miR-2904在BVDV复制过程中的调控机制

为研究microRNA在致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒(cpBVDV)感染过程中对病毒复制和调控炎症反应的作用机制,本研究以MDBK细胞为模型,通过对cpBVDV感染MDBK前后的总RNA进行microRNA芯片反应,筛选与炎症反应相关的显著差异性microRNA,并预测出其靶基因。通过将miR-2904转染至MDBK细胞,探索其在BVDV感染MDBK细胞过程中的调控作用,并验证其靶基因;利用qRT-PCR检测miR-2904、BVDV 5′UTR及相关炎症因子mRNA的表达水平,利用Western blot检测靶基因TNFAIP8L2蛋白表达水平。结果显示,miR-2904是microRNA的候选基因之一,荧光素酶报告结果显示TNFAIP8L2为其潜在的靶基因;炎症反应表明,BVDV感染MDBK细胞后,miR2904的表达水平显著上升(P<0.05),并且相应下调TNFAIP8L2的表达水平;MDBK细胞转染miR-2904mimic后,炎症因子COX-2、IL-8、TNFAIP8L2mRNA以及TNFAIP8L2蛋白的表达水平明显升高(P<0.05);MDBK细胞接种BVDV后转染miR-2904mimic,能显著降低BVDV 5′UTR的表达水平(P<0.05)。结果表明,miR-2904可以抑制TNFAIP8L2的翻译,增强cpBVDV感染MDBK细胞中的炎症反应以及降低BVDV的复制水平。