miR-517a,miR-518b,miR-519a在出生体重异常儿胎盘及母体血清中表达的研究

目的:检测出生体重异常儿胎盘及母体血清中microRNA517a(miR-517a)、microRNA518b(miR-518b)、microRNA519a(miR-519a)的表达,探讨这三种微RNAs(miR-NAs)对出生体重的影响。方法:选择无妊娠并发症和合并症的足月分娩产妇,按胎儿出生体重分为:正常出生体重儿组(对照组,15例)、巨大儿组(20例)及小样儿组(15例)。分别收集3组的新鲜胎盘组织及母体血清,用实时荧光定量PCR方法检测3组miRNAs的变化。结果:miR-517a在巨大儿组(3.28±1.04)与小样儿组(3.63±1.45)胎盘中的表达均显著高于对照组(0.29±0.91)(P均<0.05);miR-519a在巨大儿组(4.62±0.44)与小样儿组(5.99±1.06)胎盘中的表达亦均显著高于对照组(2.65±0.57)(P均<0.05);而miR-518b在3组胎盘中的表达无统计学差异(P>0.05)。miR-517a在巨大儿组(2.76±0.44)与小样儿组(3.69±0.79)母体血清中的表达均显著高于对照组(0.14±1.81)(P均<0.05);miR-519a在巨大儿组(1.93±0.76)与小样儿组(0.47±1.17)母体血清中的表达均显著低于对照组(4.56±0.74)(P均<0.05);而miR-518b在三组母体血清中的表达无统计学差异(P>0.05)。结论:miR-517a、miR-519a参与了异常出生体重的调节。

miR-517a-3p对人肺鳞癌细胞生长和转移的影响及分子机制

目的探讨miR-517a-3p对人肺鳞癌细胞生长和转移的影响及分子机制。方法肺鳞癌细胞株H460培养24 h后用Lipofectamine2000转染试剂转染,分为miR-517a-3p过表达组、miR-517a-3p表达抑制组,并设空白对照组。CCK8检测3组细胞的增殖情况;Transwell检测细胞的侵袭能力;Western印迹检测细胞中侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9表达水平。构建e2f6-3'Utr区的双荧光素酶报告载体,检测miR-517a-3p对下游靶基因e2f6的调控作用。结果 CCK8检测显示,miR-517a-3p过表达组细胞增殖速度较空白对照组明显降低,miR-517a-3p表达抑制组增殖率明显提升(P<0.05)。miR-517a-3p过表达组H460穿膜数明显低于空白对照组;miR-517a-3p表达抑制组穿膜数明显高于空白对照组(P<0.05)。miR-517a-3p过表达组MMP-2和MMP-9蛋白相对表达量均明显低于空白对照组,miR-517a-3p表达抑制组明显高于空白对照组(P<0.05)。过表达miR-517a-3p可明显下调e2f6-3'Utr的报告载体荧光素酶活性,抑制miR-517a-3p表达后可上调荧光素酶活性,与空白对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。过表达miR-517a-3p后e2f6的表达量明显低于空白对照组;抑制miR-517a-3p表达后,e2f6的表达量明显高于空白对照组(P<0.05)。结论 miR-517a-3p可通过调控下游靶基因e2f6而抑制肺鳞癌细胞株H460的生长和侵袭力。

柴胡皂苷D通过下调miR-517a调节胶质瘤细胞体外和体内移植瘤生长

目的探究柴胡皂苷D通过调控miR-517a对胶质瘤细胞体外和体内移植瘤生长的影响.方法采用MTT试剂盒检测U-87细胞和正常星形细胞的存活率;Q-PCR检测miR-517a表达;流式细胞仪检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;CCK-8试剂盒检测细胞增殖;蛋白免疫印迹试剂盒检测cleaved caspase-3、Ki67、MMP-2、Cyclin D1蛋白水平.建立裸鼠移植瘤模型,检测各组肿瘤重量;免疫组化检测Ki67、VEGF表达.结果柴胡皂苷D对正常星形细胞存活率无影响,降低U-87细胞存活率,下调miR-517a表达,促进细胞凋亡,上调cleaved caspase-3蛋白表达,抑制细胞迁移、侵袭、增殖,下调MMP-2、Cyclin D1、Ki67蛋白表达;抑制体内移植瘤生长,降低Ki67、VEGF阳性表达率.结论柴胡皂苷D具有下调miR-517a调节胶质瘤细胞体外和体内移植瘤生长的作用.

miR-517a在前置胎盘患者血清和胎盘组织中的表达及临床意义

目的探讨miR-517a在前置胎盘患者血清和胎盘组织中的表达及临床意义.方法选取2013年5月-2015年6月上海市嘉定区妇幼保健院产科收治的64例前置胎盘患者为前置胎盘组,另选取同期同院正常分娩的64例健康产妇为对照组.采用实时荧光定量PCR检测两组孕妇胎盘组织与血清中的miR-517a表达水平,分析前置胎盘组患者血清和胎盘组织miR-517a表达水平的相关性,并分析miR-517a表达水平与产妇游离β-人绒毛膜促性腺激素(f-β-hCG)、甲胎蛋白(AFP)、血清肌酸激酶、β-hCG等临床特征的相关性,分析前置胎盘发生的危险因素.结果与对照组相比,前置胎盘组患者血清f-β-hCG、AFP、肌酸激酶及β-hCG水平均显著升高(均P<0.05),血清和胎盘组织中miR-517a表达水平均显著升高(均P<0.05).Pearson相关性分析显示:前置胎盘组患者血清与胎盘组织中miR-517a表达水平呈显著正相关(r=0.714,P=0.019).血清miR-517a表达水平与血清f-β-hCG、AFP、肌酸激酶、β-hCG水平均呈正相关.miR-517a高表达、产后出血、胎盘植入及子宫切除为前置胎盘患者预后的危险因素.结论 miR-517a在前置胎盘患者血清和胎盘组织中的异常表达可作为临床早期诊断前置胎盘的生物学指标,可有效评估患者预后.