miR-223在癌症中的研究进展

微RNA(miRNA/miR)是一类在人体内广泛分布的内源性非编码RNA,miRNA失调在癌症进展中发挥重要作用。其中,miR-223可调节癌细胞中多种重要的生物过程,包括细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭等。同时,miR-223通过调控下游靶基因及参与相关信号通路(Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1/核转录因子红系2相关因子2/抗氧化反应元件、Toll样受体4/髓样分化因子88/核因子κB通路等)影响基因的表达,导致癌细胞相关的生物学行为,提示miR-223可能成为多种癌症新的潜在治疗靶点。然而,目前关于miR-223的功能研究主要集中在细胞水平,未来仍需深入研究miR-223在癌症中的作用,为癌症的诊治提供新思路。

miR-223-3p通过靶向TGFBR3促进LncRNA ADAMTS9-AS2表达上调抑制肺癌细胞的增殖和迁移作用

目的:探讨miR-223-3p通过靶向转化生长因子-βⅢ型受体(TGFBR3)促进长链非编码RNA(LncRNA)ADAMTS9-AS2表达上调抑制肺癌细胞增殖和迁移的作用及可能机制。方法:采用RT-PCR检测肺癌H1299细胞中miR-223-3p和TGFBR3 mRNA表达水平,Western blotting检测TGFBR3的蛋白表达水平,RT-qPCR检测LncRNA ADAMTS9-AS2的表达水平,CCK-8检测细胞增殖能力,Transwell细胞迁移实验和划痕实验检测细胞迁移能力。采用脂质体转染miR-223-3p模拟物(过表达组)、抑制剂(抑制组)、对照质粒(对照组)于H1299细胞中,比较各组转染前后miR-223-3p、TGFBR3、LncRNA ADAMTS9-AS2表达水平、细胞增殖能力、细胞迁移能力。结果:与转染前比较,过表达组转染后的H1299细胞中miR-223-3p、LncRNA ADAMTS9-AS2表达水平均升高(P<0.05),TGFBR3蛋白和mRNA表达水平均降低(P<0.01和P<0.05),细胞增殖和迁移能力下降(P<0.05);抑制组转染后的细胞中miR-223-3p和LncRNA ADAMTS9-AS2表达水平均降低(P<0.05),TGFBR3蛋白和mRNA表达水平均升高(P<0.01和P<0.05),细胞增殖和迁移能力均增加(P<0.05)。转染72 h后,TGFBR3蛋白表达水平及mRNA的表达水平细胞增殖与迁移能力:抑制组>观察组>过表达组(P<0.01)。3组miR-223-3p、LncRNA ADAMTS9-AS2 mRNA表达水平逐渐降低,抑制组<对照组<过表达组(P<0.01)。结论:miR-223-3p抑制肺癌H1299细胞的增殖和迁移,靶向下调TGFBR3和上调LncRNA ADAMTS9-AS2表达可能为其作用机制。

miR-223-3p与ECT2表达在食管鳞状细胞癌组织中的相关性及与其预后的关系

目的探讨miR-223-3p与ECT2表达在食管鳞状细胞癌中的相关性及与其预后的关系。方法纳入85例食管鳞状细胞癌的石蜡包埋食管鳞状细胞癌组织、相应的正常食管黏膜组织。实时荧光定量PCR检测miR-223-3p与ECT2 mRNA水平,Pearson相关系数分析miR-223-3p与ECT2 mRNA表达水平的相关性。Kaplan-Meier生存分析和Cox比例风险模型分析miR-223-3p、ECT2表达对食管鳞状细胞癌预后的影响。结果ECT2高表达食管鳞状细胞癌患者46例,ECT2低表达食管鳞状细胞癌患者39例。ECT2 mRNA表达水平食管鳞状细胞癌组织高于正常食管黏膜组织,miR-223-3p表达水平食管鳞状细胞癌组织低于正常食管黏膜组织。ECT2表达水平与肿瘤大小、分化程度、TNM分期、血管侵犯相关。miR-223-3p表达水平与肿瘤大小、分化程度、TNM分期、血管侵犯相关。此外,食管鳞状细胞癌中miR-223-3p与ECT2 mRNA表达存在相关性(ρ=-0.5223,P<0.0001),miR-223-3p与ECT2蛋白表达存在相关性(χ^(2)=21.56,P<0.0001)。Kaplan-Meier生存分析显示:TNM分期、淋巴结转移、神经侵犯、miR-223-3p表达水平、ECT2表达水平对食管鳞状细胞癌患者的总生存期有影响。Cox比例风险模型发现TNM分期、淋巴结转移、神经侵犯、miR-223-3p表达水平、ECT2表达水平对总生存期有影响。结论miR-223-3p与ECT2的表达水平在食管鳞状细胞癌中存在相关性。TNM分期、淋巴结转移、神经侵犯、miR-223-3p表达水平、ECT2表达水平可作为ESCC的独立预后因素。

miR-223对脂多糖诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎症反应的影响

以中国荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞(dairy cow mammary epithelial cell,DCMECs)为研究模型,探讨mi R-223对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的DCMECs炎症反应与乳脂合成的影响。应用Western blot检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)与脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)的表达情况,通过脂质体转染技术将mi R-223转染至DCMECs,qRT-PCR检测mi R-223的相对表达量,采用原位荧光技术分别检测DCMECs的凋亡与乳脂合成能力。结果表明LPS诱导DCMECs炎症反应的最佳浓度为1μg/m L;添加LPS可促进DCMECs mi R-223的表达;DCMECs转染mi R-223后,mi R-223的表达显著上调;mi R-223可下调LPS诱导的DCMECs炎症蛋白因子TNF-α,上调乳脂合成相关蛋白FASN,抑制LPS诱导的细胞凋亡,促进LPS诱导的乳脂合成。

老年性白内障患者泪液中miR-223和miR-143-3p水平表达与术后干眼症的相关性研究

目的探究老年性白内障患者术后干眼与泪液中miR-223,miR-143-3p水平表达的相关性。方法选取2022年5月~2023年2月于贵港东晖医院眼科行白内障术的92例老年性白内障患者作为研究对象,根据术后7天内有无发生干眼将其分为干眼症组(n=42)和无干眼症组(n=50),另选取同期体检的92例健康者作为健康对照组。采用Pearson法分析泪液miR-223,miR-143-3p表达水平与干眼诊断指标:泪膜破裂时间(break-up time,BUT)、角膜荧光素染色(corneal fluorescein staining,FL)评分和泪液分泌试验(schirmers test,SIt)的相关性;采用多因素Logistic回归分析影响白内障术后干眼发生的相关因素;采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析泪液miR-223和miR-143-3p对白内障术后干眼的预测价值。结果无干眼症组患者BUT(12.27±1.69s)及SIt(9.17±1.66mm)高于干眼症组(8.95±1.02s,4.36±0.97mm),FL(0.74±0.11分)则低于干眼症组(2.52±0.37分),差异具有统计学意义(t=11.136,16.546,32.386,均P<0.05)。干眼症组患者泪液miR-223(0.87±0.08)表达水平低于健康对照组(1.02±0.03)和无干眼症组(0.92±0.13),泪液miR-143-3p(1.37±0.32)表达水平高于健康对照组和无干眼症组(1.01±0.02,1.15±0.26),差异具有统计学意义(t=15.772,2.170;10.793,3.638,均P<0.05)。泪液中miR-223表达水平与BUT,SIt呈正相关(r=0.587,0.503,均P<0.001),与FL呈负相关(r=-0.442,P<0.001),miR-143-3p与BUT,SIt呈负相关(r=-0.714,-0.549,均P<0.001),与FL呈正相关(r=0.667,P<0.001)。干眼症组有角结膜疾病史、手术切口长度≥3 mm的患者所占比例高于无干眼症组(χ2=12.583,6.505,均P<0.05),且干眼症组患者泪液miR-223表达水平低于无干眼症组,miR-143-3p表达水平则高于无干眼症组,差异具有统计学意义(t=2.170,3.638,均P<0.05)。角结膜疾病史(OR=1.982)、手术切口长度(OR=2.036)及miR-143-3p(OR=1.653)为白内障患者术后发生干眼的危险因素,miR-223(OR=0.574)则为保护因素(P<0.05);泪液miR-223和miR-143-3p单独检测预测白内障术后干眼发生的曲线下面积(area under the cure,AUC)分别为0.692,0.719,而二者联合检测的AUC为0.880,二者联合检测优于miR-223和miR-143-3p各自单独检测(Z=3.869,3.810,均P<0.001)。结论老年性白内障术后干眼的发生与泪液中miR-223和miR-143-3p表达水平有关。

miR-223调控NLRP3抑制心力衰竭大鼠心肌纤维化机制

目的研究miR-223调控Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor protein3,NLRP3)抑制心力衰竭(heart failure,HF)大鼠心肌纤维化的机制。方法选取54只成年Wistar大鼠,采用腹主动脉缩窄法建立大鼠充血性HF动物模型,按照随机数字表法将其分为对照组、HF组、HF+miR-223过表达组,每组各18只。HF+miR-223过表达组尾静脉注射miR-223mimics,72h转染成功后,应用动物心脏彩超检测各组大鼠心功能相关指标,即舒张末期室间隔厚度(interventricular septal thickness at end-diastole,IVSd)、舒张末期左心室后壁厚度(left ventricular posterior wall thickness at end-diastolic,LVPWd)、左心室舒张末期内径(left ventricular end-diastolic diameter,LVEDd)、左心室收缩末期内径(left ventricular end systolic diameter,LVED)和射血分数(leftventricularejectfraction,LVEF)。计算测定心/体比、肺/体比;检测各组大鼠心肌组织中miR-223、NLRP3、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、Collagen-3、Collagen-1、Bax和Bcl-2的表达情况。结果HF组心功能较对照组更差,NLRP3、IL-1β、TNF-α、Collagen-1、Collagen-3和Bax表达高于对照组,miR-223、Bcl-2表达低于对照组(P<0.05),心肌间质纤维化程度明显加重。HF+miR-223过表达组心功能较HF组好转,NLRP3、IL-1β、TNF-α、Collagen-1、Collagen-3、Bax表达低于HF组,miR-223、Bcl-2表达高于HF组,心肌间质纤维化程度明显减轻。结论miR-223可通过作用于其靶标NLRP3抑制Collagen-1、Collagen-3的表达,在HE心肌纤维化的发生、发展过程中起到重要作用。

miR-223-3p在高糖诱导的H9c2细胞损伤中的靶基因预测及相关通路分析

[目的]通过生物信息学途径探究miR-223-3p在高糖环境下对H9c2细胞的影响,并结合转录组测序结果,分析其在糖尿病心肌病发病机制中的作用,旨在分子层面上发掘新的治疗靶点,探究miR-223-3p的具体作用机制。[方法]在高糖培养的H9c2细胞中分别转染miR-223-3p的抑制物及对照物,RT-qPCR检测两组细胞中miR-223-3p的表达差异;通过高通量测序对差异mRNA进行检测;用TopGO软件进行GO功能富集分析;DESeq2软件(v1.16.1)筛选差异表达基因,对检测结果的差异基因与miR-223-3p靶基因数据库共分析,预测miR-223-3p靶基因,并用RT-qPCR检测验证其表达变化。[结果]高糖处理的H9c2细胞活性明显降低,转录组测序结果提示对照组和miR-223-3p抑制剂组间的基因表达存在较为明显的差异。GO功能富集分析显示,预测靶基因集显著富集于G蛋白偶联受体活性、甘油基乙醚单加氧酶活性、细胞阴离子稳态和氯离子稳态等方面。KEGG通路富集分析显示,这些基因主要涉及TNF信号通路和IL-17信号通路。此外,它们还与1型糖尿病、细胞色素P450对外源性药物的代谢作用等相关疾病和生理过程有关。靶基因预测提示miR-223-3p可能与Cxcl10、Creb3l3、Mmp3和Bcl3等的表达变化有关。[结论]在高糖诱导的H9c2细胞损伤中miR-223-3p及其下游靶基因的预测可能为糖尿病心肌病的治疗提供新的靶点,对于揭示糖尿病心肌病的发病机制以及开发新的治疗策略具有重要意义。

未足月胎膜早破孕妇血清中miR-223-3p的表达水平及临床意义

目的 探讨miRNA-223-3p(miR-223-3p)在未足月胎膜早破(PPROM)孕妇血清中的表达水平及临床意义。方法 选取2023年4~9月徐州医科大学附属徐州妇幼保健院行剖宫产术分娩的孕妇91例,其中PPROM孕妇60例及同期足月正常孕妇31例(正常组)作为观察对象。根据胎膜病理结果将观察组分为:未足月胎膜早破(PPROM)未合并HCA组(PPROM组,n=37);PPROM合并HCA组(PPROM+HCA组,n=23)。收集入院治疗前孕妇血清样本,实时荧光定量(qRT)-PCR法检测血清中miR-223-3p的表达水平,酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α等炎症因子水平。结果 PPROM+HCA组血清中miR-223-3p的表达水平较PPROM组、正常组显著增加(P <0.05)。PPROM+HCA组血清中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的表达水平较PPROM组、正常组显著增加(P <0.05)。PPROM+HCA组孕妇血清中miR-223-3p的表达水平与IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α表达水平呈正相关(r=0.553、0.505、0438、0.656,P <0.05)。结论 miR-223-3p在PPROM+HCA孕妇血清中表达上调,与PPROM的炎症严重程度有关。

miR-223-3p调节TLR4/MyD88/NF-κB通路影响脂多糖诱导的肺癌A549细胞炎症反应

目的:探讨miR-223-3p对脂多糖诱导的肺癌A549细胞炎症反应的影响。方法:实验分成2部分,每个部分分为2组,共4组:miRNA阴性对照(mimic NC)+LPS组,miR-223-3p模拟物(miR-223-3p mimic)+LPS组;miR-223-3p mimic+BAY11-7082+LPS组,miR-223-3p mimic+等量溶剂(vehicle)+LPS组。随后利用Western blot实验检测每组TLR4/MyD88/NF-κB表达水平,酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测促炎细胞因子水平,CCK-8法检测细胞活力。结果:与mimic NC+LPS组相比,miR-223-3p mimic+LPS组的TLR4/MyD88/NF-κB蛋白表达水平低,促炎细胞因子分泌少以及细胞活力高。与miR-223-3p mimic+BAY11-7082+LPS组相比,miR-223-3p mimic+vehicle+LPS组的TLR4/MyD88/NF-κB蛋白表达水平低,促炎细胞因子分泌少以及细胞活力高。结论:miR-223-3p可以通过抑制TLR4/My D88/NF-κB促进A549细胞增殖、抑制促炎细胞因子的分泌,从而抑制肺癌中炎症的发生,本研究为今后临床上肺癌的治疗及药物开发提供了新策略。

TLR4/miR-223/NLRP3信号通路的表达与脑卒中后抑郁大鼠海马炎症反应的关系

目的探究Toll样受体4(TLR4)/miR-223/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)信号通路的表达与脑卒中后抑郁(PSD)大鼠海马炎症反应的关系。方法30只3月龄SPF级健康雄性Sprague-Dawley大鼠分为假手术组,PSD模型组和TLR4抑制剂组,各10只。PSD模型组和TLR4抑制剂组建立PSD模型,TLR4抑制剂组给予0.3 mg/kg的TAK-242溶液腹腔注射,其余各组均腹腔注射等体积的生理盐水溶液,5次/周,连续4周。评定各组大鼠的神经行为学,ELISA法检测血清白介素-1β(IL-1β)和IL-10的表达水平,RT-PCR测定海马组织中TLR4/miR-223/NLRP3信号通路相关基因的表达,Western blot测定TLR4/miR-223/NLRP3信号轴蛋白的相对表达。结果与假手术组相比,PSD模型组和TLR4抑制剂组大鼠Longa评分以及血清IL-1β和IL-10的表达升高,糖水偏嗜比(SP)、移动情况(LA)显著降低(P<0.05);与PSD模型组相比,TLR4抑制剂组大鼠Longa评分以及血清IL-1β和IL-10的表达表达下降、LA和SP升高(P<0.05)。与假手术组相比,PSD模型组大鼠海马组织中TLR4 mRNA、miR-223和NLRP3 mRNA以及TLR4、NLRP3、IL-1β和IL-10蛋白的相对表达均显著升高(P<0.05);与PSD模型组相比,TLR4抑制剂组的TLR4 mRNA和NLRP3 mRNA以及TLR4、NLRP3、IL-1β和IL-10蛋白的相对表达显著降低,miR-223的表达显著升高(P<0.05)。结论TLR4/miR-223/NLRP3信号转导通路与PSD海马炎症反应密切相关,通过调控TLR4/miR-223/NLRP3信号转导通路可能成为临床防治PSD的新靶位和新思路。

酸枣仁皂苷A通过miR-223-3p/SGK1/NLRP3轴在脓毒症小鼠肺上皮细胞损伤中的保护作用

目的 探讨酸枣仁皂苷A通过miR-223-3p/血清和糖皮质激素诱导激酶1(SGK1)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)轴在脓毒症小鼠肺上皮细胞损伤中的保护作用及潜在机制。方法 通过盲肠结扎和穿刺(CLP)诱导脓毒症动物模型。通过酸枣仁皂苷A治疗实验动物,苏木精和伊红染色分析组织病理学变化。相应试剂盒分析肾损伤指标(血清BUN、SCr和NGAL水平)和血清炎性因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)的水平。生信分析miR-223-3p在脓毒症患者中的表达及其与炎症反应因子的相关性,预测miR-223-3p与SGK1的结合位点。双荧光素酶实验验证miR-223-3p与SGK1的结合关系。构建脂多糖(LPS)诱导的HK2细胞的体外模型。荧光实时定量PCR(qPCR)检测miR-223-3p在患者血清或LPS处理的HK-2细胞中的表达。脱氧核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)检测细胞凋亡,蛋白质免疫印迹检测中BCL2相关的X(BAX)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和裂解的半胱氨酸蛋白酶(cleaved caspase-3)的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测患者血清或细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)的水平。qPCR和蛋白质免疫印迹法检测不同处理组HK-2细胞中SGK1的表达,蛋白质免疫印迹检测不同处理组HK-2细胞中NLRP3的表达。结果 酸枣仁皂苷A治疗可以降低脓毒症小鼠急性肾小管坏死评分,减轻肾损伤。血清血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)水平降低,血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平亦下降。酸枣仁皂苷A治疗可以降低脓毒症小鼠肾脏组织中miR-223-3p的表达水平。生信分析和临床样本分析显示,miR-223-3p在脓毒症患者中高表达。细胞实验结果显示,miR-223-3p在LPS处理的HK-2细胞中呈高表达。miR-223-3p促进LPS诱导的HK-2细胞凋亡和炎症反应,这种促进作用是由miR-223-3p通过负调控SGK1/NLRP3介导的。结论 酸枣仁皂苷A可能通过miR-223-3p/SGK1/NLRP3轴在脓毒症小鼠肺上皮细胞损伤中发挥保护作用,可能为脓毒症治疗提供新的治疗靶点。

miR-223-3p和FOXO3在结直肠癌中的研究进展

近年来,结直肠癌的发病率和死亡率一直居高不下,且出现年轻化趋势。结直肠癌具有异质性和隐匿性,且其在放化疗过程中可能出现药物耐受,导致结直肠癌的诊断和治疗结果一直不令人满意,患者预后较差。研究发现微RNA(microRNA,miRNA)在肿瘤的发生发展中发挥调控作用,miRNA可作为结直肠癌诊疗的生物靶点。本文就miR-223-3p和叉头框O3在结直肠癌中的研究进展作一综述。

COPD患者肺泡灌洗液来源外泌体通过miR-223-3p/FOXO3通路抑制成骨细胞成骨分化的作用

目的探索慢性阻塞性肺病患者肺泡灌洗液来源的外泌体(COPD-bronchoalveolar lavage fluid-exosome,COPD-Exo)调控成骨细胞分化的作用及机制。方法选取2023年6月于陆军军医大学第一附属医院就诊的6例COPD患者和6例非COPD患者(对照),在临床肺泡灌洗过程中收集肺泡灌洗液,提取COPD-Exo、非COPD患者肺泡灌洗液来源的外泌体(ctrl-bronchoalveolar lavage fluid-exosome,Ctrl-Exo),使用电镜和Western blot进行鉴定。使用茜素红染色、qRT-PCR检测COPD-Exo干预成骨细胞后成骨分化水平的改变。对GEO数据库数据集(GSE218571)中COPD-Exo的微小RNA(microRNA,miRNA)表达谱进行生物信息学分析,获得COPD-Exo中差异表达的miRNA,使用Antagomir阻碍MircoRNA功能,明确具有成骨分化调控功能的miRNA,使用Targetscan软件预测miRNA的下游靶基因并进行验证。结果COPD患者和非COPD患者的肺泡灌洗液内均可提取出外泌体。茜素红染色及PCR结果表明,COPD-Exo可以抑制人hFOB 1.19成骨细胞的成骨分化(P<0.05)。生物信息学分析显示,COPD-Exo中miR-223-3p表达水平显著上调。使用Antagomir阻碍miR-223-3p可减轻COPD-Exo对于人hFOB 1.19成骨细胞的成骨分化抑制(P<0.05)。Targetscan预测和Western blot结果显示miR-223-3p可能靶向抑制成骨分化相关因子FOXO3的表达(P<0.05)。结论COPD-Exo可能通过miR-223-3p抑制人hFOB 1.19成骨细胞的成骨分化,该过程与miR-223-3p抑制FOXO3表达有关。

创伤性骨折患者血清miR-92a-3p和miR-223-3p水平与临床预后的关系

目的探讨创伤性骨折患者血清miR-92a-3p和miR-223-3p水平与患者临床预后的关系。方法选择2021年8月至2022年8月收治的112例创伤性骨折患者作为创伤性骨折组,选取同期体检健康志愿者112例作为对照组。根据早期疾病预警评分(NEWS)将创伤性骨折患者分为轻中度组(n=73)和重度组(n=39);根据住院后转归情况,分为急诊手术组(n=48)、入住ICU组(n=39)、急诊死亡组(n=25)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清中miR-92a-3p和miR-223-3p相对表达水平;Spearman法分析血清miR-92a-3p和miR-223-3p表达水平与NEWS评分的相关性;采用多因素Logistic回归分析创伤性骨折患者预后的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-92a-3p和miR-223-3p水平对创伤性骨折患者预后的预测价值。结果与对照组比较,创伤性骨折组血清miR-92a-3p表达水平降低,血清miR-223-3p表达水平升高(P<0.05)。创伤性骨折患者轻中度组血清miR-92a-3p表达水平较重度组显著升高,血清miR-223-3p表达水平较重度组明显降低(P<0.05)。血清miR-92a-3p表达水平与NEWS评分呈负相关(r=-0.692,P<0.05),血清miR-223-3p表达水平与NEWS评分呈正相关(r=0.603,P<0.05)。急诊手术组、入住ICU组、急诊死亡组创伤性骨折患者血清miR-92a-3p表达水平依次逐渐下降(P<0.05);miR-223-3p表达水平依次明显升高(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,miR-223-3p是影响创伤性骨折患者预后的危险因素(P<0.05),miR-92a-3p是影响创伤性骨折患者预后的保护因素(P<0.05)。血清miR-92a-3p和miR-223-3p联合预测创伤性骨折患者预后的ROC曲线下面积(AUC)为0.824,均优于其各自单独预测(Z_(二者联合-miR-92a-3P)=2.519,P=0.012;Z_(二者联合-miR-223-3P)=2.321,P=0.020)。结论创伤性骨折患者血清miR-92a-3p水平降低,血清miR-223-3p水平升高,与创伤性骨折患者预后密切相关,二者联合可以更好评估创伤性骨折患者预后情况。

miR-223-3p靶向调控MMP16对成纤维细胞功能的影响

目的 探索新生SD大鼠心脏损伤后miR-223-3p致心肌纤维化的调控机制。方法 取新生1~2 d SD大鼠分为模型组和假手术组。模型组大鼠行手术暴露心脏后,破坏5%的心尖组织,达到心脏损伤造模效果;假手术组大鼠行手术暴露心脏后,不破坏心脏组织,达到假手术效果。术后7 d采用miRNAs高通量芯片检测两组miR-223-3p的表达差异。提取新生1~2 d SD大鼠心肌,分离并培养原代心肌细胞和心脏成纤维细胞,采用RT-qPCR检测miR-223-3p的表达差异。心脏成纤维细胞培养后分为:miR-223-3p mimics组和mimics NC组、miR-223-3p inhibitor组和inhibitor NC组。通过生物学网站预测miR-223-3p的靶基因MMP16和MEF2C,采用RT-qPCR检测靶基因MMP16、MEF2C、Ⅰ和Ⅲ型胶原基因的表达,Western blot检测MMP16蛋白、Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白的表达,免疫荧光检测Vimentin、α-平滑肌收缩蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)的表达。为了验证miR-223-3p与MMP16靶向调控关系,培养293T细胞后分为3组:psiCheck2+rno-miR-223-3p mimics组、psiCheck2-MMP16-Wt+rnomiR-223-3p mimics组、psiCheck2-MMP16-Mut+rno-miR-233-3p mimics组,采用双荧光素酶试剂检测MMP16活性的表达。结果与假手术组比较,模型组miR-223-3p表达增加(P<0.05)。与原代心肌细胞比较,心脏成纤维细胞中miR-223-3p表达增加(P<0.001)。与mimics NC组比较,miR-223-3p mimics组MMP16基因和蛋白表达降低(P<0.001),MEF2C基因表达无统计学差异(P>0.05),Ⅰ型胶原基因和蛋白表达增加(P<0.01),Ⅲ型胶原基因和蛋白表达降低(P<0.05),Vimentin蛋白表达增加,α-SMA蛋白表达无统计学差异。与inhibitor NC组比较,miR-223-3p inhibitor组MMP16基因和蛋白表达增加(P<0.05),MEF2C基因表达无统计学差异(P>0.05),Ⅰ型胶原基因和蛋白表达降低(P<0.05),Ⅲ型胶原基因表达增加(P<0.001),Ⅲ型胶原蛋白表达无统计学差异(P>0.05),Vimentin蛋白表达降低,α-SMA蛋白表达无统计学差异。与psiCheck2-MMP16-Wt+rno-miR-223-3p mimics组比较,psiCheck2+rno-miR-223-3p mimics组和psiCheck2-MMP16-Mut+rno-miR-233-3p mimics组MMP16的活性表达均增加(P<0.01)。结论 miR-223-3p通过调控靶基因MMP16表达促进成纤维细胞增殖,导致心肌纤维化发生。miR-223-3p可能是大鼠心脏损伤后心肌纤维化发生的重要调控基因。

2型糖尿病患者外周血miR-223与2型糖尿病周围神经病变相关性分析

目的 分析miR-223与糖尿病周围神经病变的相关性。方法 收集2020年12月至2022年5月138例2型糖尿病患者的临床资料,根据是否发生周围神经病变,将患者分为2组,2型糖尿病组77例;2型糖尿病伴周围神经病变组61例。通过实时定量PCR方法检测所有患者血清miR-223的表达水平,ELISA法测定所有患者血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。比较两组miR-223及TNF-α的差异。结果 与2型糖尿病组比较,miR-223及TNF-α在2型糖尿病伴周围神经病变组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析,miR-223预测糖尿病周围神经病变的敏感度67.2%,特异度76.6%(95%CI:0.634~0.809,P<0.05),miR-223联合糖尿病病程预测糖尿病周围神经病变的敏感度73.8%,特异度为77.9%(95%CI:0.750~0.889,P<0.05)。结论 2型糖尿病患者外周血miR-223可作为预测糖尿病周围神经病变的分子标志物,联合糖尿病病程诊断价值更高。

有氧运动通过TLR4/miR-223/NLRP3信号通路轴介导CUMS抑郁小鼠海马炎症反应

目的:探讨有氧运动激活慢性不可预见性应激(CUMS)抑郁小鼠海马TLR4/miR-223/NLRP3信号通路改善海马功能的作用。方法:8周龄雄性C57BL/6小鼠60只,随机数字法分为空白对照组(CG)、抑郁模型组(MG)、模型运动组(ME)、TLR4抑制剂组(TG)和TLR4抑制剂+运动组(TE),每组12只。除空白对照组外的其他小鼠均进行为期28天的慢性应激性抑郁造模。造模后进行神经行为学评定,造模成功的ME、TE组小鼠适应性运动1周后进行为期8周的中等强度跑台运动,抑制剂组进行为期4周的TAK-242腹腔注射。训练8周后当日评定各组小鼠的神经行为学改变,次日取样,ELISA法测定血清IL-1β和IL-10含量,尼氏染色检测海马尼氏体形态,海马组织进行m RNA和miRNA的高通量测序及关联分析,免疫组化法测定TLR4、IL-1β、IL-10和NF-κB蛋白阳性表达区域面积,RT-PCR检测海马NLRP3、TLR4、IL-1β、IL-10、NF-κB和mi R-223的表达,WesternBlot检测海马TLR4、IL-10和IL-1β蛋白定性表达。结果:CUMS抑郁小鼠神经行为学功能显著下降,血液IL-1β含量明显增多,海马尼氏体核固缩严重。8周的有氧运动能够有效改善CUMS抑郁小鼠海马功能,降低血清IL-1β含量,显著减少海马组织尼氏体核固缩,降低小鼠的绝望行为,增加求生欲望。miRNA与m RNA高通量测序及关联分析结果显示,mi R-223与NLRP3存在靶向调控作用,且受运动干预的影响。ME组小鼠NLRP3、TLR4、IL-1β、NF-κB等炎症相关因子的表达下调,抗炎因子IL-10表达增强,miR-223表达增强。抑郁小鼠TLR4被抑制后,下游转录子NF-κB表达降低,mi R-223表达增强,NLRP3蛋白表达降低,炎性作用下降。TE组小鼠也观察到一致的抗炎症效果。结论:有氧运动可显著降低CUMS抑郁小鼠海马TLR4表达,激活TLR4/miR-223/NLRP3通路轴,改善抑郁小鼠海马功能,拮抗抑郁小鼠海马组织炎症,促进损伤的海马组织修复。

血清miR-223的表达及联合CEA、CYFRA21-1对非小细胞肺癌的诊断价值

目的探讨血清miR-223的表达及其联合血清肿瘤标志物癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）对非小细胞肺癌的诊断价值。方法收集57例非小细胞肺癌患者、30例肺部良性疾病患者和30例正常人血清,提取总RNA后采用RT-PCR方法检测miR-223,同时对CEA、CYFRA21-1进行检测,分析血清miR-223相对表达量及其与NSCLC临床病理特征的关系,评估血清miR-223联合CEA、CYFRA21-1对NSCLC的诊断效能。结果 NSCLC组血清miR-223表达水平显著高于健康组和肺部良性病变组,差异均具有统计学意义（二者的P均〈0.001）,其相对表达量与患者年龄、性别、病理类型、淋巴结转移及CEA、CYFRA21-1的表达无关（P〉0.05）,和临床分期有统计学相关（P〈0.05）。NSCLC患者miR-223、CEA、CYFRA21-1的ROC曲线下面积分别为0.891（95%CI：0.834-0.946）、0.724（95%CI：0.632-0.816）、0.737（95%CI：0.647-0.827）。当miR-223取0.58为其cut off值时,在以健康人为对照组和以肺部良性病变为对照组的敏感性、特异性分别为71.9%、86.7%;63.2%、83.3%,其联合CEA、CYFRA21-1后在上述两组中的敏感性、特异性分别为80.7%、85.4%;78.9%、83.3%。结论 miR-223在NSCLC患者血清中高表达,提示其可作为NSCLC患者早期诊断的潜在标志物之一;并且联合CEA、CYFRA21-1可提高NSCLC的诊断效能。

miR-223在肾透明细胞癌中的表达与功能

目的探讨mi R-223在肾透明细胞癌中的表达与功能。方法用real-time RT-PCR法检测mi R-223在肾透明细胞癌组织和瘤旁组织中的表达以及细胞系中mi R-223的表达量。用transwell迁移实验和划痕实验测转染mi R-223模拟物的786-O细胞的迁徙能力,MTS法测其增殖情况,流失细胞仪分析其细胞周期。并用SPSS统计软件分析其临床数据与mi R-223表达量的关系。结果 mi R-223在肾透明细胞癌组织和细胞系中的表达量高于瘤旁组织和正常肾小管上皮细胞(P=0.0003),其mi R-223的表达量与肿瘤的大小有关,肿瘤直径大于4 cm的肿瘤mi R-223表达量升高(P=0,0028)。转染mi R-223模拟物的786-O细胞transwell细胞迁移数比对照组多(P<0.0001),划痕实验显示实验组愈合能力比对照组快,增殖实验表明实验组增殖速度快于对照组(P=0.006),细胞周期显示实验组细胞G1期减少,S期细胞增加,提示处于增殖的细胞数多(P<0.05)。结论 mi R-223可能起着促进肾透明细胞癌发生发展的作用,可能是抗肾透明细胞癌治疗的新的抗癌靶标。

miR-223对呼吸衰竭患者Th1/Th2细胞功能及免疫功能的影响

目的:本研究分析miR-223对呼吸衰竭患者Th1/Th2细胞功能及免疫功能的影响,以期为呼吸衰竭患者的临床治疗和生物靶标的选择方面提供更多参考资料。方法:抽取我院收治的40例呼吸衰竭患者为Ref组,40例同期健康体检者为Con组。采用荧光定量PCR实验测定miR-223的mRNA表达;采用PBMC法分离外周血单个核细胞,采用电穿孔顺式转染法将miR-223和对照组质粒转入核细胞;采用ELISA法测定miR-223对免疫功能的影响;采用流式细胞术测定miR-223对Th1/Th2细胞的影响;采用ELISA法测定miR-223对Th1/Th2细胞因子的影响。结果:miR-223 mRNA表达在Ref组中的水平相较Con组极显著上调(外周血和细胞)(P<0.01);IgA、IgM和IgG在Ref组中的水平相较Con组均极显著下调(P<0.01);Ref组的Th1/Th2细胞水平相较Con组均极显著下调(P<0.01);Th1类细胞因子中IL-2、IFN-γ和TNF-α在Ref组中的水平相较Con组均显著上调(P<0.05);Th2类细胞因子中IL-6、IL-10和IL-4在Ref组中的水平相较Con组均显著上调(P<0.05)。结论:miR-223可以下调呼吸衰竭患者的免疫球蛋白水平和Th1/Th2细胞水平,并且上调Th1/Th2细胞因子水平。