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miR30a体外干预乳腺癌腋窝肿大淋巴结中肿瘤干细胞相关基因表达和侵袭力的变化 被引量:1
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作者 周健 余天雾 +1 位作者 吕永双 蒋小卫 《重庆医学》 CAS 北大核心 2016年第12期1605-1607,1611,共4页
目的探讨肿瘤干细胞在乳腺癌患者腋窝肿大淋巴结中微转移灶及微小RNA30a(miR30a)对其侵袭能力的影响,初步探讨miRNAs抗乳腺癌治疗的可行性。方法从乳腺癌患者腋窝肿大淋巴结中分离、培养肿瘤干细胞样乳腺癌细胞。合成miR30a寡核苷酸片段... 目的探讨肿瘤干细胞在乳腺癌患者腋窝肿大淋巴结中微转移灶及微小RNA30a(miR30a)对其侵袭能力的影响,初步探讨miRNAs抗乳腺癌治疗的可行性。方法从乳腺癌患者腋窝肿大淋巴结中分离、培养肿瘤干细胞样乳腺癌细胞。合成miR30a寡核苷酸片段,应用腺病毒将该片段转染人原代乳腺癌细胞,同时设乳腺癌MDA-MB-231细胞株为试验对照,每组细胞均设空载体组、空白对照组,以荧光显微镜评估转染效率。以Transwell小室体外侵袭试验检测转染前后肿瘤细胞增殖和侵袭力的变化。以Western blot分别检测ALDH1、Vimentin和N-Cadherin蛋白表达。结果 Transwell小室体外侵袭试验显示空白对照组中原代乳腺癌细胞较MDA-MB-231细胞株侵袭力强,其侵袭指数分别为(75.3±3.2)%,(58.4±2.8)%,两者差异有统计学意义(P<0.05),而转染miR30a后这两种细胞体外侵袭力均明显减弱,其侵袭指数分别为(21.4±1.9)%,(28.2±2.3)%,与各自空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论乳腺癌患者部分腋窝增生肿大的淋巴结中ALDH表达增高,可能存在肿瘤微转移,术中应完全清扫为宜。miR30a抑制了肿瘤干性基因表达和侵袭能力。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 干细胞 腋窝肿大淋巴结 肿瘤转移 侵袭 mir30a
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血清miR-30a、miR-221在老年急性心肌梗死患者中表达及意义
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作者 殷淑琴 李小旺 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第20期4865-4868,共4页
目的 探讨血清微小RNA(miR)-30a、miR-221在老年急性心肌梗死患者中表达特点及意义。方法 选取老年急性心肌梗死患者86例为急性心肌梗死组,健康志愿者50例为对照组。采集空腹肘静脉血5 ml,荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测血清miR-30a、mi... 目的 探讨血清微小RNA(miR)-30a、miR-221在老年急性心肌梗死患者中表达特点及意义。方法 选取老年急性心肌梗死患者86例为急性心肌梗死组,健康志愿者50例为对照组。采集空腹肘静脉血5 ml,荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测血清miR-30a、miR-221表达水平;进行全球急性冠脉事件登记(GRACE)评分,分为低危组(总积分≤108分)、中危组(总积分109~140分)、高危组(总积分>140分);进行心脏彩超检查,记录心室重构相关超声指标;出院后进行1年随访,将全因死亡、再次血运重建、恶性心律失常纳入不良预后进行分析。结果 急性心肌梗死组血清miR-30a、miR-221表达水平明显高于对照组(P<0.01)。冠脉病变三支组血清miR-30a、miR-221表达水平明显高于双支病变和单支病变组,双支病变组血清miR-30a、miR-221表达水平明显高于单支病变组(P<0.05)。随着老年急性心肌梗死患者GRACE危险评分的增加,血清miR-30a、miR-221表达水平逐渐升高。左心房内径(LAD)、左心室后壁厚度(LVPWD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室质量指数(LVMI)、左心室重构指数(LVRI)在各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);随着老年急性心肌梗死患者GRACE危险评分的增加,LAD、LVPWD、LVEDD、LVMI逐渐升高,LVRI逐渐降低。老年急性心肌梗死血清miRNA-30a表达水平与LAD、LVPWD、LVEDD、LVMI呈显著正相关,与LVRI呈显著负相关(P<0.01);血清miR-221表达水平与LAD、LVPWD、LVEDD、LVMI呈显著正相关(P<0.01),与LVRI呈显著负相关(P<0.01)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,血清miR-30a、miR-221对老年急性心肌梗死患者预后均具有较高的预测价值(P<0.05),其中联合检测的预测价值最高[曲线下面积(AUC)=0.924]。结论 老年急性心肌梗死患者血清miR-30a、miR-221高表达,且与冠脉病变支数、GRACE评分、心室重构密切相关,联合检测可用于患者预后评估。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 微小RNA(miR)-30a MIR-221 全球急性冠脉事件登记(GRACE)评分 心室重构
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miR⁃30b⁃5p通过下调MKRN3表达抑制食管癌细胞增殖、迁移和侵袭
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作者 周乾华 毕华俊 +2 位作者 孟凡东 施益明 芮超 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第13期1627-1633,共7页
目的探讨miR⁃30b⁃5p在食管癌细胞中的表达及对食管癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响机制。方法收集2016年1月至2020年12月就诊于安徽省第二人民医院手术治疗的70例食管癌患者的肿瘤和癌旁组织,检测miR⁃30b⁃5p的表达水平。qRT⁃PCR检测食管... 目的探讨miR⁃30b⁃5p在食管癌细胞中的表达及对食管癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响机制。方法收集2016年1月至2020年12月就诊于安徽省第二人民医院手术治疗的70例食管癌患者的肿瘤和癌旁组织,检测miR⁃30b⁃5p的表达水平。qRT⁃PCR检测食管癌细胞株中miR⁃30b⁃5p的表达水平。将miR⁃30b⁃5p mimics转染至TE⁃13和ECA109细胞中,检测转染后各组细胞中miR⁃30b⁃5p及MKRN3表达水平。根据细胞增殖实验,Transwell及裸鼠成瘤实验检测食管癌细胞增殖、迁移及侵袭能力。双荧光素酶实验验证miR⁃30b⁃5p的靶基因。蛋白印迹实验探索miR⁃30b⁃5p对食管癌影响的分子机制。结果miR⁃30b⁃5p在食管癌细胞和食管癌组织中相较于正常上皮细胞和癌旁组织表达显著下降(P<0.05)。细胞增殖实验显示,miR⁃30b⁃5p mimics组增殖率显著低于NC组(P<0.05);Transwell实验结果显示,miR⁃30b⁃5p mimics组迁移率及侵袭率显著低于NC组(P<0.05);双荧光素酶实验显示MKRN3是miR⁃30b⁃5p的直接靶基因。Western blot检测JAK/STAT信号通路蛋白发现,miR⁃30b⁃5p mimics组蛋白低于NC组(P<0.05)。结论miR⁃30b⁃5p在食管癌中呈现低表达,miR⁃30b⁃5p通过下调MKRN3表达抑制食管癌细胞增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 miR⁃30b⁃5p makorin环指蛋白3 食管癌 JAK/STAT信号通路 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭
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丹参酮Ⅱ_A通过miR30b-p53信号通路诱导人肝癌细胞凋亡的研究 被引量:4
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作者 谢彬彬 夏永良 +4 位作者 任宣奇 杜仲燕 丁秦超 窦晓兵 王萃 《中药材》 CAS 北大核心 2017年第7期1718-1721,共4页
目的:研究丹参酮Ⅱ_A诱导人肝癌细胞HepG_2凋亡的作用及其机制。方法:用不同浓度的丹参酮Ⅱ_A处理细胞24 h后,检测LDH释放水平,观察丹参酮Ⅱ_A对HepG_2活力的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡;Real-time PCR检测microRNA30家族主要亚型(a,b,... 目的:研究丹参酮Ⅱ_A诱导人肝癌细胞HepG_2凋亡的作用及其机制。方法:用不同浓度的丹参酮Ⅱ_A处理细胞24 h后,检测LDH释放水平,观察丹参酮Ⅱ_A对HepG_2活力的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡;Real-time PCR检测microRNA30家族主要亚型(a,b,c,d)表达;Western Blot检测肝癌细胞内凋亡相关分子Bax、Bcl-2、Caspase-3及p53蛋白表达水平。结果:丹参酮Ⅱ_A对HepG_2细胞内LDH释放及细胞凋亡的诱导均存在量效关系。≥20μmol/L丹参酮Ⅱ_A能显著诱导细胞凋亡(P<0.05),在80μmol/L时最大诱导率达20%。Real-time PCR结果显示,丹参酮Ⅱ_A对miR30b的抑制最为显著。同时丹参酮Ⅱ_A通过抑制miR30b从而诱导了下游分子p53的表达。Western Blot检测结果显示,丹参酮Ⅱ_A上调p53蛋白水平,诱导Bax/Bcl-2及凋亡执行分子Caspase-3的表达。结论:丹参酮Ⅱ_A能诱导肝癌细胞凋亡,其机制可能为通过调控miR30b-p53介导的细胞凋亡信号通路。 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA miR30b-p53 HEPG2细胞 细胞凋亡
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Engagement of circular RNA HECW2 in non-autophagic role of ATG5 implicated in endothelial-mesenchymal transition 被引量:11
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作者 YANG Li HAN Bing +4 位作者 ZHANG Yuan BAI Ying CHAO Jie HU Gang YAO Hong-hong 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期736-737,共2页
Endothelial-mesenchymal transition(EndoMT) is associated with damage to blood-brain barrier(BBB) integrity.Circular RNAs(circRNAs) are highly expressed in the brain and are involved in brain diseases;however,whether c... Endothelial-mesenchymal transition(EndoMT) is associated with damage to blood-brain barrier(BBB) integrity.Circular RNAs(circRNAs) are highly expressed in the brain and are involved in brain diseases;however,whether circR NAs regulate the EndoM T in the brain remains unknown.Our study demonstrated that circH ECW2 regulated the EndoM T by directly binding to MIR30 D,a significantly downregulated miR NA from miR NA profiling,which subsequently caused an increased expression of ATG5.These findings shed new light on the understanding of the noncanonical role of ATG5 in the EndoMT induced by methamphetamine or lipopolysaccharide.The in vivo relevance was confirmed as microinjection of circHecw2 siRNA lentivirus into the mouse hippocampus suppressed the EndoMT induced by LPS.These findings provide novel insights regarding the contribution of circHECW2 to the nonautophagic role of ATG5 in the EndoMT process in the context of drug abuse and the broad range of neuroinflammatory disorders. 展开更多
关键词 ATG5 CIRCULAR RNA HECW2 EndoMT MIR30D nonautophagy
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MiR30b与小鼠Bach2相互作用的研究
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作者 段志青 李岩 +1 位作者 卫定禄 张志伟 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期84-87,共4页
目的研究B细胞末端分化过程中miR30b新的作用靶点。方法经生物信息学分析,利用特异性引物以及定点突变引物从小鼠c DNA中分别扩增大小为530、361和189bp三个目的片段,胶回收并对361和189bp进行拼接,获得野生型、突变型小鼠Bach2 mRNA特... 目的研究B细胞末端分化过程中miR30b新的作用靶点。方法经生物信息学分析,利用特异性引物以及定点突变引物从小鼠c DNA中分别扩增大小为530、361和189bp三个目的片段,胶回收并对361和189bp进行拼接,获得野生型、突变型小鼠Bach2 mRNA特异性片段,分别与pmir GLO载体连接,构建野生型、突变型重组荧光素酶报告基因质粒pmir GLO-m Bach2、pmir GLO-m Bach2 mt;与miR30b共转染至HEK293 T细胞,分析其荧光素酶活性。结果重组荧光素酶报告基因质粒经双酶切及测序证实构建正确;共转染后,与pmir GLO+miR30b组相比,pmir GLO-m Bach2+miR30b组的荧光素酶活性明显降低(P<0.05),而pmir GLO-m Bach2 mt+miR30b组的荧光素酶活性则无明显改变(P>0.05)。结论小鼠Bach2 mRNA是miR30b的靶点。 展开更多
关键词 miR30b 小鼠Bach2 靶基因 B细胞末端分化
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miR⁃30b在低氧环境中调控兔骨髓间充质干细胞成软骨分化 被引量:3
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作者 汪仡骁 吴恒鹏 +3 位作者 万雪 陈方 石超 瓦庆德 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第24期3113-3118,共6页
目的针对软骨缺损难以自行修复的临床难题,探讨miR⁃30b调控兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)成软骨分化中的作用及潜在机制,为软骨修复提供新思路。方法密度梯度离心法分离BMSCs;流式细胞术和双向诱导分化实验鉴定细胞;CCK⁃8和Western blot检... 目的针对软骨缺损难以自行修复的临床难题,探讨miR⁃30b调控兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)成软骨分化中的作用及潜在机制,为软骨修复提供新思路。方法密度梯度离心法分离BMSCs;流式细胞术和双向诱导分化实验鉴定细胞;CCK⁃8和Western blot检测细胞在不同CoCl_(2)浓度下增殖能力和HIF⁃1α表达变化情况;构建稳定表达miR⁃30b的细胞株,Western blot检测其靶基因SOX9和Wnt/β⁃catnein信号通路的表达;在低氧环境中成软骨诱导分化,21 d后Western blot和免疫组化染色检测CollagenⅡ与SOX9的表达。结果流式检测和双向分化实验结果显示细胞高表达CD29和CD34,低表达CD44和CD45,同时具有良好的分化能力。CCK⁃8结果表明CoCl2溶液诱导的低氧环境可促进BMSCs增殖(P<0.05),且低氧可促进细胞表达HIF⁃1α。稳定表达miR⁃30b的细胞在低氧环境中成软骨诱导21 d后,免疫组化和Western blot结果显示CollagenⅡ与SOX9的表达较对照组、空载组及低氧组均明显下调(P<0.01)。结论miR⁃30b能降低BMSCs在低氧环境中成软骨分化,为表观遗传学调控干细胞修复软骨缺损提供参考。 展开更多
关键词 软骨缺损 miR⁃30b 骨髓间充质干细胞 成软骨分化 低氧
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二甲双胍抑制人前列腺癌细胞上皮间质转化及其作用机制 被引量:3
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作者 张晶 王林 +3 位作者 夏平钿 秦晓敏 韩博 郭秀丽 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2013年第9期35-39,44,共6页
目的研究二甲双胍对前列腺癌Vcap细胞增殖、侵袭及上皮间质转化(EMT)的影响,初步探讨microRNA(miRNA)相关的作用机制。方法以PBS处理组作为对照,使用不同浓度二甲双胍(1~50mmol/L)处理前列腺癌Vcap细胞,MTS比色法检测细胞的... 目的研究二甲双胍对前列腺癌Vcap细胞增殖、侵袭及上皮间质转化(EMT)的影响,初步探讨microRNA(miRNA)相关的作用机制。方法以PBS处理组作为对照,使用不同浓度二甲双胍(1~50mmol/L)处理前列腺癌Vcap细胞,MTS比色法检测细胞的增殖能力;流式细胞术分析二甲双胍对Vcap细胞周期分布的影响;划痕和侵袭小室实验分别检测5mm01/L二甲双胍和miR30a对细胞迁移和侵袭能力的作用;使用RT—PCR和Westernblotting测定5mmol/L二甲双胍对Vcap细胞上皮指标物(E—cadherin、B—catenin)和间质指标物(Vimentin、Snail)mRNA和蛋白表达水平的影响;使用RT—PCR检测miR30a、miRl43、miRl85、miRl96、miR205的表达水平变化。结果二甲双胍抑制前列腺癌Vcap细胞的增殖,且呈浓度和时间依赖性。5mmol/L二甲双胍明显影响Vcap细胞的周期分布并显著抑制Vcap细胞的迁移和侵袭能力。二甲双胍在mRNA和蛋白水平上,显著上调Vcap细胞中E—cadherin和[3-catenin的表达(P均〈0.05),下调Vimentin和N—cadherin的表达(P均〈0.05)。进一步的实验发现,二甲双胍显著上调milL30a的表达水平(P〈0.05),而后者可显著抑制Vcap细胞的增殖和EMT的发生。结论二甲双胍明显抑制前列腺癌Vcap细胞的增殖、侵袭能力和上皮间质转化的过程。该过程可能涉及二甲双胍对miR30a的表达的上调。 展开更多
关键词 二甲双胍 上皮间质转化 前列腺肿瘤 Vcap mir30a
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醌茜素对急性髓系白血病THP-1细胞miR30b-p53信号通路的调控研究 被引量:2
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作者 王晓东 刘四喜 +2 位作者 余阅 王春静 张倩 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期806-808,共3页
目的研究醌茜素对急性髓系白血病THP-1细胞的影响及作用机制。方法体外培养急性髓系白血病THP-1细胞,低、高剂量实验组加入15,30μmol·L-1醌茜素溶液1μL处理,对照组以等量0.9%NaCl处理。以CCK-8法及DNA断裂的原位末端标记法检测TH... 目的研究醌茜素对急性髓系白血病THP-1细胞的影响及作用机制。方法体外培养急性髓系白血病THP-1细胞,低、高剂量实验组加入15,30μmol·L-1醌茜素溶液1μL处理,对照组以等量0.9%NaCl处理。以CCK-8法及DNA断裂的原位末端标记法检测THP-1细胞存活及凋亡情况;以蛋白质印迹法检测THP-1细胞中p53、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达情况;以实时荧光定量聚合酶链式反应检测THP-1细胞中miR30a、miR30b、miR30c、miR30d及p53 mRNA表达。结果干预72 h后,低、高剂量实验组和对照组THP-1细胞活率分别为(79.75±3.46)%,(67.88±6.43)%和(99.33±0.32)%,凋亡率分别为(32.06±4.05)%,(40.26±3.56)%和(1.36±0.21)%,Bax蛋白相对表达量分别为1.02±0.26,1.39±0.24和0.59±0.14,Bcl-2蛋白相对表达量分别为0.96±0.28,0.36±0.05和1.26±0.32,p53蛋白相对表达量分别为2.03±0.26,3.05±0.37和1.39±0.24,miR30a mRNA表达量分别为0.52±0.06,0.26±0.05和0.63±0.05,miR30b mRNA表达量分别为0.69±0.03,0.42±0.03和0.75±0.03,miR30c mRNA表达量分别为0.56±0.02,0.26±0.01和0.66±0.03,p53 mRNA表达量分别为0.45±0.03,0.69±0.05和0.32±0.05,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论醌茜素可有效促进人急性髓系白血病THP-1细胞凋亡,抑制其增殖,其作用机制可能与调控miR30b-p53信号通路有关。 展开更多
关键词 醌茜素 人急性髓系白血病 THP-1细胞 miR30b-p53信号通路
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