丹参酮Ⅱ_A通过miR30b-p53信号通路诱导人肝癌细胞凋亡的研究

目的:研究丹参酮Ⅱ_A诱导人肝癌细胞HepG_2凋亡的作用及其机制。方法:用不同浓度的丹参酮Ⅱ_A处理细胞24 h后,检测LDH释放水平,观察丹参酮Ⅱ_A对HepG_2活力的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡;Real-time PCR检测microRNA30家族主要亚型(a,b,c,d)表达;Western Blot检测肝癌细胞内凋亡相关分子Bax、Bcl-2、Caspase-3及p53蛋白表达水平。结果:丹参酮Ⅱ_A对HepG_2细胞内LDH释放及细胞凋亡的诱导均存在量效关系。≥20μmol/L丹参酮Ⅱ_A能显著诱导细胞凋亡(P<0.05),在80μmol/L时最大诱导率达20%。Real-time PCR结果显示,丹参酮Ⅱ_A对miR30b的抑制最为显著。同时丹参酮Ⅱ_A通过抑制miR30b从而诱导了下游分子p53的表达。Western Blot检测结果显示,丹参酮Ⅱ_A上调p53蛋白水平,诱导Bax/Bcl-2及凋亡执行分子Caspase-3的表达。结论:丹参酮Ⅱ_A能诱导肝癌细胞凋亡,其机制可能为通过调控miR30b-p53介导的细胞凋亡信号通路。

醌茜素对急性髓系白血病THP-1细胞miR30b-p53信号通路的调控研究

目的研究醌茜素对急性髓系白血病THP-1细胞的影响及作用机制。方法体外培养急性髓系白血病THP-1细胞,低、高剂量实验组加入15,30μmol·L-1醌茜素溶液1μL处理,对照组以等量0.9%NaCl处理。以CCK-8法及DNA断裂的原位末端标记法检测THP-1细胞存活及凋亡情况;以蛋白质印迹法检测THP-1细胞中p53、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达情况;以实时荧光定量聚合酶链式反应检测THP-1细胞中miR30a、miR30b、miR30c、miR30d及p53 mRNA表达。结果干预72 h后,低、高剂量实验组和对照组THP-1细胞活率分别为(79.75±3.46)%,(67.88±6.43)%和(99.33±0.32)%,凋亡率分别为(32.06±4.05)%,(40.26±3.56)%和(1.36±0.21)%,Bax蛋白相对表达量分别为1.02±0.26,1.39±0.24和0.59±0.14,Bcl-2蛋白相对表达量分别为0.96±0.28,0.36±0.05和1.26±0.32,p53蛋白相对表达量分别为2.03±0.26,3.05±0.37和1.39±0.24,miR30a mRNA表达量分别为0.52±0.06,0.26±0.05和0.63±0.05,miR30b mRNA表达量分别为0.69±0.03,0.42±0.03和0.75±0.03,miR30c mRNA表达量分别为0.56±0.02,0.26±0.01和0.66±0.03,p53 mRNA表达量分别为0.45±0.03,0.69±0.05和0.32±0.05,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论醌茜素可有效促进人急性髓系白血病THP-1细胞凋亡,抑制其增殖,其作用机制可能与调控miR30b-p53信号通路有关。