LncRNA OCPAT1通过调控miR-320d/YOD1信号通路促进卵巢癌的发生及发展

目的研究lncRNA OCPAT1调控miR-320d/YOD1信号通路在卵巢癌发生发展中的作用及机制。方法2019年1月至2020年12月应用TCGA和GTEX数据库筛选,通过qRT-PCR检测确认lncRNA AC007405.3(OCPAT1)在卵巢癌组织和细胞中的表达;在ES-2细胞中敲减OCPAT1,通过实验验证,OCPAT1与miR-320d/YOD1的靶向调控关系。结果通过GTEX和TCGA数据库及qRT-PCR检测,确认OCPAT1高表达;敲低OCPAT1后,MTT增殖显示敲减后细胞增殖减低,EdU细胞增殖显示,敲减后处于复制期的细胞减少,流式细胞周期显示敲减后细胞停滞在G0/G1期,流式周期显示敲减后细胞凋亡增加,Transwell migration实验显示,敲减后抑制卵巢癌细胞ES-2的迁移能力,Matrigel invasion实验显示敲减后抑制卵巢癌细胞ES-2的侵袭能力。双荧光素酶报告基因实验证实,OCPAT1可以靶向作用于miR-320d。结论lncRNA OCPAT1可能通过靶向调控miR-320d/YOD1信号通路调控卵巢癌细胞增殖、迁移及侵袭,进而促进卵巢癌的发生及发展。

miRNA-34b对子宫内膜癌细胞凋亡、侵袭、迁移的影响及作用机制

目的探究miR-34b对子宫内膜癌(endometrial cancer)凋亡、迁移、侵袭的影响及对Jag1/Cyclin D1信号通路的影响。方法将人子宫内膜癌细胞AN3CA细胞分为对照组、NC组和miR-34b组。通过流式细胞技术、Transwell实验分别检测各组细胞凋亡、迁移能力和侵袭能力;通过定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)及Westernblot检测各组细胞Jagged-1蛋白(Jag1)及其靶基因G1/S-特异性周期蛋白-D1(Cycling D1)mRNA和蛋白的表达水平;通过裸鼠荷瘤实验分析miR-34b对肿瘤生长的影响。结果对照组、NC组和miR-34b组细胞凋亡比例分别为5.6%±0.12%,5.80%±0.22%和19.4%±0.51%。miR-34组细胞凋亡比例高于对照组,差异具有统计学意义(t=8.325,P<0.01);对照组、NC组和miR-34b组细胞迁移数分别为322.15±13.71个,327.67±9.14个和162.19±7.49个,miR-34b组细胞迁移数低于对照组,差异具有统计学意义(t=7.945,P<0.01);对照组、NC组和miR-34b组细胞侵袭数分别为357.6±14.11个,364.05±16.12个和157.58±8.77个,miR-34b组细胞侵袭数低于对照组,差异具有统计学意义(t=7.643,P<0.01);qPCR结果表明对照组、NC组和miR-34b组Jag1 mRNA表达为2.75±0.21,2.67±0.14和1.19±0.19,miR-34b组低于对照组,差异具有统计学意义(t=8.434,P<0.01);对照组、NC组和miR-34b组蛋白表达为1.71±0.11,1.77±0.24和0.69±0.16,miR-34b组低于对照组,差异具有统计学意义(t=7.895,P<0.01);对照组、NC组和miR-34b组Cyclin D1mRNA表达为1.29±0.13,1.32±0.11和0.59±0.13,miR-34b组低于对照组,差异具有统计学意义(t=9.124,P<0.01);对照组、NC组和miR-34b组蛋白表达为1.81±0.18,1.79±0.14和1.29±0.16,miR-34b组低于对照组,差异具有统计学意义(t=8.227,P<0.01);裸鼠荷瘤实验表明过表达miR-34b裸鼠肿瘤生长曲线与对照组差异有统计学显著性意义,并且肿瘤体积显著低于对照组(t=8.184,P<0.01)。结论miR-34b可以促进人子宫内膜癌细胞的凋亡,抑制细胞迁移和侵袭能力,其机制与Jag1/Cyclin D1信号通路活性的抑制相关。