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静原鸡miR-2954的靶基因预测及生物信息学分析
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作者 杨嘉翊 何亮宏 +6 位作者 禹保军 王浩睿 魏榕 付希 胡佳欢 毛向媛 张娟 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第9期48-52,118,共6页
为了预测静原鸡miR-2954的靶基因,并分析miR-2954在静原鸡不同组织的表达差异,探索其在静原鸡肌肉组织生长发育中的调控机制,试验采用生物信息学方法对比miR-2954成熟序列,并分析其保守性,使用TargetScan、miRDB、miRmap在线工具预测其... 为了预测静原鸡miR-2954的靶基因,并分析miR-2954在静原鸡不同组织的表达差异,探索其在静原鸡肌肉组织生长发育中的调控机制,试验采用生物信息学方法对比miR-2954成熟序列,并分析其保守性,使用TargetScan、miRDB、miRmap在线工具预测其靶基因,对靶基因集合进行GO功能注释和KEGG信号通路富集分析,并采用实时荧光定量PCR方法对miR-2954的组织表达水平进行研究。结果表明:miR-2954序列在鸟类间高度保守,靶基因GO功能条目主要集中在RNA聚合酶Ⅱ对转录的正向调节、信号转导、RNA聚合酶Ⅱ对转录的负向调节、氧化-还原过程、免疫反应和G-蛋白偶联受体信号转导途径等,存在于细胞核、胞浆、外泌体等多个组分中,在ATP结合、锌离子结合、金属离子结合、蛋白质结合等分子功能中也发挥作用。靶基因主要富集于细胞因子-细胞因子受体的相互作用、肌动蛋白细胞骨架的调节、细胞黏附分子、AGE-RAGE信号通路在糖尿病并发症中的作用、胰岛素信号传递途径与脂肪细胞因子信号传递途径等信号通路。miR-2954在静原鸡公鸡肺脏、肝脏中的相对表达量极显著高于其他组织(P<0.01),在静原鸡母鸡肺脏、肾脏、胸肌、腿肌中的相对表达量极显著高于其他器官(P<0.01)。说明miR-2954可通过调节其靶向基因影响静原鸡的生长发育。 展开更多
关键词 静原鸡 mir-2954 MIRNA 基因 生物信息学
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miR-370-3p在绵羊中的表达、生物信息学分析与靶基因预测
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作者 王丹 张双双 +4 位作者 贾琪 张新玉 付佳棋 张立春 孙福亮 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期226-230,237,共6页
本研究以新吉细毛羊和小尾寒羊为实验动物,用实时荧光定量PCR检测miR-370-3p在绵羊不同组织中的表达变化;利用Mega11.0对miR-370-3p进行序列分析,并构建进化树;利用miRBase对脊椎动物的miR-370-3p序列进行检索,使用Ensembl数据库对miR-3... 本研究以新吉细毛羊和小尾寒羊为实验动物,用实时荧光定量PCR检测miR-370-3p在绵羊不同组织中的表达变化;利用Mega11.0对miR-370-3p进行序列分析,并构建进化树;利用miRBase对脊椎动物的miR-370-3p序列进行检索,使用Ensembl数据库对miR-370-3p进行定位;利用在线网站预测miR-370-3p的靶基因,并进行GO、KEGG分析。组织表达结果显示,miR-370-3p在2种绵羊1月份和10月份的皮肤组织中均存在显著差异;在2种绵羊同组织间均存在显著差异。miR-370-3p序列主要存在于哺乳动物,且在不同物种间高度保守;miR-370-3p共有315个靶基因;GO分析结果显示靶基因主要富集在蛋白质的自磷酸化、细胞核与细胞质的运输、神经元凋亡过程等方面;KEGG通路分析表明靶基因主要富集到MAPK信号通路、寿命调节通路和细胞内吞作用等,其中多个与毛囊生长发育相关的基因富集到相关通路之上。绵羊miR-370-3p在皮肤组织存在时空表达差异,在各组织间广泛表达,可能通过靶向MAPK信号通路及寿命调节等通路参与调控毛囊的生长发育。 展开更多
关键词 绵羊 mir-370-3p 基因 表达分析 生物信息学
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山羊miR-141靶基因预测及生物信息学分析
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作者 马建青 宋鹏琰 +8 位作者 杨清芳 孔建军 宋占锋 张亚丽 吴东蔚 徐增年 赵宁 周荣艳 吴占勇 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期4211-4221,共11页
【目的】探究miR-141在动物机体糖脂代谢和骨代谢中的调控机制,为糖尿病合并骨质疏松症动物模型构建及相关基因表达调控机制研究提供依据。【方法】利用miRbase数据库获取不同物种miR-141成熟序列,通过BioEdit及WebLogo软件进行序列比... 【目的】探究miR-141在动物机体糖脂代谢和骨代谢中的调控机制,为糖尿病合并骨质疏松症动物模型构建及相关基因表达调控机制研究提供依据。【方法】利用miRbase数据库获取不同物种miR-141成熟序列,通过BioEdit及WebLogo软件进行序列比对及保守性分析;利用PROMO及JASPAR在线软件对山羊miR-141启动子区转录因子结合位点进行预测;利用TargetScan和miRwalk数据平台对miR-141靶基因进行预测;利用DAVID和KOBAS在线软件对靶基因进行GO功能和KEGG通路富集分析;利用Networkanalyst数据库建立miRNA靶基因蛋白互作网络并绘制网络调控图;通过YM500V2在线数据库分析miR-141在山羊不同组织中的表达情况。【结果】miR-141成熟序列在不同物种间高度保守;山羊miR-141启动子区分布有转录因子C/EBPα、MyoD、YY1和Sp1等结合位点;选用不同数据库预测到Nfatc2、Egr2和Fasl等89个靶基因。GO功能富集分析发现,靶基因主要富集在RNA聚合酶Ⅱ启动子转录调控与转录DNA模板等生物过程、细胞核与细胞质等细胞组分、蛋白结合与DNA结合等分子功能。KEGG通路富集显示,靶基因主要富集在肌动蛋白细胞骨架的调节、细胞紧密连接、轴突引导、Hedgehog信号通路、cGMP-PKG信号通路与癌症中的microRNA等。miR-141靶基因蛋白互作分析显示,Nfatc2和Egr2基因由Fasl基因连接,构成与其他蛋白相对复杂的靶向关系,这些关键基因参与了与机体糖脂代谢及骨代谢相关的TGF-β、Hedgehog及Wnt/β-catenin等多条信号通路。miR-141在山羊多种组织中均有表达,其表达水平具有组织差异性。【结论】miR-141可通过靶向Nfatc2、Egr2和Fasl基因参与调节Hedgehog及Wnt/β-catenin等多条信号通路,并进一步调控山羊糖脂代谢、肌肉骨骼系统生理生化反应。 展开更多
关键词 山羊 mir-141 基因 糖脂代谢 骨代谢
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德宏奶水牛乳腺组织miR-21-5p基因及其脂类代谢靶基因表达研究
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作者 赵洪晓 徐思慧 +4 位作者 庞双龙 孙政 杨忠 李卫真 黎明 《饲料研究》 CAS 北大核心 2024年第2期53-57,共5页
试验旨在探究德宏奶水牛乳腺组织miR-21-5p基因及其靶基因的表达规律。选取饲养条件相同、同一胎次、年龄相近、处于泌乳中期的健康德宏奶水牛,分为高乳脂率组(H组)、中乳脂率组(M组)和低乳脂率组(L组)。每组选取3头奶水牛,屠宰后采集... 试验旨在探究德宏奶水牛乳腺组织miR-21-5p基因及其靶基因的表达规律。选取饲养条件相同、同一胎次、年龄相近、处于泌乳中期的健康德宏奶水牛,分为高乳脂率组(H组)、中乳脂率组(M组)和低乳脂率组(L组)。每组选取3头奶水牛,屠宰后采集乳腺组织,提取总RNA。采用生物信息学方法预测miR-21-5p的靶基因。利用荧光定量PCR技术检测miR-21-5p及其靶基因的表达水平,并与课题组前期测定的乳脂率进行相关性分析。结果显示,miR-21-5p的靶基因可能为AGPAT6和GPAM。L组德宏奶水牛乳腺组织中miR-21-5p的表达水平高于M组和H组(P<0.01)。相关性分析结果显示,miR-21-5p与靶基因AGPAT6的表达水平呈极显著负相关(P<0.01),与靶基因GPAM的表达水平呈显著负相关(P<0.05),德宏奶水牛乳腺组织miR-21-5p表达量与乳脂率呈显著负相关(P<0.05),靶基因AGPAT6和GPAM与乳脂率呈极显著正相关(P<0.01)。蛋白互作网络结果显示,AGPAT6和GPAM互作关系最强。研究表明,miR-21-5p可能通过负调控靶基因AGPAT6和GPAM的表达影响乳脂合成,进而影响乳脂率。 展开更多
关键词 德宏奶水牛 乳脂率 基因 mir-21-5p基因
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miR-381-3p在宫颈癌中靶基因及信号通路的分析
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作者 魏林珍 马晓梅 +2 位作者 张郎 陈凡 秦天生 《医学理论与实践》 2023年第17期2886-2889,共4页
目的:分析miR-381-3p在宫颈癌组织中的表达情况,并探索其可能的靶基因及分子调控机制,为宫颈癌的防治提供思路。方法:本研究通过TCGA数据库了解miR-381-3p在宫颈癌与宫颈癌旁组织中的表达,采用miRWalk、miRDB和miRTarBase获取下游靶基因... 目的:分析miR-381-3p在宫颈癌组织中的表达情况,并探索其可能的靶基因及分子调控机制,为宫颈癌的防治提供思路。方法:本研究通过TCGA数据库了解miR-381-3p在宫颈癌与宫颈癌旁组织中的表达,采用miRWalk、miRDB和miRTarBase获取下游靶基因,并用DAVID对下游靶基因行GO功能注释及KEGG富集分析,再构建蛋白与蛋白相互作用网络并找出关键基因,最后验证关键基因的表达。结果:成熟的miR-381-3p在多个物种间的序列有高度保守性,TCGA数据库显示:相比癌旁组织,宫颈癌组织中的miR-381-3p表达下调。GO功能注释参与RNA聚合酶Ⅱ启动子转录进行正向调节的生物学过程、细胞核等细胞组分、蛋白质结合等分子功能。KEGG表明靶基因富集于癌症通路、乳腺癌、胃癌、Hippo、MAPK等信号通路。ESR1、LEF1、PBX1、CCND2、FGFR2、CADM1、TCF3、MPP6、PVRL1、UBE3A是miR-381-3p的关键基因,还发现ESR1、PBX1、CCND2在宫颈癌的表达水平低于正常组织。结论:miR-381-3p在宫颈癌中呈低表达,其可能作为抑癌基因对宫颈癌的生物学过程起一定的作用,有望成为宫颈癌诊治的新靶点。 展开更多
关键词 宫颈癌 mir-381-3p TCGA 基因
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不同品种羊miR-1298-5p及其潜在靶基因TGF-βR1表达的比较研究 被引量:2
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作者 张桂山 徐晶 +3 位作者 孙丽敏 白曼 项露杰 姜怀志 《中国农学通报》 2017年第27期49-54,共6页
旨在探讨miR-1298-5p与TGF-βR1在不同品种羊皮肤毛囊不同发育时期的潜在关系,为研究miR-1298-5p与TGF-βR1对皮肤毛囊发育作用提供理论研究数据。以绒山羊和细毛羊皮肤毛囊组织为材料,通过生物信息学方法预测miR-1298-5p的靶基因,采用q... 旨在探讨miR-1298-5p与TGF-βR1在不同品种羊皮肤毛囊不同发育时期的潜在关系,为研究miR-1298-5p与TGF-βR1对皮肤毛囊发育作用提供理论研究数据。以绒山羊和细毛羊皮肤毛囊组织为材料,通过生物信息学方法预测miR-1298-5p的靶基因,采用qRT-PCR对miR-1298-5p与其潜在靶基因TGF-βR1进行核酸水平表达检测,利用Western blot对潜在靶基因TGF-βR1进行蛋白水平表达检测。生物信息学预测结果表明TGF-βR1的3'UTR存在miR-1298-5p种子区结合位点。miR-1298-5p在绒山羊和细毛羊皮肤毛囊发育的生长期到退行期相对表达量上调而退行期到休止期相对表达量下调,miR-1298-5p在不同品种羊皮肤毛囊不同发育时期呈现差异性表达。绒山羊皮肤毛囊发育生长期TGF-βR1基因m RNA的相对表达量高于细毛羊,而退行期和休止期低于细毛羊;从表达趋势上看,TGF-βR1与miR-1298-5p表达趋势相反,呈现负调控趋势,说明TGF-βR1可能为miR-1298-5p的靶基因。TGF-βR1蛋白在绒山羊皮肤毛囊发育生长期的相对表达量高于细毛羊,而退行期和休止期则低于细毛羊,与核酸水平相对表达量趋势相同,但都与miR-1298-5p表达趋势相反,更进一步说明TGF-βR1可能为miR-1298-5p的靶基因。 展开更多
关键词 mir-1298-5p 细毛羊 绒山羊 基因 毛囊发育
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绒山羊皮肤毛囊miR-1298-5P靶基因预测及表达载体构建 被引量:1
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作者 张桂山 徐晶 +2 位作者 孙丽敏 白曼 姜怀志 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2017年第1期28-32,共5页
探讨辽宁绒山羊皮肤毛囊不同发育时期miR-1298-5P的调控作用及其与靶基因的潜在关系,为miR-1298-5P与其靶基因对皮肤毛囊发育作用提供理论依据。以辽宁绒山羊皮肤毛囊组织为材料,通过miRNA的分离、表达、靶基因预测筛选表达及靶位点3... 探讨辽宁绒山羊皮肤毛囊不同发育时期miR-1298-5P的调控作用及其与靶基因的潜在关系,为miR-1298-5P与其靶基因对皮肤毛囊发育作用提供理论依据。以辽宁绒山羊皮肤毛囊组织为材料,通过miRNA的分离、表达、靶基因预测筛选表达及靶位点3'UTR表达载体构建,采用RT-PCR进行表达检测,用生物信息学方法预测miR-1298-5P的靶基因,并对其靶基因Fg F2的靶位点进行克隆测序、缺失突变。miR-1298-5P及其靶基因在皮肤毛囊不同发育时期均呈现差异性表达,二者之间呈现一种负调控趋势,其可能对皮肤毛囊周期性发育起到一定的调控作用。靶基因预测发现Fg F2的3'UTR存在mi R-1298-5P种子区结合位点,并成功构建了Fg F2 3'UTR表达载体,该载体的成功构建为后期过表达转染体系的建立和功能基因的验证奠定了基础。 展开更多
关键词 辽宁绒山羊 皮肤毛囊 mir-1298-5P FGF2 基因预测 表达载体构建
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miR-192进化分析、靶基因预测及组织表达分析
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作者 常艺通 张维 +1 位作者 彭英林 陈晨 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期882-892,共11页
【目的】研究miR-192的生物进化进程和潜在靶基因功能,以及miR-192在大围子猪(脂肪型猪)和大约克夏猪(瘦肉型猪)脂肪组织中的差异表达。【方法】利用miBase数据库获取miR-192成熟序列,并利用Ensembl数据库定位miR-192在不同物种基因组... 【目的】研究miR-192的生物进化进程和潜在靶基因功能,以及miR-192在大围子猪(脂肪型猪)和大约克夏猪(瘦肉型猪)脂肪组织中的差异表达。【方法】利用miBase数据库获取miR-192成熟序列,并利用Ensembl数据库定位miR-192在不同物种基因组的分布特征;采用Mega 11.0软件程序构建miR-192系统进化树;通过实时荧光定量PCR检测miR-192在大围子猪和大约克夏猪背部脂肪组织中的表达情况,并比较表达差异;利用不同在线网站预测猪miR-192靶基因,并对靶基因进行GO功能和KEGG通路富集分析。【结果】miR-192在生物进化过程中具有高度保守性;实时荧光定量PCR结果显示,miR-192在大围子猪背部脂肪组织的表达量极显著高于大约克夏猪(P<0.01);GO功能和KEGG通路富集分析结果表明,miR-192靶基因主要起转录前调节和结合的作用,且主要在染色质和细胞核中发挥作用,多数基因富集在与脂肪代谢相关的信号通路;对3个网站不同物种预测结果取交集共获得猪miR-192保守靶基因5个。【结论】miR-192在生物进化过程中具有高度保守性,可能通过靶向调节靶基因的表达,从而在猪脂肪组织分化中起作用,为进一步探讨miR-192在脂肪组织分化中的调控机制提供理论基础。 展开更多
关键词 mir-192 进化分析 脂肪组织 基因
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低氧胁迫下鲢miR-17a-5p及其靶基因分析
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作者 李晓晖 冯翠 +2 位作者 王巧欣 邹桂伟 梁宏伟 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期136-149,共14页
为了探究miR-17a-5p在鲢低氧胁迫下的功能,在前期鲢small RNA测序的基础上对鲢miR-17a-5p进行靶基因预测及功能富集分析,通过双荧光素酶活性验证其与HIF-1α的靶向关系,并检测低氧胁迫下miR-17a-5p和其靶基因在鲢肝脏、脑、心脏和鳃四... 为了探究miR-17a-5p在鲢低氧胁迫下的功能,在前期鲢small RNA测序的基础上对鲢miR-17a-5p进行靶基因预测及功能富集分析,通过双荧光素酶活性验证其与HIF-1α的靶向关系,并检测低氧胁迫下miR-17a-5p和其靶基因在鲢肝脏、脑、心脏和鳃四个组织中的动态表达特征。结果显示,鲢miR-17a-5p在不同物种间高度保守,预测出381个miR-17a-5p的潜在靶基因显著富集在硫代谢、mTOR信号通路以及萜类骨架的生物合成3个KEGG信号通路上。miR-17a-5p可与HIF-1αmRNA的3′UTR结合,并降低HIF-1αmRNA水平,低氧胁迫下miR-17a-5p的表达呈下降趋势,而HIF-1α表达则呈上升趋势;3个显著富集KEGG通路中的11个miR-17a-5p潜在靶基因在低氧胁迫过程中的不同组织中的表达,尤其是肝脏中的表达,除SGK1外,均呈显著上升趋势。研究表明,低氧胁迫下鲢各组织中miR-17a-5p的表达下调减弱了其对靶基因的抑制作用,进而导致HIF-1α、ddit4和Lrp5等响应低氧胁迫的基因表达上调。本研究为低氧胁迫下鲢miRNA的表达与调控机制提供新见解,也为培育耐低氧的鲢新品系(种)提供了参考。 展开更多
关键词 mir-17a-5p 低氧 双荧光素酶 基因 信号通路
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肝细胞癌组织中miR-203a和其靶基因的表达及其临床意义 被引量:1
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作者 沈国强 高云霞 +1 位作者 唐小琦 周知化 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期324-330,共7页
目的:探讨肝细胞癌(HCC)患者血清及癌组织中miR-203a和其靶基因的表达及其与患者临床病理特征和预后的关系。方法:利用生物信息学方法从TargetScan、miRDB和PicTar网站预测HCC组织中miR-203a的靶基因,通过双荧光素酶报告基因实验进行验... 目的:探讨肝细胞癌(HCC)患者血清及癌组织中miR-203a和其靶基因的表达及其与患者临床病理特征和预后的关系。方法:利用生物信息学方法从TargetScan、miRDB和PicTar网站预测HCC组织中miR-203a的靶基因,通过双荧光素酶报告基因实验进行验证。选取2018年1月至2019年6月在常州市金坛区第二人民医院手术切除的96例HCC患者的癌和癌旁组织标本、血清和临床资料,以及90例健康体检者的血清作为对照。qPCR法检测血清miR-203a水平,以及HCC组织和癌旁组织中miR-203a及其靶基因表达,比较分析不同临床病理特征HCC患者miR-203a及其靶基因表达。随访3年,采用Kaplan-Meier法进行生存(OS)分析。结果:从数据库筛选出HCC中miR-203a相关的靶基因共10个,包括APC、CDK6、GATA6、HOXD3、IGF1R、IGFBP5、KCNE2、PAQR3、PRMT5和SOSC3。HCC组织中mi R-203a和APC、PAQR3 mRNA表达水平均显著低于癌旁组织(均P<0.01),CDK6、GATA6、HOXD3、IGF1R、IGFBP5、KCNE2、PRMT5和SOSC3 m RNA表达水平均显著高于癌旁组织(均P<0.01);血清miR-203a、HCC组织miR-203a及其靶基因表达均与患者肿瘤临床分期、分化程度、肝功能分级、OS率有关(均P<0.01)。结论:HCC组织中miR-203a呈低表达,miR-203a及靶基因表达均与患者肿瘤临床分期、分化程度、肝功能及远期OS率有关。 展开更多
关键词 肝细胞癌 mir-203a 基因 预后
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小鼠CCL1基因双荧光素酶报告质粒构建及其与miR-21a-5p靶向关系验证
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作者 闫雪琪 陈明杰 +1 位作者 齐亚银 任静静 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2023年第19期17-21,共5页
为了验证miR-21a-5p与CCL1基因的靶向关系,试验利用生物信息学软件预测miR-21a-5p和CCL1基因的结合位点,设计引物合成CCL1基因3′非翻译区(UTR)野生型及突变型目的片段,并将其克隆到psiCHECK2质粒上构建CCL1野生型(CCL1-WT)和突变型(CCL... 为了验证miR-21a-5p与CCL1基因的靶向关系,试验利用生物信息学软件预测miR-21a-5p和CCL1基因的结合位点,设计引物合成CCL1基因3′非翻译区(UTR)野生型及突变型目的片段,并将其克隆到psiCHECK2质粒上构建CCL1野生型(CCL1-WT)和突变型(CCL1-MUT)双荧光素酶报告质粒。将构建好的CCL1-WT和CCL1-MUT分别与miR-21a-5p模拟物(miR-21a-5p mimic)和阴性对照(miR-NC)共同转染到293T细胞中,检测CCL1-WT+miR-NC组、CCL1-WT+miR-21a-5p mimic组、CCL1-MUT+miR-NC组、CCL1-MUT+miR-21a-5p mimic组的荧光素酶活性。结果表明:CCL1基因是miR-21a-5p的潜在靶基因;CCL1野生型和突变型双荧光素酶报告质粒测序结果与预期结果一致;与CCL1-WT+miR-NC组相比,CCL1-WT+miR-21a-5p mimic组荧光素酶活性显著降低(P<0.05),而CCL1-MUT+miR-NC组与CCL1-MUT+miR-21a-5p mimic组之间差异不显著(P>0.05)。说明CCL1基因野生型及突变型双荧光素酶报告质粒构建成功,且miR-21a-5p与CCL1基因存在靶向关系。 展开更多
关键词 mir-21a-5p CCL1基因 双荧光素酶报告 脑膜炎 向关系
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hsa-miR-21-5p靶基因预测及生物信息学分析
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作者 张昕沛 吴家乐 +1 位作者 吴飞 狄生伟 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期4349-4358,共10页
【目的】试验旨在对hsa-miR-21-5p的序列保守性和靶基因进行生物信息学分析,为进一步探讨其在卵母细胞成熟过程中的功能及调节机制提供思路。【方法】从GEO数据库获取人卵母细胞不同成熟阶段对应的卵丘细胞基因表达谱数据(GSE31681),利... 【目的】试验旨在对hsa-miR-21-5p的序列保守性和靶基因进行生物信息学分析,为进一步探讨其在卵母细胞成熟过程中的功能及调节机制提供思路。【方法】从GEO数据库获取人卵母细胞不同成熟阶段对应的卵丘细胞基因表达谱数据(GSE31681),利用R软件筛选差异表达基因(DEGs),通过FunRich软件预测DEGs的靶向miRNAs,找出hsa-miR-21-5p靶向的DEGs,获得miRNA-mRNA关系对;利用BLAST程序进行相似性比对,通过Mega 11.0软件构建系统进化树,采用ViennaRNA Web Services预测pre-miR-21-5p的二级结构;使用miRTarBase网站预测hsa-miR-21-5p靶基因,并进行GO功能和KEGG通路富集分析;通过STRING数据库建立蛋白质互作网络,并利用Cytoscape软件进行可视化分析。【结果】共筛选出7个卵母细胞成熟过程中GV/MⅡ期对应卵丘细胞中hsa-miR-21-5p靶向的DEGs。对物种间miR-21-5p序列分析发现,人pre-miR-21-5p与小鼠、褐家鼠、黄牛、绵羊、笔尾树鼩、猕猴的相似性均达95%以上,且miR-21-5p在进化过程中高度保守。ViennaRNA Web Services预测结果显示,pre-miR-21-5p的二级结构具有典型的单一茎环结构。靶基因预测发现,hsa-miR-21-5p共有潜在的723个靶基因。GO功能富集结果显示,靶基因主要富集到细胞增殖调控、内源性凋亡信号通路、蛋白激酶活性的正向调节等功能。KEGG通路富集表明,靶基因主要富集到MAPK和p53等信号通路。蛋白互作分析发现,靶基因MYC、FOXO 3、STAT 3等编码的蛋白与其他蛋白存在较多靶向关系,参与了PI3K/Akt、JAK-STAT等信号通路。【结论】miR-21-5p在生物进化过程中具有高度保守性,其主要通过调节卵丘细胞中相关基因的表达来调控MAPK和p53等信号通路,进而在卵母细胞成熟过程中发挥作用。 展开更多
关键词 mir-21-5p 基因 卵丘细胞 生物信息学分析
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miR-296在卵巢癌中的表达及其靶基因的预测研究
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作者 权效珍 兰艳丽 《实用癌症杂志》 2016年第5期727-729,共3页
目的观察miR-296在卵巢癌中的表达及其靶基因的预测。方法收集卵巢癌患者组织样本22例和妇科活检为正常的样本22例,在提取RNA后进行RNA纯度检测,进而检测miR-296在卵巢癌中的表达;在卵巢癌细胞中稳定转入高表达miR-296的质粒,miRNA芯片... 目的观察miR-296在卵巢癌中的表达及其靶基因的预测。方法收集卵巢癌患者组织样本22例和妇科活检为正常的样本22例,在提取RNA后进行RNA纯度检测,进而检测miR-296在卵巢癌中的表达;在卵巢癌细胞中稳定转入高表达miR-296的质粒,miRNA芯片进行靶基因检测。结果卵巢癌组织中miR-296高表达,与正常对照组相比,差异有统计学意义(P<0.001)。在卵巢癌细胞系中,当高表达miR-296时,microRNA143和microRNA215在转染组中高表达,microRNA96、microRNA551b、microRNA502-3p低表达。结论 miR-296在卵巢癌中高表达,且其潜在的靶基因有可能作为临床卵巢癌诊断的标志。 展开更多
关键词 mir-296 卵巢癌 基因
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乾华肉用美利奴羊次级毛囊小RNA文库构建及miR-1-3p靶基因预测
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作者 张桂山 张英楠 +2 位作者 杨树宝 徐晶 姜怀志 《中国饲料》 北大核心 2023年第7期35-39,共5页
本试验旨在构建乾华肉用美利奴羊次级毛囊不同发育时期的小RNA文库和预测筛选miRNA的候选靶基因。通过高通量测序技术构建乾华肉用美利奴羊次级毛囊小RNA文库;采用荧光定量PCR对高通量测序结果进行验证;利用miRDeep2软件对miRNA(长度为2... 本试验旨在构建乾华肉用美利奴羊次级毛囊不同发育时期的小RNA文库和预测筛选miRNA的候选靶基因。通过高通量测序技术构建乾华肉用美利奴羊次级毛囊小RNA文库;采用荧光定量PCR对高通量测序结果进行验证;利用miRDeep2软件对miRNA(长度为20~24 nt的小RNA)进行鉴定;利用Targetscan v7.0、RNA22 v2.0和MiRanda三个在线靶基因预测软件对miR-1-3p的靶基因进行预测分析。成功获得乾华肉用美利奴羊次级毛囊生长期、退行期、休止期小RNA纯净reads分别为10279515、11712215和10926258。分别基于荧光定量与高通量测序的5个miRNA的相对表达量结果趋势基本一致。从次级毛囊生长期、退行期和休止期分别鉴定获得miRNA 1250、1304个和1266个。确定成纤维细胞生长因子14(FGF14)和类胰岛素生长因子Ⅰ受体(IGF1R)为miR-1-3p的候选靶基因。研究结果为后续靶基因验证及确定调控乾华肉用美利奴羊毛囊周期性发育的候选基因奠定基础。 展开更多
关键词 乾华肉用美利奴羊 小RNA文库 mir-1-3p 基因预测
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miR-29a靶基因预测及其相关生物信息学分析 被引量:2
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作者 施伟杰 曾玉 +2 位作者 姚纯 曹笑梅 童华 《现代生物医学进展》 CAS 2014年第32期6340-6344,共5页
目的:通过对miR-29a进行靶基因预测及相关生物信息学分析,为miR-29a靶基因的实验验证提供数据支持,以期为深入研究miR-29a的生物学功能和调控机制提供理论指导。方法:利用PubMed检索miR-29a相关文章,通过miRBase在线工具分析miR-29a序... 目的:通过对miR-29a进行靶基因预测及相关生物信息学分析,为miR-29a靶基因的实验验证提供数据支持,以期为深入研究miR-29a的生物学功能和调控机制提供理论指导。方法:利用PubMed检索miR-29a相关文章,通过miRBase在线工具分析miR-29a序列。应用TargetScan及miRNAda两种计算方法预测miR-29a靶基因并取其交集作为分析的基因集合,分别进行基因本体(gene ontology,GO)中的分子功能和生物学过程以及KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)生物通路富集分析。结果:(1)miR-29a序列在多物种间具有高度保守性。(2)两种方法预测miR-29a靶基因交集共191个。(3)miR-29a靶基因GO分子功能集中于转录因子活性、DNA结合和钙离子结合等(P<0.05);miR-29a靶基因GO生物学过程集中于调控转录、细胞粘附、细胞增殖与凋亡等(P<0.05);KEGG生物通路主要富集于PI3K-AKT信号通路、JAK-STAT信号通路、T细胞受体信号通路和胰岛素信号通路等信号转导通路,以及肺小细胞癌和子宫内膜癌等疾病通路(P<0.05)。结论:miR-29a可能通过参与多个靶基因信号通路的调控,在机体的多种生理病理过程中发挥重要作用,是一个颇有研究价值的生物学靶标。 展开更多
关键词 mir-29a 基因 基因本体 信号通路 生物信息学
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miR-196a在剑白香猪不同颜色皮肤组织中的表达及靶基因预测
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作者 蒙泽飞 陈伟 +4 位作者 陈龙 杨帅 刘英渠 朱红橙 罗文怡 《贵州畜牧兽医》 2023年第6期9-13,共5页
为探究miR-196a在剑白香猪不同颜色皮肤组织中的表达及其靶基因的富集情况,试验采集剑白香猪的白色和黑色皮肤组织,采用qRT-PCR技术检测2种颜色皮肤组织中miR-196a的表达水平,运用MEGA11软件比对分析miR-196a与其他物种间的保守性,通过... 为探究miR-196a在剑白香猪不同颜色皮肤组织中的表达及其靶基因的富集情况,试验采集剑白香猪的白色和黑色皮肤组织,采用qRT-PCR技术检测2种颜色皮肤组织中miR-196a的表达水平,运用MEGA11软件比对分析miR-196a与其他物种间的保守性,通过在线软件PicTar、TargetScan预测其靶基因,利用DAVID数据库对靶基因进行GO功能和KEGG通路富集分析。结果:miR-196a在剑白香猪白色皮肤组织中的表达量极显著高于黑色皮肤组织(P<0.01);GO功能分析表明,生物过程、细胞定位、分子功能分别富集于38、13、27个条目;KEGG通路富集分析表明,miR-196a靶基因主要富集于蛋白质消化吸收、癌症miRNAs、黑色素生成等通路,其中黑色素生成通路包括NRAS、ADCY9、CALM3基因。结论:推测miR-196a与剑白香猪皮肤颜色遗传相关。 展开更多
关键词 剑白香猪 皮肤组织 mir-196a表达 基因预测
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鳜miR-25的时空表达特征及其靶向核心生物钟基因的预测分析
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作者 周仪 米鍇 冯晓丽 《昆明医科大学学报》 CAS 2023年第10期55-59,共5页
目的研究miR-25在鳜的时空表达特征,预测其靶向核心生物钟基因,对其可能存在的生物学意义进行探讨。方法采用实时荧光定量PCR分析miR-25在鳜各组织以及不同阶段胚胎中的表达特征,并利用TargetScan对其靶向核心生物钟基因进行预测分析。... 目的研究miR-25在鳜的时空表达特征,预测其靶向核心生物钟基因,对其可能存在的生物学意义进行探讨。方法采用实时荧光定量PCR分析miR-25在鳜各组织以及不同阶段胚胎中的表达特征,并利用TargetScan对其靶向核心生物钟基因进行预测分析。结果miR-25在鳜红肌和心肌中的表达量较高(P<0.05),而在鳜脾、肾、肠以及肝中的表达量较低,且这4个组织中的表达量,差异无统计学意义(P>0.05);miR-25在鳜胚胎的2细胞期表达量较高(P<0.05),随着胚胎发育,其表达水平逐渐降低。靶基因预测结果显示,节律基因Arntl2、Nr1d2b mRNA的3’UTR区域存在miR-25的靶位点。结论miR-25在胚胎发育过程中呈母源性表达,并且可能在鳜红肌和心肌中具有重要的调控意义,此外miR-25可能通过靶向调节Arntl2、Nr1d2b的表达来调控鳜生物节律,为后续研究miR-25的生理作用以及调控昼夜节律从而预防相关疾病提供参考依据。 展开更多
关键词 mir-25 表达特征 基因预测
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辽宁绒山羊皮肤毛囊mir-1298-5p靶基因预测及表达载体构建 被引量:1
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作者 徐晶 张桂山 +3 位作者 孙丽敏 白曼 项露杰 姜怀志 《中国农学通报》 2018年第5期123-128,共6页
探讨辽宁绒山羊皮肤毛囊不同发育时期mir-1298-5p的调控作用及其与靶基因的潜在关系,为mir-1298-5p与其靶基因对皮肤毛囊发育作用提供理论依据。以辽宁绒山羊皮肤毛囊组织为材料,通过mi RNA的分离、表达、靶基因预测筛选及靶位点3'... 探讨辽宁绒山羊皮肤毛囊不同发育时期mir-1298-5p的调控作用及其与靶基因的潜在关系,为mir-1298-5p与其靶基因对皮肤毛囊发育作用提供理论依据。以辽宁绒山羊皮肤毛囊组织为材料,通过mi RNA的分离、表达、靶基因预测筛选及靶位点3'UTR表达载体构建,采用RT-PCR进行表达检测,在线靶基因预测软件预测mir-1298-5p的靶基因,并对其靶基因TGF-βR1的靶位点进行克隆测序、缺失突变。结果表明:靶基因预测发现TGF-βR1的3'UTR存在mir-1298-5p种子区结合位点,且mir-1298-5p及其靶基因TGF-βR1均在皮肤毛囊不同发育时期呈现差异性表达。mir-1298-5p对皮肤毛囊周期性发育可能起到一定的调控作用,并成功构建了TGF-βR1 3'UTR表达载体,为后期过表达转染体系的建立和功能基因的验证奠定了基础。 展开更多
关键词 辽宁绒山羊 皮肤毛囊 mir-1298-5p TGF-ΒR1 基因预测 表达载体构建
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脑胶质瘤中miR-29b-3p核心靶基因的鉴定与分析 被引量:1
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作者 卓胜华 羊良旺 +4 位作者 陈申波 张金本 张召腾 李争争 杨堃 《海南医学院学报》 CAS 2022年第4期258-262,268,共6页
目的:探讨miR-29b-3p在脑胶质瘤中的核心靶基因,并分析核心靶基因的临床意义。方法:采用生物信息学分析方法预测、筛选miR-29b-3p的靶基因;使用STRING、Cytoscape软件分析靶基因的蛋白间互相作用(protein-protein interaction,PPI);用GE... 目的:探讨miR-29b-3p在脑胶质瘤中的核心靶基因,并分析核心靶基因的临床意义。方法:采用生物信息学分析方法预测、筛选miR-29b-3p的靶基因;使用STRING、Cytoscape软件分析靶基因的蛋白间互相作用(protein-protein interaction,PPI);用GEPIA、CGGA分析其在胶质瘤中的不同状态下的表达差异及生存预后,单因素、多因素Cox比例风险回归模型分析影响预后的独立因素。结果:通过LinkedOmics、miRDB、miRTarBase、TargetScan和starbase数据库预测出22个miR-29b-3p的靶基因,通过构建PPI网络,去除未参与网络关系的基因,综合GEPIA与CGGA数据库分析,剔除COL2A1、DNMT3A和DNMT3B,进一步通过多因素Cox比例风险回归模型分析,最终确定3个核心靶基因:SERPINH1、LOXL2、CDK6。结论:生物信息学分析显示miR-29b-3p在脑胶质瘤中靶向SERPINH1、LOXL2、CDK6基因,各基因的表达量在正常脑组织与肿瘤组织间、肿瘤不同级别间、IDH突变状态和1p/19q共缺失状态下存在差异,其高表达对总生存预后、无复发生存预后存在不良影响,且可作为独立预后因素。 展开更多
关键词 脑胶质瘤 mir-29b-3p 基因 预后 生物信息学
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猪miR-192/-215的组织表达谱及其关键靶基因分析 被引量:6
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作者 吴正常 殷学梅 +4 位作者 孙丽 夏日炜 霍永久 吴圣龙 包文斌 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2251-2261,共11页
【目的】在前期通过Illumina Solexa高通量测序技术并结合荧光定量验证筛选出断奶仔猪E.coliF18菌株感染下表达量极显著上调的micro RNAs—miR-192和miR-215的基础上,为了解miR-192和miR-215的组织表达情况,进一步筛选确定miR-192和miR-... 【目的】在前期通过Illumina Solexa高通量测序技术并结合荧光定量验证筛选出断奶仔猪E.coliF18菌株感染下表达量极显著上调的micro RNAs—miR-192和miR-215的基础上,为了解miR-192和miR-215的组织表达情况,进一步筛选确定miR-192和miR-215靶向调控E.coli F18菌株感染的关键靶基因,为探讨miR-192和miR-215调控断奶仔猪E.coli F18感染的分子调控机制奠定基础。【方法】试验采用Real-time PCR方法检测miR-192和miR-215在35日龄梅山仔猪各个组织中的分布情况,同时利用MEGA 5.0分析了其保守性,Target Scan预测miR-192和miR-215的靶基因,并对靶基因分别进行Gene Ontology和Pathway通路的富集分析,进一步利用DAVID对靶基因蛋白进行功能分类,最后将预测的靶基因与课题组前期筛选出的断奶仔猪E.coli F18感染抗性相关的调控基因取交集。【结果】miR-192和miR-215在35日龄梅山仔猪十二指肠和空肠中均高度表达,二者成熟序列在脊椎动物中高度保守。miR-192和miR-215对应的靶基因相同,具有156个靶基因,只在轴突导向通路(axon guidance pathway)显著富集(P-value<0.05)以及25个GO功能中显著富集(P-value<0.05)。靶基因蛋白按功能分为12类,其中信号转导功能的磷蛋白(phosphoprotein)和DNA结合蛋白(dna-binding)占主要部分。靶基因与前期筛选的E.coli F18感染抗性相关的调控基因(GEO登录号:GSE26854)取交集,发现DLG5、ALCAM、FRMD4B、MIPOL1和ZFHX3等5个基因为miR-192和miR-215的重要靶基因,其中DLG5为维持小肠上皮细胞结构完整性的重要因子。【结论】miR-192与miR-215是参与维持断奶仔猪肠道正常功能与抗F18大肠杆菌感染的重要因子,DLG5可能是miR-192和miR-215靶向调控E.coli F18菌株感染中关键的靶基因,今后需要进一步验证其能否作为梅山猪抗F18大肠杆菌的有效遗传标记。 展开更多
关键词 mir-192 mir-215 组织表达谱 基因 E.COLI F18
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