miR-492对非小细胞肺癌细胞迁移及侵袭能力的影响

目的:探讨miR-492对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞迁移和侵袭能力的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:RT-qPCR检测NSCLC组织及细胞株(Calu-1、A549、H1650和H1299)中miR-492的表达。A549细胞瞬时转染miR-492 mimics或miR-492 inhibitors,并通过划痕实验及Transwell实验检测细胞的迁移及侵袭能力。双荧光素酶实验证实miR-492调控的靶基因。结果:NSCLC组织及细胞株中miR-492表达明显升高。将miR-492 mimics转染A549细胞后,细胞的迁移和侵袭能力明显增强。将miR-492 inhibitors转染A549细胞后,细胞的迁移和侵袭能力明显减弱。PTPN9是miR-492的直接靶基因。结论:miR-492可能通过调节靶基因PTPN9,从而促进NSCLC细胞的迁移和侵袭。

miR-492、CD147在结肠癌细胞LS174T奥沙利铂耐药中的作用

目的:探讨miR-492、CD 147在结肠癌细胞LS174T奥沙利铂(L-OHP)耐药中的作用。方法:采用浓度递增法建立获得性L-OHP耐药的人结肠癌细胞耐药模型LS174T/L-OHP;MTT法测定LS174T细胞及LS174T/L-OHP细胞对L-OHP的生长抑制率,分别采用RT-PCR和Western blot方法对LS174T细胞和LS174T/L-OHP细胞行miR-492与CD 147的表达检测。结果:与LS174T细胞相比较,LS174T/L-OHP细胞中miR-492表达减少、CD 147表达增加。结论:miR-492可能通过调节CD 147的表达在结肠癌细胞L-OHP耐药中发挥作用。

miR-492在舌鳞癌增殖与转移中的作用

目的 阐明miR-492在舌鳞癌发生发展及侵袭转移中的作用及机制,评价其作为舌鳞癌生物标志物及预后评估中的作用,为舌鳞癌的治疗提供新的分子靶点。方法 对52例舌鳞癌及24例正常组织样本分析miR-492的表达差异,分析其表达与临床病理特点之间的关系。通过构建miR-492过表达和低表达舌鳞癌细胞系并检测其细胞增殖、侵袭转移,分析miR-492对舌鳞癌细胞生物学行为的影响。结果 miR-492在舌鳞癌组织中表达高于正常组织(P<0.05),过表达miR-492提高了舌鳞癌细胞的增殖(P<0.05)、转移(P<0.05)、侵袭(P<0.05)能力,抑制miR-492的表达可以抑制舌鳞癌细胞的增殖(P<0.05)、侵袭(P<0.05)、转移(P<0.05)能力。结论 miR-492能促进舌鳞癌细胞的增殖、转移和侵袭,促进舌鳞癌发生发展,可以作为舌鳞癌抗癌新标靶。

miR-492在红细胞OK血型抗原表达调控中的作用

目的探讨miR-492是否参与红细胞OK血型抗原表达的转录后调控。方法化学合成2个BSG基因3’UTR片段，分别包含BSGrs8259TT或BSGrs8259AA位点。合成时两端加上XhoI和NotI酶切位点，克隆至pUC57载体，随后构建至psiCHECK-2载体，测序验证。分别将不同浓度的miR-492mimic与构建的psiCHECK2-BSG-T或psiCHECK2-BSG-A重组质粒共转染K562细胞，设置空白对照，各转染实验重复3次。利用双荧光素酶报告基因检测试剂盒测定海肾荧光素酶活性，并按萤火虫荧光素酶活性进行均一化处理，数据统计分析。结果测序结果显示，成功构建了分别包含BSGrs8259TT或BSGrs8259AA位点的重组psiCHECK-2质粒。双荧光素酶报告基因检测结果表明，miR-492mimic浓度大于100nmol／L时，对psiCHECK2-BSG-T有显著抑制作用。而mir-492mimic对psiCHECK-BSG-A无抑制作用。结论miR-492可能参与了调控BSGrs8259TT基因型个体红细胞0K抗原的表达。

肺炎支原体感染诱发哮喘患儿外周血miR-33a与miR-222-3p及miR-492表达水平及意义

目的分析肺炎支原体(MP)感染诱发哮喘患儿外周血miR-33a、miR-222-3p、miR-492表达水平及意义。方法选取重庆大学附属三峡医院MP感染患儿345例,依据是否诱发哮喘分为诱发组、未诱发组,比较其外周血miR-33a、miR-222-3p、miR-492表达水平,比较诱发组中不同MP-IgM滴度、哮喘发作分期患儿的miR-33a、miR-222-3p、miR-492表达水平,并分析上述指标与哮喘发作期、MP-IgM滴度的相关性,经Logistic回归法分析MP诱发哮喘的独立危险因素。结果诱发组外周血miR-33a表达水平低于未诱发组,而miR-222-3p、miR-492表达水平高于未诱发组(P<0.05);MP感染诱发哮喘患儿中,MP-IgM高滴度患儿miR-33a表达水平低于低滴度、中滴度患儿,而miR-222-3p、miR-492水平高于低滴度、中滴度患儿,低滴度、中滴度患儿的miR-33a、miR-222-3p、miR-492水平差异也有统计学意义(P<0.05);哮喘急性发作期患儿miR-33a水平低于缓解期患儿,而miR-222-3p、miR-492水平高于缓解期患儿(P<0.05);相关分析发现,MP感染诱发哮喘患儿的miR-33a水平与MP-IgM滴度、哮喘急性发作均呈负相关,miR-222-3p、miR-492水平与MP-IgM滴度、哮喘急性发作均呈正相关(P<0.05);过敏史、家族鼻炎/哮喘史、接受雾化治疗、miR-222-3p、miR-492为MP诱发哮喘的独立危险因素,而miR-33a为保护因素(P<0.05)。结论MP感染诱发哮喘患儿外周血miR-33a呈低表达,而miR-222-3p、miR-492呈高表达,且三者与MP-IgM滴度、哮喘发作分期有一定关联。

miR⁃492表达下调促进CD44介导的恶性胶质瘤细胞迁移

目的:探讨miR⁃492对恶性胶质瘤细胞迁移的影响及分子机制。方法:利用miRNA芯片检测恶性胶质瘤组织中miRNAs的表达谱,real time RT⁃PCR验证miR⁃492在恶性胶质瘤组织中的表达;用miR⁃492 mimics转染人恶性胶质瘤细胞系U87细胞,Transwell试验检测U87细胞迁移能力;利用生物信息学方法筛选miR⁃492的下游靶基因并在U87细胞中验证;Western Blot检测恶性胶质瘤中白细胞分化抗原44(CD44)蛋白的表达,并用皮尔逊相关系数分析恶性胶质瘤组织中miR⁃492和CD44的表达的相关性。结果:与癌旁组织相比,恶性胶质瘤组织中miR⁃492表达下调。miR⁃492 mimics转染可抑制U87细胞转移,同时降低CD44的表达;恶性胶质瘤组织中miR⁃492和CD44的表达呈负相关。结论:我们鉴定了miR⁃492及其靶分子CD44作为对恶性胶质瘤转移有重要作用的调节因子。miR⁃492有望成为恶性胶质瘤的一个有前途的新治疗靶点和生物标志物。

外周血单个核细胞miRNA-492和miRNA-155水平表达与SNAPPE-Ⅱ评分对儿童急性呼吸窘迫综合征预后价值研究

目的探究外周血单个核细胞miR-492和miR-155表达水平与新生儿急性生理学评分围产期补充Ⅱ评分(score for neonatal acute physiology perinatal extension,SNAPPE-Ⅱ)评价儿童急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)预后的价值。方法选取2019年9月~2020年11月兖矿新里程总医院及山东大学齐鲁儿童医院收治的ARDS患儿70例,分为死亡组(n=18)和存活组(n=52),同期健康体检儿童36例为对照组。比较三组miR-492,miR-155,氧合指数(PaO_(2)/FiO_(2)),SNAPPE-Ⅱ评分及急性生理与慢性健康(acute physiology and chronic health evaluationⅡ,APACHEⅡ)评分。分析3个指标与PaO_(2)/FiO_(2)和APACHEⅡ评分间的相关性及预测死亡的价值。结果三组儿童PaO_(2)/FiO_(2)(448.64±85.54,269.64±31.53,165.64±27.63 mmHg),APACHEⅡ评分(5.74±1.42,20.54±4.29,29.65±5.43分)、SNAPPE-Ⅱ评分(5.95±1.75,15.86±3.75,36.45±5.32分)、miR-492(3.75±0.98,5.63±1.41,9.54±2.25)和miR-155(1.75±0.95,3.84±0.53,5.64±1.74)水平比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。ARDS存活组与ARDS死亡组患儿PaO_(2)/FiO_(2),APACHEⅡ评分、SNAPPE-Ⅱ评分、miR-492,miR-155水平比较,差异均有统计学意义(t=9.245~16.546,均P<0.001)。PaO_(2)/FiO_(2)与miR-492,miR-155和SNAPPE-Ⅱ评分呈负相关(r=-0.584,-0.623,-0.594,均P<0.05);APACHEⅡ评分与miR-492,miR-155和SNAPPE-Ⅱ评分呈正相关(r=0.863,0.868,0.757,均P<0.05)。三指标联合预测死亡诊断效能高于单一指标,临界值miR-492为0.84,miR-155为1.43,SNAPPE-Ⅱ评分为22.8。结论miR-492,miR-155和SNAPPE-Ⅱ评分联合检测能够有效预测ARDS患儿预后,当miR-492>0.84,miR-155>1.43和SNAPPE-Ⅱ评分>22.8分时,ARDS患儿的死亡率较高。