miR-567对非小细胞肺癌细胞恶性生物学行为及吉非替尼耐药的影响

目的:探究miR-567对非小细胞肺癌(NSCLC)的生物学功能以及吉非替尼耐药性的影响。方法:采用RT-qPCR检测miR-567在人肺上皮细胞系BEAS-2B、NSCLC细胞系(PC9、HCC827、A549、NCI-H1975)以及吉非替尼耐药细胞株PC9/GR中的表达。PC9细胞和PC9/GR细胞分别分为negative control组、miR-567 mimic组、miR-567 inhibitor组和miR-567 mimic+CDK8组,CCK8检测细胞的增殖能力,Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力,双荧光素酶报告基因实验检测miR-567与CDK8的靶向关系,western blotting检测细胞中CDK8的表达。结果:miR-567在PC9、HCC827、A549、NCI-H1975中的表达显著低于BEAS-2B,miR-567在PC9/GR细胞中的表达显著低于PC9。相比于negative control组,miR-567 mimic组PC9细胞增殖、迁移和侵袭能力均显著减弱(P<0.05)。miR-567 inhibitor组PC9细胞增殖、迁移和侵袭能力均显著增强(P<0.05),miR-567 mimic组PC9/GR细胞增殖率显著低于negative control组(P<0.05)。miR-567 inhibitor组PC9/GR细胞增殖率显著高于negative control组(P<0.05)。双荧光素酶报告实验和western blotting检测结果显示CDK8为miR-567的靶基因。相比于miR-567 mimic组,miR-567 mimic+CDK8组PC9细胞的增殖、迁移以及侵袭能力均显著增强(P<0.05),miR-567 mimic+CDK8组PC9/GR细胞增殖率显著升高(P<0.01)。结论:miR-567可通过靶向调控CDK8而抑制NSCLC细胞的增殖、迁移和侵袭能力以及吉非替尼耐药。

circ_0000326靶向miR-567对口腔鳞状细胞癌HSC3细胞增殖、侵袭及迁移的调控效应

目的:探讨circ_0000326调控口腔鳞状细胞癌HSC3细胞增殖、侵袭及迁移的分子机制。方法:收集2020年3月—2021年6月安徽医科大学附属合肥医院收治的45例口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)患者的癌组织及癌旁组织标本,采用qRT-PCR检测circ_0000326、miR-567的表达量,CCK-8法、平板克隆形成实验、划痕实验和Transwell实验分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力,双荧光素酶报告实验检测circ_0000326与miR-567的靶向关系,Western印迹法检测E-cadherin、N-cadherin蛋白表达量。采用SPSS 21.0软件包对数据进行统计学分析。结果:circ_0000326在OSCC组织中的平均表达量为4.01±0.29,在癌旁组织的平均表达量为1.00±0.13;miR-567的表达量分别为0.28±0.03和1.00±0.10,差异具有统计学意义。与si-NC组相比,si-circ_0000326组细胞活力显著降低(P<0.05),细胞克隆形成数显著减少(P<0.05)。与si-NC组相比,si-circ_0000326组中侵袭细胞数、划痕愈合率显著降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达量显著升高(P<0.05),N-cadherin蛋白表达量显著降低(P<0.05)。Circ_0000326靶标miR-567。miR-567在pcDNA组的表达量为1.00±0.00,在pcDNA-circ_0000326组的表达量为0.44±0.04,在si-NC组的表达量为0.99±0.06,在si-circ_0000326组的表达量为2.92±0.25,差异具有统计学意义。与miR-NC组相比,miR-567组细胞活力显著降低、划痕愈合率及N-cadherin蛋白水平显著降低(P<0.05),细胞克隆形成数和侵袭细胞数显著减少(P<0.05),E-cadherin蛋白水平显著升高(P<0.05)。与si-circ_0000326+anti-miR-NC组相比,si-circ_0000326+anti-miR-567组细胞活力、划痕愈合率和N-cadherin蛋白水平显著升高(P<0.05),细胞克隆形成数和侵袭细胞数显著增多(P<0.05),E-cadherin蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论:干扰circ_0000326表达可通过促进miR-567表达而减弱OSCC细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力。

miR-567靶向TRPM8调控结直肠癌细胞增殖凋亡的分子机制

背景miRNA在癌症中的作用日益成为研究的热点,miR-567在癌症中的研究相对较少,其在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中的功能作用尚缺乏参考.目的研究miR-567对CRC细胞增殖、凋亡的影响及其机制.方法运用qRT-PCR法检测CRC细胞SW480、SW1116、HT29和正常结直黏膜上皮细胞NCM460中miR-567、瞬时受体电位8(transient receptor potential melastatin 8,TRPM8)的表达;将miR-NC组(转染miR-NC)、miR-567组(转染miR-567 mimics)、si-NC组(转染si-NC)、si-TRPM8组(转染si-TRPM8)、miR-567+pcDNA组(共转染miR-567和pcDNA)、miR-567+pcDNA-TRPM8组(共转染miR-567和pcDNATRPM8),用脂质体法转染至SW480细胞.MTT法检测细胞的增殖;流式细胞术检测细胞的凋亡;Western blot检测细胞中TRPM8、CyclinD1、p21、p23、Bcl-2、Bax、Cleaved-capase-3的蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性.结果与正常结直黏膜上皮细胞NCM460相比,CRC细胞中miR-567的表达明显降低,TRPM8的表达明显升高;过表达miR-567或抑制TRPM8均可抑制SW480细胞的增殖,促进其凋亡;miR-567可抑制野生型TRPM8细胞的荧光活性,并负向调控TRPM8的表达;过表达TRPM8逆转了过表达miR-567对SW480细胞的增殖抑制和凋亡促进作用.结论miR-567可抑制CRC细胞的增殖,促进凋亡,其机制与靶向TRPM8有关,将可为CRC的预防和治疗提供新方向.

miR-567和CacyBP对非小细胞肺癌A549细胞影响机制研究

目的:探讨miR-567和钙周期素结合蛋白(CacyBP)对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增殖、侵袭和凋亡的影响机制。方法:选择miR-567、CacyBP高表达的NSCLC系A549作为研究对象,将实验分为4组,空白对照组(NC组),转染pcDNA6.2 miR-567组(si-miR-567组),转染pcDNA6.2 CacyBP siRNA组(si-CacyBP组),转染pcDNA6.2 miR-567+CacyBP siRNA组(si-miR-567+CacyBP组);qRT-PCR检测miR-567、CacyBP mRNA表达;CCK-8、MTT实验检测细胞增殖情况;Transwell实验检验细胞迁移、侵袭能力;流式细胞术检测NSCLC A549细胞凋亡率;Western bolt检测各组细胞凋亡蛋白变化情况。结果:相比于NC组,si-miR-567组、si-miR-567+CacyBP组miR-567表达显著降低;相比于NC组,si-CacyBP组、si-miR-567+CacyBP组CacyBP mRNA表达显著降低;MTT实验结果显示,三组细胞增殖抑制率均显著高于NC组,且si-miR-567+CacyBP组细胞增殖抑制率显著高于si-miR-567组、si-CacyBP组;CCK-8实验结果显示,三组细胞增殖计数均显著低于NC组,且si-miR-567+CacyBP组细胞增殖计数显著低于si-miR-567组、si-CacyBP组;Transwell实验结果显示NC组的细胞迁移、侵袭个数显著高于si-miR-567组、si-CacyBP组、si-miR-567+CacyBP组;且si-miR-567组、si-CacyBP组的细胞迁移、侵袭个数显著高于si-miR-567+CacyBP组;流式细胞术检测A549凋亡结果显示相比于NC组,si-miR-567组、si-CacyBP组、si-miR-567+CacyBP组的A549细胞凋亡率明显升高,且si-miR-567+CacyBP组的A549细胞凋亡率显著高于si-miR-567组、si-CacyBP组。结论:联合干预miR-567、CacyBP能够有效降低NSCLC A549细胞的增殖、迁移、侵袭能力,同时提高细胞的凋亡率。

微RNA对非小细胞肺癌程序性死亡蛋白1抑制剂联合同步化疗疗效的预测价值

目的分析血清微RNA(miR-218、miR-329、miR-567)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者程序性死亡蛋白1(programmed death-1,PD-1)抑制剂联合同步化疗临床疗效的预测价值。方法采用便利抽样法前瞻性选取2021年1月—2023年1月北京大学第一医院太原医院收治的160例行PD-1抑制剂联合同步化疗治疗的NSCLC患者为研究对象,收集患者血清miR-218、miR-329、miR-567水平以及临床疗效等相关资料,并根据临床疗效将患者分为缓解组(部分缓解与完全缓解)与未缓解组(疾病稳定与疾病进展),采用受试者操作特征曲线分析血清miR-218、miR-329、miR-567水平对NSCLC患者PD-1抑制剂联合同步化疗临床疗效的预测价值。结果160例患者中疾病进展34例(21.2%)、疾病稳定85例(53.1%)、部分缓解39例(24.4%)、完全缓解2例(1.2%),分为缓解组41例、未缓解组119例。多因素logistic回归分析结果显示,血清miR-218、miR-329、miR-567高水平对提高NSCLC患者PD-1抑制剂联合同步化疗临床疗效具有促进作用(P<0.05)。受试者操作特征曲线分析结果显示,根据联合检测血清miR-218、miR-329、miR-567的预测概率截断值预测NSCLC患者PD-1抑制剂联合同步化疗临床疗效的曲线下面积及其95%置信区间为0.938(0.855,0.964),灵敏度为82.9%,特异度为92.4%,阳性预测值为79.1%,阴性预测值为94.0%。结论联合检测血清miR-218、miR-329、miR-567水平,对NSCLC患者PD-1抑制剂联合同步化疗的治疗效果具有较高的预测价值。