基于miR21/PI3K-Akt/SREBP通路研究泽泻汤对高脂血症模型小鼠的调脂作用机制

目的 探索经典名方泽泻汤对高脂血症模型小鼠的调脂作用机制。方法 采用ELISA法检测血清中血脂四项、肝功能指标及胆固醇脂酰转移酶(LCAT)水平。采用HE和油红O染色法判断肝组织病理情况。采用网络药理学预测泽泻汤降脂相关靶点,实现对交集靶点GO功能和KEGG通路富集分析。采用PCR芯片技术检测网络药理学筛选的目的基因,应用qPCR和Western blot检测基因和蛋白表达量。结果 泽泻汤可显著调节高脂血症模型小鼠的血脂四项水平,改善因高脂引起的肝损伤指标升高,对肝脏组织中脂质代谢关键酶HMGR、CYP7A1及脂质转运体ABCA1、Apo-A1具有反向调节作用。HE和油红O染色显示,泽泻汤可改善肝组织病理形态,减轻肝组织的脂质沉积情况,阳性面积比率显著下降(P<0.01)。PCR芯片获取反向调节基因44个,GO功能富集分析获取了266个条目,KEGG通路富集分析筛选得到99条信号通路。qPCR及Western blot结果显示,泽泻汤组显著下调PIK3CG、AKT1、IL-6基因表达量(P<0.05,P<0.01),上调ABCG1基因表达量(P<0.05),下调PI3 Kinase p110β、p-AKT(Ser473)及SREBP-1c蛋白表达水平(P<0.01);泽泻汤能够反向调节miR21-5p(P<0.01)。结论 泽泻汤对高脂血症模型小鼠脂代谢具有显著的调节作用,能改善高脂血症引起的肝损伤,其调脂作用可能与调节胆固醇在体内代谢、转运有关,与miR21/PI3K-Akt/SREBP通路密切相关,且泽泻汤全方调脂效果优于单味药。

miR93和miR21联合检测对2型糖尿病视网膜病变进展的预测价值

目的:分析血浆微小核糖核酸(miR)-93和miR21联合检测对2型糖尿病视网膜病变(DR)进展的预测价值。方法:选取本院2013-06/2014-06收治的2型DR患者76例,根据随访结果,将患者分成DR非进展组(34例)和DR进展组(42例),另选取45例健康体检者为对照组。检测三组血清中miR93和miR21水平的变化;分析DR患者预后的独立危险因素;分析其对患者预后的预测价值。结果:DR进展组患者血清中miR93和miR21水平明显高于DR非进展组和对照组(均P<0.01);二者可作为影响DR患者病情进展的独立危险因素;两者联合检测曲线下面积、特异度与敏感度均高于单独检测(P<0.05)。结论:miR93和miR21在DR患者血清中增高,影响DR患者病情进展。

miR21抑制剂对肺腺癌细胞A-549的抑制效果

目的探讨miR21抑制剂转染人肺腺癌细胞A-549对其体外侵袭及血管形成能力的影响。方法 miR21抑制剂转染A-549细胞,同时设置未转染的A-549细胞作为对照组,转染24、48、72及96 h后,四甲基偶唑氮法(MTT)法检测两组细胞增殖抑制率;Transwell方法检测miR21抑制剂对A-549细胞侵袭的影响;小管形成实验检测miR21抑制剂对血管形成的影响。结果转染24 h,两组抑制率比较,差别无统计学意义;转染48 h及以后,抑制剂组抑制率均高于对照组,差别有统计学意义(P<0.05)。Transwell检测结果显示miR21抑制剂组每个视野细胞数(11.60±5.32)个远少于对照组(107.60±3.21)个,两组差别有统计学意义(P<0.01)。抑制剂组每视野小管计数平均(159.30±0.51)个,远少于对照组(508.80±1.30)个,两组差别有统计学意义(P<0.01)。结论 miR21抑制剂能够明显抑制A-549的侵袭能力,并能明显抑制血管内皮细胞血管生成,提示miR21抑制剂可以作为潜在的肺癌基因治疗的新方法。

血清miR21在高级别宫颈上皮内瘤变和宫颈癌患者中的表达及其临床意义

目的 检测血清miR21在宫颈HSIL、宫颈癌患者中表达情况,探讨血清miR21在宫颈癌诊断中的意义;方法 采用qRT-PCR方法,以miR39为外参,以无宫颈病患者为对照组,检测miR21在宫颈HSIL、宫颈癌组织和血清中的表达水平;结果 在组织中,miR21在宫颈癌组中表达水平明显高于对照组和宫颈HSIL组(均P<0.05);在血清中,miR21在宫颈癌组中表达水平明显高于正常对照组(P<0.05),但与宫颈HSIL组对比无明显差异(P>0.05);miR21在宫颈癌患者组织和血清中的表达水平呈正相关,相关系数为(r =0.808,P<0.05);miR21在宫颈癌组织中ROC曲线下面积AUC为0.942,最大约登指数0.509,灵敏度为96.4%,特异度为54.5%;而在宫颈癌患者血清中ROC曲线下面积ACU为0.699,最大约登指数0.95,灵敏度为97.7%,特异度为97.3%;结论 miR21在宫颈癌组织和血清中均呈高表达,它们在宫颈癌组织和血清中表达水平均呈正相关,可能与宫颈癌发生发展有关;血清miR21可能是诊断宫颈癌的一个理想的肿瘤标志物.

基于miR21的宫颈癌细胞顺铂敏感性机制研究

目的探讨miR21影响宫颈癌细胞株Hela及顺铂耐药细胞株Hela/DDP顺铂敏感性的分子机制。方法利用riboFECT^(TM)CP转染试剂分别将成熟miR21 mimic及其阴性对照试剂NC转染至Hela细胞,miR21 inhibitor及其阴性对照试剂NC转染至Hela/DDP细胞,并将细胞分为mimic组、inhibitor组、相应NC组及Blank组。Realtime PCR检测PTEN mRNA的表达水平;流式细胞仪检测细胞周期(PI法)及经顺铂处理后的凋亡率(Annexin Ⅴ/PI法)。结果 Real-time PCR法检测PTEN mRNA在Hela/DDP中低表达,为Hela的(0.410±0.046)倍(P<0.01);转染mimic后,Hela中PTEN mRNA表达明显低于NC组及Blank组(P<0.01),NC组与Blank组比较差异无统计学意义(P>0.05);转染inhibitor后,Hela/DDP中miR21表达明显高于NC组及Blank组(P<0.01),NC组与Blank组比较差异无统计学意义(P>0.05)。Annexin Ⅴ/PI检测结果显示,mimic组凋亡率与NC组、Blank组比较明显减少(P<0.05),inhibitor组凋亡率与NC组、Blank组比较显著提高(P<0.05)。PI法检测结果显示,mimic组S期所占比例与NC组、Blank组比较明显增加(P<0.05),NC组与Blank组比较差异无统计学意义(P>0.05);inhibitor组S期所占比例与NC组、Blank组比较明显减少(P<0.05),NC组与Blank组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PTEN mRNA在Hela/DDP中低表达,在Hela中高表达。上调miR21在Hela中的表达能明显降低PTEN mRNA的表达,减少凋亡,增加细胞周期中S期所占比例,导致细胞耐药;下调miR21在Hela/DDP中的表达能明显增加PTEN mRNA的表达,增加凋亡率,降低细胞周期中S期所占比例,从而达到增加化疗敏感性的效果。

miR21对宫颈癌Hela细胞及顺铂耐药Hela/DDP细胞顺铂敏感性的影响

目的探讨miR21基因表达水平对宫颈癌Hela细胞及其顺铂耐药Hela/DDP细胞顺铂敏感性的影响。方法利用ribo FECT^(TM) CP转染试剂分别将成熟miR21 mimic、inhibitor及其阴性对照试剂NC转染至Hela与Hela/DDP细胞,并将Hela细胞分为mimic组、阴性对照(NC)组和空白对照(Blank)组,将Hela/DDP细胞分为inhibitor组、阴性对照NC组和空白对照(Blank)组。Real-time PCR检测各组细胞中miR21的表达水平;MTT检测各组细胞对顺铂的半数抑制率浓度(IC_(50)值)。结果(1)Real-time PCR检测miR21在Hela/DDP中高表达,是Hela的(5.452±0.074)倍(P<0.01);转染mimic后,Hela中miR21表达高于明显NC组及Blank组(P<0.01),NC组与Blank组相比,差异无统计学意义(P>0.05);转染inhibitor后,Hela/DDP中miR21表达明显低于NC组及Blank组(P<0.01),NC组与Blank组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)MTT结果显示,转染mimic后Hela细胞对顺铂敏感性下降,与NC组及Blank组相比,差异有统计学意义(P<0.05),NC组与Blank组相比,差异无统计学意义(P>0.05);转染inhibitor后Hela/DDP细胞对顺铂敏感性增加,与NC组及Blank组相比,差异有统计学意义(P<0.05),NC组与Blank组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论(1)miR21在Hela/DDP中高表达,在Hela中低表达。(2)上调miR21在Hela中的表达能明显降低其对顺铂的敏感性,下调miR21在Hela/DDP中的表达能明显增加其对顺铂的敏感性。

山奈酚通过调控miR21抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖的研究

目的研究山奈酚(kaempferol,KA)对非小细胞肺癌A549细胞增殖的抑制作用及其作用机制。方法运用CCK-8细胞活力检测法和集落形成实验研究不同浓度的KA对非小细胞肺癌A549细胞存活率的影响,确定给药浓度;将A549细胞分为对照组及KA各剂量组,采用qPCR检测不同浓度KA对A549细胞中miR21表达的影响;运用miR21 mimc转染A549细胞过表达miR21,采用qPCR和Western blotting检测miR21和不同浓度KA给药作用后对PTEN/AKT信号通路的影响。结果CCK-8和集落形成实验证实KA可抑制非小细胞肺癌A549细胞的增殖;30,90μmol·L^-1 KA处理24 h均可降低A549细胞中miR21水平和p-AKT、c-Myc、Cyclin D1的表达水平,升高PTEN水平,而miR21 mimc转染后p-AKT、c-Myc、Cyclin D1的表达水平均升高,而PTEN水平降低,并经rescue实验证实miR21 mimc转染后可阻断KA抑制A549细胞增殖的作用。结论KA能够通过调控miR21/PTEN/AKT信号通路抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖。

宫颈癌Siha细胞miR21基因表达与顺铂敏感相关性研究

目的探讨miR21基因表达改变对宫颈癌Siha细胞顺铂敏感性的影响。方法采用脂质体介导法分别以micrOFFTMmiR21inhibitor、micrONTMmiR21mimic、miR21阴性对照试剂转染Siha细胞,实验分为miR21下调组、miR21上调组、阴性对照组及空白对照组。实时荧光定量PCR检测转染后各组细胞中miR21基因的表达水平;CCK-8比色法检测各组细胞对顺铂的半抑制率浓度(50%inhibitory concentration,IC50值);AnnexinⅤ/PI法检测顺铂处理后各组细胞的凋亡率;实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法,分别从mRNA和蛋白水平检测顺铂对各组细胞中PTEN、PDCD4基因表达的影响。结果实时荧光定量PCR检测miR21基因的表达结果显示,miR21下调组的表达明显低于阴性对照组,miR21上调组的表达明显高于阴性对照组,F=255.525,P<0.001。CCK-8比色法检测结果显示,顺铂对miR21下调组的IC50值为(2.44±0.69)μg/mL,阴性对照组为(3.96±0.07)μg/mL;miR21上调组为(6.93±0.07)μg/mL,空白对照组为(4.05±0.03)μg/mL,F=870.118,P<0.001。AnnexinⅤ/PI检测结果显示,5μg/mL顺铂诱导miR21下调组的凋亡率为(64.36±2.47)%,阴性对照组为(4.2±0.17)%;miR21上调组为(0.06±0.03)%,空白对照组为(4.14±0.25)%,χ2=10.385,P=0.016。实时荧光定量PCR检测PTEN和PDCD4结果显示,miR21下调组PTEN的mRNA表达相较于阴性对照组显著增加,miR21上调组PTEN的mRNA表达相较于阴性对照组降低,F=174.057,P<0.001;miR21下调组PDCD4的mRNA表达相较于阴性对照组显著增加,miR21上调组PDCD4的mRNA表达相较于阴性对照组降低,F=491.283,P<0.001。蛋白质印迹法检测结果显示,miR21下调组PTEN蛋白表达量为8.845±0.062,阴性对照组7.695±0.056;miR21上调组为6.908±0.058,空白对照组为1,F=16.036,P<0.01。miR21下调组PDCD4蛋白表达量为9.936±0.036,阴性对照组为8.728±0.019;miR21上调组为7.838±0.066,空白对照组为1,F=55.323,P<0.001。结论下调miR21基因可能增加宫颈癌Siha细胞对顺铂的敏感性,上调miR21基因后可能减弱宫颈癌Siha细胞对顺铂的敏感性。

miR21在不同分期直肠癌中的表达及意义

目的检测miR21在不同分期直肠癌中的表达量并讨论其临床意义。方法通过Taq Man探针实时荧光定量检测2012年8~10月期间在我院胃肠外科中心经病理检查新确诊的40例直肠癌患者的癌组织及相应癌旁正常组织中miR21的表达量。结果 40例直肠癌组织中miR21表达量明显高于相对应癌旁正常组织(4.122±1.973比1.825±0.661,P=0.000)。N1~N2期直肠癌组织中miR21表达量明显高于N0期(4.852±2.344比3.391±1.171,P=0.019),Dukes C^D期直肠癌组织中miR21表达量明显高于A^B期(4.787±2.304比3.386±1.203,P=0.021)。miR21在N0、N1、N2分期中的表达量呈递增关系,且N2分期中的表达明显高于N0分期,差异有统计学意义(5.556±1.500比3.391±1.171,P=0.010)。ROC曲线分析显示,miR21在预测淋巴结转移时(即N1~N2期),其AUC值为0.698(95%CI为0.530~0.865),敏感度为50.0%,特异性为90.0%;在预测中晚期肿瘤时(即Dukes C^D期),其AUC值为0.689(95%CI为0.524~0.855),敏感度为42.9%,特异性为94.7%。结论 miR21的高表达与直肠癌N分期和Dukes分期有潜在联系,提示miR21可能是潜在的术前预测直肠癌N分期和Dukes分期的指标。

血清miR21在宫颈癌患者手术前后中的表达及临床意义

目的本实验通过检测miR21在宫颈癌患者血清中表达情况,探讨宫颈癌患者手术前后血清miR21的变化对评估宫颈癌预后的临床意义。方法采用qRT-PCR方法,检测miR21在无宫颈病变对照组和宫颈癌患者血清中的表达水平。结果与对照组相比,miR21在宫颈癌患者术前血清中高表达(P<0.05)。有淋巴结转移宫颈癌患者的血清miR21表达水平显著高于无淋巴结转移者(P<0.05)。血清miR21在宫颈癌患者中表达水平在术后1个月和3个月呈显著下降(均P<0.05)。结论血清miR21在宫颈癌患者术后呈持续下降趋势,说明血清miR21在一定程度上反映体内肿瘤负荷情况。

miR⁃21⁃5p靶向BNC2调控食管癌的恶性生物行为的研究

目的:探讨miR-21-5p靶向肌成纤维细胞的身份转录因子(BNC2)调控食管癌(esophageal cancer,ESCA)细胞增殖、迁移、侵袭机制。方法:应用实时定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)方法检测食管癌组织中miR-21-5P和BNC2的相对表达量并用统计学分析其是否存在表达差异。用miR-21-5p mimics和miR-21-5P inhibitor和阴性对照(NC包括mimcs NC、inhibitor NC)分别转染ECA109、KYSE30两个食管癌细胞系后,进行细胞功能试验CCK8,Transwell等实验方法观察当miR-21-5p过表达或敲低时细胞的增殖、迁移和侵袭能力是否受到影响。通过生物信息学方法预测分析miR-21-5P的靶基因并通过双荧光素酶实验、qRT-PCR和Western blot实验验证miR-21-5p与靶向基因的负向调控关系。结果:qRT-PCR结果显示,相对于癌旁组织,BNC2在食管癌组织中的表达量显著性降低,而miR-21-5P则显著性升高,CCK8、Transwell实验结果显示,当miR-21-5P过表达时,细胞的增殖、迁移和侵袭能力增强,反之细胞功能受到抑制。也就是说,miR-21-5P在食管恶性肿瘤中起着促癌基因的功能作用。通过生物信息学方法预测miR-21-5P的靶基因为BNC2,双荧光素酶实验结果表明miR-21-5P与野生型BNC2′-UTR靶向结合,qRT-PCR和WB实验结果表示在食管癌细胞中,当miR-21-5P过表达时,BNC2的表达量降低,当miR-21-5P被敲低时,BNC2的表达量升高。这些结果显示miR-21-5P与BNC2存在靶向关系。结论:在食管癌中,miR-21-5p直接靶向BNC2,其调节作用可能从而导致癌症的增殖迁移和侵袭作用。

miR21介导Ang(1-7)对肺成纤维细胞AngⅡ诱导的NLR3炎性体激活的抑制作用

目的探讨miR21对肺成纤维细胞增殖和凋亡的影响,及其可能的作用机制。方法将miR21 NC、inhibitor和mimic转染至原代肺成纤维细胞,按照细胞处理方式分为空白对照组、miR21 NC组、inhibitor组和mimic组。利用CCK-8细胞增殖法检测miR21对肺成纤维细胞增殖的影响;流式细胞仪检测miR21对肺成纤维细胞凋亡的影响;通过RT-PCR法检测转染前后肺成纤维细胞miR21、Ang(1-7)基因水平的表达;应用免疫印迹Western blot检测转染前后miR21、NLRP3蛋白表达水平变化。结果CCK8及流式细胞仪检测显示,miR21具有显著促进肺成纤维细胞增殖、抑制肺成纤维细胞凋亡的作用;RT-PCR分析显示,细胞转染成功后,miR21 mimic/inhibitor组分别抑制/促进了Ang(1-7)表达,促进/抑制了AngⅡ表达(P<0.05),即miR21具有抑制Ang(1-7),促进AngⅡ表达的效果。Western Blot分析表明,miR21 mimic/inhibitor具有上调/下调AngⅡ、NLRP3蛋白表达水平的作用,与NC对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 miR21具有促进肺成纤维细胞增殖、抑制肺成纤维细胞凋亡的作用,其机制可能与miR21介导Ang(1-7)对肺成纤维细胞AngⅡ诱导的NLR3炎性体激活相关。

下调miR-21-5p对急性脑出血模型大鼠血脑屏障的保护作用及机制

目的分析下调微小RNA(miR)-21-5p对急性脑出血模型大鼠血脑屏障的保护作用及机制。方法48只SPF级SD大鼠,分为空白组、模型组、上调组、下调组各12只,空白组不做任何处理,模型组、上调组、下调组构建急性脑出血大鼠模型,miR-21-5p慢病毒滴定,采用实时荧光定量(RT)-聚合酶联反应(PCR)检测miR-146a基因表达量,采用透射电镜检测血脑屏障通透性,采用酶联免疫吸附试验检测细胞色素(Cyt)-C、基质金属蛋白酶(MMP)-9、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,采用Western印迹法检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路蛋白表达量。结果与上调组相比,下调组miR-21-5p表达量明显降低,Cyt-C、MMP-9、血脑屏障通透性、SOD、MDA表达量明显升高,PI3K/Akt信号通路蛋白表达量明显降低(均P<0.05)。结论下调miR-21-5p可能经作用于PI3K/Akt信号通路抑制氧化应激,发挥保护急性脑出血大鼠血脑屏障的作用。

药物性肝损伤患者血清miR-21和miR-124 a水平变化及其临床意义探讨

目的探讨药物性肝损伤(DILI)患者血清微小RNA(miR)-21和miR-124a水平变化及其临床意义.方法2019年3月~2022年3月我院收治的87例DILI患者和60例同期体检的健康人,采用实时荧光定量PCR法检测血清miR21和miR-124a mRNA水平,采用ELISA法检测核转录因子-κB(NF-κB)和白介素-6(IL-6)水平.结果在DILI发生时,血清ALT、AST、GGT和TBIL峰值水平分别为(143.6±51.8)U/L、(158.2±38.8)U/L、(131.6±26.8)U/L和(41.9±9.6)μmol/L;DILI患者血清miR-21、miR124a mRNA、NF-κB和IL-6水平分别为(1.4±0.3)、(2.6±0.4)、(3615.4±526.4)pg/ml和(12.7±1.8)pg/ml,均显著高于健康人[分别为(1.0±0.1)、(1.1±0.1)、(692.2±144.6)pg/ml和(3.4±0.7)pg/ml,P<0.05];混合型DILI患者血清NF-κB和IL-6水平分别为(3874.5±282.5)pg/ml和(14.4±2.6)pg/ml,均显著高于肝细胞型DILI患者[分别为(3609.8±296.4)pg/ml和(12.6±1.5)pg/ml,P<0.05]或胆汁淤积型DILI患者[分别为(3437.2±253.7)pg/ml和(11.7±1.3)pg/ml,P<0.05];混合型、肝细胞型和胆汁淤积型DILI患者血清miR-21和miR-124a水平无显著性差异(P>0.05).结论DILI患者血清miR21和miR-124a水平随肝功能损伤的出现而升高,但在三型不同肝损伤类型患者其水平无显著性差异,对临床分型的判断无指导意义.

远隔缺血预适应通过上调miR⁃21⁃5p减轻脑缺血模型大鼠细胞凋亡

目的:研究远隔缺血预适应(RIPC)对脑缺血模型大鼠的保护作用及分子机制。方法:18只成年雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组(sham)、缺血再灌注组(MCAO/R)组、RIPC+MCAO/R组;术前利用间断夹闭双侧股动脉的方法给予大鼠RIPC处理,利用大脑中动脉栓塞法(MCAO)制备大鼠缺血性脑卒中模型,利用转棒实验检测大鼠运动功能,利用TUNEL染色检测缺血区细胞凋亡,利用real time RT⁃PCR检测大脑缺血区皮质中miR⁃21⁃5p及SPRY1和程序性细胞死亡因子4(PDCD4)mRNA的表达。结果:与MCAO/R组大鼠相比,RIPC处理组大鼠运动功能有所改善,皮质细胞凋亡减少。miR⁃21⁃5p表达增加,而SPRY1和PDCD4 mRNA表达下调(P<0.05)。结论:RIPC处理对减轻缺血性脑卒中大鼠miR⁃21⁃5p表达上调,后者通过抑制靶分子SPRY1和PDCD4的表达抑制细胞凋亡。

白藜芦醇调节STAT3与miR-21表达抗肝癌作用的初步研究

目的初步探讨白藜芦醇(Resveratrol,Res)的抗肝癌作用及其分子机制。方法建立移植性肝癌小鼠模型,口服给予Res进行干预,分析肿瘤生长状况。然后采用Real-time PCR、RT-PCR等方法检测转录因子Foxp3及微小核糖核酸-21(miR-21)的基因表达,Western blot分析信号转导子与转录激活子3(STAT3)的活性表达,流式细胞术观察CD4+CD25+T细胞数量的变化。结果与荷瘤对照组相比,Res给药组CD4+CD25+T细胞数量和Foxp3表达均明显降低,同时miR-21表达减少,该效应或许与其下调STAT3磷酸化活性水平密切相关。结论 Res可能通过调控STAT3信号分子及miR-21表达,抑制调节性T细胞产生,改变肿瘤微环境,从而发挥抗肝癌作用。

急性髓细胞白血病患者外周血单核细胞IL-9、STAT3和miR-21的表达及意义

目的探讨急性髓细胞白血病(Aml)患者外周血单核细胞(PBMCs)中白介素-9(IL-9)、信号转导与转录活化因子3(STAT3)和miR-21的表达及临床意义。方法选取2011年2月至2014年6月住院治疗的120例Aml患者为研究对象(Aml组),以同时期的健康体检者100例为对照组,采用RT-PCR检测所有受试者PBMCs中IL-9、STAT3和miR-21mRNA的表达水平,Western blot法检测IL-9和磷酸化STAT3(pSTAT3)蛋白表达,Spearman分析IL-9、STAT3和miR-21表达之间相关性,ROC曲线分析IL-9、STAT3、miR-21及三者联合检测对Aml的诊断价值,Kaplan-Meier法分析IL-9、STAT3和miR-21表达对Aml患者生存期影响。结果与对照组相比,Aml组患者PBMCs中IL-9、STAT3和miR-21mRNA表达水平均上调(P<0.05),IL-9和pSTAT3蛋白表达显著增加(P<0.05)。IL-9、STAT3和miR-21mRNA水平与患者年龄、性别、血红蛋白均不相关(P>0.05),与FBA分型、白细胞计数和骨髓原始细胞相关(P<0.05),IL-9与血小板计数相关(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,IL-9与miR-21、IL-9与STAT3以及miR-21与STAT3表达均呈正相关(r=0.467,P<0.05;r=0.527,P<0.05;r=0.483,P<0.05)。IL-9、STAT3和miR-21三者联合诊断ALM的灵敏度、特异度以及ROC曲线下面积均较单独诊断时显著提高(P<0.05)。IL-9、STAT3和miR-21高表达患者生存期均较低表达患者显著降低(P<0.05)。结论Aml患者PBMCs中IL-9、STAT3和miR-21均表达升高,IL-9可能通过STAT3信号通路诱导miR-21表达上调参与Aml疾病的发生发展过程。

晚期胃癌患者血清miR-21和let-7i水平变化与奥沙利铂化疗疗效的关系

目的探讨晚期胃癌患者血清miR21、let7i的水平变化与奥沙利铂化疗疗效的关系。方法选取本院肿瘤科收治的79例晚期胃癌患者作为病例组,同期60例健康体检者作为对照组。测定2组外周血血清中miR21、let7i的水平,病例组采用奥沙利铂方案（奥沙利铂＋卡培他滨或者5氟尿嘧啶＋亚叶酸钙＋奥沙利铂）进行化疗,分析miR21、let7i与患者临床病理特征、化疗效果的关系。结果化疗前,病例组患者的血清miR21测定值显著高于对照组（P〈0.05）;化疗前,ECOG（0-1）级、高＋中分化程度晚期胃癌患者的血清miR21测定值显著低于ECOG 2级、低分化患者（P〈0.05）;化疗后,CR＋PR组患者的血清miR21水平显著低于SD＋PD组患者（P〈0.05）。CR＋PR组（低水平miR21）患者的中位生存时间显著长于SD＋PD组（高水平miR21）（P〈0.05）。结论晚期胃癌患者血清miR21的水平与ECOG分级、组织分化程度、疗效及预后有关。

hsa-miR-21的生物信息学特征分析

目的:观察人消化道肿瘤细胞株hsa-miR-21表达水平,通过生物信息学预测hsa-miR-21的靶基因,进一步分析其潜在功能,为其后续功能研究提供依据。方法:应用实时荧光定量PCR技术检测人胃癌细胞株AGS、人胆管癌细胞株QBC939、人食管鳞状细胞癌细胞株ECA109以及正常人食管上皮细胞株Het-1A中hsa-miR-21表达水平;应用pubmed检索hsa-miR-21已知相关文献;应用miRbase和NCBI数据库分析hsa-miR-21序列保守性和所在基因组特征;应用TargetScan、PicTar及miRanda预测hsa-miR-21的靶基因,并对其进行功能富集分析和信号转导通路富集分析。结果:(1)AGS、QBC939细胞株中hsa-miR-21表达水平显著上调,明显高于Het-1A细胞;(2)已有研究证实hsa-miR-21与多种肿瘤相关;(3)miR-21在多个物种间具有序列保守性;(4)Hsa-miR-21靶基因主要参与转录调控、信号转导和Notch信号通路的正向调控等生物学过程,涉及Notch、细胞周期和轴突导向等信号转导通路。结论:hsa-miR-21可能通过调控多个信号通路参与消化道肿瘤的发病机制。

脓毒症患者循环miR⁃21、miR⁃155变化与炎症细胞因子和心功能障碍的相关性

目的研究脓毒症患者循环miR⁃21、miR⁃155变化与心功能障碍、炎症细胞因子的相关性。方法选择2015年3月至2018年12月期间在本院诊断为脓毒症的58例患者,根据入院后24小时内的左心室射血分数(LVEF)分为LVEF<50%组及LVEF≥50%组;另取同期在本院体检的健康志愿者40例作为对照组;比较3组间临床资料、循环miR⁃21及miR⁃155表达、血清炎症因子含量的差异。结果血清CRP、PCT、cTnI、BNP、TNF⁃α、IL⁃2、ICAM⁃1含量及循环miR⁃21,miR⁃155表达量呈现LVEF<50%组>LVEF≥50%组>对照组的趋势(P<0.05);LVEF<50%组中死亡患者的循环miR⁃21,miR⁃155表达量及血清TNF⁃α、IL⁃2、ICAM⁃1含量均明显高于存活患者(P<0.05);LVEF<50%组患者的循环miR⁃21,miR⁃155表达量与血清CRP、PCT、cTnI、BNP、TNF⁃α、IL⁃2、ICAM⁃1含量均呈正相关;miR⁃21,miR⁃155表达量与血清PCT、TNF⁃α、IL⁃2、ICAM⁃1含量增多是LVEF<50%的脓毒症患者死亡的危险因素。结果脓毒症患者循环miR⁃21,miR⁃155明显增多与心功能障碍及炎症因子增多有关、同时也是影响脓毒症合并心功能障碍患者预后的危险因素。