circZNF124通过靶向miR-4262调控结直肠癌SW620细胞增殖、迁移及侵袭的机制研究

目的:探讨circZNF124对结直肠癌SW620细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其机制。方法:体外培养人结直肠癌细胞SW620,随机分组:si-NC组、si-circZNF124组、miR-NC组、miR-4262组、si-circZNF124+anti-miR-NC组、si-circZNF124+anti-miR-4262组;CCK-8法、平板克隆形成实验、划痕实验与Transwell实验分别检测SW620细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭;双荧光素酶报告实验分析circZNF124与miR-4262的靶向结合;Western blot检测E-cadherin、N-cadherin蛋白表达量。结果:与si-NC组比较,si-circZNF124组细胞活力、划痕愈合率和N-cadherin蛋白水平降低(P<0.05),细胞克隆形成数和侵袭细胞数减少(P<0.05),E-cadherin蛋白水平升高(P<0.05);circZNF124可负向调控miR-4262的表达;与miR-NC组比较,miR-4262组细胞活力、划痕愈合率和N-cadherin蛋白水平降低(P<0.05),细胞克隆形成数和侵袭细胞数减少(P<0.05),E-cadherin蛋白水平升高(P<0.05);抑制miR-4262表达逆转了干扰circZNF124表达对SW620细胞增殖、迁移侵袭的作用。结论:干扰circZNF124表达通过靶向miR-4262,减弱结直肠癌细胞增殖、迁移及侵袭能力。

lncRNA NEAT1调控miR-4262表达影响甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究

目的:研究长链非编码RNA NEAT1(lncRNA NEAT1)对甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法:qPCR检测NEAT1和miR-4262在人正常甲状腺滤泡上皮细胞株Nthy-ori 3-1与甲状腺癌细胞株FTC-133、ML-1、SW579中的表达。用si-NEAT1或miR-4262 mimic转染SW579细胞,考察其在细胞增殖、迁移和侵袭中的作用。生物学信息预测结合双荧光素酶报告实验分析NEAT1和miR-4262之间的靶向关系。MTT法检测细胞增殖抑制率;Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p21、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达;Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭。共转染si-NEAT1和anti-miR-4262,观察抑制miR-4262表达对抑制NEAT1表达诱导的SW579细胞增殖、迁移及侵袭的影响。结果:NEAT1在甲状腺癌细胞中的表达显著上调(P<0.05),miR-4262表达下调(P<0.05)。抑制NEAT1表达或过表达miR-4262显著增加SW579细胞增殖抑制率和p21蛋白表达量(P<0.05),显著降低迁移细胞数、侵袭细胞数及Cyclin D1、MMP-2和MMP-9蛋白表达量(P<0.05)。miR-4262是NEAT1的靶基因。上调或下调NEAT1表达明显调控miR-4262表达(P<0.05)。抑制miR-4262表达能逆转抑制NEAT1表达对SW579细胞增殖抑制率和p21蛋白表达的促进作用,以及对细胞迁移、侵袭及Cyclin D1、MMP-2和MMP-9蛋白表达的抑制作用。结论:lncRNA NEAT1通过靶向miR-4262影响甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。

下调miR-4262抑制肺癌细胞A549转移潜能的机制

目的探讨下调miR-4262对肺癌细胞A549转移潜能的影响及机制。方法qRT-PCR检测肺癌细胞中miR-4262表达变化。在肺癌细胞A549中转染miR-4262 inhibitor,MTT测定细胞增殖能力,Transwell小室测定细胞侵袭和迁移能力,Western blot测定E-cadherin、vimentin蛋白表达。生物信息学软件预测miR-4262和KLF3的3,UTR端有结合位点,荧光素酶系统鉴定靶向关系。qRT-PCR检测肺癌组织中KLF3 mRNA表达变化,分析其表达水平与miR-4262的相关性。在肺癌细胞A549中转染miR-4262 inhibitor、KLF3 siRNA,检测细胞增殖、侵袭、迁移变化。结果肺癌A549细胞中miR-4262表达水平升高。转染miR-4262 inhibitor后的肺癌细胞A549增殖、侵袭和迁移能力降低,细胞中E-cadherin蛋白表达水平升高,vimentin蛋白表达水平下降。明确miR-4262与KLF3的靶向关系。下调miR-4262上调肺癌细胞A549中KLF3表达。KLF3 siRNA可以逆转miR-4262 inhibitor对肺癌细胞A549增殖、侵袭和迁移的抑制功能。结论下调miR-4262抑制肺癌细胞A549转移潜能,作用机制与靶向上调KLF3的表达有关。

miR-4262在肝癌组织中的表达及对HepG2细胞增殖、侵袭及迁移的影响

目的 探讨miR-4262在肝癌组织和癌旁组织中的表达差异及对HepG2细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法 收集本院2018年以来手术治疗切除后的肝癌组织及癌旁组织20例,采用RT-qPCR检测组织中miR-4262表达水平。按Lipofectamine 3000说明书方法分别将空载质粒和miR-4262 inhibitor、miR-4262 mimic转染到HepG2细胞,应用RT-qPCR检测miR-4262表达,CCK-8法检测细胞存活率,改良Matrigel Boyden室测定法测定细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移力,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 癌旁组织miR-4262表达水平显著高于肝癌组织(P<0.05)。miR-4262 inhibitor能够升高HepG2细胞存活率、迁移能力、侵袭能力,降低HepG2细胞凋亡率和miR-4262水平(P<0.05);miR-4262 mimic能够降低HepG2细胞存活率、迁移能力、侵袭能力,升高HepG2细胞凋亡率和miR-4262水平(P<0.05)。结论 肝癌组织中miR-4262表达水平降低,高表达的miR-4262可抑制HepG2细胞增殖、侵袭和迁移,并促进HepG2细胞凋亡。