miR-939-5p、miR-144-3p与sST2在AHF患者中的预测评估价值

目的:探究miR-939-5p、miR-144-3p与可溶性生长刺激表达基因2蛋白(sST2)在急性心力衰竭(AHF)中的表达及预测评估价值。方法:选取2020年1月至2021年12月于启东市人民医院住院的AHF患者共487例作为研究对象,根据原发病分为缺血性心肌病(ICM)组335例、扩张型心肌病(DCM)组152例,另选取同期50例健康体检者,设为对照组。最终依据随访6个月全因死亡情况分为生存组、死亡组,对比miR-939-5p、miR-144-3p与sST2在不同美国纽约心脏病协会(NYHA)分级与预后组中的表达差异及对全因死亡结局的预测价值,通过Logistic回归分析总结AHF患者全因死亡的影响因素。结果:对比对照组,ICM组、DCM组miR-939-5p、miR-144-3p与sST2表达均明显升高(P<0.05)。AHF患者全因死亡率为10.63%。对比生存组,死亡组miR-939-5p、miR-144-3p、sST2表达均明显升高(P<0.05);年龄、NT-proBNP水平及糖尿病比例均明显升高(P<0.05)。用miR-939-5p、miR-144-3p、sST2预测AHF患者全因死亡的敏感度、特异度均≥60%,且AUC均>0.7。结论:miR-939-5p、miR-144-3p、sST2在AHF中呈高表达,其表达水平升高会增加AHF患者全因死亡的风险,有较高的预测评估价值。

miR-939在人肺癌中的表达及对细胞周期的影响

目的:探讨miR-939在人肺癌细胞株A549中的表达及增强miR-939表达对肺癌细胞周期的影响。方法:提取15对肺癌、癌旁正常组织标本的RNA,用qPCR法检测miR-939的表达。将miR-939前体转染入A549中,实验分为三组,即前体转染组(P组)、转染试剂阴性对照组(N组)、转染试剂空白对照组(C组),分别以qPCR法检测miR-939前体转染后三组细胞内miR-939的表达水平。用MTT法测定细胞生长曲线。PI染色法检测转染后三组细胞周期变化情况。结果:相对肺癌癌旁正常组织,86.7%肺癌组织中miR-939呈低表达(P<0.01)。P组中miR-939表达水平较N组、C组都显著升高(P<0.01)。转染48h后,P组较N组、C组,G1期细胞百分比明显增多,S期细胞百分比明显减少(P<0.05)。结论:miR-939在肺癌组织中呈低表达,上调A549细胞中miR-939的表达,能够诱导细胞周期阻滞。提示miR-939在肺癌的发生发展过程中有可能起着重要作用。

外泌体源性miR-939靶向ADCY6调控缺氧诱导的心肌细胞损伤

目的探究外泌体源性miR-939调控ADCY6在缺氧诱导的心肌细胞损伤中的作用机制。方法收集急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者血清,从血清以及正常心肌细胞中分离外泌体(exosome,exo),二氯化钴(CoCl2)处理H9C2细胞建立缺氧心肌细胞模型。将正常心肌细胞exo与H9C2细胞共培养并检测miR-939的表达。使用MTT、Transwell、流式细胞术检测细胞活力、迁移、凋亡。双荧光素酶报告实验验证miR-939与ADCY6的靶向调控关系。结果AMI患者血清、血清外泌体以及缺氧处理的心肌细胞中miR-939表达降低。正常心肌细胞exo能促进缺氧处理的H9C2细胞的增殖、迁移,并抑制心肌细胞凋亡(均P<0.05)。在exo中敲减miR-939能部分抵消exo的保护作用。ADCY6被证实是miR-939的靶基因,exo能够促进心肌细胞的增殖、迁移,抑制细胞凋亡,且联合miR-939效果更显著(P<0.05)。exo-miR-939的作用可被ADCY6部分抵消(均P<0.05)。结论正常心肌细胞exo通过将miR-939传递给缺氧诱导的心肌细胞来抑制ADCY6的表达,从而减轻心肌细胞损伤,为AMI的诊断和治疗提供了新的分子靶点。

急性冠脉综合征患者血清外泌体miR-499、miR-939和MALAT1水平变化及其临床意义

目的探讨急性冠脉综合征(ACS)患者血清外泌体miR-499、miR-939和MALAT1水平变化及其临床意义。方法选择2022年7月至2023年6月濮阳市人民医院收治的40例ACS患者为研究对象,其中20例不稳定型心绞痛患者为研究1组、20例急性心肌梗死患者为研究2组,另外将同期20例冠状动脉造影确定无冠脉狭窄者作为对照组。对比三组血清外泌体miR-499、miR-939、MALAT1水平。结果研究2组血清miR-499水平高于研究1组、对照组(P<0.05),而研究1组、对照组血清miR-499水平比较,差异未见统计学意义(P>0.05)。研究2组血清miR-939水平比研究1组、对照组低(P<0.05),研究1组血清miR-939水平比对照组低(P<0.05)。研究2组血清MALAT1水平比研究1组、对照组高(P<0.05),而研究1组、对照组血清miR-499水平比较,差异未见统计学意义(P>0.05)。结论血清外泌体miR-499、miR-939和MALAT1联合检测在ACS诊断中具有一定应用价值,可将其作为诊断、判断预后、选择治疗方式的靶点。

miR-939-5p对糖尿病视性网膜病变和视网膜微血管内皮细胞的调控作用

目的:探究mi R-939-5p对糖尿病性视网膜病变和人视网膜微血管内皮细胞(HRMEC)的调控作用。方法:将mi R-939-5p模拟物(mi R-939-5p-mimic)或mi R-939-5p抑制剂(mi R-939-5p-inhibitor)转染到HRMEC中,并将细胞用高糖(HG组,25 m M)或低糖(LG组,5 m M)处理24 h。通过细胞计数试剂盒8(CCK-8)来检测细胞活力,EdU法检测细胞DNA的复制能力,Hoechst 33258染色检测细胞凋亡,使用双荧光素酶试剂盒E2920验证mi R-939-5p与NOS2 3’-UTR之间的结合关系。对大鼠腹腔注射65 mg/kg的链脲佐菌素(STZ)诱导DR模型,通过RT-qPCR检测mi R-939-5p水平,Western Blot检测诱导型一氧化氮合酶(NOS2)水平,苏木精伊红(HE)染色检查大鼠视网膜形态,免疫组织化学染色检测视网膜Claudin-5和Occludin的表达,伊文思蓝染色检测大鼠血视网膜屏障(BRB)通透性,ELISA法检测大鼠房水中白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平。结果:与LG组的HRMEC相比,HG组的mi R-939-5p显著降低,而NOS2蛋白水平显著升高(P<0.05)。荧光素酶活性测定显示,与NC-mimic组相比,mi R-939-5p-mimic与pGL3-NOS2-WT共转染组的荧光素酶活性显著降低(P<0.05)。与HG+NC-mimic组相比,HG+mi R-939-5p-mimic组的mi R-939-5p水平和细胞活力显著升高,而NOS2蛋白水平和细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。与DR组相比,mi R-939-5p-Agomir组大鼠视网膜组织病变减轻,Claudin-5和Occludin的表达水平明显升高,伊文思蓝浓度显著降低(P<0.05);与DR组相比,mi R-939-5p-Agomir组大鼠房水中IL-1β和TNF-α的水平均显著降低(P<0.05)。结论:在高糖培养的HRMEC中和DR大鼠视网膜中,mi R-939-5p为低表达模式,NOS2为高表达模式。上调mi R-939-5p通过靶向抑制NOS2对DR大鼠视网膜和HRMEC提供保护作用。

血清mi R939-和mi R15b-表达与糖尿病视网膜病变患者微血管损伤的相关性分析

目的 分析血清miR-939和miR-15b表达与糖尿病视网膜病变(DR)患者微血管损伤的相关性。方法 选取2021年1月至2022年10月在保定市第二医院进行诊治的2型糖尿病患者176例作为研究对象。根据研究对象根据是否发生DR及病变程度分为无DR患者74例(NDR组)、非增殖型DR患者62例(NPDR组)、增殖型DR(PDR)患者40例(PDR组)。采用实时荧光定量PCR检测各组血清miR-939、miR-15b相对表达水平,酶联免疫吸附试验法检测各组血管内皮生长因子(VEGF)水平,流式细胞术检测内皮细胞(ECs)、内皮祖细胞(EPCs)和循环祖细胞(CPCs)计数百分比。比较3组患者血清miR-939、miR-15b、VEGF水平和ECs、EPCs、CPCs。采用Pearson相关性分析血清miR-939、miR-15b与VEGF、ECs、EPCs、CPCs的相关性。采用多因素Logistic回归分析2型糖尿病患者发生DR的影响因素。结果 PDR组、NPDR组血清miR-939、miR-15b相对表达水平低于NDR组,而血清VEGF水平高于NDR组,差异有统计学意义(P<0.05)。PDR组、NPDR组ECs高于NDR组,而EPCs和CPCs低于NDR组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-939与VEGF、ECs呈负相关(r=-0.407、-0.613,P<0.05),与EPCs、CPCs呈正相关(r=0.481、0.486,P<0.05),血清miR-15b与VEGF、ECs呈负相关(r=-0.539、-0.625,P<0.05),与EPCs、CPCs呈正相关(r=0.451、0.483,P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,2型糖尿病病程、糖化血红蛋白、餐后2 h血糖、VEGF、miR-939和miR-15b为2型糖尿病患者发生DR的影响因素(P<0.05)。结论 DR患者血清miR-939、miR-15b表达与VEGF、ECs、EPCs和CPCs密切相关,DR患者血清miR-939、miR-15b表达能够为其微血管损伤程度的早期判断与评估提供一定参考。