干扰素-α1b通过miR141抑制ZEB1/SIP1信号通路改善IgA肾病肾小管上皮细胞上皮-间充质转化和纤维化

目的研究干扰素-α1b通过mi R141抑制锌指E盒结合同源蛋白1(ZEB1)/Smad相互作用蛋白1(SIP1)信号通路改善Ig A肾病肾小管上皮细胞上皮-间充质转化(EMT)和纤维化的影响。方法通过MDCK细胞模型验证干扰素-α1b对mi R-141表达、ZEB1/SIP1信号通路的影响;构建Ig A肾病大鼠模型,按照随机分为对照组、模型组、干扰素-α1b(15、30μg)组、泼尼松组,每组8只,连续治疗8周。监测大鼠肾功能、炎症因子水平、Ig A沉积和肾脏病理变化;分析mi R-141、ZEB1、SIP1、E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达水平。结果体外实验表明,干扰素-α1b能够显著上调MDCK细胞中mi R-141的表达,并降低ZEB1和SIP1蛋白相对表达量(P<0.05)。Ig A肾病大鼠模型中,相比于模型组,干扰素-α1b组大鼠肾功能显著改善,炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的分泌水平明显降低,Ig A沉积减少,肾脏损伤得到缓解(P<0.05)。干扰素-α1b能诱导大鼠肾脏中mi R-141显著上调,抑制ZEB1和SIP1蛋白相对表达,上调Ecadherin蛋白相对表达,抑制上皮细胞EMT和纤维化(P<0.05)。结论干扰素-α1b通过上调肾脏中mi R-141的表达,抑制转录因子ZEB1和SIP1表达,减少对E-cadherin的抑制,最终抑制肾小管上皮细胞EMT和纤维化,有效改善Ig A肾病。

miR200家族在乳腺癌患者血浆中表达水平的检测及其临床意义

目的:检测microRNA200 (miR200)家族在乳腺癌患者和正常人血浆中表达水平,评价其对乳腺癌筛查、进展和预后评估的潜在价值。方法:收集82例乳腺癌患者(乳腺癌组)和30名健康女性(对照组)的血浆标本,提取血浆中的微小RNAs (miRNAs),逆转录后采用实时荧光定量PCR法检测2组受试对象血浆中miR200家族(miR200a、miR200b、miR200c、miR141和miR429)的表达水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血浆中miRNAs的诊断价值,分析乳腺癌患者血浆miRNAs表达水平与临床病理参数的关系;采用Cox风险比例模型进行生存分析。结果:乳腺癌组患者血浆中miR141表达水平低于对照组(P<0.01),ROC曲线下面积(AUC)为0.717 (P<0.01);miR200b表达水平低于对照组(P=0.006),AUC为0.685(P=0.003);但miR200a、miR200c和miR429表达水平与对照组比较差异无统计学意义(P=0.268,P=0.075,P=0.872)。联用miR141和miR200b时,AUC为0.735,比单用miR141稍有提升。miR200家族的表达水平与乳腺癌临床病理特征和术后总生存期无关联(P>0.05)。结论:miR200b和miR141有可能作为乳腺癌诊断的分子生物学指标。

miR-141通过调控TSGF对直肠癌细胞化疗敏感性及免疫逃逸的作用机制

目的探究微小RNA(miR)-141通过调控肿瘤特异性生长因子(TSGF)对直肠癌细胞化疗敏感性及免疫逃逸的作用机制。方法实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测正常直肠上皮细胞及3种直肠癌细胞系中miR-141表达水平,取直肠癌细胞将其分为直肠癌细胞(CC)组、直肠癌细胞+miR-141-NC(MN)组,直肠癌细胞+miR-141 mimics(MM)组、直肠癌细胞+miR-141 inhibitor(MI)组、直肠癌细胞+TSGF-NC(TN)组、直肠癌细胞+TSGF过表达质粒(TM)组、直肠癌细胞+TSGF沉默质粒(TI)组、直肠癌细胞+miR-141 inhibitor+TSGF沉默质粒(MT)组,CCK-8法检测化疗敏感性,免疫印迹法检测免疫逃逸相关因子及TSGF蛋白表达,双荧光素酶报告实验证实miR-141和TSGF的相互作用。结果直肠癌细胞系中的miR-141 mRNA表达量均显著高于正常直肠上皮细胞系NCM460,其中SW837的miR-141 mRNA表达量最高(P<0.05);与MN组、TN组相比,MM组、TM组细胞化疗敏感性、程序性死亡分子(PD)-1、PD-1配体(PD-L1)及TSGF蛋白表达明显升高(P<0.05),MI组、TI组细胞化疗敏感性、PD-1、PD-L1及TSGF蛋白表达明显降低(P<0.05);与TI组相比,MT组细胞化疗敏感性、PD-1、PD-L1及TSGF蛋白表达明显降低(P<0.05);双荧光素酶报告结果显示,转染miR-141后可显著促进TSGF-3′-非翻译区(UTR)-野生型(WT)的荧光素酶活性(P<0.05),但对突变基因无显著影响(P>0.05);miR-141与TSGF呈正相关(P<0.05)。结论抑制miR-141表达可显著提高直肠癌细胞化疗敏感性,抑制细胞免疫逃逸,其机制可能与抑制TSGF有关。