miR-892a通过细胞外因子/β-连环蛋白信号通路调控对前列腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨miR-892a在前列腺癌细胞中表达情况及其过表达对细胞增殖、凋亡的影响。方法实验分为3组:空白对照组(BC)即BC组,转染空载病毒阴性对照组(NC)即miR-NC组,转染miR-892a过表达慢病毒序列为miR-892a mimic组,每组6个复孔。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-892a在前列腺癌细胞中的表达。慢病毒转染建立过表达miR-892a的前列腺癌细胞系。采用CCK-8、细胞流式检测过表达miR-892a对细胞增殖能力及凋亡能力的影响。qRT-PCR检测细胞外因子(Wnt)、β-连环蛋白(β-Catenin)、c-myc基因及转录因子SOX5分子mRNA的表达水平。结果人前列腺癌细胞(DU145、PC3)中miR-892a的表达水平显著低于人正常前列腺上皮细胞(RWPE-1)(P<0.05);慢病毒转染之后miR-892a mimic组的miR-892a表达水平显著高于BC组及miR-NC组(P<0.05);miR-892a mimic组24、48、72 h的细胞增殖活力均显著低于BC组及miR-NC组(P<0.05);miR-892a mimic组的前列腺癌细胞凋亡率显著高于BC组和miR-NC组(P<0.05);miR-892a mimic组的Wnt、β-Catenin、c-myc基因及转录因子SOX5的mRNA表达水平显著低于BC组及miR-NC组(P<0.05)。结论前列腺癌中的miR-892a水平下调,过表达miR-892a能抑制前列腺癌细胞的增殖、促进凋亡,其机制可能与Wnt/β-Catenin信号通路相关。

紫铆因通过调控lncRNA STXBP5-AS1/miR-892a轴对口腔鳞癌细胞的糖酵解、凋亡、迁移及侵袭的影响

目的:探讨紫铆因对口腔鳞癌细胞(HSC-3)糖酵解、凋亡、迁移及侵袭的影响和机制。方法:不同浓度紫铆因处理HSC-3细胞,运用流式细胞术、Transwell实验检测细胞凋亡、迁移和侵袭。试剂盒检测葡糖糖消耗以及乳酸产生量。实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测长链非编码RNA (lncRNA) STXBP5反义RNA1 (STXBP5-AS1)和miR-892a表达量。双荧光素酶报告实验和RT-qPCR分析和验证STXBP5-AS1与miR-892a调控关系。转染STXBP5-AS1过表达质粒至HSC-3细胞,检测STXBP5-AS1过表达对细胞糖酵解、凋亡、迁移及侵袭的影响。转染STXBP5-AS1小干扰RNA至HSC-3细胞,检测抑制STXBP5-AS1表达对紫铆因处理的HSC-3细胞糖酵解、凋亡、迁移及侵袭的影响。结果:紫铆因处理后HSC-3细胞葡萄糖消耗量、乳酸产生量、迁移和侵袭细胞数显著降低,凋亡率显著升高,STXBP5-AS1表达显著升高,miR-892a表达显著降低(P<0.05),并表现出一定剂量依赖效应。miR-892a是STXBP5-AS1的靶基因。过表达STXBP5-AS1后HSC-3细胞葡萄糖消耗量、乳酸产生量、迁移和侵袭细胞数显著降低,凋亡率显著升高,miR-892a表达显著降低(P<0.05)。抑制STXBP5-AS1表达可降低紫铆因处理对HSC-3细胞糖酵解、凋亡、迁移及侵袭的影响(P<0.05)。结论:紫铆因可抑制HSC-3细胞的迁移侵袭和糖酵解代谢,促进细胞凋亡,其机制可能与调控lncRNA STXBP5-AS1/miR-892a轴有关。

circ_0015756通过靶向调控miR-892b表达影响结直肠癌SW620细胞增殖、迁移、侵袭

目的探讨环状RNA 0015756(circ_0015756)对结直肠癌SW620细胞生物学行为的影响,分析其调控微小RNA-892b(miR-892b)表达的机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测49例结直肠癌组织和癌旁组织中circ_0015756和miR-892b表达水平。在SW620细胞中分别转染circ_0015756小干扰RNA(si-circ_0015756)、miR-892b模拟物、si-circ_0015756+miR-892b抑制物(anti-miR-892b),采用平板克隆实验和CCK-8法检测SW620细胞增殖能力,划痕愈合实验检测SW620迁移,Transwell实验检测SW620细胞侵袭,Western印迹检测神经钙黏素(N-cadherin)和上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白表达。双荧光素酶报告实验和RT-pCR分析circ_0015756对miR-892b的靶向作用。结果结直肠癌组织中circ_0015756表达水平较癌旁组织显著升高(P<0.05),而miR-892b表达水平较癌旁组织显著降低(P<0.05)。干扰circ_0015756或过表达miR-892b显著降低SW620细胞活力、克隆形成数、划痕愈合率、侵袭细胞数及N-cadherin蛋白表达量(P<0.05)。miR-892b是circ_0015756的靶基因,过表达circ_0015756显著下调miR-892b表达(P<0.05),而抑制circ_0015756显著上调miR-892b表达(P<0.05)。下调miR-892b能够逆转抑制circ_0015756对SW620细胞活力、克隆形成、迁移、侵袭及N-cadherin、E-cadherin蛋白表达的影响。结论结直肠癌中circ_0015756呈高表达,miR-892b呈低表达。抑制circ_0015756通过靶向上调miR-892b表达可抑制结直肠癌SW620细胞增殖、迁移和侵袭。