MiR-4739通过下调MIEN1表达抑制胃癌NCI-N87细胞恶性生长和转移的机制

目的:研究miR-4739对胃癌NCI-N87细胞恶性生长和转移的影响及其机制。方法:采用qRT-PCR检测胃黏膜上皮GES-1细胞和胃癌HGC-27、NCI-N87、HS-746T细胞中miR-4739表达水平。在胃癌NCI-N87细胞中转染miR-4739 mimics后,采用CCK-8检测细胞增殖、流式细胞术检测凋亡、Transwell小室检测迁移和侵袭、蛋白质印迹法检测剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(C-caspase-3)、波形蛋白(Vimentin)和上皮性钙黏附素(E-cadherin)的表达。采用在线靶基因预测软件预测miR-4739的靶基因,随后采用荧光素酶报告系统鉴定二者的靶向关系。在胃癌NCI-N87细胞共转染miR-4739 mimics和迁移侵袭增强因子1(MIEN1)过表达载体pcDNA-MIEN1后,检测细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力以及C-caspase-3、Vimentin和E-cadherin表达情况。结果:胃癌HGC-27、NCI-N87、HS-746T细胞中miR-4739表达水平均低于胃黏膜上皮GES-1细胞,差异均有统计学意义(P<0.05)。胃癌NCI-N87细胞转染miR-4739 mimics后,与转染miR-mimics-NC相比,细胞增殖、迁移、侵袭能力降低,细胞凋亡率升高,E-cadherin、C-caspase-3蛋白表达水平升高,Vimentin蛋白表达水平下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-4739可靶向抑制MIEN1表达。胃癌NCI-N87细胞共转染miR-4739 mimics和pcDNA-MIEN1后,与共转染miR-4739 mimics和pcDNA相比,细胞增殖、迁移、侵袭能力升高,细胞凋亡率降低,E-cadherin、C-caspase-3蛋白表达水平减少,Vimentin蛋白表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:MiR-4739可通过靶向抑制MIEN1表达阻碍胃癌NCI-N87细胞的恶性生长和转移潜能。

免疫性血小板减少症患儿外周血miR-320c、miR-4739和miR-3162-3p的表达及其临床意义

目的:探讨免疫性血小板减少症(ITP)患儿血清miR-320c、miR-4739和miR-3162-3p的表达水平及其临床意义。方法:收集2019年8月~2021年8月青岛大学附属医院收治的96例ITP患儿作为ITP组,另在本院体检中心收集100例性别、年龄相匹配的健康儿童作为对照组。所有患儿行常规血小板检查,采用逆转录–聚合酶链式反应(RT-PCR)检测外周血miR-320c、miR-4739和miR-3162-3p表达水平。比较miR-320c、miR-4739和miR-3162-3p单独检测与联合检测对ITP的诊断价值。结果:与对照组比较,ITP组患儿PLT、PCT水平显著降低,MPV、PDW水平显著增加,差异具有统计学意义(P 【0.05)。RT-PCR结果显示,与对照组比较,ITP组患儿外周血miR-320c和miR-4739表达显著增加,miR-3162-3p表达显著降低,差异具有统计学意义(P 【0.05)。绘制ROC曲线结果显示,miR-320c单独检测诊断ITP的曲线下面积(AUC)为0.782,95%CI为0.733~0.831;miR-4739单独检测诊断ITP的AUC为0.774,95%CI为0.678~0.799;miR-3162-3p单独检测诊断ITP的AUC为0.739,95%CI为0.723~0.826;三者联合诊断的AUC为0.844,95%CI为0.813~0.875;联合诊断AUC大于单独诊断,差异具有统计学意义(P 【0.05)。结论:ITP患儿外周血血清miR-320c、miR-4739和miR-3162-3p表达异常,其表达水平可用于检测ITP,且三者联合检测,诊断价值更高,可作为早期诊断儿童ITP的生物标志物。