miR-6867及其宿主基因RAPGEFL1在食管鳞状细胞癌组织和细胞系中的表达及甲基化状态

目的:检测miR-6867及其宿主基因Rap型鸟苷酸交换因子1(rap guanine nucleotide exchange factor like 1,RAPGEFL1)在食管癌细胞系及食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中的表达水平及甲基化状态,并探讨其在ESCC发生发展中的作用。方法:选取河北医科大学第四医院2014年1月至2016年1月收治的ESCC手术患者组织标本87例。应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-6867及RAPGEFL1在食管癌细胞系和ESCC组织及其相应癌旁组织中的表达水平,分析miR-6867和RAPGEFL1基因表达之间的相关性。应用甲基化特异性PCR法(MSP)检测RAPGEFL1在食管癌细胞系和ESCC组织及其相应癌旁组织中的甲基化状态。结果:miR-6867在ESCC组织中的相对表达量显著低于其相应癌旁组织(P<0.05),并与淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05);RAPGEFL1基因在ESCC组织中的表达显著低于其相应癌旁组织(P<0.05),并与淋巴结转移、组织分化程度及TNM分期相关(P<0.05);miR-6867与RAPGEFL1在ESCC组织中的表达呈明显正相关(P<0.05)。5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dC)处理后,4种食管癌细胞系中miR-6867和RAPGEFL1基因的表达均增高,并且其甲基化程度明显降低。RAPGEFL1基因在ESCC组织中的甲基化率显著高于其相应癌旁组织(P<0.05),并与淋巴结转移、组织分化程度及TNM分期有关(P<0.05)。结论:ESCC的发生发展可能与miR-6867和RAPGEFL1的异常低表达及RAPGEFL1高甲基化状态有关,miR-6867与RAPGEFL1表达具有一致性,且RAPGEFL1基因启动子区甲基化可能是导致miR-6867与RAPGEFL1表达沉默的机制之一。

阿尔茨海默病患者血清miR-6867-5p表达水平及诊断价值研究

目的研究miR-6867-5p在阿尔茨海默病(AD)患者血清中的表达水平及其诊断价值,分析其参与AD的可能机制。方法选取2021年11月-2022年6月就诊于江苏大学附属医院神经内科门诊的52例AD患者作为AD组,另选取同期在医院体检中心进行常规体检的28名健康体检者为对照组,收集两组血清标本及临床基本资料。使用实时荧光定量PCR方法检测AD组在治疗前及盐酸多奈哌齐治疗6个月后的血清miR-6867-5p表达水平,简易智力状态检查(MMSE)、蒙特利尔认知评估(MoCA)量表评价AD患者的认知功能,分析血清miR-6867-5p与量表评分之间的相关性。使用受试者工作特征(ROC)曲线评估miR-6867-5p在AD中的诊断效能。利用在线预测工具预测miR-6867-5p的靶基因,通过R语言分析包对其进行功能及信号通路富集分析。结果AD组在治疗前血清miR-6867-5p表达水平高于对照组(Z=-4.65),治疗后血清miR-6867-5p低于治疗前(Z=-5.54),差异均有统计学意义(P均<0.01)。血清miR-6867-5p的表达水平与MMSE和MoCA评分成负相关(r=-0.72、-0.69,P均<0.01)。ROC曲线显示,血清miR-6867-5p曲线下面积为0.82(95%CI:0.73~0.91,P<0.01),灵敏度为80.77%,特异度为71.43%。在线预测工具共取得1277个相同靶基因,基因本体(GO)富集分析表明miR-6867-5p靶基因可能参与轴突发育、化学突触传递的调节、学习与记忆等生物学过程,主要位于突触上,具有DNA结合转录抑制因子活性等分子功能。京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析表明,miR-6867-5p与Wnt等信号通路以及谷氨酸能突触有关。结论AD患者血清miR-6867-5p表达上调,有望成为AD早期诊断的潜在生物标志物。

创伤性脑损伤患者高压氧治疗后血清miR-3195、miR-328-5p和miR-6867-5p水平及其与预后的关系

目的探讨创伤性脑损伤患者高压氧治疗后血清miR-3195、miR-328-5p和miR-6867-5p水平及其与预后的关系。方法选取2018年5月至2020年8月在山西医科大学第一医院就诊的124例创伤性脑损伤患者作为研究对象,根据患病后6个月患者的格拉斯哥预后评分(GOS),将其分为预后良好组(n=75)和预后不良组(n=49)。用实时荧光定量PCR法检测高压氧治疗前(T1)及高压氧治疗1个月后(T2),患者血清miR-3195、miR-328-5p和miR-6867-5p的表达水平;通过受试者工作特征(ROC)曲线和Logistic回归分析评估这3种指标对创伤性脑损伤患者高压氧治疗预后的评价效能及其与预后的关系。结果预后良好组患者的格拉斯哥昏迷评分(GCS)高于预后不良组,发病至开始治疗时间短于预后不良组,差异均有统计学意义(P<0.05)。预后良好组患者T1和T2时间点miR-3195、T2时间点miR-328-5p、T1和T2时间点miR-6867-5p相对表达量均低于同期预后不良组(P<0.05)。2组患者T2时间点miR-3195、miR-328-5p和miR-6867-5p的相对表达量均低于T1时间点(P<0.05)。预后良好组的miR-6867-5p相对表达量降低程度高于预后不良组(P<0.05)。T2时间点miR-3195、miR-328-5p和miR-6867-5p的ROC曲线下面积(AUC)大于T1时间点,差异均有统计学意义(P<0.05)。高GCS是创伤性脑损伤预后的独立保护因素(P<0.05),发病至开始治疗时间过长、T2时间点患者miR-3195和miR-6867-5p高表达是创伤性脑损伤预后的独立危险因素(P<0.05)。结论创伤性脑损伤患者高压氧治疗后血清miR-3195和miR-6867-5p水平与预后密切相关,而miR-328-5p水平与预后无关。