miR-581对结直肠癌SW620细胞增殖能力的影响

目的:探讨miR-581对结直肠癌SW620细胞增殖能力的影响。方法:分别用携带miR-581基因的慢病毒颗粒(LV-miR-581-GFP)和miR-581 mimics(miR-581)转染人结肠癌细胞株SW620作为实验组;用对照组病毒颗粒(LV-GFP)和对照组mimics(Vector)转染SW620细胞株作为阴性对照组。用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞中miR-581的mRNA表达水平;CCK8和克隆形成实验检测细胞增殖能力和克隆形成能力的变化。结果:实验组SW620细胞中miR-581表达较对照组明显增高(P<0.05);CCK8和克隆形成实验显示过表达实验组细胞的增殖及克隆形成能力较对照组明显增强(P<0.05)。结论:miR-581对结直肠癌SW620细胞的增殖具有促进作用。

miR-581调控FOXO1对卵巢癌SKOV3细胞自噬的影响

目的探讨miR-581对卵巢癌SKOV3细胞自噬的影响及作用机制。方法将miR-581 mimics和miR-581 NC转染到卵巢癌SKOV3细胞中,实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测转染效率;转染成功后,Western blot检测转染后卵巢癌SKOV3细胞中自噬相关蛋白的表达水平;TargetScanHuman数据库预测miR-581靶基因,Western blot验证miR-581与靶基因的作用。结果过表达miR-581后可显著抑制自噬相关蛋白LC3Ⅱ和Beclin1的表达(P<0.01);miR-581可负向调控FOXO1的表达(P<0.01);FOXO1促进卵巢癌SKOV3细胞自噬(P<0.05)。结论miR-581通过调控FOXO1的表达影响卵巢癌SKOV3细胞自噬。

miR-581对非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的探讨miR-581对非小细胞肺癌A549细胞增殖,迁移和侵袭生物学行为的影响。方法转染miR-581以及miR-mimics进入A549细胞,未进行干扰的A549细胞为阴性对照组。流式细胞仪检测转染miR-581进入A549细胞的效率。CCK8法和克隆形成实验检测miR-581对肺癌A549细胞增殖能力的影响。划痕实验和Transwell迁移小室检测miR-581对肺癌A549细胞迁移和侵袭能力的影响。结果转染miR-581进入A549细胞的效率为(75.3±3.8)%。转染miR-581进入A549细胞后,同一时间细胞活力的检测值相对于未进行干扰的A549细胞明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。转染miR-mimics的细胞增殖曲线与未进行干扰的A549细胞无明显差异,同一时间细胞活力的检测值相对于未进行干扰的A549细胞,差异无统计学意义(P>0.05)。克隆形成实验结果证实miR-581能够显著抑制A549细胞的克隆形成能力。Transwell迁移小室检测和划痕实验结果显示miR-581能够显著抑制A549细胞的迁移和侵袭能力。结论miR-581能够抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖,同时能够抑制其迁移和侵袭能力,提示miR-581可能作为一种潜在的肺癌治疗手段。

体内荧光活体成像观察miR-581对结直肠癌细胞SW620转移能力的影响

目的:采用动物活体荧光成像技术体内动态观察miR-581对结直肠癌(CRC)细胞SW620转移能力的影响。方法:构建并筛选出荧光素酶标记的SW620稳转株(miR-581-NC-Luc、miR-581-UP-Luc),分组尾静脉注射于裸鼠体内,实时荧光成像系统动态观察其在体内成瘤大小和转移部位情况。切取裸鼠转移器官组织行HE染色、免疫荧光等检测。结果:成功构建稳定表达荧光素酶的CRC SW620细胞,建立了裸鼠CRC异位转移瘤模型;从实验组和对照组裸鼠的总转移率、转移灶个数、转移区域内荧光表达量等多方面对比得出,与阴性对照组相比,miR-581过表达组SW620细胞在裸鼠内肺转移能力显著下降(P<0.05)。结论:本研究通过活体成像系统间接反映肿瘤在体内的生长情况,使在不触及肿瘤的情况下对动物移植瘤模型的研究成为可能,为深入研究miR-581对CRC肿瘤细胞转移能力的影响提供体内证据。

miR-581对结直肠癌SW620细胞侵袭和转移的影响

探讨miR-581对结直肠癌SW620细胞侵袭转移能力的影响。首先,用miR-581mimics转染SW620细胞作为实验组(miR-581),用对照组mimics转染SW620细胞作为对照组(vector);用qRT-PCR检测2组细胞中miR-581的mRNA表达水平;划痕实验和transwell实验检测2组细胞迁移和侵袭能力的变化;Western blotting检测2组细胞中MMP-1和MMP-9的蛋白表达水平。结果显示,实验组细胞中miR-581表达较对照组明显增高(P<0.05);划痕实验显示实验组细胞划痕愈合率较对照组减慢(P<0.05),transwell结果显示实验组细胞较对照组细胞穿膜细胞数减少(P<0.05);Western blotting结果显示实验组MMP-1和MMP-9的表达都较对照组降低(P<0.05)。以上结果提示miR-581可以抑制SW620细胞的侵袭和转移。