miR146通过靶向Notch 1促进骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化

目的探讨miR146在骨髓间充质干细胞(BMSC)向髓核样细胞分化中的作用及其机制。方法从SD大鼠中分离培养BMSC,传至第3代用于本实验。以TGFβ1(转化生长因子-β1)诱导BMSC向髓核样细胞分化为模型。检测TGFβ1诱导BMSC后蛋白多糖(ACAN)、Ⅱ型胶原蛋白(COLⅡ)和SOX 9的蛋白及mRNA表达水平;RT-PCR检测miR146的表达水平。随后通过上调或下调miR146水平,检测ACAN、COLⅡ和SOX 9的蛋白及mRNA表达水平;双荧光素酶报告系统验证miR146的靶基因,并上调或下调miR146水平后检测靶基因的蛋白表达水平;过表达靶基因并检测其与miR146 mimic共转染对ACAN、COLⅡ和SOX 9表达的影响。最后,上调或下调靶基因后,检测miR146表达水平的变化。结果 TGFβ1诱导BMSC向髓核样细胞分化后ACAN、COLⅡ、SOX 9和miR146高表达。上调miR146后,ACAN、COLⅡ和SOX 9的表达升高;下调miR146后ACAN、COLⅡ和SOX 9的表达降低。双荧光素酶报告系统证实,Notch1是miR146的靶基因,miR146通过抑制Notch1的表达上调ACAN、COLⅡ和SOX 9的表达水平。上调Notch1后miR146表达下调,下调Notch1后miR146表达上调。结论 miR146通过靶向Notch1促进骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化,Notch1对miR146亦具有负向调控作用。

基质辅助激光解析电离时间飞行质谱技术检测miR146a单核苷酸多态性

目的:运用基质辅助激光解析电离时间飞行质谱技术(MALDI-TOF-MS)检测miR146a基因单核苷酸多态性,并探讨其与哈萨克族食管癌的相关性。方法:运用MALDI-TOF-MS检测261例哈族食管癌患者及190例同地区对照样本miR146a基因rs2910164位点单核苷酸多态性。结果:成功应用MALDI-TOF-MS检测了哈族食管癌miR146a基因rs2910164位点G/C多态,其基因型分布频率分别是36.4%,49.0%和14.6%,与对照组基因型分布频率(分别是36.3%,49.5%,14.2%)之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:基于MALDI-TOF-MS技术检测miR146a基因多态性的方法是一个快速、准确和可靠的检测方法。

miR146a及miR155表达与益赛普治疗类风湿关节炎疗效及安全性的相关性研究

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)中miR146a及miR155的表达与益赛普治疗RA疗效的相关性。方法 117例中国RA患者接受了为期3个月的益赛普治疗,以欧洲抗风湿病联盟与美国风湿病学学会共同修订的RA临床缓解新标准评估益赛普对RA的疗效。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法检测PBMC中miR146a及miR155的表达水平,并分析miR146a及miR155的表达水平与益赛普治疗RA疗效的相关性。结果治疗后,临床缓解91例,26例患者未达到临床缓解新标准。临床缓解患者PBMC中miR146a的表达水平显著低于未达到临床缓解患者[(1.30±0.62)比(1.59±0.56),P<0.05],而两组患者miR155的表达水平无显著性差异[(1.87±0.46)比(1.83±0.33),P>0.05]。结论治疗前,PBMC中miR146a的表达水平与益赛普治疗RA的疗效可能相关,具有较低miR146a表达水平的RA患者对益赛普的疗效反应较好,有可能作为益赛普对RA的疗效预测指标,具体作用机制尚需作进一步研究。

注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白治疗类风湿关节炎疗效及与尿沉渣中miR146a表达的相关性

目的:探讨类风湿关节炎(RA)患者尿沉渣中miR146a的表达与注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(rh TNFR:Fc)治疗RA疗效的相关性。方法:117例中国RA患者接受为期3个月的rh TNFR:Fc的治疗,治疗后评价疗效。治疗前对入选患者尿沉渣中miR146a的表达水平进行检测,分析尿沉渣中miR146a的表达水平与rh TNFR:Fc治疗RA疗效的相关性。结果:117例患者中,达到RA临床缓解新标准的91例患者,其尿沉渣中miR146a的表达水平为(0.39±0.26),显著低于未达标的26例患者的(0.89±0.31),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在治疗前尿沉渣中miR146a的表达水平与rh TNFR:Fc治疗RA的疗效可能相关,具有较低的miR146a表达水平的RA患者对rh TNFR:Fc的疗效反应较好,有可能作为rh TNFR:Fc对RA的疗效预测指标,其具体机制尚需进一步的研究。

类风湿关节炎患者治疗前尿沉渣中miR146a的表达与治疗效果的关系

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者治疗前尿沉渣中miR146a的表达与益赛普治疗效果的相关性。方法 2013年6月至2016年3月,收集117例来自深圳市龙华区人民医院风湿免疫科的符合入选标准的中国RA患者作为研究对象,对其进行为期3个月的益赛普的治疗。采用美国风湿病学会与欧洲抗风湿病联盟联合制定的RA临床缓解标准,对益赛普治疗RA的疗效进行评估。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应方法,在治疗前对研究对象尿沉渣中miR146a的表达水平进行检测。在治疗结束后,统计分析治疗前尿沉渣中miR146a的表达水平与益赛普治疗RA效果的相关性。结果治疗结束时,达到RA临床缓解标准的RA患者91例(77.8%),其余26例(22.2%)RA患者未达到临床缓解新标准。达到RA临床缓解标准的RA患者的尿沉渣中miR146a的表达水平为(0.39±0.26),而未达到RA临床缓解标准的患者的表达水平为(0.89±0.31),前者明显低于后者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论治疗前尿沉渣中miR146a的表达水平与益赛普治疗RA的疗效可能相关,具有较低的miR146a表达水平的RA患者对益赛普的疗效反应较好,有可能作为益赛普对RA的疗效预测指标,其具体机制尚需进一步的研究。

MiR146a-loaded engineered exosomes released from silk fibroin patch promote diabetic wound healing by targeting IRAK1

Unhealable diabetic wounds need to be addressed with the help of newer,more efficacious strategies.Exosomes combined with biomaterials for sustained delivery of therapeutic agents are expected to bring new hope for chronic wound treatment.Here,the engineered exosomes modified for efficiently loading miR146a and attaching to silk fibroin patch(SFP)were demonstrated to promote diabetic wound healing.Silk fibroin binding peptide(SFBP)was screened through phage display,and SFBP-Gluc-MS2(SGM)and pac-miR146a-pac fusion protein were constructed.The designed exosomes(SGM-Exos,miR146a-Exos,and SGM-miR146a-Exos)were isolated from the engineered placental mesenchymal stem cells(PMSCs)transduced with SGM or/and pac-miR146a-pac protein.Gluc signals indicated SGM-Exo@SFP markedly increased the binding rate and the stability of SGM-Exo.Moreover,the loading efficiency of miR146a in SGM-miR146a-Exos was ten-fold higher than that in miR146a-Exos.Superior to untreated,SGM-miR146a-Exo-only treated,and SFP-only treated groups,SGM-miR146a-Exo@SFP drived wound healing associated with less inflammation,collagen deposition,and neovascularization.The transcriptomics analysis suggested anti-inflammatory and regenerative effects with SGM-miR146a-Exo@SFP treatment.Here,we show efficient exosome@biomaterial-based miRNA delivery systems for regenerative medicine and tissue engineering.

消瘀接骨散对骨关节炎患者血瘀状态及miR146、IL-12家族的影响

目的:观察消瘀接骨散对骨关节炎患者血瘀状态及miR-146、IL-12家族的影响。方法:按照随机对照表将60例病例随机均分为对照组和观察组,对照组采用氨基葡萄糖口服治疗,观察组采用氨基葡萄糖口服联合消瘀接骨散外敷治疗。分别于治疗前后观察临床疗效、关节功能评分、中医证候积分、凝血指标[凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、部分凝血酶原时间(APTT)、纤维蛋白原(FBG)、纤维蛋白原降解产物(FDP)、国际标准化比值(INR)、D二聚体(D-D)]。RT-PCR法检测外周血miR-146、白细胞介素(Il)-12、Il-35 mRNA表达,酶联免疫吸附法检测IL-12、IL-35含量。结果:观察组有效率明显高于对照组(P<0.05)。与治疗前比较,观察组治疗后疼痛口述评分(VRS)、关节功能调查量表(WOMAC评分)、关节夜间刺痛积分、僵硬感积分、局部肿胀积分、TT、FBG、FDP、IL-12明显降低,Il-12 mRNA明显下调(P<0.05),Il-35 mRNA表达上调(P<0.05)。对照组治疗后VRS评分、LequesneMG指数、关节夜间刺痛积分、关节活动不利积分、关节僵硬感积分、TT、IL-12含量降低,miR-146 mRNA表达升高(P<0.05或P<0.01)。与对照组治疗后比较,观察组治疗后关节夜间刺痛、局部肿胀积分和FDP降低(P<0.05)。结论:消瘀接骨散可能通过抑制miR-146,上调IL-35、下调IL-12表达,改善骨关节炎患者血瘀状态和关节肿痛症状。

miR146a（rs2910164）G〉C多态性与儿童急性淋巴细胞白血病易感性的关系

目的探讨miR146a（rs2910164）G〉C多态性与儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）易感性的关系。方法选取2010年3月至2016年10月保定市第一中心医院ALL患儿血液标本200份作为病例组，健康儿童血液标本100份作为健康对照组，病例组和健康对照组性别、年龄比较差异均无统计学意义（χ2=0．430，P=0．512;χ2=2.839，P=0．092），病例组和健康对照组基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡，采用限制性片段长度多态性（restriction fragment length polymorphism，RFLP）方法检测MiR146a（rs2910164）G〉C多态性。基因型和ALL的关系以比值比（odds ratio，OR）和95％可信区间（credibility interval，CI）表示。结果miR146a（rs2910164）GG、GC和CC基因型在病例组和健康对照组的频率分别为16．0％、44．5％、39．5％和29．0％、41．0％、30．0％。GC／CC基因型在病例组的频率显著高于健康对照组（以GG基因型为参照，GC基因型：OR=1．967，95％CI：1．054～3．672，P=0．037；CC基因型：OR=2．386，95％CI：1．239～4．595，P=0．012）。结论miR146a（rs2910164）G〉C多态性与儿童ALL易感性密切相关。

miR146a参与炎症条件下骨髓间充质干细胞成骨分化的降低及其机制研究

目的:阐明炎症对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及miR146a在此过程中的调控作用。方法:将骨髓间充质干细胞置于3种不同条件培养基下培养:①成骨分化诱导培养基、②成骨分化培养基联合BMP2、③成骨分化联合炎症刺激TNF(10 ng/mL),观察其成骨分化情况。通过miRNA特异性的qRT-PCR观察miR146a在上述条件下变化情况,进而对细胞转染miR146a的拮抗体antago-miR146a观察炎症条件下骨髓间充质干细胞的成骨分化情况。结果:建立了稳定的骨髓间充质干细胞体外培养体系,在不同诱导条件下其能成骨、成脂、成软骨。BMP2能够促进MSC成骨分化,而模拟炎症刺激TNF则能抑制MSC的分化;分化条件下,miR146a表达下降;而TNF剂量依赖性能增强miR146a的表达;miR146a拮抗体则能逆转TNF引起的骨髓间充质干细胞成骨分化降低。结论:miR146a参与炎症条件下骨髓间充质干细胞成骨分化的抑制。

miR146a通过Smad4参与多柔比星的心肌细胞毒性作用

目的:探讨miR146a参与多柔比星心肌细胞毒性作用的可能机制。方法:用多柔比星处理大鼠心肌细胞,用CCK-8方法检测细胞活力,用荧光定量PCR检测miR146a的变化,用Western blot检测切割的Caspase 3的蛋白变化。使用常间回文重复序列丛集(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)的方法,设计针对miR146a的向导RNA,敲除miR146a的表达。用CCK-8方法和Western blot分别检测敲除细胞的活力和Caspase 3蛋白变化。用软件预测miR146a的靶基因,利用荧光素酶系统进行验证。用Western blot检测多柔比星处理后靶基因的变化,以及用Western blot检测敲除miR146a对靶基因变化的影响。结果:多柔比星处理导致大鼠心肌细胞活力降低,切割的Caspase 3水平升高,同时发现miR146a表达升高(3.6倍)。使用CRISPR可有效敲除miR146a的表达,敲除效果显著高于microRNA decoy的效果(88.6%vs 57.6%)。敲除miR146a的细胞用多柔比星处理,miR146a增加不明显(1.08倍),并且敲除miR146a抑制了多柔比星导致的细胞活力降低和Caspase 3升高。经生物信息学及荧光素酶检测证实在大鼠心肌细胞内Smad family member 4(Smad4)是miR146a的靶基因,用多柔比星处理心肌细胞后,Smad4的表达降低。而敲除miR146a后,Smad4的表达升高,用多柔比星处理敲除miR146a的细胞,Smad4的表达变化不明显。结论:大鼠心肌细胞中,miR146a通过调节Smad4的表达参与了多柔比星对细胞的毒性作用。

miR146a基因多态性与早发型阿尔茨海默病的关联性研究

目的 探讨miR146a的基因多态性与早发型阿尔茨海默病（EOAD）的关系.方法 本研究共纳入103例EOAD患者和100名健康对照组人群,采用SnapShot分型技术检测miR146a基因的rs2910164和rs57095329的多态性.结果 病例组的rs57095329位点的基因型和等位基因频率与健康对照组比较,差异有统计学意义（基因型P=0.027 0,等位基因频率P=0.004 2）,而rs2910164的病例组和对照组基因型和基因频率差异无统计学意义（基因型P=0.595 7,等位基因频率P=0.322 6）.结论 miR146a基因的rs57095329多态位点与EOAD的发病风险具有相关性,rs57095329的G等位基因是EOAD的发病风险的保护因素.

补阳还五汤对急性高血压脑出血综合功能、炎性因子及miR124、miR146a的影响

目的观察补阳还五汤对急性高血压脑出血综合功能、炎性因子及微小RNA124(miR124)、微小RNA146a(miR146a)的影响。方法将本院72例急性高血压脑出血患者随机分为观察组与对照组两组各36例。对照组采用西医康复治疗,观察组采用西医康复治疗联合补阳还五汤治疗,比较两组综合功能评分、血清炎性因子的水平、脑脊液中miR124、miR146a的水平。结果治疗后,两组患者各个中医证候积分均降低,且观察组患者各个中医证候积分均低于对照组(P<0.05);两组hs-C超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、同型半胱氨酸(Hcy)水平均降低;且观察组hs-CRP、IL-8、TNF-α和Hcy水平均低于对照组(P<0.05);两组脑脊液miR124、miR146a水平均降低;且观察组脑脊液miR124、miR146a水平均低于对照组(P<0.05)。结论补阳还五汤明显提高急性高血压脑出血的综合功能,可能与血清中炎性因子、Hcy、脑脊液中miR124、miR146a的含量下降有关。

miR⁃146a通过TGF⁃β1/SMAD通路调控脊柱结核进展的分子机制

目的探讨miR⁃146a/转化生长因子-β(transforming growth factor⁃β1,TGF⁃β1)/母亲抗肢瘫(small mother against decapentaplegic,SMAD)通路在脊柱结核进展中的调控机制。方法收集脊柱结核病人和正常病人髓核组织,验证miR⁃146a/TGF⁃β1/SMAD通路在结核髓核组织中的表达量;分离培养髓核细胞,敲低/过表达miR⁃146a,分别应用qPCR、Western blot、CCK⁃8、划痕实验验证miR⁃146a对TGF⁃β1/SMAD通路表达及髓核细胞增殖、迁移能力的影响。结果与正常病人比较,脊柱结核病人髓核细胞增殖及迁移能力显著减低,miR⁃146a在脊柱结核病人髓核组织中表达量显著减低,而脊柱结核病人髓核组织中SMAD同系物2(SMAD2)、SMAD同系物3(SMAD3)、SMAD同系物4(SMAD4)、TGF⁃β1基因表达增高,SMAD同系物7(SMAD7)表达减低,提示miR⁃146a与TGF⁃β1/SMAD通路活性显著负相关。过表达miR⁃146a可抑制SMAD2、SMAD3、SMAD4、TGF⁃β1和促进SMAD7表达,而敲低miR⁃146a可促进SMAD2、SMAD3、SMAD4、TGF⁃β1 mRNA和抑制SMAD7表达水平。细胞实验进一步证实过表达miR⁃146a可促进脊柱结核病人髓核细胞增殖和迁移能力,而敲低miR⁃146a可显著抑制其增殖和迁移能力。结论miR⁃146a是脊柱结核进展的关键调控因子,其可通过抑制TGF⁃β1/SMAD通路活性进而调控髓核细胞增殖及迁移活性。

类克治疗强直性脊柱炎的临床效果及对患者miR146a的影响

目的探讨注射用英夫利西单抗(类克)在强直性脊柱炎治疗中的应用效果及对患者miR146a的影响。方法选取2014年6月至2016年1月强直性脊柱炎患者86例为研究对象,经随机数字表法分为观察组和对照组,每组43例。对照组给予常规治疗,观察组在对照组基础上加用类克治疗,观察两组患者治疗效果及miR146a水平变化。结果治疗前两组患者临床指标比较差异未见统计学意义(P>0.05),治疗后均有改善,观察组治疗后BASDAI、脊柱疼痛VAS评分明显低于对照组,晨僵持续时间明显短于对照组,扩胸度显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者治疗前miR146a表达比较差异未见统计学意义(P>0.05),治疗后均有降低,观察组治疗后6周、12周miR146a水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论类克治疗强直性脊柱炎效果确切,可显著改善症状及体征,同时能降低患者miR146a表达,值得推广。

电针对睡眠剥夺大鼠脾脏TLR4信号通路以及miR146a的影响

目的:观察电针对睡眠剥夺大鼠脾脏TLR4/NF-κβ信号通路上关键因子Toll样受体4(TLR4)、核因子-κβ(NF-κβ)、白细胞介素1受体相关激酶1(IRAK1)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)和微小核糖核酸146a(miR146a)表达的影响。方法:将32只雄性SPF级Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、安定组和电针组,每组8只。对照组未做任何处理,其余3组注射对氯苯丙氨酸(PCPA)进行睡眠剥夺后,安定组腹腔注射安定注射液,电针组给予电针百会、神庭,每组每天治疗1次,连续5天后采用RT-PCR检测大鼠脾脏TLR4、NF-κβ、IRAK1、TRAF6和miR146a的表达情况。结果:与对照组比较,模型组大鼠脾脏TLR4、NF-κβ、IRAK1、TRAF6的mRNA表达量明显升高,脾脏miR146a的表达量升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,安定组和电针组大鼠脾脏TLR4、NF-κβ、IRAK1、TRAF6的mRNA表达量显著降低,安定组大鼠脾脏miR146a的表达量显著降低,电针组大鼠脾脏miR146a的表达量明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:电针百会、神庭可以提高睡眠剥夺大鼠体内miR146a的表达,进而负性调节TLR4信号通路,最终达到对固有免疫应答的调控作用,减轻睡眠剥夺对机体的损害。

脂多糖上调微RNA-146a表达减缓小鼠肾脏缺血再灌注损伤

目的明确脂多糖(LPS)预处理上调微RNA(microRNA)-146a(以下简称miR-146a)表达对小鼠肾脏缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用。方法 120只8~10周无特定病原体(SPF)级C57BL/6雄性小鼠,体重20~25g,将其随机分入0.9%氯化钠溶液假手术组(NS假手术组)、LPS假手术组、抑制miR-146a+LPS预处理I/R组、LPS预处理I/R组、单纯I/R组和抑制miR-146a+I/R组,每组20只。分别于I/R后6、24和48h处死小鼠(每个时间点5只小鼠),通过实时PCR检测miR-146a在肾脏中的表达情况。I/R后24h,每组选择5只小鼠,心脏采血,分离血清,采用Quantichrom^(TM) creatinine Assay试剂盒检测血清肌酐(sCr)水平;留取各组小鼠的肾脏组织标本,进行过碘酸-雪夫(PAS)染色,采用Jablonski评分法和肾小管间质损伤评分评估肾组织的病理改变,并采用TUNEL法检测肾组织切片细胞凋亡情况。结果 LPS预处理I/R组小鼠I/R后6、24和48h肾组织中的miR-146a水平均显著高于NS假手术组、抑制miR-146a+LPS预处理I/R组和抑制miR-146a+I/R组同时间点(P值均<0.01)。I/R后24h,抑制miR-146a+LPS预处理I/R组、单纯I/R组和抑制miR-146a+I/R组小鼠的sCr水平均显著高于LPS假手术组和LPS预处理I/R组(P值均<0.01),NS假手术组、LPS假手术组与LPS预处理I/R组间的差异均无统计学意义(P值均>0.05);抑制miR-146a+LPS预处理I/R组和单纯I/R组的肾小管间质损伤评分均显著高于LPS假手术组和LPS预处理I/R组(P值均<0.05),抑制miR-146a+LPS预处理I/R组与单纯I/R组间肾小管间质损伤评分的差异无统计学意义(P>0.05);抑制miR-146a+LPS预处理I/R组和单纯I/R组小鼠肾小管上皮细胞每高倍镜视野下的平均凋亡阳性细胞数显著多于LPS假手术组和LPS预处理I/R组(P值均<0.01)。结论 miR-146a是参与LPS诱导的肾脏I/R交叉耐受肾保护作用的重要调控分子,LPS预处理上调miR-146a表达可以显著改善I/R小鼠肾功能,减少肾小管间质损伤和肾小管上皮细胞凋亡。

虎黄烧伤搽剂对小鼠烫伤MRSA感染模型中miR⁃155、miR⁃146a及炎症因子的影响

目的:探讨虎黄烧伤搽剂对小鼠烫伤MRSA感染模型中微小RNA⁃155(miR⁃155)、miR⁃146a及炎症因子的影响。方法:建立小鼠烫伤MRSA感染模型,实验设置3组:正常对照组、模型组、虎黄烧伤搽剂组,每组各10只。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT⁃PCR)检测miR⁃155、miR⁃146a及TLR2、TLR6、NOD2、IRAK⁃1、IRAK⁃4、IRK⁃M mRNA表达;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清细胞因子TNF⁃α、IL⁃6、IL⁃1β、IFN⁃γ、CCL3水平。采用Pearson法分析虎黄烧伤搽剂组小鼠烫伤创面组织中miR⁃155、miR⁃146a表达量与TLR2、TLR6、NOD2、IRAK⁃1、I⁃RAK⁃4、IRK⁃M表达量的相关性。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠烫伤创面组织中miR⁃155及TLR2、TLR6、NOD2、IRAK⁃1、IRAK⁃4 mRNA表达显著升高,miR⁃146a及IRK⁃M mRNA表达显著降低,血清TNF⁃α、IL⁃6、IL⁃1β、IFN⁃γ、CCL3水平显著升高(P<0.05)。与模型组比较,虎黄烧伤搽剂组小鼠烫伤创面组织中miR⁃155及TLR2、TLR6、NOD2、IRAK⁃1、IRAK⁃4 mRNA表达显著降低(P<0.05),miR⁃146a及IRK⁃M mRNA表达显著升高,血清TNF⁃α、IL⁃6、IL⁃1β、IFN⁃γ、CCL3水平显著降低。miR⁃155与TLR2、TLR6、IRAK⁃1呈正相关,IRK⁃M呈负相关(P<0.05);miR⁃146a与TLR2、TLR6、IRAK⁃1呈负相关,与IRK⁃M呈正相关(P<0.05)。结论:虎黄烧伤搽剂治疗小鼠烫伤MR⁃SA感染模型后可抑制miR⁃155表达、促进miR⁃146a表达及抑制炎症因子释放,其作用机制可能与调控IRAK⁃1、I⁃RAK⁃4、IRK⁃M表达及TLRs信号通路有关。

益赛普联合柳氮磺吡啶治疗强直性脊柱炎疗效及miR⁃29a、miR⁃146a的变化

目的探讨益赛普联合柳氮磺吡啶治疗强直性脊柱炎(AS)疗效及对外周血单个核细胞(PBMCs)中miR⁃29a、miR⁃146a表达的影响。方法选取本院AS患者123例进行前瞻性随机对照研究,以随机数字表将患者分为对照A组(n=41)、对照B组(n=41)、观察组(n=41)。对照A组给予益赛普,对照B组给予柳氮磺吡啶,观察组给予益赛普联合柳氮磺吡啶,均治疗12周。比较3组疗效与治疗前、治疗4、8、12周后症状与病情改善情况[脊柱痛、晨僵时间、AS活动指数(BASDAI)评分]、血清炎症因子指标[C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子⁃α(TNF⁃α)、基质金属蛋白酶⁃3(MMP⁃3)]、PBMCs中miR⁃29a、miR⁃146a水平。结果经治疗,临床疗效改善率比较结果显示,观察组最高,其次是对照A组,最低是对照B组,差异有统计学意义(P<0.05),而无效率则是对照B组最高,其次是对照A组,最低是观察组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗4、8、12周后脊柱痛、晨僵时间、BASDAI评分、血清CRP、TNF⁃α、MMP⁃3及PBMCs中miR⁃29a、miR⁃146a水平比较结果为:观察组最低,其次是对照A组,最高是对照B组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论应用益赛普联合柳氮磺吡啶治疗AS患者可减轻机体炎症反应,降低PBMCs中miR⁃29a、miR⁃146a水平,改善临床症状、病情,疗效显著。

低强度周期性应力对骨骼肌细胞增殖分化调控的机制

目的:探明低强度周期性应力调控骨骼肌细胞增殖分化的分子机制。方法:采用Flexercell Strain Unit系统对C2C12成肌细胞加载5%牵张应力,观察细胞增殖和分化情况,检测成肌细胞分化标志基因myogenin等的表达情况,荧光报告系统检测NFkappa B的活性,microRNA特异性荧光定量PCR检测miR146a在增殖和分化条件下表达差异。结果:在5%周期性牵张应力作用下,成肌细胞分化受到抑制;无论增殖条件还是分化条件下,低强度拉伸均可以导致miR146a升高,但在分化条件下更为明显(P<0.05);分化条件下组成性的NFkappa B的活性低于其在增殖条件下的活性(P<0.05)。结论:低强度应力抑制骨骼肌细胞分化,可能是通过miR146a的升高从而抑制NFkappaB的活性引起的。

miR⁃146a多态性对硫辛酸治疗2型糖尿病患者糖尿病周围神经病变疗效的影响

目的探讨miR‐146a rs2910164多态性对硫辛酸治疗T2DM患者糖尿病周围神经病变(DPN)临床预后的影响。方法选取2017年1月至2020年1月于南京医科大学康达学院第一附属医院内分泌科住院治疗的T2DM合并DPN患者128例。使用TaqMan探针法检测外周血miR‐146a rs2910164的基因多态性,硫辛酸(0.6 g,1次/d,静滴)治疗3周后,根据DPN患者改善情况分为无效组(IG,n=44)和总有效组(EG,n=84),比较两组基因多态性表达差异。结果与EG组比较,IG组miR‐146a rs2910164位点等位基因G和GG基因型频率降低(72.73%vs 38.10%,50.00%vs 28.57%,P<0.05);与CC基因型患者比较,GG基因型患者治疗有效率(89.29%vs 38.10%)和神经传导速度增加幅度降低(P<0.05)。结论miR‐146 rs2910164多态性对硫辛酸治疗T2DM患者DPN的疗效有一定影响,可作为判断DPN患者预后的早期分子标志物。