芒柄花黄素联合下调miR-4326对肝癌细胞HCCLM3生长和侵袭的影响

目的研究芒柄花黄素联合下调miR-4326对肝癌细胞HCCLM3生长和侵袭的影响和机制。方法RT-qPCR检测各种肝癌细胞中miR-4326表达变化;MTT检测芒柄花黄素对HCCLM3细胞增殖影响;在HCCLM3细胞中转染miR-4326抑制物,并给予芒柄花黄素处理,MTT检测细胞增殖,Transwell小室检测细胞侵袭和迁移,Western blot检测E-cadherin、Vimentin、β-catenin、c-Myc蛋白表达;用Wnt/β-catenin信号通路激活剂处理转染miR-4326抑制物后的HCCLM3细胞,检测细胞增殖、迁移、侵袭变化。结果miR-4326在HCCLM3肝癌细胞中表达较高;芒柄花黄素处理后的HCCLM3细胞增殖能力降低;转染miR-4326抑制物和芒柄花黄素处理能够协同抑制肝癌细胞增殖、侵袭和迁移,提高细胞中E-cadherin蛋白表达,降低细胞中Vimentin、β-catenin、c-Myc蛋白表达;Wnt/β-catenin信号通路激活剂可以逆转芒柄花黄素联合下调miR-4326对HCCLM3细胞增殖、侵袭和迁移的抑制作用。结论芒柄花黄素联合下调miR-4326抑制肝癌细胞HCCLM3生长和侵袭,作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路激活有关。

纳米氧化钕诱导大鼠多器官炎症中miR⁃4326和miR⁃1299的表达及意义

探讨稀土纳米氧化钕(NPs⁃Nd_(2)O_(3))致雄性SD大鼠多器官炎症反应中miR⁃4326、miR⁃1299的表达及意义。将42只健康雄性SD大鼠随机分为对照组和NPs⁃Nd_(2)O_(3)(100 mg/kg)染毒组,采用非暴露式气管内一次性滴注法对大鼠染毒,分别在染毒第7、14和28天后处死大鼠。提取大鼠肺、肝、肾、脾、脑、睾丸组织中的总RNA,利用实时荧光定量PCR检测大鼠各脏器中IL⁃6和TNF⁃α的水平以及MiR⁃4326、MiR⁃1299的水平;Pearson相关分析探讨miR⁃4326、miR⁃1299与TNF⁃α、IL⁃6的相关性;TargetScan、miReap、miRanda网站预测与miR⁃4326和miR⁃1299相互作用的下游靶基因。结果显示NPs⁃Nd_(2)O_(3)染毒7、14、28天后,大鼠肺组织中TNF⁃α、IL⁃6的表达均升高(P<0.05);脑、肝、脾、肾、睾丸组织中TNF⁃α的表达水平均显著上升(P<0.05);大鼠各脏器中的miR⁃4326、miR⁃1299表达水平均明显上调(P<0.05),且与IL⁃6或TNF⁃α的表达呈相关性。KEGG通路富集分析发现,与miR⁃4326作用的mR⁃NAs中有20个mRNAs参与JAK⁃STAT通路,20个mRNAs参与NF⁃κB通路;与miR⁃1299作用的mRNAs中有39个mRNAs参与JAK⁃STAT通路,33个mRNAs参与NF⁃κB通路,1个mRNA同时参与以上两条通路。表明NPs⁃Nd_(2)O_(3)经呼吸道进入大鼠体内可引起大鼠肺、脑、肝、脾、肾、睾丸炎症反应;NPs⁃Nd_(2)O_(3)染毒组大鼠各脏器中miR⁃4326、miR⁃1299表达水平显著上升,并与IL⁃6或TNF⁃α的表达具有相关性;miR⁃4326、miR⁃1299可能通过JAK⁃STAT通路和NF⁃κB通路参与NPs⁃Nd_(2)O_(3)诱导的大鼠多器官炎症反应。