不同病理类型及分期甲状腺癌组织中miR-197、miR-221和miR-222的表达及其临床意义

目的:观察不同病理类型及分期甲状腺癌组织中miR-197、miR-221和miR-222的表达,并分析其在甲状腺癌诊断中的意义。方法:回顾性分析2020年01月至2022年12月我院92例甲状腺癌患者临床资料,患者均进行甲状腺癌组织、癌旁组织病理检查,采用定量逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)测定miR-197、miR-221和miR-222表达水平,对比不同病理类型、分期等病理特征的甲状腺癌患者miR-197、miR-221和miR-222表达状况,并分析其在甲状腺癌诊断中的意义。结果:甲状腺癌组织中miR-197、miR-221、miR-222表达高于癌旁组织(t=14.696、14.004、15.351,P<0.05);淋巴结转移、未分化癌、Ⅲ-Ⅳ期的甲状腺癌患者miR-197、miR-221、miR-222表达分别高于未发生淋巴结转移、乳头状癌/髓样癌/滤泡癌、Ⅰ-Ⅱ期甲状腺癌患者(P<0.05)。经Logistic回归分析,结果显示,miR-197、miR-221、miR-222高表达是甲状腺癌患者发生淋巴结转移、发生未分化癌及是Ⅲ-Ⅳ期甲状腺癌的危险因素(OR>1,P<0.05)。结论:不同病理类型及分期甲状腺癌组织中miR-197、miR-221和miR-222的表达存在差异,三者将有助于判断甲状腺癌是否淋巴结转移、不同病理类型及临床分期。

miR-197在人口腔鳞状细胞癌中的表达及对细胞增殖的作用机制

目的探讨miR-197在人口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达及对细胞增殖的作用机制。方法选取2015年3月—2019年3月在海南医学院第一附属医院选择手术切除病灶的100例OSCC患者的肿瘤组织及癌旁组织(距离病灶边缘超过2.5 cm),qRT-PCR检测miR-197在OSCC组织及细胞系CAL27中的表达,Western blotting检测JAK2在OSCC组织及细胞系中的表达。构建沉默miR-197表达的病毒载体(miR-197-siRNA)及miR-197-siRNA阴性对照(miR-197-siRNA-NC),转染CAL27细胞,以未处理的CAL27细胞作为空白对照;倒置显微镜观察转染miRNA-197后的细胞形态;流式细胞术、EdU标记实验、Transwell小室实验分别检测miR-197对CAL27细胞凋亡率、DNA合成能力、侵袭能力的影响;荧光素酶实验基因报告分析miR-197与JAK2的作用关系,Western blotting检测各组细胞中JAK2的表达。结果qRT-PCR结果显示,与癌旁组织相比,miR-197在OSCC组织中的表达明显升高,JAK2在OSCC组织中的表达明显降低(P<0.05)。与人正常口腔黏膜角化细胞株HOKs相比,miR-197在人OSCC细胞株CAL27中的表达明显上升,JAK2在CAL27中的表达明显下降(P<0.05);与miR-197-siRNA-NC组相比,miR-197-siRNA组贴壁细胞数量明显减少,胞质空泡样,细胞堆积明显增多,染色质固缩,核膜破损严重,线粒体空泡。流式细胞术、EdU标记实验、平板集落克隆实验、软琼脂集落形成实验结果表明,与miR-197-siRNA-NC组相比,miR-197-siRNA组细胞凋亡率明显增加,细胞内DNA合成明显受阻,细胞增殖和侵袭明显受到抑制,差异均具有统计学意义(P<0.05);荧光素酶实验基因报告分析结果证明,miR-197与JAK2具有靶向调控关系;Western blotting结果表明,与miR-197-siRNA-NC组相比,miR-197-siRNA组细胞中JAK2的表达明显升高(P<0.05)。结论miR-197在OSCC中呈高表达,下调miR-197可抑制OSCC细胞增殖,这可能与JAK信号通路有关。

非小细胞肺癌血清miR-197和miR-203的表达及意义

目的：检测外周血清miR-197、miR-203在非小细胞肺癌的表达及对非小细胞肺癌诊断的意义。方法：采用实时荧光定量PCR检测80例正常人和80例非小细胞肺癌患者血清中miR-197、miR-203的表达量,绘制ROC曲线分析其诊断非小细胞肺癌的价值。结果：miR-197和miR-203在NSCLC血清中均高表达,miR-197在两组中表达有差异[（4.23±0.38）vs（1.25±0.24）,P〈0.05],miR-203在两组中表达有差异[（3.32±0.21）vs（1.32±0.42）,P〈0.05]。miR-197诊断非小细胞肺癌的AUC值为0.83（95%CI：0.68-0.93）,而miR-203则为0.76（95%CI：0.60-0.87）。联合miR-197与miR-203诊断非小细胞肺癌的AUC值提高至0.93（95%CI：0.70-0.98）。结论：非小细胞肺癌外周血中miR-197、miR-203呈高表达,与NSCLC临床TNM分期、淋巴结转移关系密切。ROC曲线分析显示联合检测miR-197、miR-203特异度及灵敏度均可达90%,有望作为诊断NSCLC的潜在分子标志物。

肺癌患者血浆miR-197-3p和miR-361-3p表达的诊断评价

目的:评价血浆miR-197-3p和miR-361-3p用于肺癌诊断的价值。方法:采用实时定量PCR法检测57例肺癌患者和53例良性肺病患者血浆中miR-197-3p和miR-361-3p的表达水平。建立这两个血浆miRs的受试者工作特征(ROC)曲线评价其诊断肺癌的效果,并与血清癌胚抗原和细胞角蛋白19(Cyfra21-1)诊断效果进行比较。结果:miR-197-3p和miR-361-3p在肺癌患者血浆中的表达水平明显高于良性肺病患者(均P<0.001)。两指标诊断肺癌的ROC曲线下面积分别为0.908和0.869(均P<0.001)。血浆miR-197-3p表达与肺癌的病理组织学类型显著相关(P=0.011);而血浆miR-361-3p表达与肺癌的分化程度及临床分期相关(P=0.005和P=0.015)。血浆miR-197-3p和miR-361-3p测定诊断肺癌的敏感性(78.9%和71.9%)和准确性(81.8%和80%)高于血清癌胚抗原(42.6%和60%)和Cyfra21-1(25%和58.9%),两种miR的联合检测可较大程度提高诊断的敏感性(89.5%)和准确性(85.5%),但特异性略有下降。结论:血浆miR-197-3p和miR-361-3p可作为诊断肺癌的肿瘤标志物,诊断效果优于血清癌胚抗原和Cyfra21-1。

不同病理类型及分期甲状腺癌中miR-221 miR-222 miR-197和miR-346的表达研究

目的探讨不同病理类型及分期甲状腺癌中miR-221、miR-222、miR-197和miR-346的表达水平,为临床手术方式选择及术后治疗提供参考。方法选取2013年6月～2017年8月行甲状腺手术的40例甲状腺癌(乳头状癌、滤泡癌各20例)及癌旁正常甲状腺组织、20例良性甲状腺疾病组织,术中取材后,立即放入液氮中保存后转入-70℃保存。采用定量RT-PCR检测miR-221、miR-222、miR-197和miR-346在相应组织标本中的表达水平。结果对甲状腺癌,miR-221与miR-222的表达与患者的年龄、性别、最大肿瘤灶等无明显相关性(P>0.05),与TNM分期及淋巴转移情况相关(P<0.05);miR-197和miR-346的表达在20例甲状腺滤泡癌中均有明显升高(P<0.05),乳头状癌组织中未见显著变化(P>0.05)。miR-221与miR-222在良性甲状腺疾病组织表达量变化均不明显(P>0.05);但在甲状腺癌组织中的表达变化显著,差异均有统计学意义(P<0.05);对miR-197和miR-346在相应组织标本中的表达水平进行比较结果显示,良性甲状腺疾病组织中miR-197和miR-346表达没有明显变化(P>0.05);在20例滤泡癌组织中明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);在乳头状癌组织及癌旁正常组织中的均无明显变化(P>0.05)。结论不同病理类型及分期甲状腺癌中miRNA的表达可作为甲状腺癌早期诊断、淋巴结转移、复发及远处转移密切相关的预警分子,为甲状腺癌手术方式选择及术后指导治疗提供了重要依据。

MiR-197-3p/STAMP2对ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡及炎症应激的影响

目的探究miR-197-3p/前列腺六次跨膜蛋白(Six transmembrane protein of prostate,STAMP) 2对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡和炎症应答。方法用ox-LDL处理HUVEC复制内皮细胞损伤模型; RT-PCR检测miR-197-3p和STAMP2表达; ELISA检测细胞凋亡; Western blot用于检测STAMP2,Bax和Bcl-2的蛋白水平; ELISA检测HUVECs中细胞间黏附分子(ICAM)-1,血管内皮细胞黏附分子(VCAM)-1和E选择素(E-selectin)的表达水平;生物信息学预测miR-197-3p的靶基因;并采用双萤光素酶报告系统、qRT-PCR及Western blot验证miR-197-3p与STAMP2的靶向调控关系。结果 ox-LDL能明显上调miR-197-3p的表达(P <0. 05),同时降低STAMP2的表达(P <0. 05),且呈时间依赖性;下调miR-197-3p能够显著抑制ox-LDL诱导的细胞凋亡(P <0. 05),同时降低促凋亡蛋白Bax并增加抑凋亡蛋白Bcl-2(P <0. 05);抑制miR-197-3p明显降低ox-LDL诱导的炎症因子的表达(P <0. 05);此外,生物信息学预测提示STAMP2是miR-197-3p的靶基因,而且qRT-PCR及Western blot结果显示抑制miR-197-3p明显上调STAMP2 mRNA和蛋白水平(P <0. 05),从而证实miR-197-3p能够靶向调控STAMP2。结论 MiR-197-3p可以通过靶向调控STAMP2从而调节ox-LDL诱导的HUVECs凋亡及炎症应答,为动脉粥样硬化的靶向治疗提供理论基础。

miR-197靶向调节CD82对结肠癌细胞侵袭转移的影响

目的探讨下调microRNA-197(miR-197)对结肠癌HCT116细胞侵袭转移能力的影响及其作用机制。方法将对数生长期HCT-116细胞随机分为miR-197反义寡核苷酸(inhibitor)组、无义序列阴性对照(NC)组、空白对照(Mock)组,采用脂质体介导转染法,将miR-197反义寡核苷酸(miR-197 inhibitor)转染HCT116细胞。运用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-197的表达水平;通过生物信息学预测miR-197靶基因,应用Western blot法检测CD82蛋白的表达;采用transwell小室实验检测HCT116细胞的侵袭、迁移能力的改变。结果miR-197反义寡核苷酸转染HCT116细胞后,inhibitor组miR-197的表达较NC组和Mock组明显降低(P<0.05);下调miR-197的表达后,inhibitor组的CD82蛋白表达较其余两组显著增加(P<0.05);转染miR-197反义寡核苷酸的HCT116细胞的侵袭与迁移能力inhibitor组较NC组、Mock组均降低(P<0.05)。结论下调结肠癌HCT116细胞中miR-197的表达能抑制肿瘤细胞的侵袭和转移,其机制可能与其靶点CD82表达增加有关,这将为结肠癌的治疗提供新的靶点。

hsa-miR-197在子宫肌瘤中的表达及生物信息学特征分析

应用实时定量聚合酶链式反应(PCR)技术检测子宫肌瘤组织中的hsa-miR-197表达水平,并与配对正常子宫肌细胞对比。通过miRbase、UCSC、NCBI等在线数据库获取并分析hsa-miR-197序列保守性及其基因组特征。选择miRanda、MirTarget2及TargetScan三个在线数据库预测hsa-miR-197的靶基因并取交集以便后续分析。通过基因本体(GO)功能注释、GO富集分析和信号转导通路富集分析初步阐明,hsamiR-197靶基因参与调控的细胞功能与信号通路。hsa-miR-197的功能较广泛,参与肿瘤发生的多种生物学过程,提示hsa-miR-197可能与子宫肌瘤的发病机制密切相关。

miR-197-3p调控DMBT1抑制甲状腺癌细胞系增殖、迁移和侵袭

目的探讨miR-197-3p是否通过靶向调控恶性脑瘤缺失1基因(DMBT1)影响甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。方法RT-qPCR检测健康人甲状腺细胞Nthy-ori 3-1和甲状腺癌细胞SW579、CGTHW-1中miR-197-3p表达;MTT法检测SW579细胞增殖;Transwell小室法检测SW579细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告基因实验验证miR-197-3p是否靶向DMBT1;Western blot检测细胞DMBT1、cyclinD1、p21、MMP-2和E-cadherin蛋白表达。结果与Nthy-ori 3-1细胞比较,SW579和CGTHW-1细胞中miR-197-3p相对表达量升高(P<0.05);抑制miR-197-3p表达后,SW579细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显受到抑制,细胞中cyclinD1蛋白和MMP-2蛋白表达降低而p21蛋白和E-cadherin蛋白表达升高;SW579细胞中miR-197-3p靶向负调控DMBT1的表达;过表达DMBT1明显抑制SW579细胞增殖、迁移和侵袭,而抑制DMBT1则能逆转miR-197-3p对SW579细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结论miR-197-3p通过靶向调控DMBT1的表达,抑制甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。

miR-197在慢性心力衰竭中的生物信息学分析

目的筛选在慢性心力衰竭中差异表达的microRNA(miRNA),并对其靶基因进行生物信息学分析,以期为miRNA调控慢性心力衰竭机制的相关性研究奠定基础。方法利用GEO数据库及limma软件包筛选出在慢性心力衰竭中差异表达的miRNA,进而应用Targetscan、miRPathDB数据库通过生物信息学方法预测其靶基因,最后利用CytoScape软件及David数据库对靶基因进行GO富集及生物通路富集分析。结果miR-197在慢性心力衰竭中差异表达,其靶基因富集在生物调控、基因表达等生物学过程中,细胞质膜、细胞核等细胞组分上,以及离子结合、核苷酸结合等分子功能中。生物信号通路则显著富集在Ras、Rap1、Wnt、Hippo等信号通路中。结论miR-197或许是调控慢性心力衰竭疾病进程的潜在作用靶点。

Has_circ_0065901通过竞争性吸附miR-197-3p促进 PCDH 10表达抑制宫颈癌进展的机制研究

目的本研究以has_circ_0065901为研究对象,探讨其在宫颈癌中的分子机制。方法本研究共纳入30对取自新疆医科大学第二附属医院2019年1月至2020年12月患者,对其未经化疗或放疗的宫颈癌组织和癌旁组织进行分析。根据基因表达综合(GEO)数据库(GSE102686)分析发现了异常表达的环状RNA(circRNAs)。通过靶向预测数据库(Targetscan)发现has_circ_0065901的靶向微小RNA(miRNA)是miR-197-3p。通过TargetScan和癌症基因组图谱(TCGA)数据库发现原钙黏蛋白10(PCDH 10)是miR-197-3p的靶基因之一。此外,荧光素酶报告基因测定证实了靶标关系。采用荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫印迹法(WB)定量测定has_circ_0065901、miR-197-3p和PCDH 10的表达。利用细胞计数试剂盒(CCK-8)、流式细胞仪和细胞迁移检测细胞的增殖能力和迁移能力。最后通过体内裸鼠成瘤实验对其进行验证。结果发现在宫颈癌组织细胞中has_circ_0065901表达下调并能够抑制肿瘤细胞增殖和迁移,且差异具有统计学意义(P<0.05)。进一步检测发现has_circ_0065901的靶基因miR-197-3p在宫颈癌中高表达且能够促进肿瘤增殖和迁移(P<0.05)。此外,PCDH 10在宫颈癌组织及细胞中低表达,过表达PCDH 10能够显著抑制肿瘤细胞增殖和迁移且差异具有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测验证has_circ_0065901、miR-197-3p及PCDH 10三者之间的靶向关系且差异均存在统计学意义(P<0.05)。结论Has_circ_0065901能够竞争性吸附miR-197-3p,通过调节PCDH 10的表达来抑制细胞的增殖和迁移。

miR-197-3p对骨肉瘤MG63细胞生物学行为的影响

目的观察miR-197-3p对骨肉瘤MG63细胞生物学行为的影响。方法将细胞分两组,实验组细胞转染miR-197-3p inhibitor,对照组转染inhibitor NC,在转染完毕后48 h行qRT-PCR检验转染效率,用CCK-8实验、Transwell侵袭和迁移实验及流式细胞仪检测来研究miR-197-3p对MG63细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响。结果实验组在转染miR-197-3p inhibitor后,与对照组比较,其细胞内miR-197-3p的表达水平明显降低(P <0. 01); CCK-8试验结果显示,实验组细胞在48 h、72h和96 h的OD值明显低于对照组细胞,表明实验组细胞的增殖能力较对照组明显降低(P <0. 01); Tranwell侵袭和迁移实验结果表明实验组细胞的侵袭和迁移能力较对照组明显降低(P <0. 01);流式细胞术凋亡检测证实,实验组细胞的凋亡率(10. 93±0. 32)%较对照组细胞的凋亡率(4. 03±0. 21)%明显增加(P <0. 01)。结论降低miR-197-3p在MG63细胞内的表达,可以抑制骨肉瘤细胞的增殖、侵袭和迁移,并促进凋亡,也说明miR-197-3p本身在骨肉瘤中起着促肿瘤作用。

高糖诱导心肌细胞miR-26a/miR-197表达促进细胞凋亡的机制研究

目的探讨miR-26a/miR-197在高糖诱导的心肌细胞表达及对细胞活力和凋亡率的影响。方法 H9c2心肌细胞分为低糖组(LG组)、LG+miRcramble组、高糖(HG)+miRcramble组、HG+miR-26ainhibitor组、HG+miR-197 inhibitor组和HG+miR-26a/miR-197 inhibitor组,RT-PCR检测细胞中miR-26a和miR-197的表达;MTT法及流式细胞术分别检测细胞活力及凋亡率;Western blotting检测β-catenin、PCNA和Bax的蛋白表达。通过靶基因预测软件、miR-26a/miR-197的mimics/inhibitor转染后的细胞中MCL1表达检测及miR-NC、Wt-MCL1+miR-26a mimics、Wt-MCL1+miR-197 mimics、Mut-MCL1+miR-26a mimics和Mut-MCL1+miR-197 mimics共转染后的荧光素酶活性检测,确定MCL1与miR-26a/miR-197是否存在靶向关系。结果 HG诱导的H9c2心肌细胞miR-26a和miR-197的表达均明显高于LG组,而转染miR-26a/miR-197 inhibitor后miR-26a和miR-197表达均明显低于HG组(P<0.05)。HG+miRcramble组细胞活力及PCNA的蛋白表达均明显低于LG+miRcramble组,细胞凋亡率及β-catenin和Bax的蛋白表达均明显高于LG+miRcramble组(P<0.05),而HG+miR-26a inhibitor组和HG+miR-197 inhibitor组细胞活力及PCNA的蛋白表达均明显高于HG+miRcramble组,低于HG+miR-26a/miR-197 inhibitor组,细胞凋亡率及β-catenin和Bax的蛋白表达均明显低于HG+miRcramble组,高于HG+miR-26a/miR-197 inhibitor组(P<0.05)。MCL1是miR-26a和miR-197的靶基因。结论 miR-26a/miR-197可通过靶向MCL1促进高糖诱导心肌细胞活力和降低细胞凋亡率,机制可能与抑制Wnt信号通路有关。

lncRNA SCAMP1靶向miR-197-3p对肝癌SNU-449细胞增殖和侵袭的影响

目的:研究lncRNA SCAMP1靶向miR-197-3p对肝癌SNU-449细胞增殖和侵袭的影响。方法:qRT-PCR方法测定肝癌组织及细胞内SCAMP1表达变化。肝癌SNU-449细胞分成Control组、si-NC组(转染siRNA control)、si-SCAMP1组(转染SCAMP1 siRNA)组,CCK-8实验检测细胞增殖能力的变化,克隆形成实验测定各组细胞克隆能力的变化,Transwell小室检测各组细胞迁移和侵袭能力的变化,Western blot检测各组细胞中N-cadherin、E-cadherin蛋白表达水平的变化。在线靶基因软件预测SCAMP1的靶基因可能是miR-197-3p,经双荧光素酶报告系统鉴定两者之间的靶向关系。在肝癌SNU-449细胞中分别把SCAMP1 siRNA、miR-197-3p inhibitor共转染,利用上述方法检测细胞增殖、克隆、侵袭、迁移能力。结果:肝癌组织中SCAMP1表达水平高于癌旁组织,肝癌细胞内SCAMP1表达水平高于正常肝细胞,差异均有统计学意义(P<0.05)。与Control组、si-NC组比较,si-SCAMP1组肝癌SNU-449细胞增殖、克隆、侵袭、迁移能力均降低,细胞中N-cadherin蛋白表达水平降低,E-cadherin蛋白表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。下调SCAMP1靶向促进miR-197-3p表达,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-197-3p inhibitor能够逆转SCAMP1 siRNA对肝癌SNU-449细胞增殖、克隆、迁移和侵袭的抑制作用,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:下调SCAMP1靶向促进miR-197-3p降低肝癌SNU-449细胞增殖、克隆、迁移和侵袭能力。

外周血miR-197联合胃蛋白酶原在胃早癌诊断中的价值研究

目的:探讨外周血miR-197联合胃蛋白酶原(PG)检测对胃早癌的诊断价值。方法:回顾分析2019年1月—2021年4月在本院接受胃镜筛查的500例疑似胃癌患者临床资料。根据病理检查结果将其中胃早癌患者分为研究组(254例),另将其中萎缩性胃炎、肠化生等胃部疾病患者分为对照组(246例)。同时依据胃镜及病理检查结果将对照组患者分为萎缩性胃炎组(83例)、肠化生组(82例)、异型增生组(81例)。比较研究组与对照组,及不同病理分型组患者外周血miR-197、胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ);运用受试者工作特征曲线(ROC)曲线分析外周血miR-197、PGⅠ、PGⅡ及联合指标对胃早癌的诊断价值。结果:研究组miR-197显著高于对照组(P<0.05),而PGⅠ及PGⅡ显著低于对照组(P<0.05);不同病理分组组间外周血miR-197比较结果为,研究组>异型增生组>肠化生组>萎缩性胃炎组(P<0.05);而不同病理分组外周血PGⅠ及PGⅡ组间比较结果为,萎缩性胃炎组>肠化生组>异型增生组>研究组(P<0.05);miR-197、PGⅠ、PGⅡ,联合预测因子共4项对于胃早癌有着较高的诊断价值,其中联合检测因子与PGⅠ对早期胃癌诊断效能高于miR-197及PGⅡ,且上述比较差异具有统计学意义(P<0.05)结论:外周血miR-197、PGⅠ及PGⅡ对胃早癌均具有较高诊断价值,其中PGⅠ与联合预测因子诊断效能更高。

miR-197在肝细胞肝癌组织中的表达及临床意义

目的探讨microRNA-197(miR-197)在肝细胞肝癌(HCC)中的表达及临床意义。方法从癌症基因组图谱(TCGA)中提取有关HCC的miR-197基因表达谱和相关临床特征及预后信息,利用SPSS统计学软件分析miR-197在HCC癌组织和癌旁正常组织中的表达情况,分析miR-197与HCC患者临床特征及预后的相关性。结果 miR-197在HCC癌组织中的表达量低于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。TNM分期与HCC癌组织miR-197表达水平有关(P<0.05)。性别、年龄、病理分级、血清AFP水平与HCC癌组织miR-197表达水平无关(P>0.05)。miR-197高表达组HCC患者的整体生存率高于miR-197低表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-197可参与HCC的发生发展过程,有望被作为早期诊断HCC的生物标志物。

miR-197结合HNRNPD的5'UTR区上调其蛋白表达

microRNA介导的基因调节在发育和疾病调控中都发挥了重要的作用.我们实验室前期研究发现miR-197可以调节神经干细胞分化.在本研究中,我们利用生物信息学数据库分析发现了9个miR-197的候选靶基因.qRT-PCR结果表明miR-197能下调其中8个基因的表达,但是显著上调了异质核糖核蛋白(Heterogeneous Nuclear RiboNucleoProtein,HNRNP)D0基因(HNRNPD)的表达.我们进一步实验发现,这种上调是通过miR-197与HNRNPD的5'UTR而不是3'UTR区的相互作用实现的.RNA pull-down实验证实miR-197的确与HNRNPD的5'UTR之间存在互补配对.并且敲低Ago2可以阻断miR-197介导的HNRNPD的上调,说明Ago2对于miR-197上调HNRNPD是必需的.已知HNRNPD能通过与AU-Rich Elements(AREs)结合来调控mRNA的降解.我们利用AutDB、SZDB和OMIM等多个数据库分析了几种神经发育障碍疾病(如自闭症和严重的智力障碍)的相关基因,发现这些基因含有比全基因组中更高比例的ARE-mRNA.因此,miR-197和HNRNPD在调节神经发育和相关疾病中可能具有重要作用.

外周血miR-197表达水平与子宫肌瘤患者病情及治疗效果的相关性研究

目的:探究外周血miR-197表达水平与子宫肌瘤患者病情及治疗效果的相关性。方法:将100例行子宫肌瘤剔除术的患者作为观察组,选取同期体检的100例健康女性作为对照组,采用RT-qPCR的方法检测两组术前、术后外周血miR-197表达水平,测量子宫体积大小;采用免疫组化染色方法测定观察组患者切除肿瘤组织中雌激素受体(ER)的表达水平,测量肿瘤体积大小;分析患者外周血miR-197水平与ER表达水平、肿瘤大小的相关性。结果:观察组外周血miR-197表达水平明显低于对照组,差异有统计学意义( P <0.05);观察组术后外周血miR-197表达水平明显高于术前,差异有统计学意义( P <0.05);患者外周血miR-197表达水平与ER表达水平、肿瘤体积大小均呈负相关( P <0.05)。结论:外周血miR-197表达水平在一定程度上可以反映子宫肌瘤患者的肿瘤大小、ER表达水平,且治疗后患者外周血miR-197水平明显升高,是患者病情及治疗的良好观察指标。

miR-197在前列腺癌患者血清中的表达及临床意义

目的探讨miR-197在前列腺癌患者血清中的表达及临床意义。方法通过实时荧光定量聚合酶链式反应检测48例前列腺癌患者、48例前列腺增生患者及48例健康男性血清miR-197的相对表达水平,分析血清miR-197的相对表达水平与临床病理特征的关系,并构建受试者工作特征曲线,分析血清miR-197对于前列腺癌诊断的敏感度和特异度。结果前列腺癌患者血清miR - 197的表达水平较前列腺增生及健康男性增高,差异有统计学意义(P <0.05),而前列腺增生患者血清miR - 197的表达水平和健康男性中的表达差异统计学意义(P >0.05)。血清miR-197表达水平与前列腺癌临床病理分期、Gleason评分及骨转移有关(P <0.05),与年龄、前列腺特异性抗原水平无关(P >0.05)。受试者工作特征曲线显示miR-197能够较好地区分前列腺癌与前列腺增生及健康男性,曲线下面积分别为0.828(95% CI:0.794-0.919)和0.809(95% CI:0.746-0.918)。结论miR-197在前列腺癌患者血清中高表达,与前列腺癌进展有关,可作为判断前列腺癌预后的标志物。

MiR-197靶向JAK2调节人皮肤鳞状细胞癌细胞增殖侵袭能力的研究

目的:探讨miR-197通过调控JAK2对人皮肤鳞状细胞癌细胞A431增殖和侵袭的影响。方法:收集2018年7月-2019年5月于笔者医院经手术切除且被证实为皮肤鳞状细胞癌的组织标本以及对应的癌旁组织标本各40例,RT-qPCR检测miR-197在皮肤鳞状细胞癌组织、癌旁组织、人正常皮肤细胞系HaCaT、人皮肤鳞状细胞癌细胞株A431、A431-miR-197-siRNA和A431-miR-197-siRNA-NC中的表达情况;Western-Blot检测JAK2在各细胞株中的表达;生物信息学预测及双荧光素酶报告基因实验验证miR-197和JAK2的靶向关系;MTS法检测miR-197对A431增殖能力的影响;Transwell检测miR-197对皮肤鳞状细胞癌细胞侵袭能力的影响;IFA检测miR-197对上皮间质转化(EMT)相关分子N-cadherin表达的影响。结果:miR-197在皮肤鳞状细胞癌组织和皮肤鳞状细胞癌细胞株A431中的表达水平分别高于癌旁组织和人正常皮肤细胞系HaCaT,差异均具有统计学意义(P<0.05);与A431和A431-miR-197-siRNA-NC相比,稳定下调细胞系A431-miR-197-siRNA中miR-197、JAK2的表达水平均显著下降(P<0.05)。经Target Scan数据库分析发miR-197和JAK2有互补结合位点。下调miR-197能显著降低皮肤鳞状细胞癌细胞的增殖和侵袭能力,同时抑制N-cadherin的表达水平。结论:下调miR-197能够靶向抑制皮肤鳞状细胞癌中JAK2的表达和降低EMT相关分子N-cadherin的表达,进而抑制皮肤鳞状细胞癌细胞的EMT进程以及增殖侵袭能力。