姜黄素通过调控miR-7641/PTPN14分子轴抑制乳腺癌发展进程的分子机制研究

目的探讨姜黄素通过调控miR-7641/PTPN14分子轴抑制乳腺癌发展进程的分子机制。方法采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测乳腺癌患者癌组织及细胞系中miR-7641表达情况;使用Kaplan-Meier方法作乳腺癌患者生存曲线;采用不同浓度的姜黄素处理细胞,或转染miR-7641 mimic、Anti-miR-7641及pc DNA-PTPN14载体,采用q RT-PCR检测miR-7641表达情况,MTT实验及克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell小室法检测细胞迁移及侵袭,western blotting检测Ki67、pc DNA、Cyclin D1、Bax、Bcl-2、caspase-3、caspase-8蛋白表达水平,采用双荧光素酶报告基因系统检测miR-7641与PTPN14靶向调控关系。结果与癌旁组织或乳腺正常上皮细胞比较,miR-7641在乳腺癌患者癌组织及乳腺癌细胞系中高表达(P<0.01、0.001),且miR-7641能够明显促进乳腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭(P<0.05、0.01、0.001),并促进Ki67、pc DNA、Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达,抑制Bax、caspase-3、caspase-8蛋白表达;miR-7641与PTPN143′-UTR靶向结合,姜黄素通过miR-7641/PTPN14分子轴抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭(P<0.01、0.001),并抑制Ki67、pc DNA、Cyclin D1、Bax蛋白表达,促进Bcl-2、caspase-3、caspase-8蛋白表达。结论姜黄素可通过下调miR-7641促进PTPN14表达,进而抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭。

注意缺陷多动障碍患儿药物治疗前后microRNA表达量与临床症状的关系

目的探讨注意缺陷多动障碍(ADHD)儿童药物治疗前后microRNA表达量与临床症状的关系。方法选取2017年5月至2018年10月初诊为ADHD儿童80例为研究对象,将愿意接受药物治疗的儿童随机分为盐酸哌甲酯治疗组(n=31)和盐酸托莫西汀治疗组(n=33),不愿接受治疗的作为未治疗组(n=16),随访中盐酸哌甲酯组脱落10例,盐酸托莫西汀组脱落13例。另随机选取同时期行健康体检儿童60例作为健康对照组。ADHD儿童在首诊、随访3个月、6个月时进行SNAP-V评分,并采集ADHD及健康对照组儿童血清样本以荧光定量PCR法检测miR-4655-3p和miR-7641的相对表达量。结果重复测量方差分析结果显示,注意力不足症状SNAP-V评分在两治疗组和未治疗组中,以及两种miRNA相对表达量在两治疗组和健康对照组中均存在分组与时间因素差异,且分组与时间因素均存在交互作用(P<0.05)。多动冲动症状SNAP-V评分在两治疗组和未治疗组中存在时间因素差异(P<0.05),而分组因素差异无统计学意义,且时间因素与分组因素无交互作用(P>0.05)。经药物治疗的ADHD儿童注意力不足症状SNAP-V评分与miRNA-4655-3p和miRNA-7641相对表达量均呈负相关(分别r=-0.314、-0.495,P<0.05)。结论药物治疗可显著改善ADHD儿童的临床症状;血清中miR-4655-3p和miR-7641的表达水平可能作为ADHD的诊断及疗效评估的分子指标。

微小核糖核酸7641/沉默信息调节因子1途径参与高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞损伤的研究

目的探讨微小核糖核酸7641(miR-7641)/沉默信息调节因子1(SIRT1)途径参与人视网膜微血管内皮细胞(HRCEC)的损伤。方法HRCEC分为正常对照(NC)组、高糖(HG)组、高糖+抑制剂无关RNA序列(inhibitor NC)组(HG+siNC组)、高糖+miR-7641抑制剂(miR-7641 inhibitor)组(HG+miR-7641 siRNA组)。流式细胞仪检测细胞凋亡,细胞计数试剂盒8检测细胞增殖活力,RT-PCR法检测miR-7641表达,ELISA法检测SIRT1表达。结果与NC组比较,HG、HG+siNC、HG+miR-7641siRNA组细胞凋亡率、miR-7641表达升高(P<0.05),细胞活力、SIRT1表达降低(P<0.05)。HG+miR-7641siRNA组细胞凋亡、miR-7641表达低于HG、HG+siNC组(P<0.05),细胞活力、SIRT1表达高于HG、HG+siNC组(P<0.05)。结论miR-7641可能通过靶向降解SIRT1参与DM环境下HRCEC损伤,影响HRCEC增殖及凋亡,参与DR的发生发展。