miR-586在骨肉瘤患者体内的表达及其意义

目的:探讨miR-586在骨肉瘤患者体内的表达水平及临床意义。方法:以20例骨肉瘤患者及20例健康体检者作为研究对象,收集其静脉血、瘤体组织及瘤体周围正常骨组织,提取总RNA,采用实时荧光定量PCR检测骨肉瘤患者与健康志愿者各样本中miR-586的表达水平。评估血清miR-586表达水平与瘤体内表达水平的相关性及miR-586的诊断效能。结果:骨肉瘤患者血清中miR-586表达水平较健康对照组高(P<0.05),瘤体组织中miR-586相对表达水平明显高于瘤体周围正常骨组织(P<0.05),骨肉瘤患者瘤体组织内miR-586表达水平与血清中表达水平呈正相关(r=0.908,P<0.001)。ROC曲线下面积为0.883,当最佳筛查阳性界值为0.9550时,敏感性和特异性均为85%。结论:患者血清中miR-586或可作为骨肉瘤诊断的一个血清学指标。

miR-586对骨肉瘤的诊断价值研究

目的探讨miR-586对骨肉瘤的诊断价值,为该指标在诊断骨肉瘤的应用上提供理论依据。方法选取接受手术治疗的35例骨肉瘤患者作为病例组,同时选取35例健康人群作为对照组。对比两组受试者的血清miR-586的检测结果;对比病例组患者骨肉瘤瘤体组织和周围正常骨组织的miR-586的检测结果;通过Pearson相关性分析检验骨肉瘤瘤体组织中miR-586表达与血清miR-586表达的相关性;通过ROC曲线分析两组受试者的血清miR-586检测结果,评估血清miR-586对骨肉瘤的诊断价值。结果病例组miR-586的检测结果为(1.43±0.52),均显著高于对照组(P<0.05);骨肉瘤瘤体组织miR-586的检测结果为(5.38±0.31),显著高于正常骨组织miR-586的检测结果(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,骨肉瘤瘤体组织中miR-586表达与血清miR-586表达呈正相关关系(γ=0.912,P<0.05);ROC曲线分析结果显示,血清miR-586诊断骨肉瘤的曲线下面积为0.879,0.952为最佳筛查阳性界值,血清miR诊断骨肉瘤的敏感度和特异度均为85%。结论骨肉瘤患者血清以及瘤体组织的miR-586水平显著升高,两者呈正相关的关系。血清miR-586水平的检测对临床诊断骨肉瘤有一定的参考价值。

MiR-586对胶质瘤细胞增殖及周期的影响

目的探讨miR-586对胶质瘤细胞增殖及细胞周期的影响。方法采用实时荧光定量PCR检测miR-586在非肿瘤脑组织(NBT)及胶质母细胞瘤组织中的表达。同时检测miR-586在人正常星形胶质细胞(NHA)及4株胶质瘤细胞株(U87、U251、T98、LN229)中的表达。在胶质瘤细胞株中通过转染miR-586 inhibitor下调miR-586的表达后,采用CCK-8检测细胞增殖能力,流式细胞术检测胶质瘤细胞周期阶段。结果miR-586在胶质母细胞瘤组织中表达显著比非肿瘤脑组织中高(P<0.001);在胶质瘤细胞系中,U87中的表达显著升高(P<0.01)。CCK-8实验结果显示:U87细胞转染miR-586 inhibitor后细胞增殖能力显著下降(P<0.01)。此外,miR-586 inhibitor转染U87后诱导细胞周期阻滞在G0/G1期(P<0.01)。结论miR-586在胶质瘤组织和细胞中高表达,抑制miR-586的表达可以抑制胶质瘤细胞增殖并诱导细胞周期阻滞。

miR-586靶向TLR7调控食管癌细胞CaES-17的凋亡和增殖

目的:探讨miRNA调控食管癌细胞CaES-17的凋亡和增殖的潜在机制。方法:纳入2019年06月至2020年06月在我院接受治疗的食管癌患者6例,采集其食管癌组织和癌旁组织后抽取总RNA进行miRNA高通量测序。在食管癌细胞CaES-17中过表达食管癌组织和癌旁组织中的差异miRNA,检测食管癌细胞CaES-17的凋亡和增殖情况。通过TargentScan7.2在线分析和荧光素酶报告实验分析miRNA的靶标mRNA。结果:6例患者的食管癌组织和癌旁组织通过高通量测序发现hsa-miR-30d-5p、hsa-miR-6818-5p、hsa-miR-525-5p、hsa-miR-1909-3p、hsa-miR-212-5p、hsa-miR-586、hsa-miR-1286、hsa-miR-365b-3p、hsa-miR-30e-5p、hsa-miR-4317在食管癌组织和癌旁组织中的表达差异在8倍以上,并且食管癌组织均高于癌旁组织。干扰上述miRNA后,发现干扰miR-586能够抑制食管癌细胞CaES-17的增殖水平和迁移水平,提高凋亡水平。过表达miR-586后,食管癌细胞CaES-17的凋亡水平下降,增殖水平和迁移水平上升。TargentScan7.2在线分析和荧光素酶报告实验发现miR-586靶向TLR7的3'端非编码区。敲低TLR7后,食管癌细胞CaES-17的凋亡水平下降,增殖水平和迁移水平上升。过表达TLR7后,食管癌细胞CaES-17的凋亡水平上升,增殖水平和迁移水平下降。但是,同时干扰miR-586和敲低TLR7后,相比于对照食管癌细胞,食管癌细胞CaES-17的凋亡水平和增殖水平无显著差异。结论:miR-586通过靶向TLR7的3'端非编码区,降解了TLR7的mRNA,抑制了TLR7的蛋白翻译,最终抑制了食管癌细胞CaES-17的凋亡、促进了食管癌细胞CaES-17的增殖。

lncRNA ACTA2-AS1通过靶向下调miR-586表达抑制子宫内膜癌生物学行为的研究

目的分析长链非编码RNA(lncRNA)ACTA2-AS1在子宫内膜癌中的表达,探讨ACTA2-AS1对子宫内膜癌细胞周期和迁移的作用及其分子机制。方法采用GEPIA数据库分析ACTA2-AS1在子宫内膜癌组织中的表达水平。qRT-PCR检测ACTA2-AS1在子宫内膜癌细胞系和正常子宫内膜上皮细胞ESC中的表达水平。分别转染空白质粒(NC组)和ACTA2-AS1过表达质粒(ACTA2-AS1组)至AN3CA细胞。流式细胞法和细胞划痕实验分别检测ACTA2-AS1对子宫内膜癌细胞AN3CA的G 0~G 1期细胞比例和迁移能力的影响。LncBase v.2数据库预测ACTA2-AS1的潜在靶基因,双荧光素酶报告基因实验和qRT-PCR验证ACTA2-AS1对靶基因的调控作用。qRT-PCR或Western blot法检测磷酸酶及张力蛋白同源物基因(PTEN)和PI 3K-AKT-mTOR信号通路蛋白表达。结果GEPIA数据库显示ACTA2-AS1在子宫内膜癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织(P<0.01)。ACTA2-AS1在子宫内膜癌细胞系中的表达水平显著低于ESC细胞(P<0.05),ACTA2-AS1表达最低的细胞系是AN3CA(P<0.01)。与NC组比较,上调ACTA2-AS1表达可以增加G 0~G 1期细胞比例(P<0.01)。NC组和ACTA2-AS1组AN3CA细胞迁移率分别为69.54%±6.64%和40.46%±3.76%,上调ACTA2-AS1可以抑制AN3CA细胞迁移能力(P<0.01)。ACTA2-AS1能够靶向结合miR-586(P<0.01)。与NC组比较,上调ACTA2-AS1可明显抑制miR-586表达(P<0.01),PTEN基因表达明显增加(P<0.01),PI 3K-AKT-mTOR信号通路蛋白表达降低。结论ACTA2-AS1在子宫内膜癌组织和细胞系中表达降低。对于存在PI 3K-AKT-mTOR信号通路的子宫内膜癌类型,上调ACTA2-AS1表达通过靶向调控miR-586,促进PTEN基因表达和抑制PI 3K-AKT-mTOR信号通路活化,抑制子宫内膜癌细胞周期和迁移。

miR-586在骨肉瘤患者体内的表达及意义的相关研究

目的:探究miR-586在骨肉瘤患者体内的表达及意义。方法:选取我院2014年9月~2016年9月收治的骨肉瘤患者151例,将其作为观察组,选择同期于我院进行体检的健康的志愿者52例,将其作为对照组,对患者瘤体周围正常骨组织及骨肉瘤瘤体组织中miR-586的表达、两组血清miR-586的表达、患者血清中miR-586表达与骨肉瘤患者瘤体组织的相关性、miR-586对骨肉瘤的诊断价值进行分析。结果:瘤体周围正常骨组织、骨肉瘤瘤体组织的miR-586相对表达水平分别为(0.94±0.27)、(5.34±0.29),患者瘤体周围正常骨组织较骨肉瘤瘤体组织中miR-586相对表达水平高,差异明显具有统计学意义;观察组、对照组血清miR-586的相对表达水平分别为(1.48±0.47)、(0.85±0.22),观察组较对照组高,差异明显,具有统计学意义;经皮尔森相关系数分析发现,患者血清中miR-586与骨肉瘤患者瘤体组织呈正相关的关系;经对观察组、对照组患者外周血miR-586水平ROC曲线分析,曲线下面积为0.882(0.774、0.991为95%可信区间;P=0.023),当0.9551为最佳筛查阳性届值(cut-off)时,特异度及敏感度均为85%。结论:miR-586对骨肉瘤患者具有较好的诊断价值,其表达水平可作为骨肉瘤患者诊断的生物学指标。