miR-217靶向FOXO3影响非小细胞肺癌对吉非替尼耐药性及相关机制

目的检测miR-217对非小细胞肺癌吉非替尼耐药性的影响,并探讨下游靶基因及相关通路。方法qRT-PCR检测人肺正常上皮细胞系BEAS-2B,NSCLC细胞系A549、HCC827、PC9、NCI-H1975及吉非替尼耐药株PC9/GR中miR-217表达量。选取PC9/GR细胞,利用转染技术构建control组、NC-mimic组、miR-217 mimic组、miR-217 mimic+si-NC组、miR-217 mimic+si-FOXO3组细胞,CCK8及克隆形成实验检测细胞增殖能力、流式细胞仪检测细胞凋亡能力,Western blot检测PI3K/AKT信号通路蛋白表达。Targetscan生物信息学网站预测miR-217下游靶基因,双荧光素酶实验检测miR-217与靶基因FOXO3相关性。结果与BEAS-2B相比,miR-217表达量在A549、HCC827、PC9、NCI-H1975细胞中显著降低(P<0.05),随着吉非替尼培养浓度增加,PC9细胞中miR-217基因表达量逐渐降低(P<0.05),并且miR-217在PC9/GR细胞中的表达低于PC9(P<0.05)。相较于control及NC-mimic组,miR-217 mimic组细胞增殖能力明显降低(P<0.05),细胞凋亡数量增多(P<0.05),p-PI3K和p-AKT蛋白表达量降低(P<0.05)。双荧光素酶报告表明FOXO3是miR-217的靶标。回复实验测得,与miR-217 mimic组及miR-217 mimic+si-NC组相比,miR-217 mimic+si-FOXO3组细胞耐药能力升高(P<0.05),增殖能力显著提升(P<0.05),细胞凋亡数量减少(P<0.05),p-PI3K和p-AKT蛋白表达量增高(P<0.05)。结论miR-217过表达逆转NSCLC细胞PC9/GR对吉非替尼的耐药性并抑制PC9/GR细胞增殖加速凋亡,这种机制可能与靶向FOXO3调控PI3K/AKT信号通路相关。

miR-217靶向调控ERK2表达对非小细胞肺癌细胞活性和免疫逃逸的影响及机制研究

目的:研究miR-217靶向调控细胞外信号调节激酶2(ERK2)表达对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞活性和免疫逃逸的影响及作用机制。方法:qRT-PCR检测miR-217与ERK2 mRNA在NSCLC组织、癌旁组织及HLF-1、A549、HCC827细胞株中的表达量,分析不同miR-217表达量NSCLC患者的预后生存状态。使用生物信息学、双荧光素酶基因报告实验分析miR-217与ERK2的靶向关系。培养NSCLC A549细胞,分为NC组、miR-217 inhibitor组、miR-217 mimic组、miR-217 mimic+ERK2NC组、miR-217 mimic+ERK2组,除NC组不做任何处理外,其余各组均转染对应质粒,分析各组A549细胞增殖活性、免疫逃逸状况,并明确作用机制。结果:与癌旁组织比较,NSCLC组织miR-217表达量降低,ERK2 mRNA表达量升高(P<0.05)。与肺成纤维细胞HLF-1细胞株比较,NSCLC细胞A549、HCC827细胞株miR-217表达量降低,ERK2 mRNA表达量升高(P<0.05)。基于Kaplan-Meier Plotter数据库分析miR-217与NSCLC患者预后的关系,结果表明miR-217低表达与患者预后不良有关(HR=0.90,P=0.033)。双荧光素报告基因显示miR-217与ERK2之间的3'UTR区域间存在匹配序列,miR-217 mimic片段可抑制ERK2-WT信号,但对ERK2-MUT无影响。与NC组比较,miR-217 inhibitor组细胞增殖活性、PD-L1、PD-L2 mRNA表达量升高,CD8+T细胞活力降低,miR-217 mimic组细胞增殖活性、PD-L1、PD-L2 mRNA表达量降低,CD8+T细胞活力升高(P<0.05)。与miR-217 mimic组比较,miR-217 mimic+ERK2 NC组细胞增殖活性、CD8+T细胞活力、PD-L1、PD-L2 mRNA表达量无明显改变(P>0.05),miR-217 mimic+ERK2组细胞增殖活性、PD-L1、PD-L2 mRNA表达量升高,CD8+T细胞活力降低(P<0.05)。结论:miR-217过表达可降低NSCLC细胞A549活性,抑制PD-L1表达,激活肿瘤微环境中的CD8+T细胞,进而抑制免疫逃逸,其可能通过靶向调控ERK2发挥作用。

miR-217靶向PI3K/Akt通路增强阿霉素对急性髓系白血病的敏感性

目的:探讨miR-217对急性髓系白血病细胞增殖及阿霉素敏感性的影响。方法:构建mimic NC和mi R-217 mimic载体转染至HL-60细胞中,q PCR检测转染效率。不同浓度的阿霉素处理细胞24和48 h,CCK-8法检测阿霉素化学敏感性并筛选阿霉素的最佳处理浓度和时间。将细胞分为对照、mimic NC、mi R-217 mimic、阿霉素和mi R-217 mimic+阿霉素共5组,流式细胞术检测细胞凋亡,qPCR检测miR-217、PI3K和Akt3的表达,Western blot检测PI3K/Akt通路蛋白PI3K、Akt3和凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达,双荧光素酶验证mi R-217和Akt3的关系。结果:mi R-217 mimic能够增强HL-60细胞对阿霉素的敏感性,阿霉素的最佳处理浓度和时间为160 ng/ml、48 h。与对照组相比,mi R-217 mimic组和阿霉素组细胞凋亡率、mi R-217和Bax蛋白水平显著升高(P<0.01),而Bcl-2蛋白和PI3K、Akt3 m RNA和蛋白水平显著降低(P<0.01);与阿霉素组相比,mi R-217 mimic+阿霉素组细胞凋亡率、mi R-217和Bax蛋白水平显著升高(P<0.01),Bcl-2蛋白和PI3K、Akt3 m RNA和蛋白水平显著降低(P<0.01)。双荧光素酶实验表明mi R-217与Akt3之间存在靶向调控关系。结论:mi R-217靶向Akt3调控PI3K/Akt通路,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡并增强阿霉素对急性髓系白血病细胞的敏感性。

血清降钙素原联合miR-217对急性胰腺炎病情严重程度及预后的评估价值

目的探究血清降钙素原(PCT)和miR-217与急性胰腺炎(AP)病情严重程度的关系,并分析两者联合检测对AP预后的预测价值。方法选择2020年1月至2021年6月无锡市第五人民医院收治的147例AP患者作为研究对象,设为AP组。根据AP病情严重程度将患者分为轻度组(33例)、中度组(71例)和重度组(43例),另根据患者预后情况将其分为预后良好组(85例)和预后不良组(62例)。另选择同期于该院进行健康体检的147名志愿者设为健康组。采用ELISA法检测各组血清PCT表达水平。采用实时荧光定量PCR法检测各组血清miR-217表达水平。采用多因素logistic回归模型分析影响AP预后不良的危险因素。采用ROC曲线分析血清PCT和miR-217表达水平对AP预后不良的预测价值。结果与健康组相比,AP组的血清PCT、miR-217表达水平均显著升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。与轻度组相比,中度组、重度组的血清PCT、miR-217表达水平均显著升高(P均<0.05);与中度组相比,重度组的血清PCT、miR-217表达水平均显著升高(P均<0.05)。与预后良好组相比,预后不良组的血清PCT、miR-217表达水平均显著升高(P均<0.05)。多因素logistic回归模型分析结果显示,高脂血症、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、胰腺坏死范围、血尿素氮(BUN)、PCT和miR-217均是AP预后不良的独立危险因素(P均<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清PCT和miR-217联合检测预测AP患者发生预后不良的曲线下面积(AUC)为0.854,分别大于单项检测,且联合检测的敏感度最高。结论血清PCT和miR-217表达水平均与AP病情严重程度密切相关,两者联合检测对于AP预后不良具有较高的预测价值。

miR-217靶向调控HMGA 2基因对内质网应激介导的口腔癌细胞自噬与凋亡的影响

目的探究微小RNA 217(miRNA-217)对口腔癌细胞中内质网应激介导的自噬与凋亡的影响及其分子机制。方法培养人口腔癌细胞和人正常口腔角质形成细胞,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测细胞中miR-217与高迁移率族蛋白A2(HMGA2)表达水平;将人口腔癌细胞系SAS分为对照组、miR-NC组、miR-217 mimic组和miR-217 mimic+4-PBA组4组,脂质体法进行转染和内质网应激抑制剂4-苯丁酸处理后,流式细胞术检测细胞凋亡率,Hoechst33342染色观察细胞凋亡情况,细胞免疫荧光染色检测细胞中微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达,蛋白质免疫印迹(Western Blot)测定细胞中自噬相关蛋白LC3I、LC3II及Beclin-1的表达水平,RT-qPCR和Western Blot测定细胞内质网应激相关分子CCAAT/增强予结合蛋白同源蛋白(CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)及天冬氨酸蛋白水解酶-12(Caspase-12)的表达水平;双荧光素酶报告基因检测实验和Western Blot验证miR-217对HGMA2的靶向作用。结果与人正常口腔角质形成细胞HNOK比较,人口腔癌细胞HSC3、SAS、SCC15、FaDu中miR-217相对表达量下调而HMGA2相对表达量上调(P<0.05);与对照组比较,miR-217 mimic组SAS细胞凋亡率升高,有大量呈亮蓝色高荧光的凋亡细胞,LC3荧光强度升高,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值与Beclin-1蛋白相对表达量均上调,GRP78、CHOP、Caspase-12 mRNA相对表达量与蛋白相对表达量均上调(P<0.05);而与miR-217 mimic组比较,miR-217 mimic+4-PBA组SAS细胞凋亡率下降,呈亮蓝色高荧光的凋亡细胞明显减少,LC3荧光强度降低,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值与Beclin-1蛋白相对表达量均下调,GRP78、CHOP、Caspase-12 mRNA相对表达量与蛋白相对表达量也均下调(P<0.05);HMGA2与miR-217在特定区域存在碱基互补现象,且miR-217靶向负调控HGMA2表达。结论miR-217可能通过促进内质网应激途径诱导口腔癌细胞发生自噬与死亡,其机制可能与靶向负调控HMGA2表达相关。

circPLOD2调节miR-217/ANLN轴对结肠癌细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响

目的:探讨circPLOD2对结肠癌细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响以及对miR-217/ANLN轴的调节机制。方法:将HT-29细胞分为NC组、si-NC组、si-circPLOD2组、si-circPLOD2+anti-miR-NC组、si-circPLOD2+anti-miR-217组。qRT-PCR检测细胞中circPLOD2、miR-217、ANLN mRNA的表达;CCK-8法检测细胞增殖活性;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及PD-L1的表达;ELISA检测免疫逃逸相关因子TNF-α、IL-2、IFN-γ的水平;双荧光素酶报告基因实验验证circPLOD2、miR-217、ANLN三者的靶向关系。结果:与si-NC组相比,si-circPLOD2组HT-29细胞中circPLOD2、ANLN水平、细胞增殖活性、Bcl-2、PD-L1表达降低(P<0.05),miR-217水平、细胞凋亡率、Bax表达以及TNF-α、IL-2、IFN-γ水平升高(P<0.05),且双荧光素酶基因报告实验验证了circPLOD2、ANLN与miR-217之间均存在靶向关系。结论:敲低circPLOD2能够上调miR-217表达,下调ANLN的表达,抑制CC细胞的增殖和免疫逃逸,促进细胞凋亡。

hsacircRNA0002141靶向miR-217影响口腔癌进展的分子机制研究

目的探讨人环状RNA(hsa_circRNA)0002141在口腔癌细胞生物学进展中的作用及其机制。方法应用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测人口腔鳞状细胞癌HSC3、SAS、SCC15、FaDu细胞与人正常口腔角质形成HNOK细胞中hsa_circ_0002141、miR-217的表达差异,生物信息学软件预测hsa_circ_0002141与miR-217的靶向结合位点,双荧光素酶报告基因检测细胞荧光素酶活性;将si_NC组、si_circ_0002141组、pc_NC组、pc_circ_0002141组、pc_circ_0002141+miR-NC组、pc_circ_0002141+miR-217 mimic组均根据脂质体法转染口腔癌细胞SAS,以正常培养的SAS细胞作为对照组,CCK-8法检测各组细胞增殖活性,EdU染色检测各组细胞增殖水平,Transwell实验测定各组细胞迁移与侵袭情况。结果与人正常口腔角质形成HNOK细胞比较,在人口腔鳞状细胞癌HSC3、SAS、SCC15、FaDu细胞中,hsa_circ_0002141表达显著上调,而miR-217表达显著下调(P<0.05)。hsa_circ_0002141与miR-217之间存在互补靶向结合位点,miR-217靶向负调控hsa_circ_0002141表达(P<0.05)。与对照组比较,si_circ_0002141组SAS细胞增殖活性下降,EdU阳性率降低,细胞迁移与细胞侵袭数目均减少(P<0.05);而pc_circ_0002141组细胞增殖活性上升,EdU阳性率升高,细胞迁移与细胞侵袭数目均增加(P<0.05)。与pc_circ_0002141组比较,pc_circ_0002141+miR-217 mimic组细胞增殖活性下降,EdU阳性率降低,细胞迁移与细胞侵袭数目均减少(P<0.05)。结论hsa_circ_0002141可调控SAS细胞的增殖、迁移及侵袭的生物学行为,该机制可能与其靶向miR-217有关。

出血性脑卒中患者血清miR-217-5p表达及临床意义

目的探讨血清miR-217-5p在出血性脑卒中患者中的表达水平及其临床意义。方法选取2019年5月至2021年5月邯郸市第一医院收治的出血性脑卒中患者135例作为观察组,另选取同时期健康体检者127例为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测所有受试者血清miR-217-5p表达水平并对比;根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分将观察组患者分为轻度、中度和重度,比较不同病情程度患者血清miR-217-5p表达水平;根据治疗后随访3个月的预后情况将观察组分为预后良好组和预后不良组,比较预后良好组和预后不良组血清miR-217-5p表达水平及一般资料;采用多因素Logistic回归分析法分析出血性脑卒中患者预后不良的影响因素,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-217-5p表达水平对出血性脑卒中患者预后情况的预测价值。结果观察组血清miR-217-5p表达水平低于对照组(t=37.182,P<0.05);观察组中度、重度患者血清miR-217-5p表达水平低于轻度者(P<0.05),重度者血清miR-217-5p表达水平低于中度者(P<0.05)。随访3个月,135例患者发生预后不良的有51例,发生率为37.78%;预后不良组血清miR-217-5p表达水平低于预后良好组(t=13.525,P<0.05);预后不良组年龄大于预后良好组(t=2.900,P<0.05),合并脑疝占比、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、NIHSS评分高于预后良好组(t=4.676、6.949、6.332、5.712、3.062、12.066,P<0.05),格拉斯哥昏迷指数(GCS)评分低于预后良好组(t=10.457,P<0.05)。经Logistic回归分析显示,年龄、合并脑疝、IL-1β、TNF-α、CRP、IL-6、NIHSS评分、GCS评分、miR-217-5p表达水平均是出血性脑卒中预后不良的影响因素(OR=5.073、3.009、5.801、5.392、5.223、5.109、7.294、7.621、0.685,P<0.05);ROC曲线结果显示,血清miR-217-5p表达水平预测出血性脑卒中患者预后不良的曲线下面积(AUC)、敏感度、特异度、阳性预测价值、阴性预测价值分别为0.832、86.27%、79.76%、72.13%、90.54%。结论出血性脑卒中患者血清miR-217-5p呈低表达,且该指标与预后密切相关,可作为预测出血性脑卒中患者预后的重要生化指标。

SMI技术联合血清miR-217-5p诊断进展性缺血性脑卒中的研究

本研究考察超微血流成像(SMI)技术联合血清miR-217-5p诊断进展性缺血性脑卒中的价值。选择121例急性缺血性脑卒中患者作为研究对象,参照欧洲进展性卒中研究组相关诊断标准将患者分为非进展组(73例)和进展组(48例)。所有患者均进行SMI检查。另外,选择20例男性和10例女性健康体检者作为对照组。通过RT-qPCR检测受试者血清miR-217-5p水平。结果显示,进展组(50.00%)患者颈动脉重度狭窄率高于非进展组(20.55%),P<0.001。进展组患者的SMI分值高于非进展组(P<0.001)。与对照组相比,非进展组和进展组的血清miR-217-5p相对表达量均降低,且进展组低于非进展组(P<0.001)。血清miR-217-5p水平与狭窄程度负相关(r=-0.247,P=0.006),SMI分值与狭窄程度正相关(r=0.427,P<0.001)。血清miR-217-5p水平和SMI分值联合诊断进展性缺血性脑卒中的ROC曲线下面积(AUC)和特异性高于单独诊断。血清miR-217-5p联合SMI分值诊断进展性缺血性脑卒中的准确性高于两项指标的单独诊断。

miR-217调节Runx2/OPN在钛颗粒诱导小鼠胫骨骨溶解中的作用

目的 探讨微RNA-217(miR-217)调节矮小相关转录因子2(Runx2)和骨桥蛋白(OPN)分子在小鼠胫骨假体周围骨溶解(PPOL)中的作用机制。方法 建立钛颗粒诱导的小鼠胫骨PPOL模型,外源性miR-217 mimics作用PPOL小鼠1~2周。采用micro-CT检测PPOL小鼠胫骨微结构(骨密度、骨矿物质含量及骨体积比)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting检测小鼠胫骨PPOL骨组织内Runx2和OPN mRNA和蛋白表达情况。结果 去内毒素的钛颗粒成功诱导小鼠胫骨骨髓腔PPOL效应,外源性miR-217 mimics参与PPOL作用,在第1周和第2周时,PPOL小鼠胫骨的骨密度、骨矿物质含量及骨骼体积比均显著升高(P <0.05);miR-217 mimics可呈时间依赖性促进小鼠胫骨PPOL骨组织内Runx2和OPN mRNA和蛋白的表达(P <0.05)。结论 miR-217可促进PPOL小鼠胫骨骨组织内Runx2和OPN mRNA和蛋白表达,增加PPOL小鼠胫骨的骨密度及骨矿物质含量,改善PPOL小鼠的骨溶解病理效应。

幽门螺杆菌感染对老年胃癌病理组织miR-217表达水平的影响

目的探究幽门螺杆菌感染对老年胃癌病理组织miR-217表达水平的影响及预后情况。方法选取武警安徽省总队医院2019年2月~2020年2月收治的108例老年胃癌患者进行回顾性分析,据术后病理组织幽门螺杆菌检测结果分为阳性组(74例)及阴性组(34例)。采用qRT-PCR法检测miR-217表达水平,比较不同临床病理特征幽门螺杆菌阳性胃癌患者癌组织miR-217的表达水平,ROC曲线评估癌组织miR-217对幽门螺杆菌阳性胃癌患者预后的影响,比较miR-217不同表达水平与幽门螺杆菌阳性胃癌患者生存预后的关系。结果阳性组癌组织miR-217的表达水平高于阴性组,差异有统计学意义(P<0.05);肿瘤直径≥5 cm、分化程度为低中分化、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、存在淋巴结转移的幽门螺杆菌阳性胃癌患者癌组织miR-217的表达水平较高(P<0.05)。癌组织miR-217预测预后的曲线下面积为0.712(95%CI:0.590~0.834,P=0.003),截断值为4.667,灵敏度为70.80%,特异度为62.00%。癌组织miR-217高表达者(miR-217>4.667)的死亡率高于miR-217低表达者(P<0.05)。结论幽门螺杆菌感染阳性胃癌患者癌组织的miR-217表达水平较高,与幽门螺杆菌感染阳性胃癌病理特征有关,同时癌组织miR-217对患者的预后具有预测价值。

沉默circRNA hsa_circ_0061137通过miR-217/ARL6IP1轴抑制宫颈癌细胞生长和转移

目的:探讨环状RNA(circular RNA,circRNA)hsa_circ_0061137对宫颈癌(cervical cancer,CC)生长转移的影响及其相关作用机制。方法:取CC组织样本(93例)及癌旁组织样本(93例),正常宫颈上皮细胞系(End1/E6E7)和CC细胞系(HeLa、SiHa、C-33A、CaSki),用qRT-PCR法检测组织和细胞中hsa_circ_0061137、miR-217、ARL6IP1的表达;双荧光素酶报告实验验证hsa_circ_0061137、ARL6IP1与miR-217的靶向调控作用。敲低CC细胞系(HeLa、SiHa)中hsa_circ_0061137及HeLa细胞共转染si-hsa_circ_0061137和miR-217抑制物(miR-217 inhibitor)后,用CCK8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell检测细胞迁移和侵袭;Western blot检测上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白(E-cadherin、Vimentin)的表达;qRT-PCR法检测各组细胞中hsa_circ_0061137、miR-217、ARL6IP1的表达。裸鼠荷瘤实验检测敲低hsa_circ_0061137后对肿瘤生长的影响。结果:hsa_circ_0061137、ARL6IP1在CC组织及细胞系中表达水平显著高于正常宫颈组织及正常宫颈上皮细胞(P<0.05);miR-217在CC组织及细胞系中表达水平显著低于正常宫颈组织及正常宫颈上皮细胞(P<0.05)。hsa_circ_0061137、ARL6IP1分别与miR-217之间存在靶向负调控关系。敲低hsa_circ_0061137,可抑制CC细胞增殖、迁移、侵袭及EMT特性,并促进CC细胞凋亡(P<0.05);miR-217 inhibitor可部分逆转hsa_circ_0061137敲低发挥的抗CC生长及转移作用(P<0.05)。裸鼠荷瘤实验证实hsa_circ_0061137敲低可显著减弱瘤体生长增殖,并抑制ARL6IP1表达(P<0.05)。结论:沉默hsa_circ_0061137可发挥抗CC增殖及转移作用,其作用可能与靶向miR-217/ARL6IP1轴有关。

环形RNA成纤维细胞生长因子受体1/miR-217/HOXA13轴对结肠癌进展、肿瘤免疫浸润影响研究

目的 通过构建潜在hsa_circRNA/miRNA/mRNA调控轴来明确环状RNA在结肠癌(COAD)中的潜在潜在作用机制。方法 通过CRI数据库得到环形RNA成纤维细胞生长因子受体1(circFGFR1)下游调控的候选miRNA,并在TCGA数据库中结合表达分析及预后分析确定最终候选miRNA。在miRBD数据库中进行miRNA下游靶基因的预测,并在TCGA数据库中结合表达分析及预后分析确定最终候选下游靶基因。用Cox回归法进行多因素分析,在此基础上构建列线图,进行内部验证。在TIMER数据库和TCGA数据库中分析靶基因与免疫细胞之间的相关性。采用基因集富集分析(GSEA),探讨可能的作用机制。结果 在CRI数据库选出HOXA13为最终的候选下游靶基因,且HOXA13高表达的COAD患者有更好的总生存期(OS)。列线图C-指数为0.739(0.712~0.765)。Timer数据库显示,HOXA13的表达与各类免疫细胞之间都具有较好的相关性。GSEA分析显示,HOXA13可能通过参与影响DNA甲基化,细胞周期,线粒体分裂和胆固醇生成影响COAD的生物学事件。结论 HOXA13的表达增加可以延长COAD患者的OS,可以用作COAD患者的新型预测性生物标志物,同时可能与COAD的肿瘤免疫浸润相关,并在COAD肿瘤微环境中对于肿瘤细胞发生免疫逃逸可能起着重要的抑制作用。circFGFR1/miR-217/HOXA13轴可能通过影响细胞周期来抑制结肠癌的进展,这些发现为COAD抗癌策略的开发提出一个潜在的靶点和研究机制。

CT灌注成像参数联合血清miR-217-5p对缺血性脑卒中的诊断价值

目的 分析研究CT灌注成像参数联合血清miR-217-5p水平对缺血性脑卒中患者的诊断价值。方法 选取2020年1月至2022年12月辽宁省健康产业集团阜新矿总医院收治的124例疑似缺血性脑卒中患者作为研究对象,根据检查结果,将确诊为缺血性脑卒中的患者分为缺血性卒中组(n=68),非缺血性脑卒中的患者分为对照组(n=56)。对两组患者进行CT灌注成像检查,比较两组的脑血流量(CBF)、脑血容量(CBV)平均通过时间(MTT)、到达峰值时间(TTP);比较两组血清miR-217-5p表达水平;采用多因素Logistic回归分析发生缺血性脑卒中的影响因素,并采用ROC曲线分析CT灌注成像参数(CBF、CBV、MTT、TTP)联合血清miR-217-5p表达水平对诊断缺血性脑卒中的预测价值。结果 年龄、高血压病史、CBF、CBV、MTT、TTP与血清miR-217-5p表达水平均是发生缺血性脑卒中的影响因素,差异均具有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,年龄>60岁(OR=2.102)、有高血压病史(OR=1.793)、CBF水平降低(OR=1.891)、CBV水平降低(OR=1.914)、MTT水平升高(OR=2.121)、TTP水平升高(OR=1.889)和miR-217-5p表达水平降低(OR=2.090)均是发生缺血性脑卒中的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示CBF、CBV、MTT、TTP、血清miR-217-5p表达水平及联合检测的曲线下面积(AUC)分别为0.899、0.947、0.909、0.916、0.822、0.999,联合检测优于单一检测(P<0.05)。结论 CT灌注成像参数与血清miR-217-5p表达水平对缺血性脑卒中具有一定的诊断价值,联合检测的诊断价值优于单一检测。

结直肠癌患者血清、粪便和癌组织中miR-21、miR-217、miR-29b和miR-92a-1的检测及其临床意义

目的:探讨结直肠癌(colorectal carcinoma,CRC)患者血清、粪便和癌组织中miR-21、miR-217、miR-29b和miR-92a-1的表达水平及其临床意义。方法:收集2016年7月至2017年5月在海南省中医院就诊的63例CRC患者,根据CRC有无远处转移将患者分为无转移组(n=35)和转移组(n=28);另选取同期体检的30例健康志愿者纳入对照组。采集所有受试者的血清、粪便及CRC组织,用RT-PCR检测标本中miR-21、miR-217、miR-29b和miR-92a-1的表达水平,并进行比较分析。结果:CRC患者血清中miR-21、miR-217、miR-29b和miR-92a-1表达水平显著高于对照组(均P<0.05),以转移组中表达水平最高(P<0.05)。CRC患者粪便中miR-21、miR-217和miR-92a-1表达水平显著高于对照组(均P<0.05),无转移组miR-217表达水平显著低于转移组(P<0.05),而miR-21、miR-29b和miR-92a-1在无转移组和转移组的差异无统计学意义(P>0.05)。无转移组CRC组织中miR-21、miR-29b和miR-92a-1均明显低于转移组(均P<0.05),而miR-217表达水平显著高于转移组(P<0.05)。结论:miR-21、miR-217、miR-29b和miR-92a-1在CRC患者的血清、粪便和癌组织中异常表达,多种miRNAs的联合检测有利于对CRC的发生、诊治和预后的评估。

下调miR-217抑制类风湿性关节炎患者外周血单个核细胞炎症反应的实验研究

目的:探讨下调miR-217表达对类风湿性关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)炎症反应的影响及作用机制。方法:分离培养RA患者PBMC细胞,脂多糖(LPS)诱导PBMC细胞24 h,ELISA法检测炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10的表达,qRT-PCR检测miR-217和Sirt1 mRNA表达,Western blot检测Sirt1蛋白表达。分别转染anti-miR-217和pcDNA3.1-Sirt1至PBMC细胞,构建miR-217低表达、Sirt1过表达的PBMC细胞,ELISA法检测PBMC细胞分泌TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10的变化。双荧光素酶报告基因验证miR-217与Sirt1的关系。结果:LPS诱导PBMC细胞24 h后,TNF-α、IL-1β和IL-6水平升高,IL-10水平降低。miR-217在LPS诱导的PBMC细胞中表达上调,Sirt1 mRNA和蛋白表达下调。下调miR-217表达或上调Sirt1表达均可抑制PBMC细胞TNF-α、IL-1β和IL-6表达,促进IL-10表达。miR-217在PBMC细胞中负向调控Sirt1表达,上调miR-217表达抑制了Sirt1过表达对LPS诱导的PBMC细胞中炎症因子表达的影响。结论:下调miR-217可能通过负向调控Sirt1表达抑制RA患者PBMC细胞炎症反应,可作为治疗RA的新靶点。

人乳腺癌上皮细胞miR-217对DNMT1调控作用的研究

目的验证在乳腺癌上皮细胞系中,miR-217通过直接作用于DNMT1 3′UTR调控DNMT1表达,为后期动物实验和临床试验提供实验基础。方法利用瞬时转染技术,在对应细胞系中,过表达、抑制miR-217,Western blot检测各实验组中DNMT1蛋白表达,并用含有miR-217野生型及突变型识别位点的DNMT1 3′UTR载体质粒分别转染293T细胞,检测相对荧光素酶活性改变。结果过表达miR-217,DNMT1表达下降;抑制miR-217,DNMT1表达增高;双荧光素酶检测实验,DNMT1-UTR-WT的相对荧光素酶活性显著低于DNMT1-UTR-MUT,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在乳腺癌上皮细胞系中,miR-217对DNMT1表达具有调控作用,且miR-217通过直接作用于DNMT1 3′UTR调控DNMT1表达。

MiR-217调节ERK1/2表达对结直肠癌细胞增殖的作用机制

目的多种miRNA被发现参与结直肠癌的发生发展。文章旨在探索miR-217与结直肠癌在临床和生物学方面的相关性,以及miR-217在结直肠癌中可能参与调控的分子途径。方法收集2015年1月至2019年1月于在南医大二附院50例结直肠癌患者的手术标本(结直肠癌和癌旁组织),根据瘤体直径分为肿瘤>5 cm(n=22)和≤5 cm(n=28);结直肠癌Ⅰ-Ⅱ期标本有18份,III-IV期患者有32份;根据miR-217的表达中位数,将标本分为miR-217高表达组和低表达组。利用qRT-PCR测定50份标本中结肠癌标准中癌组织及癌旁组织中的miR-217表达量。将细胞分组:过表达对照组(转染control mimic)和miR-217过表达组(转染miR-217 mimic)、低表达对照组(转染control inhibitor)和miR-217低表达组(转染miR-217 inhibitor)以及miR-217 & ERK1/2低表达组(转染miR-217 inhibitor+U0126)。于SW480细胞株中过表达miR-217、HCT116细胞中敲低miR-217,并通过cck-8、克隆形成、edu等实验测定细胞株生物学行为变化。从蛋白水平测定ERK1/2表达的变化,并通过拯救实验探索miR-217和ERK1/2潜在的关系。结果癌组织中miR-217表达量(-1.360±0.645)低于癌旁组织(2.244±0.168),差异有统计学意义(P<0.01);直径>5 cm的瘤体中miR-217的表达量(-1.718±0.272)显著低于直径≤5cm的瘤体(-0.587±0.288),差异有统计学意义(P<0.01);I-II期结直肠癌组织中miR-217表达(-0.413±0.330)显著高于III-IV期组织(-1.463±0.260),差异有统计学意义(P<0.05)。SW480 细胞中MiR-217 过表达组miR-217 的表达量(15.120±0.522)显著高于过表达对照组(1.004±0.003),差异有统计学意义(P<0.01),克隆形成数量显著少于过表达对照组(P<0.01)。HCT116细胞中,MiR-217低表达组miR-217的表达量(0.207±0.021)显著低于低表达对照组(1.006±0.003),差异有统计学意义(P<0.01),克隆形成数量显著高于低表达对照组(P<0.01)。miR-217在SW480中过表达后,ERK1/2的蛋白表达下降;而miR-217在HCT116中受到抑制后,ERK1/2的蛋白表达增加。MiR-217低表达组较miR-217 & ERK1/2低表达组克隆形成数量显著减少(P<0.01)。结论MiR-217在结直肠癌组织和细胞中显著低表达,且miR-217通过抑制ERK1/2的表达部分参与结直肠肿瘤细胞的增殖。

Mir-217在胃癌中的表达及与临床病理间的关系

目的研究Mir-217在胃癌中的表达及与临床病理间的关系。方法回顾性研究q RT-PCR检测58例胃癌组织和22例癌旁胃黏膜组织中Mir-217的表达;q RT-PCR检测不同分化程度的胃癌细胞株中Mir-217的表达。结果Mir-217在胃癌中的表达明显低于癌旁组织中的表达(P<0.05);Mir-217的表达水平与年龄、性别无关(P>0.05);Mir-217在低分化胃癌中的表达水平低于高分化胃癌,在有淋巴结转移和远处转移胃癌患者中低于无转移的胃癌患者(P<0.05);低分化人胃癌细胞株BGC-823中Mir-217表达水平低,中、高分化人胃癌细胞株SGC-7901、MKN-28中Mir-217表达水平高(P<0.05)。不同分化程度胃癌细胞株中,Mir-217表达水平差异也有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌中Mir-217表达低于癌旁胃粘膜组织,低分化胃癌组织和低分化胃癌细胞中Mir-217的表达低于高分化胃癌组织和高分化胃癌细胞,Mir-217可能与胃癌的发生发展有关。

基于癌症基因组图谱数据库探索miR-217在胃癌中的表达及其预后价值

目的评估miR-217在胃癌组织中的表达及其预后价值。方法利用R语言统计学软件下载癌症基因组图谱数据库(TCGA)胃癌数据集中患者的临床病理学资料、生存数据和miRNA测序数据,比较miR-217在肿瘤组织与癌旁组织间的表达差异,受试者操作特征曲线(ROC)评估miR-217对胃癌的诊断价值;Kaplan-Meier生存分析比较不同miR-217表达水平的胃癌患者无进展时间(PFI)和总生存期(OS);利用单因素和多因素Cox回归分析评估影响PFI和OS的预后因子;利用基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)对miR-217潜在靶基因进行功能和信号通路富集分析。结果446例胃癌患者纳入分析,Wilcoxon秩和检验结果显示,miR-217显著高表达于胃癌组织(5.10 vs.3.74,P<0.01)。经ROC曲线评估发现,miR-217具有良好的诊断价值(AUC=0.795,95%CI:0.728~0.863)。Kaplan-Meier结果显示,与低表达组比较,miR-217高表达的患者OS更短(56.2个月vs.22.3个月,P=0.005),但两组患者PFI之间的差异无统计学意义(55.9个月vs.26.0个月,P=0.099)。多因素Cox回归分析结果显示,miR-217是影响患者OS的独立预后因子之一(HR=1.386,95%CI:1.003~1.914,P=0.048),但miR-217的表达与患者PFI无明显相关性(P>0.05)。GO/KEGG富集分析结果表明,miR-217潜在的靶基因主要富集于前列腺癌、膀胱癌、黑色素瘤、子宫内膜癌、EGFR酪氨酸激酶抑制剂抵抗、细胞间蛋白转运调节、蛋白入核调节、神经分支形态、成长发育负向调节及核-浆转运调控等病理过程。结论miR-217显著高表达于胃癌组织,其表达水平可用于预测胃癌患者的死亡风险;miR-217的生物学功能可能与泌尿生殖系统恶性肿瘤以及蛋白质转运等相关。