miR-501-5p在宣威地区肺腺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨24例宣威肺腺癌病人癌组织中miR-501-5p的表达与临床病理因素之间的关系及miR-501-5p在宣威地区肺腺癌中的作用。方法收集24例宣威地区肺腺癌患者的癌组织及相应的正常肺标本,提取组织中的微小RNA(microRNA),采用QPCR技术,microRNAs芯片扫描,检测miR-501-5p在肺癌组织和相应正常肺组织的表达量。使用χ2检验对miR-501-5P在宣威地区肺腺癌标本的表达量与临床特征因素(年龄,性别,肺癌分期及术前CEA值)进行统计学分析,运用多重回归分析miR-501-5p表达与临床特征(年龄,肺癌分期及术前CEA值)的关系。结果通过对24对宣威地区肺腺癌配对样本进行microRNA芯片检测和QPCR验证均提示:miR-501-5p在宣威地区肺腺癌中呈上调(P<0.01)。mciroRNA芯片结果(癌vs肺组织)表达差异倍数:3倍(P<0.05,FDR:0.07)。qPCR验证结果(癌vs正常肺组织)表达倍数(x±s):5.702±4.626。χ~2检验芯片miR-501-5p表达量与临床特征结果显示与年龄(f=7.168,P=0.014),肺癌TNM分期(f=36.627,P<0.01)及术前CEA值f=30.045,P<0.01)关系密切;但与性别(f=3.612,P=0.071)无关。在多重回归分析结果提示:miR-501-5p表达量与患者年龄,肺癌TNM分期、血清CEA(癌胚抗原)均呈正相关(P<0.05)。结论 miR-501-5p在宣威地区肺腺癌标本中呈高表达,其与年龄,临床肺癌TNM分期、血清CEA呈显著相关,可能参与宣威地区肺腺癌的发生发展。

miR-501通过下调eIF4E3促进胃癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的 探讨miR-501对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及分子机制。方法 采用qRT-PCR检测miR-501和eIF4E3 mRNA表达,应用Western blot法检测eIF4E3蛋白水平,CCK-8和细胞克隆形成实验检测细胞增殖能力,运用Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭能力,双荧光素酶报告基因实验检测miR-501与eIF4E3的靶向关系。结果 miR-501在胃癌细胞系SGC-7901、BGC-823和MGC-803中表达水平分别是正常胃黏膜上皮细胞GES-1的2.78±0.28、2.51±0.30和1.62±0.14倍(P均<0.05)。TCGA数据库分析显示miR-501在胃癌组织中表达显著高于正常胃组织(P<0.001)。miR-501 mimic转染BGC-823细胞(miR-501组)增殖活性明显高于miRNA无关序列对照(NC组)(P均<0.05);Transwell小室迁移实验miR-501组穿膜细胞数(587±16)个,高于阴性NC组的(396±34)个(P<0.05);Transwell小室侵袭实验miR-501组穿膜细胞数(553±43)个,高于NC组的(398±21)个(P<0.05)。miR-501和野生型eIF4E3载体共转染细胞荧光素酶活性明显降低(P<0.01)。转染miR-501可使eIF4E3 mRNA和蛋白水平显著降低。与siRNA无关序列(NCi组)相比,eIF4E3敲低(eIF4E3-si组)可显著增强BGC-823细胞增殖活性(P<0.05);Transwell小室迁移实验eIF4E3-si组穿膜细胞数(299±32)个,多于阴性NCi组的(182±13)个(P<0.01),Transwell小室侵袭实验也呈相同趋势(P<0.01)。TCGA数据库分析显示eIF4E3 mRNA在正常胃组织中表达显著高于胃癌组织(P<0.001)。结论 miR-501可通过靶向下调抑癌基因eIF4E3表达,促进胃癌细胞增殖、迁移和侵袭能力;miR-501有望成为胃癌治疗的潜在靶点。

猫眼草提取物通过调控miR-501-3p/KPNA4轴影响肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的实验研究

目的探讨猫眼草提取物对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法猫眼草提取物作用于肝癌Hep3B细胞后,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,蛋白印迹(Western blotting)检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、细胞增殖蛋白Ki67、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、E-钙黏附素(E-cadherin)和核周蛋白α4(KPNA4)蛋白表达水平,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-501-3p和KPNA4 mRNA表达水平。转染miR-501-3p模拟物至Hep3B细胞,或猫眼草提取物作用于转染KPNA4过表达载体的Hep3B细胞,上述相同方法检测过表达miR-501-3p或过表达KPNA4对猫眼草提取物处理的Hep3B细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭及相关蛋白表达的影响。双荧光素酶报告基因实验验证miR-501-3p与KPNA4调控关系。结果猫眼草提取物作用Hep3B细胞后,细胞存活率、迁移和侵袭数及CyclinD1、Ki67和MMP-2蛋白表达降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05),miR-501-3p表达升高(P<0.05),KPNA4 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。过表达miR-501-3p后,Hep3B细胞存活率、迁移和侵袭数及CyclinD1、Ki67和MMP-2蛋白表达降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05)。miR-501-3p在Hep3B细胞中靶向负调控KPNA4表达。过表达KPNA4降低了猫眼草提取物对Hep3B细胞增殖、迁移和侵袭及相关蛋白表达的影响。结论猫眼草提取物可能通过调控miR-501-3p/KPNA4轴抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭。

血清miR-501和miR-195检测对宫颈癌临床诊断及预后价值

目的:探究miR-501和miR-195在宫颈癌患者血清中的表达水平及其临床意义。方法:回顾性收集61例宫颈癌患者和35例健康者,测定两组血清中miR-501和miR-195水平及与临床病理特征和生存时长关系。结果:与健康对照组相比,宫颈癌组血清中的miR-501和miR-195表达水平分别呈上调和下调趋势(P<0.05),在血清中表达水平与患者年龄、人乳头瘤病毒感染、肿瘤分化程度等未见差异,与临床TNM分期、淋巴结转移存在差异(P<0.05);miR-501高表达、miR-195低表达可相对延长生存时间(P<0.05)。结论:宫颈癌患者血清中的miR-501和miR-195的表达水平分别呈上升和下降趋势,有望成为辅助诊断宫颈癌及评估预后的标志物。

miR-501靶向BLID介导吉非替尼耐药性非小细胞肺癌的恶性表型

目的探究miR-501在吉非替尼耐药非小细胞肺癌(NSCLC)中的作用和机制。方法采用实时定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)检测吉非替尼耐药性NSCLC血清和细胞系PC9/GR中miR-501的表达水平,通过CCK-8、划痕实验和Transwell实验检测miR-501对PC9/GR的恶性表型的影响;利用在线数据库预测miR-501的潜在靶点,并验证其在PC9/GR的具体作用。结果与健康对照人群和正常人肺上皮细胞系比较,miR-501在吉非替尼耐药性NSCLC患者血清和PC9/GR中表达水平升高,差异有高度统计学意义(P <0.01);与mimics NC比较,miR-501 mimics PC9/GR的增殖、迁移和侵袭能力增加,差异有高度统计学意义(P <0.01);荧光素酶报告基因实验证实BLID是miR-501的直接靶点;与miR-501 mimics+pcDNA3.1比较,miR-501 mimics+pcDNA3.1-BLID PC9/GR的增殖、迁移和侵袭能力下降,差异有高度统计学意义(P <0.01)。结论上调表达的miR-501通过抑制BLID进而促进吉非替尼耐药性NSCLC的增殖、迁移和侵袭能力。因此,miR-501是吉非替尼耐药性NSCLC的潜在靶点。

lncRNA GABPB1-IT1靶向下调miR-501抑制宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移的机制

目的:探讨lncRNA GABPB1-IT1靶向下调miR-501抑制宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移的机制。方法:qRT-PCR方法检测宫颈癌HeLa、Caski、SiHa细胞和正常宫颈上皮Ect1/E6E7细胞中GABPB1-IT1表达水平。宫颈癌SiHa细胞分成Control组、Vector组(转染pcDNA)、GABPB1-IT1组(转染pcDNA-GABPB1-IT1)、GABPB1-IT1+miR-NC组(转染pcDNA-GABPB1-IT1和mimics control)、GABPB1-IT1+miR-501组(转染pcDNA-GABPB1-IT1和miR-501 mimics)。CCK-8法检测细胞增殖;Transwell小室检测细胞迁移和侵袭;Western blotting检测细胞中MMP-2、MMP-9、N-cadherin、E-cadherin蛋白表达。利用starbase数据库对GABPB1-IT1的靶基因进行分析,通过荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。结果:宫颈癌HeLa、Caski、SiHa细胞中GABPB1-IT1表达水平低于正常宫颈上皮Ect1/E6E7细胞(均P<0.05)。宫颈癌HeLa、Caski细胞中GABPB1-IT1表达水平高于宫颈癌SiHa细胞(均P<0.05)。与Control组、Vector组比较,GABPB1-IT1组宫颈癌SiHa细胞存活率降低,细胞迁移和侵袭数目减少,细胞中MMP-2、MMP-9、N-cadherin蛋白表达水平降低,E-cadherin蛋白表达水平升高(均P<0.05)。与GABPB1-IT1+miR-NC组比较,GABPB1-IT1+miR-501组宫颈癌SiHa细胞中miR-501水平升高,细胞存活率、细胞迁移数目和侵袭数目均升高,细胞中MMP-2、MMP-9、N-cadherin蛋白表达水平升高,E-cadherin蛋白表达水平降低(均P<0.05)。GABPB1-IT1靶向下调miR-501表达水平。结论:lncRNA GABPB1-IT1靶向下调miR-501抑制宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移。

血清miR-501和miR-195与局部晚期宫颈癌患者同步放化疗敏感性的关系

目的探讨局部晚期宫颈癌(LACC)患者血清miR-501和miR-195与同步放化疗敏感性的关系。方法回顾性分析2020年1月—2022年6月河南省南阳市中心医院收治的96例LACC患者,与同期96例健康体检者对照,比较两者血清miR-501和miR-195的差异。于患者同步放化疗6个月后复查肿瘤情况,以实体瘤疗效评定标准将患者分为敏感组和抵抗组。采用单因素和多因素分析血清miR-501和miR-195与局部晚期宫颈癌患者同步放化疗敏感性的关系,并绘制受试者操作特征(ROC)曲线预测LACC患者同步放化疗敏感性的区分效能。多因素分析采用二元logistic回归分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果LACC患者的血清miR-501表达水平显著高于健康体检者,miR-195表达水平显著低于健康体检者(P<0.05)。单因素分析显示,抵抗组患者入院时血清miR-501表达水平显著高于敏感组,miR-195表达水平显著低于敏感组(P<0.05)。多因素分析显示,血清miR-501、miR-195表达水平与LACC患者同步放化疗敏感性显著相关,ROC曲线的曲线下面积分别为0.736、0.913。结论LACC患者治疗前的血清miR-501表达水平越高、miR-195表达水平越低,同步放化疗抵抗概率越高。患者治疗前的血清miR-501和miR-195表达水平对同步放化疗敏感性具有一定的预测价值。

乳腺癌患者血浆中miR-501-5p、CLCA4 mRNA的表达及其诊断价值

目的研究乳腺癌患者血浆中微小RNA-501-5p(miR-501-5p)、钙激活氯通道调节蛋白A4(CLCA4)mRNA的表达水平及其诊断价值。方法选取2019年2月至2020年12月武汉大学中南医院诊治的88例乳腺癌患者(乳腺癌组)及同时期的60例乳腺良性病变患者(对照组),采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测血浆中miR-501-5p及CLCA4 mRNA的相对表达量,并分析两者表达水平及在乳腺癌中的意义。结果乳腺癌组患者血浆中miR-501-5p相对表达量明显高于对照组[(2.304±0.727)vs(1.813±0.324),t=4.906,P<0.001],CLCA4 mRNA相对表达量明显低于对照组[(2.162±0.416)vs(4.037±0.542),t=23.905,P<0.001],差异均有统计学意义。血浆miR-501-5p、CLCA4 mRNA表达水平在不同TNM分期、分化程度、是否淋巴结转移的乳腺癌患者中差异有统计学意义(均P<0.05)。乳腺癌患者血浆中miR-501-5p及CLCA4 mRNA的表达呈负相关(r=-0.731,P=0.031)。受试者工作特征(ROC)曲线分析结果显示:血浆中miR-501-5p及CLCA4 mRNA的表达水平对乳腺癌均有较高的诊断价值,曲线下面积(AUC)均>0.700,二者联合应用价值更高,AUC为0.928,灵敏度和特异度分别为94.32%、93.33%。结论乳腺癌患者血浆中miR-501-5p表达升高,CLCA4 mRNA表达降低,与肿瘤TNM分期、细胞分化程度、淋巴结转移有关,可能有助于乳腺癌的辅助诊断。

食管癌组织中miR-501-5p与LPAR1 mRNA的表达及临床意义

目的研究食管癌组织中微小RNA-501-5p(miR-501-5p)与溶血磷脂酸受体1(LPAR1)mRNA的表达水平,并分析其与临床病理资料之间的关系。方法选取2015年1月至2017年8月于滇南中心医院住院治疗的130例食管癌患者为研究对象。应用荧光实时定量PCR技术(qRT-PCR)检测食管癌组织和癌旁正常组织中miR-501-5p及LPAR1 mRNA的相对表达量,分析miR-501-5p和LPAR1 mRNA与患者临床病理资料的关系及两指标的相关性。采用Kaplan-Meier检验分析miR-501-5p和LPAR1 mRNA的表达与患者预后的关系。结果食管癌组织中miR-501-5p的相对表达量高于癌旁组织,LPAR1 mRNA的相对表达量低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。食管癌组织中miR-501-5p和LPAR1 mRNA的相对表达量与肿瘤TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05),与患者年龄、性别及肿瘤长径无关(P>0.05)。相关性分析结果显示,食管癌组织中miR-501-5p和LPAR1 mRNA的表达呈负相关(r=-0.632,P<0.05)。Kaplan-Meier检验结果显示,高miR-501-5p表达组患者3年总体生存率(OS)低于低表达组,高LPAR1 mRNA表达组患者3年OS高于低表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论食管癌组织中miR-501-5p表达水平高于癌旁组织、LPAR1 mRNA表达水平低于癌旁组织,并与肿瘤TNM分期、分化程度、淋巴结转移及预后有关,有望成为食管癌诊断、治疗及预后评估的生物标志物。

Excel软件结合Visual Basic编程工具探索MicroRNA-501对肺鳞癌患者生存情况的影响

目的使用Excel软件结合Visual Basic编程工具依据Kaplan-Meier生存分析理论探索肺鳞癌肿瘤组织中MicroRNA-501(miR-501)表达水平对肺鳞癌患者生存时间的影响。方法从Kmplot数据库获取miR-501在不同肺癌患者癌症组织中表达的高低情况数据和对应的生存时间数据,导入Excel表格中。使用Excel软件自带的Visual Basic编程工具设计用户图形界面并编写多个函数进行肺鳞癌患者生存分析。结果肺癌组织中miR-501表达高的肺鳞癌患者生存时间比肺癌组织中miR-501表达低的患者生存时间长。miR-501高表达和低表达的两组患者之间生存曲线的对数秩检验显示,两组生存时间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论使用Excel结合Visual Basic语言编程可以较好地分析miR-501表达高低对肺鳞癌患者生存时间的影响,其结果可信可靠。