miR-626下调HepG2细胞载脂蛋白(a)的表达

目的筛选高效调控LPA基因表达的miRNA。方法用在线预测工具预测作用于LPA基因3'UTR的miRNA,RT-PCR和Western blot检测转染预测所得miRNA mimic后HepG2细胞载脂蛋白(a)[Apo(a)]mRNA和蛋白表达水平。实验分为对照组、miR-626 mimic组、miR-626 mimic+miR-626 inhibitor组和miR-626 inhibitor组共4组。使用荧光素酶报告系统进行miR-626靶标验证实验。结果可作用于LPA基因3'UTR的miRNA有9个。mimic转染组与对照组相比,Apo(a)的mRNA表达水平差异不显著,但miR-626能显著下调Apo(a)蛋白的表达。使用miR-626 inhibitor后,miR-626对Apo(a)蛋白的下调作用减弱。转染miR-626后细胞裂解液的荧光强度显著下降。结论miR-626能显著下调Apo(a)蛋白表达水平,其通过与LPA mRNA 3'UTR序列结合,抑制LPA mRNA翻译实现的。

circ_0005075靶向miR-626调控缺氧复氧诱导心肌细胞炎症损伤的机制

目的探讨circ_0005075对H/R诱导心肌细胞炎症损伤的影响及分子机制。方法大鼠心肌细胞H9C2随机分为对照(Con)组、H/R组、H/R+si-circ_0005075组、H/R+si-NC组、H/R+miR-626组、H/R+miR-NC组、H/R+si-circ_0005075+anti-miR-626组、H/R+si-circ_0005075+anti-miR-NC组;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circ_0005075和miR-626的表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;流式细胞仪检测心肌细胞的凋亡情况;蛋白质印迹法检测蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测circ_0005075和miR-626的靶向关系。结果H/R诱导心肌细胞中circ_0005075表达水平升高,miR-626表达水平降低,IL-6和TNF-α水平、心肌细胞凋亡率、Cleaved-caspase3和Cleaved-caspase9表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。干扰circ_0005075表达或过表达miR-626后,IL-6和TNF-α水平、心肌细胞凋亡率、Cleaved-caspase3和Cleaved-caspase9表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。circ_0005075靶向调控miR-626;抑制miR-626表达逆转了干扰circ_0005075表达对H/R诱导心肌细胞炎症损伤的作用。结论干扰circ_0005075表达可能通过靶向miR-626抑制H/R诱导心肌细胞炎症损伤。

老年帕金森病患者血浆miR-361-3p、miR-626表达与病情严重程度的相关性

目的探讨老年帕金森病患者血浆微小RNA-361-3p(miR-361-3p)、微小RNA-626(miR-626)表达与病情严重程度的相关性。方法选择2019年3月-2022年1月浙江省医疗健康集团杭州医院收治的75例老年帕金森病患者为帕金森组,另外选取70例同期健康体检者作为正常组。采用荧光实时定量聚合酶链反应法检测所有研究对象血浆miR-361-3p、miR-626表达水平,采用Hoehn-Yahr分级量表和统一帕金森病评定量表(UPDRS)评估帕金森病患者病情严重程度,采用Spearman分析帕金森病患者血浆miR-361-3p、miR-626表达水平与Hoehn-Yahr分级、UPDRS评分的相关性。结果与正常组相比,帕金森组血浆miR-361-3p、miR-626表达水平均较低,差异有统计学意义(P<0.01);帕金森病患者血浆miR-361-3p、miR-626表达水平与Hoehn-Yahr分级、UPDRS评分均呈负相关(P<0.01)。结论血浆miR-361-3p、miR-626表达水平对帕金森病的病情评估有一定的参考价值。