-2HG)对胆管癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响及其对微小RNA-376a-3p(miR-376a-3p)的调控作用。方法 qRT-PCR法检测人肝内胆管上皮细胞HIBEpic与人胆管癌细胞RBE中MIR4435-2HG、miR-376a-3p的表达。将si-NC、si-MIR4435-2HG、miR-NC、miR-376a-3p mimics、si-MIR4435-2HG联合anti-miR-NC、si-MIR4435-2HG联合anti-miR-376a-3p分别转染至RBE细胞,作为si-NC组、si-MIR4435-2HG组、miR-NC组、miR-376a-3p组、si-MIR4435-2HG+anti-miR-NC组、si-MIR4435-2HG+anti-miR-376a-3p组;采用MTT法、Transwell小室法及流式细胞仪分别检测细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡情况;双荧光素酶报告基因实验验证MIR4435-2HG与miR-376a-3p的靶向关系。Western blot检测相关蛋白表达。结果 RBE细胞中MIR4435-2HG表达量升高(P<0.05),miR-376a-3p表达量降低(P<0.05)。与si-NC组比较,si-MIR4435-2HG组MIR4435-2HG表达、细胞活力及CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白水平降低(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-376a-3p组细胞活力及CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白水平降低(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),miR-376a-3p表达、细胞凋亡率升高(P<0.05)。MIR4435-2HG可靶向调控miR-376a-3p;与si-MIR4435-2HG+anti-miR-NC组比较,si-MIR4435-2HG+anti-miR-376a-3p组细胞活力及CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白水平升高(P<0.05),迁移及侵袭细胞数增多(P<0.05),miR-376a-3p表达、细胞凋亡率降低(P<0.05)。结论 敲低MIR4435-2HG可通过靶向调控miR-376a-3p进而抑制RBE细胞增殖、迁移、侵袭,并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 lncRNA MIR4435-2HG mir-376a-3p 胆管癌 细胞增殖 迁移 侵袭
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CircACAP2靶向miR-29a-3p/CCNT2轴对缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的影响
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作者 屈苗 关欣 《中西医结合心脑血管病杂志》 2024年第17期3128-3135,共8页
目的:探讨CircACAP2靶向miR-29a-3p/细胞周期蛋白T2(CCNT2)轴对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响。方法:将H9c2细胞分为Control组(正常培养)、si-NC组(转染si-NC)、Model组(建立H/R模型)、si-CircACAP2组(转染si-CircACAP2)、si-... 目的:探讨CircACAP2靶向miR-29a-3p/细胞周期蛋白T2(CCNT2)轴对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响。方法:将H9c2细胞分为Control组(正常培养)、si-NC组(转染si-NC)、Model组(建立H/R模型)、si-CircACAP2组(转染si-CircACAP2)、si-CircACAP2+inhibitor-NC组(si-CircACAP2和inhibitor-NC共转染)、si-CircACAP2+miR-29a-3p inhibitor组(si-CircACAP2和miR-29a-3p inhibitor共转染);实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测H9c2细胞中CircACAP2、miR-29a-3p的表达水平;四唑盐(MTT)法检测H9c2细胞活力;流式细胞仪检测H9c2细胞凋亡;单丹磺酰尸胺(MDC)染色法检测H9c2细胞自噬;乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒检测H9c2细胞上清中LDH、MDA、SOD水平,DCFH-DA荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)水平;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞凋亡蛋白[B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)]、自噬相关蛋白(Beclin-1、P62)及CCNT2的表达;双荧光素酶报告检测CircACAP2对miR-29a-3p的靶向关系和miR-29a-3p对CCNT2的靶向关系。结果:与Control组比较,Model组H9c2细胞中CircACAP2表达、凋亡率、自噬囊泡数、LDH释放率、MDA、ROS水平、Bax、Beclin-1、CCNT2蛋白表达升高,miR-29a-3p表达、OD490值、SOD活性、PCNA、Bcl-2、P62蛋白表达降低(P<0.05);与Model组比较,si-CircACAP2组H9c2细胞中CircACAP2表达、凋亡率、自噬囊泡数、LDH释放率、MDA、ROS水平、Bax、Beclin-1、CCNT2蛋白表达降低,miR-29a-3p表达、OD490值、SOD活性、PCNA、Bcl-2、P62蛋白表达升高(P<0.05);与si-CircACAP2组比较,si-CircACAP2+miR-29a-3p inhibitor组H9c2细胞中CircACAP2表达差异无统计学意义(P>0.05),凋亡率、自噬囊泡数、LDH释放率、MDA、ROS水平、Bax、Beclin-1、CCNT2蛋白表达升高,miR-29a-3p表达、OD490值、SOD活性、PCNA、Bcl-2、P62蛋白表达降低(P<0.05);CircACAP2靶向调控miR-29a-3p的表达,miR-29a-3p靶向负调控CCNT2的表达。结论:敲低CircACAP2可能通过靶向miR-29a-3p来下调CCNT2表达,进而抑制H/R诱导的H9c2细胞凋亡、自噬能力及氧化应激,促进细胞增殖,发挥保护作用。 展开更多
关键词 缺氧/复氧 CircACAP2 mir-29a-3p/细胞周期蛋白T2 心肌细胞 实验研究
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circFADS2靶向miR-125a-5p调控MPP+诱导的SK-N-SH细胞损伤的机制 被引量:1
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作者 张永志 顾平(指导) +3 位作者 王文婷 刘惠苗 张赛 刘义晗 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1243-1247,共5页
目的:探究circFADS2靶向miR-125a-5p调控帕金森病(PD)细胞炎症反应和凋亡的机制。方法:100μmol/L MPP+诱导SK-N-SH细胞建立PD模型,分为Con组、PD组、PD+pcDNA组、PD+pcDNA-circFADS2组、PD+anti-miR-NC组、PD+anti-miR-125a-5p组、PD+p... 目的:探究circFADS2靶向miR-125a-5p调控帕金森病(PD)细胞炎症反应和凋亡的机制。方法:100μmol/L MPP+诱导SK-N-SH细胞建立PD模型,分为Con组、PD组、PD+pcDNA组、PD+pcDNA-circFADS2组、PD+anti-miR-NC组、PD+anti-miR-125a-5p组、PD+pcDNA-circFADS2+miR-NC组、PD+pcDNA-circFADS2+miR-125a-5p组。qRT-PCR检测circFADS2和miR-125a-5p表达;ELISA检测IL-1β、TNF-α含量;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测circFADS2与miR-125a-5p的靶向关系。结果:与Con组相比,PD组circFADS2表达降低,miR-125a-5p表达、凋亡率、IL-1β、TNF-α含量、cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白表达升高(P<0.05)。circFADS2过表达或干扰miR-125a-5p表达可降低MPP+诱导的SK-N-SH细胞凋亡率、IL-1β、TNF-α含量、cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白表达(P<0.05)。circFADS2靶向负调控miR-125a-5p表达,上调miR-125a-5p表达逆转了circFADS2过表达对PD细胞炎症反应和凋亡的作用。结论:circFADS2过表达通过降低miR-125a-5p表达抑制PD细胞炎症反应和凋亡。 展开更多
关键词 circFADS2 mir-125a-5p 帕金森病 炎症反应 凋亡
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慢性肾脏病患者治疗前后血清miR-30a-5p和miR-196a水平变化及价值 被引量:1
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作者 朱媛媛 徐天 +2 位作者 于茜 孙伟 顾万建 《临床检验杂志》 CAS 2023年第5期340-344,共5页
目的检测并分析慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者治疗前、连续治疗不同随访时间点血清miR-30a-5p和miR-196a-5p水平动态变化,探讨其作为CKD患者辅助诊断及疗效监测分子标志物的价值。方法收集江苏省中医院肾内科2015年4月至2... 目的检测并分析慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者治疗前、连续治疗不同随访时间点血清miR-30a-5p和miR-196a-5p水平动态变化,探讨其作为CKD患者辅助诊断及疗效监测分子标志物的价值。方法收集江苏省中医院肾内科2015年4月至2016年2月就诊的20例CKD患者治疗前以及连续治疗并随访3~6个月的血清标本,记录患者血生化及尿液指标,同时收集23例体检健康者血清标本作为对照。采用实时荧光定量PCR检测各组血清miR-30a-5p和miR-196a-5p水平。采用非参数检验、Spearman秩相关分析血清miR-30a-5p和miR-196a-5p的水平变化及临床应用价值。结果与健康人对照相比,CKD患者治疗前血清miR-30a-5p[0.563(0.324,1.737)vs 0.270(0.127,0.435),U=100.5,P=0.004]和miR-196a-5p[0.423(0.154,1.270)vs 0.121(0.056,0.168),U=74,P=0.0003]水平显著升高。与CKD患者治疗前相比,CKD患者血清miR-30a-5p和miR-196a-5p水平从治疗后第3个月开始呈持续降低趋势,至第6个月,其miR-30a-5p[0.344(0.128,0.672)vs 0.563(0.324,1.737),P=0.020],miR-196a-5p[0.227(0.079,0.474)vs 0.423(0.154,1.270),P=0.030]水平与治疗前比较差异有统计学意义。Spearman相关性分析显示,血清miR-30a-5p和miR-196a-5p水平与估算的肾小球滤过率(eGFR)呈显著负相关(r=-0.223,P=0.013;r=-0.191,P=0.035)。结论CKD患者血清miR-30a-5p和miR-196a-5p水平检测有助于反映肾脏功能,具备成为CKD患者辅助诊断及疗效监测分子标志物的潜能。 展开更多
关键词 慢性肾脏病 辅助诊断 mir-30a-5p mir-196a-5p 分子标志物
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lncRNA MAGI2-AS3靶向调控miR-130a-5p对柯萨奇病毒B3诱导的大鼠心肌细胞H9C2损伤的影响 被引量:1
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作者 朱康宁 郑培明 高岚 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2023年第6期801-806,共6页
目的:探讨lncRNA MAGI2-AS3靶向miR-130a-5p调控柯萨奇病毒B3(CVB3)诱导的大鼠心肌细胞H9C2损伤的分子机制。方法:对照组,用不含药物、病毒的DMEM处理H9C2细胞48 h。CVB3组,用含有100倍半数组织培养感染剂量CVB3的DMEM处理H9C2细胞48 h... 目的:探讨lncRNA MAGI2-AS3靶向miR-130a-5p调控柯萨奇病毒B3(CVB3)诱导的大鼠心肌细胞H9C2损伤的分子机制。方法:对照组,用不含药物、病毒的DMEM处理H9C2细胞48 h。CVB3组,用含有100倍半数组织培养感染剂量CVB3的DMEM处理H9C2细胞48 h(感染)。CVB3+sh-NC组,H9C2细胞转染sh-NC慢病毒后感染CVB3。CVB3+sh-MAGI2-AS3组,H9C2细胞转染sh-MAGI2-AS3慢病毒后感染CVB3。CVB3+miR-NC组,H9C2细胞转染miR-NC后感染CVB3。CVB3+miR-130a-5p组,H9C2细胞转染miR-130a-5p mimic后感染CVB3。sh-MAGI2-AS3+抗miR-NC组,sh-MAGI2-AS3、抗miR-NC共转染H9C2细胞后感染CVB3。sh-MAGI2-AS3+抗miR-130a-5p组,sh-MAGI2-AS3、抗miR-130a-5p共转染H9C2细胞后感染CVB3。qRT-PCR检测MAGI2-AS3、miR-130a-5p相对表达量;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率;ELISA法检测TNF-α、IL-6分泌水平;双荧光素酶报告实验验证MAGI2-AS3与miR-130a-5p靶向关系;Western blot检测Bcl-2、Cleaved-Caspase-3蛋白相对表达量。结果:与对照组比较,CVB3组MAGI2-AS3相对表达量、细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平及TNF-α、IL-6分泌水平升高,而miR-130a-5p相对表达量、Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05)。分别与CVB3+sh-NC组、CVB3+miR-NC组相比,CVB3+sh-MAGI2-AS3组、CVB3+miR-130a-5p组细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平及TNF-α、IL-6分泌水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05)。MAGI2-AS3可靶向调控miR-130a-5p表达。与sh-MAGI2-AS3+抗miR-NC组比较,sh-MAGI2-AS3+抗miR-130a-5p组细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平及TNF-α、IL-6分泌水平升高,Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:沉默MAGI2-AS3可通过上调miR-130a-5p而抑制细胞凋亡、炎症反应,进而减轻CVB3诱导的H9C2细胞损伤。 展开更多
关键词 MAGI2-AS3 mir-130a-5p 柯萨奇病毒B3 大鼠 心肌细胞
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miR-196a-2基因多态位点rs11614913与乳腺癌易感性关系的Meta分析 被引量:1
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作者 师金 梁迪 +2 位作者 靳晶 王立群 贺宇彤 《中国肿瘤》 CAS 2016年第11期919-926,共8页
[目的]分析mi R-196a-2基因多态位点rs11614913与乳腺癌易感性的关系。[方法]检索外文数据库Pubmed、Science Direct和中文数据库CNKI、万方,收集截止到2016年5月31日发表的关于mi R-196a-2基因多态位点rs11614913与乳腺癌易感关系的病... [目的]分析mi R-196a-2基因多态位点rs11614913与乳腺癌易感性的关系。[方法]检索外文数据库Pubmed、Science Direct和中文数据库CNKI、万方,收集截止到2016年5月31日发表的关于mi R-196a-2基因多态位点rs11614913与乳腺癌易感关系的病例对照研究,按纳入与排除标准筛选文献,利用Meta分析的方法对各研究数据进行统计学处理及异质性检验,评估发表偏倚并进行敏感性分析。[结果]共纳入15篇研究mi R-196a-2基因多态位点rs11614913与乳腺癌易感关系的文献,包括6362例病例和7392例对照,结果显示:等位基因模型(T vs C)、隐形模型(TT vs CC+CT)和相加模型(TT vs CC)与降低乳腺癌发病风险相关,差异均有统计学意义(OR=0.89,95%CI:0.81~0.99;OR=0.83,95%CI:0.72~0.96;OR=0.79,95%CI:0.65~0.97)。按种族进行亚组分析后发现,在亚洲人群中,等位基因模型(T vs C)、显性模型(TT+CT vs CC)、隐形模型(TT vs CC+CT)和相加模型(TT vs CC)也与降低乳腺癌发病风险相关(OR=0.85,95%CI:0.75~0.95;OR=0.83,95%CI:0.70~0.99;OR=0.78,95%CI:0.67~0.91;OR=0.72,95%CI:0.57~0.91),其余模型均不能认为与乳腺癌的易感性相关。高加索人群的各遗传模型均与乳腺癌的发病风险无显著相关性。[结论]mi R-196a-2基因多态位点rs11614913的T等位基因和TT基因型可能与降低乳腺癌的发病风险相关。 展开更多
关键词 META分析 乳腺癌 mir-196a-2 rs11614913 基因多态性
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CircRNA Hipk1调控miR-146a-5p/Notch2轴对缺血性心律失常大鼠心肌细胞凋亡的影响
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作者 郭亮 李亚洁 《中西医结合心脑血管病杂志》 2023年第4期643-648,654,共7页
目的:探讨CircRNA Hipk1调控miR-146a-5p/Notch2轴对缺血性心律失常大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法:将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、CircRNA Hipk1 siRNA腺相关病毒(干扰CircRNA Hipk1)组、miR-146a-5p Antagomir(miR-146a-5p抑制剂... 目的:探讨CircRNA Hipk1调控miR-146a-5p/Notch2轴对缺血性心律失常大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法:将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、CircRNA Hipk1 siRNA腺相关病毒(干扰CircRNA Hipk1)组、miR-146a-5p Antagomir(miR-146a-5p抑制剂)组、CircRNA Hipk1 siRNA腺相关病毒+miR-146a-5p Antagomir组、阴性对照(CircRNA Hipk1 siRNA腺相关病毒阴性对照+miR-146a-5p Antagomir阴性对照)组,每组12只;除假手术组外,其余各组制备缺血性心律失常模型,分组给药干预后,测定各组大鼠心律失常症状并进行评分;以2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测各组大鼠心肌梗死面积;苏木精-伊红(HE)染色检测各组大鼠心肌组织病理形态;采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)染色检测各组大鼠心肌细胞凋亡率;试剂盒检测各组大鼠血清致炎因子白细胞介素(IL)-1β、IL-17水平;逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测各组大鼠心肌组织CircRNA Hipk1、miR-146a-5p及Notch2 mRNA表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠心肌组织结构紊乱,细胞轮廓不清,排列紊乱,有炎性细胞浸润,呈明显损伤,心律失常评分、心肌梗死面积、心肌细胞凋亡率、血清IL-1β与IL-17水平、心肌组织CircRNA Hipk1、Notch2 mRNA表达水平升高(P<0.05),miR-146a-5p表达水平降低(P<0.05)。与模型组、CircRNA Hipk1 siRNA腺相关病毒+miR-146a-5p Antagomir组比较,CircRNA Hipk1 siRNA腺相关病毒组大鼠心肌组织病理损伤减轻,心律失常评分、心肌梗死面积、心肌细胞凋亡率、血清IL-1β与IL-17水平、心肌组织CircRNA Hipk1、Notch2 mRNA表达水平降低(P<0.05),miR-146a-5p表达水平升高(P<0.05);miR-146a-5p Antagomir组大鼠心肌组织病理损伤加重,心律失常评分、心肌梗死面积、心肌细胞凋亡率、血清IL-1β与IL-17水平、心肌组织CircRNA Hipk1、Notch2 mRNA表达水平升高(P<0.05),miR-146a-5p表达水平降低(P<0.05)。结论:下调CircRNA Hipk1表达可促进miR-146a-5p表达,抑制Notch2表达,减轻缺血性心律失常大鼠炎症损伤,减小心肌梗死面积,降低心肌细胞凋亡率,改善大鼠心律失常症状。 展开更多
关键词 缺血性心律失常 CircRNA Hipk1 mir-146a-5p/Notch2 心肌细胞 凋亡 大鼠 实验研究
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草苁蓉多糖下调miR-302a-3p表达对缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的影响 被引量:3
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作者 陈虹 黄明伟 +4 位作者 程振东 陈金成 卢辉耀 许朝祥 吴晶莹 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1241-1247,共7页
目的探讨草苁蓉多糖(boschniakia rossica polysaccharides,BRPS)对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响及其作用机制。方法H/R诱导大鼠心肌细胞H9c2建立细胞损伤模型,不同剂量的BRPS处理H9c2细胞;酶联免疫... 目的探讨草苁蓉多糖(boschniakia rossica polysaccharides,BRPS)对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响及其作用机制。方法H/R诱导大鼠心肌细胞H9c2建立细胞损伤模型,不同剂量的BRPS处理H9c2细胞;酶联免疫吸附剂测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)的水平和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)的活性;流式细胞术检测凋亡率;qRT-PCR检测miR-302a-3p的表达量;anti-miR-NC、anti-miR-302a-3p分别转染至H9c2细胞后进行H/R处理,miR-NC、miR-302a-3p mimics分别转染至H9c2细胞后加入100 mg·L^(-1)BRPS处理24 h,进行H/R处理;Western blot检测Bcl-2、Bax蛋白表达;线软件预测和双荧光素酶报告实验检测miR-302a-3p和LRP8的靶向关系;Western blot检测低密度脂蛋白受体相关蛋白8(LRP8)的表达量。结果BRPS降低H/R诱导的H9c2细胞中MDA的水平、miR-302a-3p的表达量、细胞凋亡率、Bax表达(P<0.05),提高SOD、GSH-Px、Bcl-2(P<0.05);转染anti-miR-302a-3p后,MDA的水平、细胞凋亡率、Bax表达下调(P<0.05),SOD、GSH-Px、Bcl-2上调(P<0.05);转染miR-302a-3p mimics后,MDA的水平、细胞凋亡率和Bax蛋白水平升高(P<0.05),SOD、GSH-Px和Bcl-2降低(P<0.05)。miR-302a-3p靶向调节LRP8,且BRPS通过下调miR-302a-3p上调LRP8基因的表达。结论BRPS通过调节miR-302a-3p/LRP8轴减轻H/R诱导的心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 草苁蓉多糖 缺氧/复氧 大鼠心肌细胞H9c2 mir-302a-3p 氧化应激 细胞凋亡
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BSN-AS2竞争性结合miR-219a-5p影响NSCLC细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡 被引量:1
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作者 王韵 彭斐 +2 位作者 宋姗 张晓云 胡文霞 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第11期2026-2031,共6页
目的:探讨BSN-AS2竞争性结合miR-219a-5p调控非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的机制。方法:qRT-PCR检测BSN-AS2和miR-219a-5p在NSCLC组织和细胞系中的表达;原位杂交FISH检测BSN-AS2和miR-219... 目的:探讨BSN-AS2竞争性结合miR-219a-5p调控非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的机制。方法:qRT-PCR检测BSN-AS2和miR-219a-5p在NSCLC组织和细胞系中的表达;原位杂交FISH检测BSN-AS2和miR-219a-5p的信号强度;双荧光素酶报告基因检验miR-219a-5p靶向调控BSN-AS2;Transwell、CCK8和Tunel细胞凋亡分别检测BSN-AS2-miR-219a-5p轴对侵袭、迁移、增殖和凋亡的影响;构建NSCLC裸鼠皮下移植瘤模型进行验证BSN-AS2-miR-219a-5p轴的调控作用。结果:BSN-AS2在NSCLC组织和细胞系中高表达,miR-219a-5p为低表达,BSN-AS2竞争性结合miR-219a-5p;siBSN-AS2组抑制NCI-H520细胞侵袭、迁移和增殖,且促进细胞凋亡,而In-miR-219a-5p组促进NCI-H520细胞侵袭、迁移和增殖,抑制细胞凋亡,siBSN-AS2+In-miR-219a-5p组相比siBSN-AS2组促进了NCI-H520细胞侵袭、迁移和增殖,抑制细胞凋亡;BSN-AS2增加体内肿瘤细胞增殖和肿瘤生长,miR-219a-5p则能抑制。结论:BSN-AS2竞争性结合miR-219a-5p促进NSCLC细胞侵袭、迁移和增殖,且抑制凋亡,而干扰BSN-AS2-miR-219a-5p轴可能作为抗NSCLC的新靶点。 展开更多
关键词 NSCLC BSN-AS2 mir-219a-5p NCI-H520
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重楼皂苷在miR-125a-5p靶向调控GAB2诱导乳腺癌细胞增殖和凋亡中的作用及机制研究 被引量:2
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作者 吕世文 朱亚兰 王婧婧 《浙江医学》 CAS 2023年第20期2129-2135,2162,共8页
目的探讨重楼皂苷(RPS)在miR-125a-5p靶向调控Grb2相关结合蛋白2(GAB2)诱导乳腺癌细胞增殖和凋亡中的作用及机制。方法取人乳腺癌细胞系MCF-7和人正常乳腺上皮细胞系MCF-10A,采用qRT-PCR、Western blot法分别检测并比较两者miR-125a-5p... 目的探讨重楼皂苷(RPS)在miR-125a-5p靶向调控Grb2相关结合蛋白2(GAB2)诱导乳腺癌细胞增殖和凋亡中的作用及机制。方法取人乳腺癌细胞系MCF-7和人正常乳腺上皮细胞系MCF-10A,采用qRT-PCR、Western blot法分别检测并比较两者miR-125a-5p、GAB2表达水平。再将MCF-7细胞按随机数字表法分成6组:RPS 0μg/mL组、RPS 80μg/mL组、RPS 80μg/mL+阴性抗体组、RPS 80μg/mL+anti-miR-125a-5p组、RPS 80μg/mL+anti-miR-125a-5p+阴性干扰组和RPS 80μg/mL+anti-miR-125a-5p+si-GAB2组,每组设3个复孔;培养48 h后检测并比较miR-125a-5p、GAB2、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平以及细胞增殖率、细胞凋亡率。将GAB2与空白质粒和过表达miR-125a-5p质粒共转染到MCF-7细胞中,采用荧光素酶Promega检测法检测miR-125a-5p与GAB2的靶向作用。结果与MCF-10A细胞比较,MCF-7细胞中miR-125a-5p表达水平较低(P<0.05),GAB2表达水平较高(P<0.05)。与RPS 0μg/mL组比较,RPS 80μg/mL组和RPS 80μg/mL+阴性抗体组miR-125a-5p、Bax表达水平和细胞凋亡率均明显升高(均P<0.05),细胞增殖率和Bcl-2表达水平均明显降低(均P<0.05);RPS 80μg/mL组和RPS 80μg/mL+anti-miR-125a-5p+阴性干扰组GAB2表达水平均明显降低(均P<0.05)。与RPS 80μg/mL组、RPS 80μg/mL+阴性抗体组比较,RPS 80μg/mL+anti-miR-125a-5p组miR-125a-5p表达水平均明显降低(均P<0.05);RPS 80μg/mL+anti-miR-125a-5p组和RPS 80μg/mL+anti-miR-125a-5p+阴性干扰组细胞增殖率和Bcl-2表达水平均明显升高(均P<0.05),细胞凋亡率和Bax表达水平均明显降低(均P<0.05)。与RPS 80μg/mL组、RPS 80μg/mL+anti-miR-125a-5p+阴性干扰组比较,RPS 80μg/mL+anti-miR-125a-5p+si-GAB2组GAB2表达水平均明显降低(均P<0.05)。与RPS 80μg/mL+anti-miR-125a-5p组、RPS 80μg/mL+anti-miR-125a-5p+阴性干扰组比较,RPS 80μg/mL+anti-miR-125a-5p+si-GAB2组细胞增殖率和Bcl-2表达水平均明显降低(均P<0.05),细胞凋亡率和Bax表达水平均明显升高(均P<0.05)。GAB2与miR-125a-5p的结合位点为CAGGGA,GAB2的突变位点为AGUCCC;miR-125a-5p与GAB2野生型结合能明显降低荧光活性比(P<0.05),但与GAB2突变型结合不影响荧光活性比(P>0.05)。结论RPS能够介导miR-125a-5p/GAB2轴发挥抗肿瘤活性,具体机制可能与miR-125a-5p发挥抑癌效应来负向调控GAB2蛋白表达,进而影响乳腺癌细胞的增殖和凋亡能力有关。 展开更多
关键词 重楼皂苷 乳腺癌 mir-125a-5p Grb2相关结合蛋白2 增殖 凋亡 作用机制
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AKT3逆转miR-22-3p/29a-3p对LX-2细胞活化的协同抑制作用 被引量:1
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作者 张荣花 张亚楠 +4 位作者 韩向阳 崔笑妍 田晓丽 章广玲 刘志勇 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第7期1132-1139,共8页
目的探讨丝氨酸/苏氨酸激酶3(AKT3)能否逆转miR-22-3p/29a-3p对人肝星状细胞LX-2活化的协同抑制作用。方法利用TargetScan、Starbase、miRDB和DIANA预测miR-22-3p和miR-29a-3p的共同靶基因,对筛选出的靶基因进行KEGG、GO和蛋白-蛋白互作... 目的探讨丝氨酸/苏氨酸激酶3(AKT3)能否逆转miR-22-3p/29a-3p对人肝星状细胞LX-2活化的协同抑制作用。方法利用TargetScan、Starbase、miRDB和DIANA预测miR-22-3p和miR-29a-3p的共同靶基因,对筛选出的靶基因进行KEGG、GO和蛋白-蛋白互作(PPI)分析;RNAhybrid分析候选靶基因与两个miRNAs结合的自由能,并通过双萤光素酶报告实验确定它们的靶向关系;采用CCK-8、Transwell和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测LX-2细胞增殖、迁移以及纤维化标志物的表达。结果miR-22-3p和miR-29a-3p的共同靶基因有24个,且它们富集在与肝纤维化相关的信号通路和生物学过程;候选靶基因AKT3与miR-22-3p和miR-29a-3p的结合自由能分析结合双萤光素酶实验结果提示AKT3是miR-22-3p和miR-29a-3p的共同靶基因;miR-22-3p和miR-29a-3p mimics能够单独或协同抑制LX-2细胞的增殖、迁移以及纤维化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和I型胶原α1链(COL1A1)mRNA的表达(P<0.05),AKT3过表达后能够逆转miR-22-3p和miR-29a-3p mimics对LX-2细胞的上述协同抑制作用(P<0.05)。结论AKT3过表达可逆转miR-22-3p和miR-29a-3p对LX-2细胞活化的协同抑制作用。 展开更多
关键词 LX-2 丝氨酸/苏氨酸激酶3 mir-22-3p mir-29a-3p 增殖 迁移
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