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环状RNA circ-TNRC6A靶向miR-494-3p抑制膀胱癌细胞增殖和迁移
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作者 翁彪 唐迪 +1 位作者 彭善君 李洋 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第11期1289-1294,共6页
目的探讨环状RNA circ-TNRC6A在膀胱癌组织中的表达水平及其调控膀胱癌细胞增殖和迁移的作用机制。方法采用癌症基因组图谱数据库分析circ-TNRC6A在膀胱癌组织中的表达水平及其与膀胱癌患者临床分期的关系。实时荧光定量PCR(qPCR)分析ci... 目的探讨环状RNA circ-TNRC6A在膀胱癌组织中的表达水平及其调控膀胱癌细胞增殖和迁移的作用机制。方法采用癌症基因组图谱数据库分析circ-TNRC6A在膀胱癌组织中的表达水平及其与膀胱癌患者临床分期的关系。实时荧光定量PCR(qPCR)分析circ-TNRC6A在人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1和膀胱癌细胞系(MGH-U3、5637、RT-4、T24、J82)中的表达水平。在膀胱癌5637细胞中分别转染circ-TNRC6A质粒(circ-TNRC6A组)和对照质粒(NC组),细胞克隆形成实验和细胞划痕实验分别检测circ-TNRC6A对膀胱癌细胞增殖和迁移的影响。生物信息学技术预测并采用荧光素酶报告基因实验证实circ-TNRC6A和微小RNA(miR)-494-3p的靶向关系。qPCR检测circ-TNRC6A对miR-494-3p表达的影响。蛋白质印迹法检测circ-TNRC6A对Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路关键蛋白表达的影响。结果与癌旁组织比较,circ-TNRC6A在膀胱癌组织中低表达(P<0.01)。circ-TNRC6A表达水平与膀胱癌患者临床分期有关(P<0.05)。与SV-HUC-1细胞比较,circ-TNRC6A在膀胱癌细胞系中低表达(均P<0.05),5637细胞中circ-TNRC6A表达水平最低(P<0.01)。与NC组比较,过表达circ-TNRC6A可抑制5637细胞的增殖(P<0.01),并降低细胞的迁移能力(P<0.01)。circ-TNRC6A能够靶向结合miR-494-3p(P<0.01)。与NC组比较,过表达circ-TNRC6A组降低miR-494-3p表达水平(P<0.01),并抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活(P<0.01)。结论circ-TNRC6A靶向下调miR-494-3p抑制膀胱癌细胞的增殖和迁移,circ-TNRC6A可能成为膀胱癌新的治疗靶点。 展开更多
关键词 膀胱癌 circ-TNRC6A 微小RNA-494-3p 细胞增殖 细胞迁移
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miR-494-3p靶向调控RCAN1对高糖诱导的足细胞损伤的影响
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作者 郭晓莉 杜燕 +1 位作者 李莎莎 袁二磊 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第8期711-717,共7页
目的 探讨miR-494-3p对高糖(HG)诱导的小鼠肾足细胞(MPC5)损伤的影响及其对钙调磷酸酶调节蛋白1 (RCAN1)的调控作用。方法 HG诱导MPC5细胞建立细胞损伤模型,随机分为NC组、HG组、HG+anti-miR-NC组、HG+anti-miR-494-3p组、HG+pcDNA组、H... 目的 探讨miR-494-3p对高糖(HG)诱导的小鼠肾足细胞(MPC5)损伤的影响及其对钙调磷酸酶调节蛋白1 (RCAN1)的调控作用。方法 HG诱导MPC5细胞建立细胞损伤模型,随机分为NC组、HG组、HG+anti-miR-NC组、HG+anti-miR-494-3p组、HG+pcDNA组、HG+RCAN1组、HG+anti-miR-494-3p+si-NC组、HG+anti-miR-494-3p+si-RCAN1组。采用实时PCR (qRT-PCR)检测miR-494-3p、RCAN1 mRNA表达量;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA法检测白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)水平;双荧光素酶报告实验检测miR-494-3p mimic对Wt-RCAN1荧光素酶活性的影响;Western blotting检测RCAN1蛋白表达量。结果与NC组比较,HG组miR-494-3p表达量升高,凋亡率、IL-1β、TNF-α水平升高,RCAN1 mRNA及蛋白水平降低(P <0.05);与HG+anti-miR-NC组比较,HG+anti-miR-494-3p组凋亡率、IL-1β、TNF-α水平降低(P <0.05);miR-494-3p mimic可降低Wt-RCAN1荧光素酶活性(P <0.05);与HG+pcDNA组比较,HG+RCAN1组凋亡率、IL-1β、TNF-α水平降低(P <0.05);与HG+anti-mi R-NC+si-NC组比较,HG+anti-miR-494-3p+si-RCAN1组凋亡率、IL-1β、TNF-α水平升高(P <0.05)。结论 沉默miR-494-3p可通过促进RCAN1表达抑制MPC5细胞凋亡、炎症反应,从而减轻HG诱导的MPC5细胞损伤。 展开更多
关键词 mir-494-3p 钙调磷酸酶调节蛋白1 足细胞 炎症 细胞凋亡
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LncRNA SNHG8通过抑制miR-494-3p表达减轻脑缺血再灌注损伤
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作者 曹天然 刘青芳 +1 位作者 潘美民 张雪红 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2015-2022,共8页
目的探究LncRNASNHG8调控miR-494-3p表达减轻脑缺血再灌注损伤的发生机制。方法构建小鼠脑缺血再灌注损伤模型,通过TTC染色检测梗死面积,ELISA检测脑组织中炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α含量,RT-qPCR检测脑组织中LncRNASNHG8和miR-494-3... 目的探究LncRNASNHG8调控miR-494-3p表达减轻脑缺血再灌注损伤的发生机制。方法构建小鼠脑缺血再灌注损伤模型,通过TTC染色检测梗死面积,ELISA检测脑组织中炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α含量,RT-qPCR检测脑组织中LncRNASNHG8和miR-494-3p的表达。构建过表达LncRNASNHG8的OGD/R模型小胶质细胞,细胞分为OGD/R+oe-NC组或OGD/R+oe-SNHG8组,并通过ELISA和流式细胞术检测细胞的炎症反应和凋亡情况。双荧光素酶实验验证LncRNA SNHG8和miR-494-3p的靶向关系。在oe-SNHG8的OGD/R模型小胶质细胞中进一步过表达miR-494-3p,细胞分为OGD/R+oe-SNHG8+mimicNC组或OGD/R+oe-SNHG8+miR-494-3pmimic组,检测细胞炎症反应和凋亡的变化。结果小鼠脑缺血再灌注损伤模型中,脑组织出现明显的梗死区,炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的含量明显增加(P<0.001),lncRNASNHG8低表达(P<0.01),而miR-494-3p高表达(P<0.01)。过表达LncRNASNHG8明显抑制OGD/R模型小胶质细胞的炎症反应和凋亡(P<0.01)。过表达LncRNASNHG8能抑制miR-494-3p的表达(P<0.01)。在oe-SNHG8的OGD/R模型小胶质细胞中进一步过表达miR-494-3p,部分促进细胞的炎症反应和凋亡(P<0.05)。结论LncRNASNHG8通过抑制miR-494-3p表达,抑制炎症反应和细胞凋亡,从而改善脑缺血再灌注损伤。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注损伤 LncRNASNHG8 mir-494-3p 炎症反应 细胞凋亡
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LncRNA IQCH-AS1调节miR-494-3p/ARID1A轴抑制孕激素耐药的子宫内膜癌细胞增殖
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作者 强贤 欧阳俊 +1 位作者 王海珍 葛素梅 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第18期3335-3341,共7页
目的:探讨LncRNA IQCH-AS1调节miR-494-3p/ARID1A轴对孕激素耐药的子宫内膜癌(EC)细胞增殖、凋亡的影响。方法:体外培养Ishikawa细胞,构建EC孕激素耐药细胞株Ishikawa/醋酸甲羟孕酮(MPA),MTT法验证Ishikawa/MPA细胞的耐药性;qRT-PCR法检... 目的:探讨LncRNA IQCH-AS1调节miR-494-3p/ARID1A轴对孕激素耐药的子宫内膜癌(EC)细胞增殖、凋亡的影响。方法:体外培养Ishikawa细胞,构建EC孕激素耐药细胞株Ishikawa/醋酸甲羟孕酮(MPA),MTT法验证Ishikawa/MPA细胞的耐药性;qRT-PCR法检测Ishikawa细胞和Ishikawa/MPA细胞中孕激素受体(PR)、LncRNA IQCH-AS1、miR-494-3p和ARID1A mRNA表达。双荧光素酶报告基因实验、RNA pull-down实验验证Ishikawa/MPA细胞中LncRNA IQCH-AS1、miR-494-3p和ARID1A间靶向关系。Ishikawa/MPA细胞分为Ad-NC组、Ad-IQCH-AS1组、Ad-IQCH-AS1+miR-NC组和Ad-IQCH-AS1+miR-494-3p组,qRT-PCR法检测LncRNA IQCH-AS1、miR-494-3p、ARID1AmRNA、PR mRNA表达;MTT检测细胞增殖活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测ARID1A、PR、CyclinD1、CDK4、cleaved-caspase-3、cleaved-PARP蛋白表达。裸鼠成瘤实验观察LncRNA IQCH-AS1对Ishikawa/MPA细胞裸鼠移植瘤生长和MPA耐药性的影响。结果:本研究构建的Ishikawa/MPA细胞耐药指数为4.33。Ishikawa/MPA细胞中PR mRNA、LncRNA IQCH-AS1和ARID1A mRNA低表达,而miR-494-3p高表达(P<0.05)。经验证,Ishikawa/MPA细胞中miR-494-3p与LncRNA IQCH-AS1、ARID1A均存在靶向关系。Ishikawa/MPA细胞中过表达LncRNA IQCH-AS1能够下调miR-494-3p表达,同时上调ARID1A、PR mRNA和蛋白表达,降低细胞存活率和CyclinD1、CDK4蛋白表达,提高细胞凋亡率和cleaved-caspase-3、cleaved-PARP蛋白表达(P<0.05);而过表达miR-494-3p可减弱过表达LncRNA IQCH-AS1对ARID1A、PR表达以及细胞增殖、凋亡的影响。此外,过表达LncRNA IQCH-AS1可抑制Ishikawa/MPA细胞的裸鼠移植瘤生长,并降低MPA耐药性。结论:LncRNA IQCH-AS1调节miR-494-3p/ARID1A轴抑制孕激素耐药的EC细胞增殖,并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 LncRNA IQCH-AS1 mir-494-3p ARID1A 孕激素 耐药性 子宫内膜癌
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miR-494-3p在胃癌患者血清外泌体中的表达及价值
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作者 李金昌 王俊壹 +1 位作者 张其德 顾万建 《临床检验杂志》 CAS 2023年第7期508-511,共4页
目的探究微小RNA-494-3p(miR-494-3p)在胃癌患者血清外泌体中的表达水平及临床意义。方法采用TaqMan探针法RT-qPCR检测44例胃癌患者和44例健康人对照组血清外泌体中miR-494-3p的表达水平,采用ROC曲线分析并评估其对胃癌的鉴别诊断价值... 目的探究微小RNA-494-3p(miR-494-3p)在胃癌患者血清外泌体中的表达水平及临床意义。方法采用TaqMan探针法RT-qPCR检测44例胃癌患者和44例健康人对照组血清外泌体中miR-494-3p的表达水平,采用ROC曲线分析并评估其对胃癌的鉴别诊断价值。同时,在14例胃癌组织和16例胃良性疾病对照患者胃组织中进行进一步验证。结果与健康人对照组(1.00±0.36)相比,胃癌组血清外泌体中miR-494-3p的相对表达水平(0.21±0.03)显著降低,差异有统计学意义(Z=3.64,P<0.01);胃癌组织中miR-494-3p的相对表达水平(0.22±0.07)亦显著低于胃良性疾病对照组(1.00±0.39),差异有统计学意义(Z=2.66,P<0.01)。血清外泌体miR-494-3p筛查胃癌和健康人的ROC曲线下面积(AUC ROC)为0.725(95%CI:0.622~0.829,P<0.01),当cut-off值为0.370时,其敏感性为50.0%,特异性为86.4%,阳性预测值为63.3%,阴性预测值为78.6%,准确性为68.2%。结论miR-494-3p在胃癌患者血清外泌体中呈低表达,有望成为胃癌筛查和辅助鉴别诊断的潜在生物学标志物。 展开更多
关键词 外泌体 微小RNA-494-3p 胃癌
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LINC00355调控miR-494-3p/CCND2对前列腺癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响 被引量:6
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作者 张建育 李毅宁 +1 位作者 郭一泓 穆鑫 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期564-570,共7页
目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA LINC00355)对前列腺癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响及其作用机制。方法:qRT-PCR检测前列腺癌组织及癌旁组织中LINC00355、miR-494-3p、细胞周期蛋白HD2(CCND2)mRNA的表达水平;体外培养前列腺癌细胞DU145,... 目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA LINC00355)对前列腺癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响及其作用机制。方法:qRT-PCR检测前列腺癌组织及癌旁组织中LINC00355、miR-494-3p、细胞周期蛋白HD2(CCND2)mRNA的表达水平;体外培养前列腺癌细胞DU145,分别将si-NC、si-LINC00355、si-LINC00355与anti-miR-NC、si-LINC00355与anti-miR-494-3p、si-LINC00355与miR-NC、si-LINC00355与miR-494-3p mimics共转染至DU145细胞。MTT检测细胞增殖;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告实验验证LINC00355与miR-494-3p的靶向调控作用以及miR-494-3p与CCND2的靶向调控作用;Western blot检测CCND2、P21、上皮钙黏附素(E-cadherin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白表达量。结果:与癌旁组织相比,前列腺癌组织中LINC00355与CCND2 mRNA的表达水平显著升高(P<0.05),miR-494-3p的表达水平显著降低(P<0.05);与si-NC组、si-LINC00355+miR-NC组相比,si-LINC00355组、si-LINC00355+miR-494-3p组细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05),迁移细胞数与侵袭细胞数显著减少(P<0.05),P21、E-cadherin蛋白水平显著升高(P<0.05),MMP-2蛋白水平显著降低(P<0.05);与si-NC组相比,si-LINC00355组细胞中miR-494-3p的表达水平显著升高(P<0.05),CCND2 mRNA及蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);与si-LINC00355+anti-miR-NC组相比,si-LINC00355+anti-miR-494-3p组细胞增殖抑制率显著降低(P<0.05),迁移细胞数与侵袭细胞数显著增多(P<0.05),P21、E-cadherin蛋白水平显著降低(P<0.05),MMP-2蛋白水平显著升高(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实LINC00355能够靶向结合miR-494-3p, miR-494-3p能够靶向CCND2。结论:LINC00355通过与CCND2竞争结合miR-494-3p,降低miR-494-3p对CCND2表达的抑制作用,从而促进前列腺癌细胞增殖、侵袭、迁移。 展开更多
关键词 LncRNA LINC00355 mir-494-3p CCND2 前列腺癌 增殖 侵袭 迁移
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肿瘤坏死因子-α对3T3-L1脂肪细胞miR-494-3p表达的调控作用
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作者 王玉美 徐广峰 +2 位作者 张佩滢 王圣雯 林小飞 《中国科技期刊数据库 医药》 2021年第12期0137-0139,共3页
探讨TNF-α对3T3-L1脂肪细胞miR-494-3p表达的调控作用。方法:以10ng/mL TNF-α干预3T3-L1成熟脂肪细胞0、4、8、24、48小时,并采用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应方法检测不同时间点miR-494-3p相对表达水平。结果:1.3T3-L1成熟脂肪细... 探讨TNF-α对3T3-L1脂肪细胞miR-494-3p表达的调控作用。方法:以10ng/mL TNF-α干预3T3-L1成熟脂肪细胞0、4、8、24、48小时,并采用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应方法检测不同时间点miR-494-3p相对表达水平。结果:1.3T3-L1成熟脂肪细胞中miR-494-3p相对表达量显著高于前体脂肪细胞,差异有统计学意义(P<0.001)。2.与干预0小时比较,10ng/mL的TNF-α干预3T3-L1成熟脂肪细胞4、8、24、48小时后,miR-494-3p/U6和miR-494-3p/miR-103相对表达量均显著降低,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论:miR-494-3p在3T3-L1成熟脂肪细胞的表达受脂源性细胞因子TNF-α的调控,为miR-494-3p与肥胖相关炎症反应以及脂肪细胞胰岛素敏感性相关性的研究提供理论依据。 展开更多
关键词 TNF-Α 3T3-L1脂肪细胞 mir-494-3p
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尿液外泌体miR-494-3p在急性肾损伤患者中的表达水平及诊断价值 被引量:2
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作者 魏萍 王艳侠 +1 位作者 尹娣 石书梅 《国际检验医学杂志》 CAS 2022年第18期2283-2287,共5页
目的 探讨急性肾损伤(AKI)患者尿液外泌体miR-494-3p的表达水平,并分析其作为生物标志物的临床应用价值。方法 收集2019年1月至2021年12月该院131例新诊断未经治疗的AKI患者和96例健康对照者。提取尿液外泌体,随机将其纳入训练集(48例AK... 目的 探讨急性肾损伤(AKI)患者尿液外泌体miR-494-3p的表达水平,并分析其作为生物标志物的临床应用价值。方法 收集2019年1月至2021年12月该院131例新诊断未经治疗的AKI患者和96例健康对照者。提取尿液外泌体,随机将其纳入训练集(48例AKI患者和48例健康对照者)和验证集(83例AKI患者和48例健康对照者)。提取RNA,通过实时荧光定量聚合酶链反应检测尿液外泌体中miR-494-3p的相对表达水平,分析其在AKI患者和健康对照者中的差异,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,并计算曲线下面积(AUC)。结果 训练集miR-494-3p在AKI患者和健康对照者尿液中呈差异表达(P<0.05)。训练集尿液外泌体miR-494-3p诊断AKI的AUC为0.740(95%CI:0.640~0.824),灵敏度为68.75%,特异度为75.00%。相对于健康对照者,尿液外泌体miR-494-3p在验证集AKI患者中同样也呈高表达(P<0.05),验证集尿液外泌体miR-494-3p诊断AKI的AUC为0.761(95%CI:0.679~0.831),灵敏度为72.29%,特异度为70.83%。尿液外泌体miR-494-3p相对表达水平与患者年龄、性别及疾病分期无关(P>0.05)。结论 尿液外泌体miR-494-3p在AKI患者中呈高表达,对AKI具有一定的临床诊断价值。 展开更多
关键词 尿液外泌体 急性肾损伤 mir-494-3p 生物标志物
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MiR-494-3p regulates cell proliferation and apoptosis via KLF7 in Schwann cells 被引量:1
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作者 YANGUO PENG WEI LI +2 位作者 SHUIYU CHEN WANGCHUN WU ZHANFANG SHANG 《BIOCELL》 SCIE 2021年第1期57-64,共8页
Peripheral nerve injury is a common neurodegenerative disease,which causes disability and a huge economic burden for patients.MicroRNAs(miRNAs)have been acknowledged as major regulators and therapeutic targets of neur... Peripheral nerve injury is a common neurodegenerative disease,which causes disability and a huge economic burden for patients.MicroRNAs(miRNAs)have been acknowledged as major regulators and therapeutic targets of neurological disease.Thus,the functional studies of miRNAs in neurological disease will contribute to discover new therapeutic targets for peripheral nerve injury.Sprague Dawley rats treated sciatic nerve surgical injury were regarded as peripheral nerve injury model in vivo.The expression of miR-494-3p and Kruppel like factor7(KLF7)were measured by Real-time quantitative polymerase chain reaction(RT-qPCR)assay.In addition,western blot analysis was conducted to measure the protein levels of KLF7,Bax,Bcl-2,and C-caspase 3.Cell viability and apoptosis were detected in Schwann cells by EdU stain and flow cytometry,respectively.The interaction between miR-494-3p and KLF7 was investigated by dual-luciferase reporter assay.The expression of miR-494-3p was reduced at the beginning,but KLF7 was enhanced in Sprague Dawley rats with peripheral nerve injury.Knockdown of miR-494-3p promoted cell proliferation and suppressed apoptosis,while overexpression of miR-494-3p or silencing KLF7 led to opposite results.Moreover,the upregulation of KLF7 attenuated miR-494-3p overexpression-induced suppressive effects on viability and promotion of apoptosis in Schwann cells.MiR-494-3p negatively regulates KLF7 in Schwann cells to mediate proliferation and apoptosis. 展开更多
关键词 peripheral nerve injury mir-494-3p KLF7 Schwann cells
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前列腺癌组织中LncRNA LINC00355、miR-494-3p、CCND2的表达及临床意义
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作者 解丹丹 夏磊 +1 位作者 李松果 潘献柱 《中国医药导报》 CAS 2022年第11期123-126,共4页
目的探讨前列腺癌组织中长链非编码RNA(LncRNA)LINC00355、微小RNA-494-3p(miRNA-494-3p)、细胞周期素D2(CCND2)的表达及临床意义。方法选取安徽省第二人民医院2015年1月至2017年12月收治的91例前列腺癌患者,qRT-PCR检测患者癌组织和癌... 目的探讨前列腺癌组织中长链非编码RNA(LncRNA)LINC00355、微小RNA-494-3p(miRNA-494-3p)、细胞周期素D2(CCND2)的表达及临床意义。方法选取安徽省第二人民医院2015年1月至2017年12月收治的91例前列腺癌患者,qRT-PCR检测患者癌组织和癌旁正常组织中LncRNA LINC00355、miR-494-3p、CCND2 mRNA表达。Kaplan-Meier曲线分析不同LncRNA LINC00355、miR-494-3p、CCND2 mRNA表达前列腺癌患者的术后3年生存率。结果前列腺癌组织中LncRNA LINC00355、CCND2 mRNA表达高于癌旁正常组织,miR-494-3p表达低于癌旁正常组织(P<0.05)。前列腺癌组织中LncRNA LINC00355与miR-494-3p表达呈负相关,与CCND2 mRNA表达呈正相关(r=-0.502、0.458,P<0.001),miR-494-3p与CCND2 mRNA表达呈负相关(r=-0.493,P<0.001)。LncRNA LINC00355高表达、miR-494-3p低表达、CCND2 mRNA高表达患者术后3年总生存率低于LncRNA LINC00355低表达、miR-494-3p高表达、CCND2 mRNA低表达患者(P<0.05)。结论前列腺癌组织中LncRNA LINC00355、CCND2表达上调,miR-494-3p表达下调,LncRNA LINC00355可能通过抑制miR-494-3p上调CCND2表达,促进前列腺癌进展。 展开更多
关键词 前列腺癌 长链非编码RNA LINC00355 微小RNA-494-3p
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miR-141-3p对腰椎间盘突出症大鼠背根神经节炎症及下肢疼痛的抑制和改善作用 被引量:2
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作者 许刚 张长春 +2 位作者 朱坤 叶雨辰 周平辉 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第16期2593-2598,共6页
背景:研究表明,胰岛素样生长因子1/血小板源性生长因子有抑制纤维环细胞凋亡的作用。miR-141-3p微小RNA在骨髓基质细胞中随着年龄的增加而增加,且与炎症信号通路的活化存在一定关系,提示其可能成为腰椎间盘突出症的治疗靶点。目的:探究m... 背景:研究表明,胰岛素样生长因子1/血小板源性生长因子有抑制纤维环细胞凋亡的作用。miR-141-3p微小RNA在骨髓基质细胞中随着年龄的增加而增加,且与炎症信号通路的活化存在一定关系,提示其可能成为腰椎间盘突出症的治疗靶点。目的:探究miR-141-3p通过调控胰岛素样生长因子1/血小板源性生长因子对腰椎间盘突出症大鼠背根神经节炎症及下肢疼痛的影响。方法:选取50只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、miR-NC组、miR-141-3p inhibitor组、miR-141-3p mimics组,每组10只。除正常组外,其余大鼠采用自体髓核移植法进行腰椎间盘突出症建模。建模成功后,对miR-NC组、miR-141-3p inhibitor组和miR-141-3p mimics组大鼠鞘内分别注射10μL 20μmol/L miR-NC,miR-141-3p inhibitor,miR-141-3p mimics,均每天注射1次,连续注射28 d;正常组、模型组同期同位置注射同体积生理盐水。采用热缩足潜伏期阈值评价大鼠下肢疼痛,实时荧光定量PCR检测背根神经节组织miR-141-3p mRNA表达,ELISA法检测背根神经节组织炎症因子,免疫印迹法检测背根神经节组织胰岛素样生长因子1/血小板源性生长因子蛋白表达,并分析miR-141-3p与胰岛素样生长因子1/血小板源性生长因子的相关性。结果与结论:miR-NC组各项指标与模型组比较,差异均无显著性意义。①大鼠热缩足潜伏期阈值:模型组明显低于正常组(P<0.05),miR-141-3p inhibitor组明显低于miR-NC组(P<0.05),miR-141-3p mimics组明显高于miR-141-3p inhibitor组(P<0.05)。②背根神经节组织miR-141-3p mRNA表达:模型组明显低于正常组(P<0.05),miR-141-3p inhibitor组明显低于miR-NC组(P<0.05),miR-141-3p mimics组明显高于miR-141-3p inhibitor组(P<0.05)。③背根神经节组织肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素1含量:模型组明显高于正常组(P<0.05),miR-141-3p inhibitor组明显高于miR-NC组(P<0.05),miR-141-3p mimics组明显低于miR-141-3p inhibitor组(P<0.05)。④背根神经节组织胰岛素样生长因子1、血小板源性生长因子蛋白表达:模型组明显低于正常组(P<0.05),miR-141-3p inhibitor组明显低于miR-NC组(P<0.05),miR-141-3p mimics组明显高于miR-141-3p inhibitor组(P<0.05)。⑤胰岛素样生长因子1与miR-141-3p呈正相关(r=0.904,P<0.001),血小板源性生长因子与miR-141-3p呈正相关(r=0.879,P<0.001)。⑥结论:miR-141-3p可显著改善腰椎间盘突出症大鼠下肢疼痛,抑制背根神经节炎症,其机制可能与促进胰岛素样生长因子1/血小板源性生长因子表达有关。 展开更多
关键词 mir-141-3p IGF-1/pDGF 腰椎间盘突出症 背根神经节炎症 下肢疼痛
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miR-132-3p/CAMTA1对I-125粒子处理的面神经损伤大鼠施万细胞的调控作用
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作者 朱瑾 欧阳欣 +4 位作者 刘屿 钱叶梅 夏斌 施延安 俞力夫 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期571-577,共7页
目的探讨miR-132-3p通过钙调素结合转录因子1(CAMTA1)对I-125粒子处理的面神经损伤大鼠(FNI)中施万细胞的调控作用。方法用I-125粒子辐射大鼠施万细胞,并在细胞中转染miR-132-3p mimic、miR-132-3p inhibitor以及sh-CAMTA1。免疫荧光检... 目的探讨miR-132-3p通过钙调素结合转录因子1(CAMTA1)对I-125粒子处理的面神经损伤大鼠(FNI)中施万细胞的调控作用。方法用I-125粒子辐射大鼠施万细胞,并在细胞中转染miR-132-3p mimic、miR-132-3p inhibitor以及sh-CAMTA1。免疫荧光检测S100B和β-TubulinⅢ荧光强度。RT-qPCR检测miR-132-3p的表达,Western blot检测CAMTA1蛋白表达。EdU染色评估细胞增殖,Transwell检测细胞迁移。同时,构建FNI大鼠模型并在大鼠面部植入I-125粒子,HE、LFB染色以及IF染色评估大鼠面神经组织的病理损伤。StarBase v2.0数据库和双荧光素酶报告实验验证miR-132-3p和CAMTA1的靶向关系。结果S100B和β-TubulinⅢ在大鼠施万细胞中显著表达。I-125粒子辐射组中miR-132-3p表达降低(P<0.001),抑制细胞的增殖(P<0.001)和迁移(P<0.001)。过表达miR-132-3p或敲降CAMTA1显著促进施万细胞的增殖(P<0.001)和迁移(P<0.05),敲降miR-132-3p则具有相反的作用。机制研究显示,miR-132-3p靶向负调控CAMTA1。体内实验结果显示,过表达miR-132-3p通过抑制CAMTA1的蛋白表达,减弱I-125粒子对FNI大鼠面神经损伤的促进作用。结论过表达miR-132-3p抑制CAMTA1的表达,促进施万细胞的增殖和迁移,抑制I-125对FNI大鼠面神经损伤的促进作用。 展开更多
关键词 面神经损伤 mir-132-3p 施万细胞 钙调素结合转录因子1 增殖 迁移
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水飞蓟素通过调控miR-124-3p/WEE1轴影响胶质瘤细胞恶性生长的机制研究
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作者 刘明 刘熙鹏 +4 位作者 李淳 张秀峰 曹兵 乔建新 王雪 《中国医科大学学报》 北大核心 2024年第2期142-148,共7页
目的探讨水飞蓟素(SM)对胶质瘤细胞恶性生长的影响以及对miR-124-3p/WEE1轴的调控机制。方法将胶质瘤U87细胞分为对照组,SM低、中、高浓度组,SM高浓度+miR-124-3p抑制剂组(SM高+miR-124-3p inhibitor组)。采用CCK-8法检测细胞增殖活性,T... 目的探讨水飞蓟素(SM)对胶质瘤细胞恶性生长的影响以及对miR-124-3p/WEE1轴的调控机制。方法将胶质瘤U87细胞分为对照组,SM低、中、高浓度组,SM高浓度+miR-124-3p抑制剂组(SM高+miR-124-3p inhibitor组)。采用CCK-8法检测细胞增殖活性,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,流式细胞术检测细胞周期变化,Western blotting检测细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)及凋亡相关蛋白的表达,实时定量PCR检测细胞中miR-124-3p和WEE1 mRNA水平,荧光素酶活性实验验证miR-124-3p和WEE1之间的靶向关系,建立NOD/SCID小鼠颅内移植瘤模型并进行给药和分析。结果与对照组比较,不同浓度SM处理组的细胞增殖活性、迁移和侵袭细胞数、cyclin D1蛋白表达、WEE1 mRNA表达水平降低,G0/G1周期细胞数、cleaved caspase-8、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3及miR-124-3p表达升高(P<0.05);进一步转染miR-124-3p inhibitor后发现,SM对胶质瘤细胞恶性行为的抑制作用被逆转。小鼠体内实验显示,SM处理组肿瘤的质量和体积均低于模型组(P<0.05),且小鼠体质量无显著变化(P>0.05)。结论SM可通过上调miR-124-3p靶向下调WEE1抑制胶质瘤细胞的恶性生长。 展开更多
关键词 水飞蓟素 胶质瘤 mir-124-3p/WEE1轴 恶性生长
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miR-152-3p表达下调降低紫杉醇耐药人卵巢癌细胞A2780T对紫杉醇的耐药性
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作者 张洋 赵辰戈 +2 位作者 程荔春 吕慧怡 吴迪 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期22-30,共9页
目的探讨miR-152-3p对紫杉醇耐药人卵巢癌细胞A2780T对紫杉醇耐药性的影响及机制。方法①紫杉醇(1.875,3.75,7.5,17和23μmol·L^(-1))与人卵巢癌A2780和A2780T细胞作用48 h,MTT法检测细胞存活率,计算抑制细胞存活半数抑制浓度(IC50... 目的探讨miR-152-3p对紫杉醇耐药人卵巢癌细胞A2780T对紫杉醇耐药性的影响及机制。方法①紫杉醇(1.875,3.75,7.5,17和23μmol·L^(-1))与人卵巢癌A2780和A2780T细胞作用48 h,MTT法检测细胞存活率,计算抑制细胞存活半数抑制浓度(IC50)值和耐药指数(RI)。Western印迹法检测A2780和A2780T细胞耐药蛋白P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)蛋白表达。②实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测A2780和A2780T细胞miR-152-3p表达水平。脂质体瞬时转染技术转染miR-152-3p抑制物降低A2780T细胞中miR-152-3p表达(miR-152-3p抑制物组),同时设转染miR-152-3p阴性对照组,RT-qPCR检测转染效率,MTT法、划痕实验和流式细胞术分别检测转染miR-152-3p抑制物对A2780T细胞存活、迁移和凋亡的影响;Western印迹法检测转染miR-152-3p抑制物对A2780T细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。③用miRDB,Targetscan,miRWalk和Starbase数据库预测miR-152-3p的靶基因,并用Western印迹法检测转染miR-152-3p抑制物后A2780T细胞磷酸酯酶张力蛋白同源物(PTEN)蛋白表达的变化及RT-qPCR检测A2780和A2780T细胞PTEN mRNA表达水平予以验证。随后,脂质体瞬时转染技术转染PTEN siRNA沉默A2780T细胞中PTEN表达,同时设转染siRNA阴性对照组,RT-qPCR检测转染效率,MTT法检测沉默PTEN表达后A2780T细胞存活率和IC50值,Western印迹法检测P-gp,MRP1和ABCG2蛋白表达。结果①紫杉醇处理后A2780和A2780T细胞存活率均降低(P<0.01),A2780T细胞RI为2.8。与A2780细胞相比,A2780T细胞P-gp,MRP1和ABCG2蛋白高表达(P<0.05,P<0.01)。②与A2780细胞相比,A2780T细胞miR-152-3p明显高表达(P<0.01)。与转染miR-152-3p阴性对照组比较,转染miR-152-3p抑制物后A2780T细胞存活率(P<0.05,P<0.01)和细胞迁移能力(P<0.05)明显降低,细胞凋亡率升高(P<0.01);Bax蛋白表达增加(P<0.01),Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。③生物信息学数据库分析结果提示,PTEN是miR-152-3p的一个靶基因;Western印迹法验证显示,转染miR-152-3p抑制物组A2780T细胞PTEN蛋白表达低于转染miR-152-3p阴性对照组(P<0.05);RT-qPCR结果显示,A2780T细胞PTEN mRNA表达水平高于A2780细胞(P<0.01)。转染PTEN siRNA沉默PTEN表达后,与转染siRNA阴性对照组相比,A2780T细胞存活率(P<0.05,P<0.01)和IC50值(P<0.01)显著降低,P-gp,MRP1和ABCG2蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论miR-152-3p在A2780T细胞中高表达,其表达下调可抑制A2780T细胞增殖和迁移,促进细胞凋亡,降低A2780T细胞对紫杉醇的耐药性,该作用可能是通过降低其靶基因PTEN表达发挥的。 展开更多
关键词 卵巢癌 mir-152-3p 紫杉醇 耐药 细胞增殖 细胞凋亡
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miR-141-3p靶向调控HMGB1对LPS诱导的A549细胞损伤的影响
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作者 龙光文 张谦 +2 位作者 杨秀林 孙鸿鹏 吉春玲 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第1期85-91,共7页
目的探讨miR-141-3p通过靶向调控高迁移率族蛋白1(HMGB1)对脂多糖(LPS)诱导的A549细胞损伤的影响。方法以Ⅱ型肺泡上皮细胞来源的A549细胞作为研究对象,将miR-141-3p mimics、mimics NC、HMGB1基因过表达质粒(pcDNA3.1-HMGB1)和空载质粒... 目的探讨miR-141-3p通过靶向调控高迁移率族蛋白1(HMGB1)对脂多糖(LPS)诱导的A549细胞损伤的影响。方法以Ⅱ型肺泡上皮细胞来源的A549细胞作为研究对象,将miR-141-3p mimics、mimics NC、HMGB1基因过表达质粒(pcDNA3.1-HMGB1)和空载质粒(Vector)分别或共转染至A549细胞中,再采用10μg/ml LPS处理24 h。细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测各组细胞增殖活性;比色法检测各组细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性;流式细胞术检测各组细胞凋亡水平;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组细胞中白介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-141-3p与HMGB1之间的靶向调控关系。结果LPS干预后,A549细胞增殖活性及细胞中miR-141-3p表达水平降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α水平及上清液中LDH活性升高(P<0.05)。过表达miR-141-3p可增强LPS处理后的A549细胞增殖活性(P<0.05),降低细胞凋亡率及细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α水平和上清液中LDH活性(P<0.05)。然而,HMGB1基因过表达可逆转miR-141-3p对LPS诱导A549细胞损伤的改善作用。双荧光素酶报告基因实验证实,HMGB1是miR-141-3p下游靶基因。结论miR-141-3p可抑制LPS诱导的A549细胞凋亡,降低炎症因子表达水平,改善A549细胞损伤,其作用机制可能与靶向调控HMGB1表达有关。 展开更多
关键词 Ⅱ型肺泡上皮细胞 A549 脂多糖 mir-141-3p 高迁移率族蛋白1
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miR-21-3p靶向STAT3促进银屑病角质形成细胞增殖的研究
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作者 王慧琴 谢敏欣 +1 位作者 丁媛 吴卫东 《西部医学》 2024年第5期661-666,共6页
目的探讨miR-21-3p及其靶蛋白信号转导子和转录激活子3蛋白(STAT3)在寻常型银屑病发生过程中角质形成细胞的作用意义。方法对皮肤组织中STAT3蛋白表达情况的检测选择免疫组织化学法,对健康人群皮肤组织及银屑病患者皮损组织miR-21-3p表... 目的探讨miR-21-3p及其靶蛋白信号转导子和转录激活子3蛋白(STAT3)在寻常型银屑病发生过程中角质形成细胞的作用意义。方法对皮肤组织中STAT3蛋白表达情况的检测选择免疫组织化学法,对健康人群皮肤组织及银屑病患者皮损组织miR-21-3p表达量的检测选择实时荧光定量PCR法,靶基因STAT3和miR-21-3p关系的检测选择双荧光素酶报告基因。化学合成miR-21-3p模拟物、抑制剂,瞬时转染HaCaT细胞,对不同分组细胞进行CCK8、流式细胞凋亡实验,探究分析miR-21-3p调控细胞表型主要作用。对于转染细胞中STAT3蛋白表达情况,选择Western Blot检测。结果寻常型银屑病患者皮肤组织中miR-21-3p呈高表达(P<0.05)。STAT3免疫组化阳性表达定位于细胞浆,在银屑病组患者皮损组织阳性表达率为82.22%(37/45)高于正常皮肤组织(P<0.01)。双荧光素酶报告基因显示miR-21-3p与STAT3存在结合,呈靶向关系。miR-21-3p mimics促进HaCaT细胞增殖活性,抑制细胞凋亡;miR-21-3p inhibitor抑制HaCaT细胞的增殖能力,促使细胞趋向凋亡。miR-21-3p转染HaCaT过表达可对STAT3蛋白表达量产生促进,相反则降低(F=48.632,P<0.01)。结论miR-21-3p呈现正调控关系,能够靶向调控STAT3;两者共同作用参与并加重银屑病的病程,并抑制患者细胞凋亡,调节角质形成细胞增殖活性。 展开更多
关键词 角质形成细胞 mir-21-3p STAT3 表达量 银屑病
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小白菊内酯通过LINC00299/miR-590-3p对阿尔茨海默病模型细胞损伤的影响
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作者 王进 霍颖浩 +1 位作者 樊登云 殷立新 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期921-925,共5页
目的探讨小白菊内酯调控LINC00299/微小RNA(miR)-590-3p途径对阿尔茨海默病(AD)模型细胞损伤的影响。方法用Aβ_(1~42)处理SK-N-SH细胞复制AD细胞模型。CCK-8和流式细胞术检测细胞活力和凋亡率。试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱... 目的探讨小白菊内酯调控LINC00299/微小RNA(miR)-590-3p途径对阿尔茨海默病(AD)模型细胞损伤的影响。方法用Aβ_(1~42)处理SK-N-SH细胞复制AD细胞模型。CCK-8和流式细胞术检测细胞活力和凋亡率。试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)活性、丙二醛(MDA)含量。实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测LINC00299和miR-590-3p表达。采用上述方法观察抑制LINC00299对AD模型细胞损伤的影响。双荧光素酶报告实验验证LINC00299和miR-590-3p靶向关系。结果Aβ_(1~42)处理后,SK-N-SH细胞活力、miR-590-3p表达量、SOD活性明显降低,凋亡率、LINC00299表达量、MDA含量、LDH释放量明显升高(P<0.05)。小白菊内酯处理后,Aβ_(1~42)诱导的SK-N-SH细胞活力、miR-590-3p表达量、SOD活性明显升高,凋亡率、LINC00299表达量、MDA含量、LDH释放量明显降低(P<0.05)。LINC00299过表达逆转了小白菊内酯对Aβ_(1~42)诱导的SK-N-SH细胞凋亡和氧化损伤的影响。miR-590-3p与LINC00299序列直接结合。结论小白菊内酯可能通过调控LINC00299/miR-590-3p通路进而保护AD模型细胞损伤。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 小白菊内酯 LINC00299 mir-590-3p 细胞凋亡 氧化应激
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miR-652-3p通过靶向Nptn抑制胶质母细胞瘤的增殖和迁移
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作者 胥敏 陈正楼 +3 位作者 王云江 火旭其 张新化 王宏盛 《临床神经外科杂志》 2024年第1期43-48,53,共7页
目的 探讨miR-652-3p对胶质母细胞瘤(GAM)增殖和迁移的影响。方法 用miR-652-3p模拟物转染胶质母细胞系C6和U87,然后分别通过CCK8、细胞流式、EdU、Transwell和划痕实验研究miR-652-3p对细胞增殖和迁移的影响。利用实时定量聚合酶链反应... 目的 探讨miR-652-3p对胶质母细胞瘤(GAM)增殖和迁移的影响。方法 用miR-652-3p模拟物转染胶质母细胞系C6和U87,然后分别通过CCK8、细胞流式、EdU、Transwell和划痕实验研究miR-652-3p对细胞增殖和迁移的影响。利用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、蛋白质免疫印迹(Western Blot)和双荧光素酶报告基因实验检测miR-652-3p与Neuroplastin(Nptn)的互作关系。通过CCK8、细胞流式、EdU、Transwell和划痕实验研究Nptn对细胞增殖和迁移的影响。结果 miR-652-3p的过表达可以抑制C6和U87细胞的增殖和迁移;双荧光素酶报告基因实验结果表明miR-652-3p可以与Nptn结合,Nptn表达水平受到miR-652-3p水平的影响;干扰Nptn的表达可以抑制C6和U87细胞的增殖和迁移。结论 miR-652-3p通过靶向Nptn抑制GBM的增殖和迁移。 展开更多
关键词 mir-652-3p Nptn 胶质母细胞瘤 增殖 迁移
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LncRNA PURPL调节miR-342-3p/PIK3R1轴对肝癌细胞恶性生物学行为的影响
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作者 王红梅 陈思瑞 杜红 《河北医学》 2024年第1期29-35,共7页
目的:探究长链非编码RNA(PURPL)调节微小RNA-342-3p(miR-342-3p)/磷脂酰肌醇-3激酶调节亚基1(PIK3R1)轴对肝癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:细胞实验:将si-NC、si-PURPL、si-PURPL+inhibitor NC、si-PURPL+miR-342-3p inhibitor分别... 目的:探究长链非编码RNA(PURPL)调节微小RNA-342-3p(miR-342-3p)/磷脂酰肌醇-3激酶调节亚基1(PIK3R1)轴对肝癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:细胞实验:将si-NC、si-PURPL、si-PURPL+inhibitor NC、si-PURPL+miR-342-3p inhibitor分别转染至肝癌细胞Huh-7细胞并命名为si-NC组、si-PURPL组、si-PURPL+inhibitor NC组、si-PURPL+miR-342-3p inhibitor组,未做任何处理的Huh-7细胞记为NC组。双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA PURPL、miR-342-3p、PIK3R1的关系;qRT-PCR检测人正常肝细胞系L02和人肝癌细胞系Huh-7中LncRNA PURPL、miR-342-3p表达;Western blot检测L02细胞、Huh-7细胞PIK3R1蛋白水平;MTT法检测Huh-7细胞增殖情况;流式细胞术检测Huh-7细胞凋亡率;Transwell检测Huh-7细胞侵袭数量;划痕试验测定Huh-7细胞迁移。体内实验:构建裸鼠异种移植模型,分组同细胞实验,检测肿瘤体积和肿瘤重量。结果:细胞实验结果显示:与si-NC组相比,si-PURPL组Huh-7细胞OD490值、划痕愈合率、侵袭细胞数量、LncRNA PURPL、PIK3R1水平显著下降(P<0.05),Huh-7细胞凋亡率、miR-342-3p相对表达量显著升高(P<0.05),而抑制miR-342-3p表达减弱了沉默LncRNA PURPL抑制Huh-7细胞增殖、迁移、侵袭和促进凋亡的效果;LncRNA PURPL负向调控miR-342-3p/PIK3R1轴。体内结果显示:si-PURPL组裸鼠肿瘤体积和质量较si-NC组下降(P<0.05);抑制miR-342-3p表达减弱了沉默LncRNA PURPL对体内肿瘤生长的抑制作用。结论:沉默LncRNA PURPL可抑制Huh-7细胞的恶性生物学行为,其机制可能与调控miR-342-3p/PIK3R1轴有关。 展开更多
关键词 LncRNA pURpL mir-342-3p/pIK3R1轴 肝癌 增殖 凋亡
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多囊卵巢综合征患者卵巢颗粒细胞miR-144-3p及其靶基因PTEN的表达及作用研究
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作者 苏静 张荣雪 +3 位作者 仲纪祥 邱峰龙 贾媛媛 薛惠英 《医学分子生物学杂志》 CAS 2024年第2期154-160,共7页
目的探讨多囊卵巢综合征患者(polycystic ovary syndrome,PCOS)卵巢颗粒细胞miR-144-3p及其靶基因PTEN的表达及作用。方法选取2020年10月至2022年3月在淮安市妇幼保健院生殖医学科行IVF/ICSI治疗的20例PCOS患者作为研究对象即为PCOS组,... 目的探讨多囊卵巢综合征患者(polycystic ovary syndrome,PCOS)卵巢颗粒细胞miR-144-3p及其靶基因PTEN的表达及作用。方法选取2020年10月至2022年3月在淮安市妇幼保健院生殖医学科行IVF/ICSI治疗的20例PCOS患者作为研究对象即为PCOS组,选取行IVF/ICSI治疗的输卵管因素或男方因素患者20例作为对照组。收集两组患者颗粒细胞,并分析颗粒细胞miR-144-3p的表达情况。利用Tar-getScan数据库预测miR-144-3p的靶基因,并采用双荧光素酶活性检测验证靶基因。复苏人卵巢颗粒细胞(ovarian granulosa cells,KGN),转染并建立miR-144-3p模拟物组、模拟物阴性对照组、miR-144-3p抑制物组、抑制物阴性对照组、si-PTEN和siRNA-NC组。采用流式细胞仪检测各组的细胞凋亡情况,RT-PCR及蛋白质印迹技术检测颗粒细胞中miR-144-3p、PTEN mRNA及蛋白的表达情况。结果RT-PCR结果显示P-COS组miR-144-3p表达水平显著低于对照组(P<0.05),流式细胞仪检测结果显示miR-144-3p mimic组的颗粒细胞凋亡百分比显著低于mimic-NC组(P<0.05),miR-144-3p inhibitor组颗粒细胞凋亡水平显著高于inhibitor-NC组(P<0.05)。生物信息学预测miR-144-3p的靶基因为PTEN,荧光素酶结合实验证实miR-144-3p能特异结合PTEN-3′UTR并下调PTEN基因表达。RT-PCR测定结果显示PCOS组PTEN mRNA表达显著高于对照组(P<0.05),且与miR-144-3p表达水平呈负相关(r=-0.91,P<0.001)。qRT-PCR及蛋白质印迹检测结果显示与mimic NC组相比,miR-144-3p mimic组中PTEN mRNA及蛋白表达量显著低于mimic NC组(P<0.05)。miR-144-3p inhibitor组PTEN mRNA及蛋白表达量显著高于inhibitor NC组(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示si-PTEN组颗粒细胞凋亡水平显著低于siRNA-NC组(P<0.05),而miR-144-3p inhibitor+si-PTEN组的颗粒细胞凋亡比例显著低于miR-144-3p inhibitor组(P<0.05)。结论PCOS患者卵巢颗粒细胞miR-144-3p表达水平显著降低,而PTEN基因表达水平显著增高,进而促进PCOS患者卵巢颗粒细胞凋亡。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 卵巢颗粒细胞 凋亡 mir-144-3p pTEN
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