LncRNA LINC01194在非小细胞肺癌中对miR-302e的影响及机制研究

目的:初步探索长链非编码RNA(lncRNA LINC01194)在非小细胞肺癌(NSCLC)中对miR-302e的影响及机制。方法:实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测NSCLC组织、癌旁组织和人肺正常上皮细胞BEAS-2B及NSCLC细胞株中lncRNA LINC01194、miR-302e表达,筛选最佳干预细胞系;将NCI-H1975细胞分为:control组(正常培养)、si-NC组(转染si-NC)、si-LINC01194组(转染si-LINC01194)、si-LINC01194+anti-miR-NC组(si-LINC01194和anti-miR-NC共转染)、si-LINC01194+anti-miR-302e组(si-LINC01194和anti-miR-302e共转染);qRT-PCR检测细胞中lncRNA LINC01194、miR-302e的表达;MTT法、平板克隆实验、Transwell小室、流式细胞仪分别检测细胞增殖、迁移及侵袭、凋亡;Western blot方法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、B细胞淋巴瘤蛋白2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达;双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA LINC01194与miR-302e靶向调控关系。结果:在NSCLC组织和细胞中,lncRNA LINC01194表达水平升高,miR-302e表达水平降低(P<0.05);抑制lncRNA LINC01194表达可显著抑制NCI-H1975细胞增殖、迁移与侵袭,促进细胞凋亡(P<0.05);抑制miR-302e表达可逆转抑制lncRNA LINC01194表达对NCI-H1975细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用及对细胞凋亡的促进作用(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实lncRNA LINC01194与miR-302e存在靶向调控关系。结论:在NSCLC组织和细胞中lncRNA LINC01194上调表达,miR-302e下调表达,抑制lncRNA LINC01194可通过上调miR-302e表达,从而抑制NSCLC细胞增殖、迁移与侵袭,促进其凋亡。

吸入糖皮质激素对毛细支气管炎患儿血miR-302e、NF-κB RNA表达的治疗观察

目的观察毛细支气管炎患儿miR-302e、NF-κB RNA的表达水平及雾化吸入糖皮质激素对其的治疗作用。方法收集毛支患儿分为激素组、非激素组各30例,急性期、恢复期各采集血标本,收集门诊体检健康儿31例为对照组,采集血标本。采用RT-PCR法检测各组血miR-302e、NF-κB RNA的表达水平。结果急性期毛支激素组、非激素组患儿血miR-302e的表达水平[(1.21±0.07)pg/ml,(1.22±0.09)pg/ml]均显著低于对照组[(1.51±0.09)pg/ml],而NF-κB RNA的表达水平[(0.63±0.13)pg/ml,(0.66±0.12)pg/ml]显著高于对照组[(0.43±0.09)pg/ml]。经吸入糖皮质激素治疗后,恢复期毛支激素组患儿血miR-302e的表达水平[(1.48±0.11)pg/ml]显著高于非激素组[(1.36±0.09)pg/ml],而NF-κB RNA的表达水平[(0.39±0.09)pg/ml]显著低于非激素组[(0.47±0.11)pg/ml]。经Pearson等级相关分析,毛支患儿血miR-302e的表达水平与NF-κB RNA的表达水平呈显著负相关(r=-0.727,P<0.01),miR-302e的表达水平与入院临床症状评分呈负相关(r=-0.845,P<0.01)。结论吸入糖皮质激素能上调毛支血miR-302e的表达,抑制NF-κB RNA的表达从而发挥抗炎作用。

血清miR-665和miR-302e在卵巢癌早期诊断中的临床应用

目的探讨血清微小RNA(miR)-665和miR-302e表达在卵巢癌早期诊断中的临床应用。方法于2020年3月至2022年12月选取在中国人民解放军空军军医大学第二附属医院接受治疗的90例卵巢癌患者(卵巢癌组)及85例健康体检者(对照组),实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清miR-665和miR-302e表达;Pearson法、ROC曲线、Logistic回归进行分析血清miR-665和miR-302e水平的相关性、血清中两者水平对卵巢癌的诊断价值以及影响卵巢癌发生的因素,并分析血清miR-665和miR-302e水平与卵巢癌患者临床病理的关系。结果与对照组相比,卵巢癌组患者血清中miR-665和miR-302e水平均显著下降,且差异有统计学意义(P<0.05);卵巢癌患者血清miR-665和miR-302e水平呈正相关(P<0.001);血清miR-665、miR-302e单独诊断卵巢癌患者的曲线下面积、敏感度、特异度分别为0.779、77.78%、70.59%,0.877、72.22%、87.06%,最佳截断值分别为0.960、0.880;二者联合诊断卵巢癌的曲线下面积为0.900,敏感度为67.78%,特异度为96.47%。Logistic回归分析显示,卵巢癌患者发生的影响因素为血清miR-665和miR-302e水平(P<0.05)。结论血清miR-665和miR-302e表达可用于卵巢癌早期诊断,且联合诊断效果更佳。

miR-302e NF-κB RNA在毛细支气管炎喘息性支气管炎中的表达及与IL-6和TNF-α的相关性

目的研究毛细支气管炎、喘息性支气管炎患儿血miR-302e、NF-κB RNA的表达及与炎症介质白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的相关性,探讨其临床意义。方法采用RT-PCR法检测毛细支气管炎、喘息性支气管炎患儿血miR-302e、NF-κB(p65)RNA的表达水平,采用化学发光法测定毛细支气管炎、喘息性支气管炎患儿血清IL-6、TNF-α水平,与健康对照组进行对比。结果毛细支气管炎组、喘息性支气管炎组患儿血miR-302e表达水平(1.19±0.08,1.22±0.06)显著低于健康对照组(1.51±0.09),差异均有统计学意义(均P<0.01);而NF-κB(p65)RNA的表达水平(0.63±0.13,0.78±0.11)显著高于健康对照组(0.43±0.09),差异均有统计学意义(均P<0.01)。毛细支气管炎组、喘息性支气管炎组血清IL-6[(30.68±8.93)pg/ml,(25.31±6.09)pg/ml]、TNF-α[(21.93±8.87)pg/ml,(24.34±9.18)pg/ml)]含量均显著高于健康对照组[(12.48±3.32)pg/ml,(10.67±3.60)pg/ml],差异均有统计学意义(均P<0.01),其中毛细支气管炎中重度组血清IL-6、TNF-α含量均显著高于轻度组。毛细支气管炎组、喘息性支气管炎组miR-302e的表达水平与NF-κB RNA的表达水平呈显著负相关。miR-302e的表达水平与入院时评分呈负相关;毛细支气管炎中重度组血miR-302e的表达水平也显著低于轻度组。结论毛细支气管炎、喘息性支气管炎患儿血miR-302e低表达而NF-κB RNA高表达,并与气道炎症密切相关。

毛细支气管炎患儿糖皮质激素治疗前后血清白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α、微小RNA-302e、核因子-κB mRNA水平变化及意义

目的:探讨毛细支气管炎患儿糖皮质激素治疗前后血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、miR-302e、核因子-κB(NF-κB)mRNA水平变化及意义。方法:选取毛细支气管炎患儿108例为研究对象,均行糖皮质激素治疗。比较糖皮质激素治疗前后患儿血清IL-6、TNF-α、miR-302e、NF-κB mRNA水平变化。采用Pearson法分析IL-6、TNF-α、miR-302e、NF-κB mRNA间的相关性。根据糖皮质激素治疗效果将患儿分为有效组和无效组,比较不同疗效患儿一般资料及生化指标。分析IL-6、TNF-α、miR-302e、NF-κB mRNA水平对糖皮质激素治疗效果的影响,以及它们对毛细支气管炎患儿糖皮质激素治疗无效的预测价值。结果:糖皮质激素治疗后患儿血清IL-6、TNF-α、NF-κB mRNA水平低于治疗前,miR-302e水平高于治疗前(均P<0.05)。Pearson相关性分析显示,患儿血清IL-6与TNF-α、NF-κB mRNA水平呈正相关(r=0.512、0.564,均P<0.05),与miR-302e呈负相关(r=-0.573,P<0.05);患儿血清TNF-α与NF-κB mRNA水平呈正相关(r=0.521,P<0.05),与miR-302e水平呈负相关(r=-0.559,P<0.05);患儿血清miR-302e与NF-κB mRNA水平呈负相关(r=-0.571,P<0.05)。无效组患儿血清IL-6、TNF-α、NF-κB mRNA水平,以及重度病情患儿占比高于有效组,miR-302e水平低于有效组(均P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,血清IL-6、TNF-α、miR-302e、NF-κB mRNA水平异常以及病情严重程度(重度)是毛细支气管炎患儿糖皮质激素治疗无效的危险因素(均P<0.05)。血清IL-6、TNF-α、miR-302e、NF-κB mRNA联合检测对毛细支气管炎患儿糖皮质激素治疗无效的预测价值高于上述指标单独预测。结论:经糖皮质激素治疗后,毛细支气管炎患儿血清IL-6、TNF-α、NF-κB mRNA水平降低,miR-302e水平升高,四者水平异常是毛细支气管炎患儿糖皮质激素治疗无效的危险因素,联合检测对毛细支气管炎患儿糖皮质激素治疗无效的预测价值更高。