膀胱癌患者血清miR-124、miR-320a水平与临床病理特征及生存预后的关系

目的探讨膀胱癌患者血清miR-124、miR-320a水平与临床病理特征及生存预后的关系。方法将该院2018年2月至2020年2月收治的100例膀胱癌患者纳入研究作为研究组,另选取100例同期体检的健康志愿者作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测血清miR-124和miR-320a水平。比较研究组和对照组血清miR-124和miR-320a水平。对膀胱癌患者随访3年,记录生存情况。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清miR-124和miR-320a水平对膀胱癌患者生存预后的评估价值。采用Spearman法分析膀胱癌患者血清miR-124和miR-320a水平高低的相关性。采用Kaplan-Meier法分析血清miR-124和miR-320a水平与患者生存预后的关系。采用多因素Cox回归分析膀胱癌患者生存预后的影响因素。结果研究组血清miR-124和miR-320a水平低于对照组(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清miR-124和miR-320a联合检测评估膀胱癌患者生存预后的曲线下面积(AUC)大于单独检测(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,膀胱癌患者血清miR-124和miR-320a水平高低呈正相关(r=0.432,P<0.05)。TNM分期为T_(a)+T_(1)期、肿瘤最大径≤3 cm、淋巴结未转移的膀胱癌患者血清miR-124和miR-320a高水平比例分别高于TNM分期为T2~T4期、肿瘤最大径>3 cm、淋巴结转移患者(P<0.05)。Kaplan-Meier法分析表明,miR-124高水平患者3年累积生存率高于miR-124低水平患者;miR-320a高水平患者3年累积生存率高于miR-320a低水平患者(P<0.05)。多因素Cox回归分析表明,miR-124、miR-320a、TNM分期、淋巴结转移是膀胱癌患者生存预后的影响因素(P<0.05)。结论血清miR-124和miR-320a水平在膀胱癌患者中下调,二者联合检测对评估膀胱癌生存预后有重要价值。

miR-92b、miR-320a表达水平与非小细胞肺癌患者临床病理及术后3年生存率的关系

目的:探讨miR-92b、miR-320a表达水平与非小细胞肺癌(NSCLC)患者临床病理及术后3年生存率的关系。方法:回顾我院肿瘤外科2017年10月—2019年5月收治的86例NSCLC患者资料,比较患者肿瘤组织及癌周组织的miR-92b、miR-320a表达水平,比较不同miR-92b、miR-320a表达水平患者的预后,并进行生存分析。结果:肿瘤组织的miR-92b表达水平高于癌周组织,miR-320a表达水平低于癌周组织,差异有统计学意义(P<0.05);不同miR-92b、miR-320a表达水平患者肿瘤分期、淋巴结转移比较差异有统计学意义(P<0.05);miR-92b低表达组术后3年累积生存率、平均生存时间优于miR-92b高表达组,miR-320a高表达组术后3年生存率、平均生存时间优于miR-320a低表达组,差异有统计学意义(P<0.05);肿瘤分期、淋巴结转移、miR-92b、miR-320a表达水平为影响NSCLC患者预后独立影响因素(P<0.05)。结论:miR-92b、miR-320a表达水平与NSCLC患者临床病理及术后3年生存率相关,可作为预后预测指标。

miR-320a-5p靶向Twist抑制肝细胞癌上皮间质转化

目的探讨miR-320a-5p调控肝细胞癌(HCC)侵袭与转移的生物学功能及其作用机制。方法采用qRT-聚合酶链反应(PCR)检测HCC肿瘤组织、相邻正常组织及肝癌细胞系中miR-320a-5p与癌基因Twist的表达。Pearson相关性分析miR-320a-5p与Twist表达的相关性,双荧光素酶实验证明二者靶向关系。通过CCK8增殖实验、细胞集落形成实验、Transwell、划痕实验分别检测miR-320a-5p对HCC细胞的增殖、活力、侵袭和迁移能力的影响;Western印迹检测Twist蛋白及上皮间质转化(EMT)相关蛋白的表达。结果miR-320a-5p在HCC组织和细胞中表达下调。而过表达miR-320a-5p可抑制HCC细胞的增殖、侵袭和迁移能力及EMT趋势。miR-320a-5p可靶向抑制Twist表达。Twist在HCC肿瘤组织和细胞系中高表达,同时miR-320a-5p可逆转Twist对HCC发展的促进作用。结论miR-320a-5p可通过抑制Twist表达调控HCC细胞的增殖、迁移、侵袭及EMT趋势,从而抑制HCC的发展及转移。

血清miR-134-5p和miR-320a检测联合肺功能指标对煤工尘肺患者的早期诊断价值

目的探讨血清miR-134-5p和miR-320a联合肺功能指标对尘肺患者早期临床诊断价值。方法选取煤工尘肺(CWP)患者(CWP组)、煤矿接尘体检人群(接尘组)以及同期健康体检人群(对照组)各40例;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组血清miR-134-5p和miR-320a水平。检测各组受试者的肺功能指标:最大通气量(MVV)、用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV1)、第3秒用力呼气容积(FEV3)、1秒率(FEV1/FVC)、3秒率(FEV3/FVC)、最大呼气中期流量(MMEF)、峰流速(PEF)、75%呼气流速(MEF75)、50%呼气流速(MEF50)、25%呼气流速(MEF25)、残气量/肺总量(TLC)、功能残气量(FRC)和肺泡通气量(VA);采用Logistic回归分析煤矿接尘相关作业的人群发生CWP的危险因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miRNA联合肺功能指标对CWP患者的早期诊断价值。结果对照组、接尘组和CWP组血清miR-134-5p、miR-320a表达水平,MVV、FEV1、FEV1/FVC、MMEF、MEF50、FRC和VA逐渐降低(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果发现FRC降低是煤矿接尘人群发生CWP的独立危险因素(P<0.05)。miR-134-5p和miR-320a联合肺功能指标FRC预测煤矿接尘相关作业的人群发生CWP的诊断效能较高,AUC为0.975(95%CI:0.948~1.000)。结论血清miR-134-5p、miR-320a和肺功能指标FRC联合对早期CWP的临床诊断具有重要参考价值。

miR-320a通过靶向调控NLRP3对氧糖剥夺诱导的大鼠心肌细胞损伤的保护作用

目的 探讨miR-320a对氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)诱导的心肌细胞损伤的影响及其作用机制。方法 建立OGD诱导心肌H9C2细胞损伤模型,采用q RT-PCR法检测细胞中miR-320a和NLRP3 m RNA表达水平。双荧光素酶报告系统验证miR-320a与NLRP3的靶向关系。将miR-320a mimics及其阴性对照mimics-NC、NLRP3过表达质粒及其空载质粒分别或同时转染至H9C2细胞中,再进行OGD损伤诱导。采用CCK-8检测细胞增殖活性;比色法测定细胞上清液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性;流式细胞术检测细胞凋亡水平;ELISA检测细胞IL-1β和IL-18水平;Western blot检测细胞中Bax、Bcl-2、Cleaved-caspase-3、NLRP3、ASC和caspase-1蛋白表达水平。结果 OGD诱导的H9C2细胞中miR-320a表达水平明显降低,而NLRP3 mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。双荧光素酶报告系统验证,miR-320a靶向负调控NLRP3表达。miR-320a过表达可提高OGD暴露下H9C2细胞增殖活性,上调Bcl-2蛋白表达,降低LDH活性、细胞凋亡率、IL-1β和IL-18水平以及细胞中Bax、Cleaved-caspase-3、NLRP3、ASC和caspase-1等蛋白表达水平。然而,NLRP3过表达可逆转miR-320a过表达对OGD暴露下H9C2细胞损伤的改善作用。结论 miR-320a可通过靶向负调控NLRP3表达提高OGD暴露下心肌细胞的增殖活性,降低细胞凋亡和炎症水平,从而减轻OGD诱导的心肌细胞炎症损伤。

miR-320a与VEGF在肺癌患者血清中的表达及其临床意义

目的探讨微小RNA-320a(miR-320a)、血管内皮生长因子(VEGF)在肺癌患者血清内的表达与其临床意义。方法选取54例肺癌患者设定为观察组,同期体检的58例健康体检者设定为对照组。采集所有研究对象的5 ml静脉血,以实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(qRT-PCR)与酶联免疫吸附法测定miR-320a与VEGF表达,对比2组miR-320a与VEGF表达差异。同时分析miR-320a、VEGF表达与肺癌患者临床病理特征的关系;另绘制受试者工作曲线(ROC),探究miR-320a、VEGF单独与联合检测肺癌的诊断效能。结果观察组miR-320a水平(0.85±0.21)低于对照组(2.23±0.57),VEGF水平[(289.75±16.53)pg/ml]高于对照组[(115.69±12.49)pg/ml],有统计学差异(P<0.05)。miR-320a、VEGF表达与肺癌患者性别、年龄、病理类型无关(P>0.05),miR-320a、VEGF表达与临床分期、分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)。ROC结果显示:miR-320a联合VEGF检测的曲线下面积(AUC)为0.905(95%CI:0.850~0.960),高于两项指标单独检测的AUC[0.875(95%CI:0.794~0.956)、0.872(95%CI:0.801~0.943)]。结论miR-320a、VEGF在肺癌患者血清内呈异常表达,其表达与患者临床分期、分化程度、淋巴结转移相关,联合检测可提高疾病早期诊断效能。

牛miR-320a的靶基因预测及生物信息学分析

旨在对bta-miR-320a的靶基因进行生物信息学预测和分析,探索其影响牛脂肪沉积的作用机制。本试验利用Promoter Scan、TargetScan、DAVID、Cytoscape等生物信息学软件和miRBase、Ensembl、NCBI、miRWalk等数据库对bta-miR-320a进行转录因子结合位点预测、保守性分析、靶基因预测、基因本体论富集分析和信号通路富集分析。结果表明,miR-320(a)在各物种间非常保守,bta-miR-320a启动子区域有SP1等多个转录因子结合位点,获得的84个靶基因主要参与负调控细胞分化、细胞周期、负调控生长等多个生物学过程,涉及p53、细胞周期和MAPK等信号转导通路。由此推测,bta-miR-320a受到SP1等多种转录因子调控,它可能通过对MAPK、细胞周期和p53信号通路中靶基因TP53、MAPK1等的抑制作用调控牛脂肪细胞分化,进而影响了牛的脂肪沉积。

胃癌组织中miR-320a和CYLD的表达及与临床病理特征及预后的关系

目的研究miR-320a和头帕肿瘤综合征蛋白(CYLD)在胃癌患者中的表达及其与临床病理特征及预后的关系。方法选取2013年3月—2014年11月在我院行肿瘤切除术的460例胃癌患者作为研究对象,分别收集患者肿瘤组织及癌旁非肿瘤胃粘膜组织,采用荧光定量PCR检测miR-320a和CYLD mRNA表达水平,采用免疫组织化学染色法检测CYLD蛋白表达,分析miR-320a和CYLD表达水平及其与临床病理特征及预后的关系。结果 miR-320a和CYLD mRNA在肿瘤组织中的相对表达量为(0. 37±0. 09)、(0. 91±0. 23),在癌旁非肿瘤组织中的相对表达量为(0. 86±0. 15),(1. 56±0. 42),miR-320a和CYLD mRNA在肿瘤组织中的相对表达量与非肿瘤组织比较,差异具有统计学意义(t=60. 078,29. 113,P <0. 001); CYLD蛋白在肿瘤组织中的阳性表达率43. 48%与癌旁非肿瘤组织73. 91%比较,差异具有统计学意义(χ2=86. 624,P=0. 003); miR-320a表达水平与患者肿瘤直径和淋巴结转移有关(χ2=25. 859,13. 742,P <0. 05); YLD表达水平与患者TNM分期和肿瘤分化程度有关(χ2=37. 725,59. 323,P <0. 05)。miR-320a低表达患者中位生存期(20. 36±0. 56)(95%CI:19. 252～21. 462)与miR-320a高表达患者中位生存期(28. 29个月95%CI:27. 158～29. 412个月)比较,差异具有统计学意义(χ2=87. 967,P <0. 001); CYLD阴性表达患者中位生存期(17. 70个月95%CI:16. 599～18. 796个月)与CYLD阳性表达患者中位生存期(26. 74个月95%CI:25. 474～27. 997个月)比较,差异具有统计学意义(χ2=109. 887,P <0. 001); miR-320a和CYLD共表达患者中位生存期(29. 01个月95%CI:26. 831～28. 946个月)与非共表达患者中位生存期(17. 13个月95%CI:17. 214～19. 568个月)比较,差异具有统计学意义(χ2=117. 680,P <0. 001)。肿瘤组织miR-320a与CYLD mRNA表达水平呈正相关(r=0. 607,P <0. 001); miR-320a低表达、CYLD阴性表达、TNM分期、淋巴结转移及肿瘤分化程度是影响胃癌患者预后的独立危险因素(HR=1. 939、2. 180、1. 561、1. 719、1. 608,95%CI:1. 141～3. 295,1. 252～3. 796,1. 014～2. 403,1. 115～2. 650,1. 097～2. 357,P <0. 05)。结论 miR-320a和CYLD在胃癌患者肿瘤组织中表达量明显降低,与疾病发生发展及不良预后有关,是潜在的胃癌诊断及治疗新靶点。

lncRNA LINC01419靶向miR-320a对小儿类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:探讨lncRNA LINC01419对小儿类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法:取2017年1月至2019年12月本院21例小儿类风湿关节炎患者的滑膜组织及21例因骨折式创伤截肢者的膝关节正常滑膜组织;分离培养小儿类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RASFs),将其分为si-NC组、si-LINC01419组、pcDNA组、pcDNALINC01419组、miR-NC组、miR-320a组、si-LINC01419+anti-miR-NC组、si-LINC01419+anti-miR-320a组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测LINC01419和miR-320a的表达水平;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;Transwell检测细胞迁移和侵袭;Western blot法检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(p21)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达;荧光素酶报告实验检测LINC01419和miR-320a的靶向关系。结果:与正常滑膜组织相比,小儿类风湿关节炎患者滑膜组织中LINC01419表达水平升高,miR-320a表达水平降低(P<0.05)。抑制LINC01419表达或过表达miR-320a,细胞活性降低,迁移和侵袭细胞数降低,CyclinD1、MMP-2、MMP-9表达水平降低,p21表达水平升高(P<0.05)。LINC01419靶向调控miR-320a的表达,干扰miR-320a表达逆转了抑制LINC01419表达对小儿类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论:抑制LINC01419表达可能通过靶向上调miR-320a抑制小儿类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭。

miR-320a与肿瘤相关性的研究进展

miR-320a是miR-320家族成员之一,广泛存在于人体的多种组织和器官。近年来,许多研究者发现miR-320a在胃、肝、结直肠等肿瘤细胞中表达水平异常,并证实了miR-320a与肿瘤的发生、发展、转移及预后密切相关。本文通过总结最新文献,重点阐述miR-320a在肿瘤发生和发展过程中的作用及其可能机制,以期为肿瘤治疗和研究提供新的靶点分子。

miR-320a表达与结直肠癌患者预后的关系

目的探讨miR-320a与结直肠癌患者的临床病理特征及预后的相关性。方法选取2010年1月至2013年3月在本科室收治的65例已经配对的癌旁正常组织和结直肠癌组织,采用实时定量PCR的方法检测癌旁正常组织和癌组织中miR-320a的表达情况,分析miR-320a表达情况与结直肠癌患者的临床病理特点及生存预后的关系。结果结直肠癌组织中miR-320a表达量明显低于癌旁正常组织(P<0.001)。结直肠癌患者组织中miR-320a的表达与肿瘤分化程度、TNM分期和CEA水平有关(均P<0.05),而与年龄、性别、肿瘤部位无关(均P>0.05)。生存分析结果显示miR-320a高表达的结直肠癌患者术后总体预后明显优于miR-320a低表达者,两组患者的5年生存率分别为54.7%和31.4%(P=0.022)。结论 miR-320a可能作为结直肠癌患者预后的预测指标。miR-320a过表达可能提示结直肠癌患者肿瘤生物学行为较佳。

PCOS患者血清miR-320a、miR-145表达水平及其与雌孕激素的关系探讨

目的 探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清微小RNA-320a(miR-320a)、miR-145表达水平及其与雌、孕激素的关系。方法 采用前瞻性研究,选取2019年5月至2021年7月于本院就诊的92例PCOS患者作为PCOS组,另招募同期健康体检的90例育龄期女性作为对照组。采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测并比较两组患者血清miR-320a和miR-145表达水平,采用电化学发光法检测并比较两组患者血清E_(2)和孕酮水平;采用Pearson相关性分析探讨PCOS患者血清miR-320a、miR-145表达水平与雌孕激素的关系。结果 电化学发光检测结果显示,PCOS组血清E_(2)和孕酮水平显著低于对照组(P<0.05);Real-time PCR检测结果显示,PCOS组血清miR-320a和miR-145表达水平均显著低于对照组(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,PCOS组血清miR-320a和miR-145表达水平与E_(2)和孕酮水平均呈显著正相关(P<0.05)。结论 PCOS患者血清miR-320a和miR-145表达水平显著低于健康育龄期女性,且其表达水平与血清E_(2)、孕酮水平呈显著正相关,提示临床干预中可通过调控miR-320a、miR-145的表达来调节PCOS患者雌孕激素水平。

miR-320a与肺部恶性肿瘤相关性的研究进展

世界卫生组织(World Health Organization,WHO)2018年公布的资料显示肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,仅2018年一年就新增1810万肺癌患者,死亡人数高达960万[1],5年生存率仅为15.8%,其中非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)约占全部肺癌的80%,约50%的NSCLC患者确诊时已发生远处转移,整体预后差,约2/3的患者确诊时手术治疗已基本无效。规范有序的诊断、分期以及根据肺癌类型进行多学科治疗是改善肺癌患者生存率的重要方法。随着科学技术的不断发展,科研工作者对肿瘤基因组及分子生物学的研究更加深入,并对EGFR、MET、HER2、C759S、T790M、RAS、FGFR1、BRAF、PI3CA等基因不断探索,为肿瘤在基因层面的治疗指明新的方向。

Linc00460通过海绵吸附影响miR-320a对乳腺癌细胞的有氧糖酵解作用

目的探讨Linc00460通过海绵吸附miR-320a对乳腺癌(BC)细胞有氧糖酵解作用的影响。方法qRT-PCR法检测正常乳腺上皮细胞系MCF-10A及5种BC细胞系中Linc00460和miR-320a表达水平。qRT-PCR检测干扰Linc00460对miR-320a表达的影响,双荧光素酶报告基因实验检测miR-320a和Linc00460的靶向关系。将si-Linc00460和miR-320a inhibitor共转染至MDA-MB-231细胞,qRT-PCR检测细胞中miR-320a表达水平;MTT法检测细胞增殖能力;2-NBDG法检测细胞葡萄糖摄取率;比色法检测细胞上清液中乳酸含量;酶活性试剂盒检测糖酵解关键酶的活性;Western blot检测酵解途径中关键蛋白表达水平。结果与MCF-10A细胞比较,5种BC细胞系中Linc00460高表达,而miR-320a低表达。干扰Linc00460后,MDA-MB-231细胞中miR-320a表达显著升高。双荧光素酶报告基因实验证实,miR-320a和Linc00460可靶向结合。干扰Linc00460表达后MDA-MB-231细胞增殖能力受到明显抑制(P=0.000),细胞葡萄糖摄取率和细胞上清液中乳酸含量降低(均P=0.000),PFK、PK和LDH酶活性受到抑制(均P=0.000),PFKM、GLUT1和LDHA蛋白表达水平下调(均P=0.000)。抑制miR-320a可明显逆转si-Linc00460对MDA-MB-231细胞增殖和糖酵解的抑制作用(均P=0.000或0.001)。结论Linc00460可能通过海绵吸附miR-320a,上调PFKM表达,从而促进BC细胞有氧糖酵解作用。

lncRNA EGOT靶向miR-320a对LPS诱导肺泡上皮细胞炎症反应和细胞凋亡的影响

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)嗜酸性粒细胞转录因子(EGOT)对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞A549凋亡、炎症反应的影响及可能机制。方法:将A549细胞分为对照组(Con)、LPS组、LPS+pcDNA组、LPS+pcDNA-EGOT组、LPS+anti-miR-NC组、LPS+anti-miR-320a组、LPS+pcDNA-EGOT+miR-NC组、LPS+pcDNA-EGOT+miR-320a组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测EGOT和miR-320a表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;试剂盒检测白细胞介素(IL)-6、IL-1β水平。双荧光素酶报告基因实验和RT-qPCR确定EGOT和miR-320a之间靶向作用。结果:与Con组比较,LPS组A549细胞凋亡率、IL-6和IL-1β水平均升高(P<0.05),EGOT表达水平降低(P<0.01),miR-320a表达水平明显升高(P<0.01)。与LPS+pcDNA组比较,LPS+pcDNA-EGOT组A549细胞凋亡率、Bax蛋白表达、IL-6和IL-1β水平均降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05)。与LPS+anti-miR-NC组比较,LPS+anti-miR-320a组A549细胞凋亡率、Bax蛋白表达、IL-6和IL-1β水平均明显降低(P<0.01),Bcl-2蛋白表达明显升高(P<0.01)。与LPS+pcDNA-EGOT+miR-NC组比较,LPS+pcDNA-EGOT+miR-320a组A549细胞凋亡率、Bax蛋白表达、IL-6和IL-1β水平均明显升高(P<0.01),Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.01)。双荧光素酶报告实验显示,EGOT靶向负性调控miR-320a表达。结论:lncRNA EGOT通过靶向miR-320a可减轻LPS诱导肺泡上皮细胞炎症反应和细胞凋亡。

miR-320a、FOXQ1在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征及预后的关系

目的:探讨miR-320a和转录因子叉头框蛋白Q1(FOXQl)在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征及预后的关系。方法:选取40例胃癌患者为研究对象,分别采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)及免疫组织化学En Vision法检测miR-320a和FOXQl在癌组织及癌旁组织中的表达水平,分析其与临床病理特征及预后的关系,COX回归分析影响患者术后3年生存率的因素。结果:癌组织中miR-320a相对表达量低于癌旁组织(P<0.05);FOXQl在癌组织中的阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05)。miR-320a、FOXQl表达水平与肿瘤直径、AJCC分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移及浸润程度有关(P<0.05)。40例胃癌患者3年生存率为70.00%。回归分析显示,肿瘤直径、AJCC分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移及浸润程度及miR-320a、FOXQl表达为影响胃癌预后的独立因素(P<0.05);miR-320a低表达和FOXQl阳性表达患者3年生存率低于miR-320a高表达和FOXQl阴性表达患者(P<0.05)。结论:胃癌组织中miR-320a表达量降低,FOXQl呈阳性表达,且与疾病发生发展和不良预后有关。

MiR-320a作为阿尔茨海默氏病的诊断生物标志物,对β淀粉样蛋白诱导的神经毒性具有保护作用

目的:MicroRNA (miRNA)在包括阿尔兹海默症(AD)在内的多种人类疾病中异常表达。本研究分析了miR-320a在AD患者中的表达变化和临床价值,并进一步研究了miR-320a在Aβ诱导的SH-SY5Y细胞神经毒性中的作用。方法:qRT-PCR用于测量miR-320a表达水平。建立ROC曲线以评估miR-320a对AD的诊断潜力。CCK-8和流式细胞仪用于细胞活力和凋亡的检测。荧光素酶报告基因测定进行靶基因确定。结果:AD患者的血清miR-320a低于健康对照组,并且与患者的MMSE评分呈正相关。血清miR-320a可以将AD患者与对照组区分开,在0.827的临界值下,诊断敏感性和特异性分别为85.5%和87.0%。MiR-320a减弱了Aβ25-35对SH-SY5Y细胞的神经毒性,而PTEN是被证明是其靶基因。结论:本结果为miR-320a作为诊断AD的有前途的生物标志物提供了依据,miR-320a的过表达通过靶向PTEN减弱了Aβ诱导的神经毒性。

miR-34b和miR-320a的表达与前列腺癌组织临床病理特征及预后的相关性

目的探讨前列腺癌组织中miR-34b、miR-320a的表达与其临床病理特征及预后的相关性。方法选择前列腺癌患者80例,另选40例良性前列腺增生患者作为对照组。采用定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测两组患者组织中miR-34b、miR-320a的表达量,分析前列腺癌组织中miR-320a、miR-34b与各临床参数的相关性。结果前列腺癌患者miR-34b、miR-320 a相对表达量均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);前列腺癌患者组织中miR-320a、miR-34b表达量与年龄、初始PSA无关,与Gleason评分、肿瘤大小、肿瘤分期、有无远处转移有关(P<0.05);随访36个月,死亡36例,存活44例。死亡组miR-320a、miR-34b表达水平显著低于存活组(P<0.05)。结论前列腺癌组织中miR-34b、miR-320a表达降低,两者的异常表达与肿瘤的发生发展和预后密切相关。

lncRNA SNHG12/miR-320a/β-catenin分子轴调控肺癌细胞的生长和侵袭

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)SNHG12对肺癌细胞生长和侵袭的影响及作用机制。方法QRT-PCR检测肺癌细胞株(A549、H1299和PC9)和正常支气管上皮细胞HBE中SNHG12和miR-320a的表达。双荧光素酶报告基因实验检测SNHG12、β-catenin和miR-320a的靶向关系。以A549细胞为研究对象,实验分组:control组(正常培养)、si-NC组(转染si-NC)、si-SNHG12组(转染si-SNHG12)、si-SNHG12+si-β-catenin组(共转染si-SNHG12和si-β-catenin)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-320a组(转染miR-320a mmics)、miR-320a+pcDNA3.1组(共转染miR-320a mimics和pcDNA3.1)、miR-320a+SNHG12组(共转染miR-320a mimics和SNHG12过表达载体)。采用MTT法、Transwell小室及AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞活力、侵袭数及凋亡率,蛋白质印迹法检测Cyclin D1、MMP-2和Survivin蛋白的表达。结果肺癌细胞中SNHG12的表达明显高于正常支气管上皮细胞,而miR-320a的表达明显低于正常支气管上皮细胞,差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-320a能够降低SNHG12-WT和β-catenin-WT细胞的相对荧光素酶活性,差异有统计学意义(P<0.05)。与si-NC组比较,si-SNHG12组细胞活力、Cyclin D1、MMP-2、Survivin蛋白水平降低,细胞侵袭数减少,凋亡率升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-320a组、miR-320a+pcDNA3.1组细胞活力降低,细胞侵袭数减少,凋亡率升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与miR-320a+pcDNA3.1组比较,miR-320a+SNHG12组细胞活力升高,细胞侵袭数增多,凋亡率降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与si-SNHG12组比较,si-SNHG12+si-β-catenin组Cyclin D1、MMP-2、Survivin蛋白水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论LncRNA SNHG12可通过调节miR-320a/β-catenin分子轴抑制肺癌细胞增殖和侵袭,促进细胞凋亡。

miR-320a调控非小细胞肺癌细胞的上皮细胞间质化过程研究

目的探讨miR-320a对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞上皮细胞间质化过程的调控作用及其可能的作用机制。方法选取2017-07至2018-12于菏泽市立医院住院并进行手术治疗的NSCLC患者60例,术中取切除的癌组织和癌旁组织,RT-PCR和Western Blot检测癌组织和癌旁组织miR-320a和FoxM1表达;miR-320a mimics、miR-320a NC和miR-320a inhibitor转染A549细胞,24 h后划痕实验和Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力,双荧光素酶报告基因系统预测miR-320a与FoxM1的靶向关系,Western Blot检测FoxM1、E-Cadherin和Vimentin蛋白表达。结果癌旁组织内miR-320a的表达高于癌组织(P<0.001),FoxM1的阳性细胞率低于癌组织(P<0.001);miR-320a NC组细胞迁移和侵袭能力低于miR-320a mimics组(P<0.001),而高于miR-320a inhibitor组(P<0.001);miR-320a可靶向下调FoxM1的表达水平;FoxM1-WT A549细胞中,miR-320a mimics组细胞E-cadherin表达显著高于miR-320a NC组(P<0.001),Vimentin表达显著低于miR-320a NC组(P<0.001);miR-320a inhibitor组细胞E-cadherin表达显著低于miR-320a NC组(P<0.001),Vimentin表达显著高于miR-320a NC组(P<0.001)。结论miR-320a在NSCLC中可能作为抑癌基因发挥作用,这种作用可能是通过靶向抑制FoxM1的表达,从而抑制NSCLC细胞的上皮细胞间质化过程而实现的。