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miR-M11基因编辑对马立克病病毒体外复制的影响
被引量:
3
1
作者
王伟东
滕蔓
+6 位作者
郑鹿平
刘金玲
张文凯
李林燕
张志会
樊剑鸣
罗俊
《河南农业科学》
北大核心
2023年第1期134-143,共10页
为探究病毒编码的微小RNA前体基因miR-M11对马立克病病毒(MDV)体外复制能力的影响,以MDV国内分离株HN_(3)0_(2)为研究对象,利用CRISPR/Cas9系统靶向编辑并敲除位于Mid基因簇的miRM11,构建1株miR-M11基因编辑缺失毒株HN_(3)0_(2)ΔM11(...
为探究病毒编码的微小RNA前体基因miR-M11对马立克病病毒(MDV)体外复制能力的影响,以MDV国内分离株HN_(3)0_(2)为研究对象,利用CRISPR/Cas9系统靶向编辑并敲除位于Mid基因簇的miRM11,构建1株miR-M11基因编辑缺失毒株HN_(3)0_(2)ΔM11(克隆号C58-8-4)。经过PCR鉴定、测序分析、间接免疫荧光试验(IFA)、实时荧光定量PCR(qPCR)以及传代稳定性分析,证实HN302编码的miRM11被精确编辑并从病毒基因组中完全缺失,且未发生回复突变。病毒增殖曲线绘制结果显示,miRM11缺失毒株HN_(3)0_(2)ΔM11的增殖速度显著高于亲本毒株HN_(3)0_(2)(P<0.05)。综上,miR-M11是MDV复制的非必需基因,且其缺失后可增强MDV的体外复制能力。
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关键词
马立克病
mir-m11
微小RNA
CRISPR/Cas9
基因编辑
qPCR
复制
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职称材料
题名
miR-M11基因编辑对马立克病病毒体外复制的影响
被引量:
3
1
作者
王伟东
滕蔓
郑鹿平
刘金玲
张文凯
李林燕
张志会
樊剑鸣
罗俊
机构
河南省农业科学院动物免疫学重点实验室/农业农村部动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室
郑州大学公共卫生学院
河南省农业科学院中英禽病国际研究中心
河南科技大学动物科技学院
出处
《河南农业科学》
北大核心
2023年第1期134-143,共10页
基金
国家自然科学基金项目(U21A20260)
河南省自然科学基金项目(212300410359)
河南省农业科学院自主创新项目(2022ZC65)。
文摘
为探究病毒编码的微小RNA前体基因miR-M11对马立克病病毒(MDV)体外复制能力的影响,以MDV国内分离株HN_(3)0_(2)为研究对象,利用CRISPR/Cas9系统靶向编辑并敲除位于Mid基因簇的miRM11,构建1株miR-M11基因编辑缺失毒株HN_(3)0_(2)ΔM11(克隆号C58-8-4)。经过PCR鉴定、测序分析、间接免疫荧光试验(IFA)、实时荧光定量PCR(qPCR)以及传代稳定性分析,证实HN302编码的miRM11被精确编辑并从病毒基因组中完全缺失,且未发生回复突变。病毒增殖曲线绘制结果显示,miRM11缺失毒株HN_(3)0_(2)ΔM11的增殖速度显著高于亲本毒株HN_(3)0_(2)(P<0.05)。综上,miR-M11是MDV复制的非必需基因,且其缺失后可增强MDV的体外复制能力。
关键词
马立克病
mir-m11
微小RNA
CRISPR/Cas9
基因编辑
qPCR
复制
Keywords
Marek’s disease
miR‐M
11
miRNA
CRISPR/Cas9
Gene editing
qPCR
Replication
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
miR-M11基因编辑对马立克病病毒体外复制的影响
王伟东
滕蔓
郑鹿平
刘金玲
张文凯
李林燕
张志会
樊剑鸣
罗俊
《河南农业科学》
北大核心
2023
3
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