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桑树miR482的表达特性及生物功能研究
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作者 刘超瑞 董晴 +5 位作者 王玉琪 郭方月 董晓楠 李燕 盖英萍 冀宪领 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期101-110,共10页
MicroRNA(miRNA)作为一种重要的基因表达调控因子,在植物生长发育和响应环境胁迫过程中具有重要的调节功能。本研究克隆了桑树miR482基因(MulmiR482),发现该基因可以表达加工成两种成熟体mul-miR482-5p和mul-miR482-3p,两者在桑树根中... MicroRNA(miRNA)作为一种重要的基因表达调控因子,在植物生长发育和响应环境胁迫过程中具有重要的调节功能。本研究克隆了桑树miR482基因(MulmiR482),发现该基因可以表达加工成两种成熟体mul-miR482-5p和mul-miR482-3p,两者在桑树根中均具有较高的表达丰度,而在叶片中的丰度较低。通过拟南芥嫁接试验发现mul-miR482-5p和mul-miR482-3p在植物体内具有长距离运输特性。将MulmiR482基因转入拟南芥,发现其可以在拟南芥中表达并可加工成成熟体,同时发现MulmiR482基因在拟南芥中表达降低了转基因植株对盐胁迫和丁香假单胞菌番茄致病变种DC3000的抗性。上述结果为深入研究桑树mul-miR482的生物功能和其表达调控机制奠定了基础。 展开更多
关键词 桑树 mir482 表达特性 生物学功能 逆境胁迫
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高山松miR482a的鉴定及其表达分析 被引量:1
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作者 王稳利 曾倩倩 +1 位作者 刘岩 邱宗波 《湖北农业科学》 2021年第17期135-138,144,共5页
以裸子植物高山松(Pinus densata)为试验材料,利用实验室前期构建的高山松miRNA数据库,通过生物信息学方法筛选了与生长发育相关的miR482a,并通过RLM-5′RACE的方法验证了NBS-LRR抗性蛋白(Unigenes45569)是高山松miR482a的靶基因。通过... 以裸子植物高山松(Pinus densata)为试验材料,利用实验室前期构建的高山松miRNA数据库,通过生物信息学方法筛选了与生长发育相关的miR482a,并通过RLM-5′RACE的方法验证了NBS-LRR抗性蛋白(Unigenes45569)是高山松miR482a的靶基因。通过PCR方法克隆得到高山松miR482a前体序列是130 bp,并可形成稳定的茎环发夹结构,但其成熟序列的碱基保守性较差。系统进化显示pdemiR482a与裸子植物欧洲云杉的进化关系较近。经qRT-PCR分析表明,pde-miR482a在根中表达量最高,其次是在茎中。而靶基因Unigenes45569在根和茎中的表达水平相对较低,暗示pde-miR482a可以通过调控靶基因NBS-LRR抗性蛋白(Unigenes45569)而参与高山松的生长发育。 展开更多
关键词 高山松(Pinus densata) mir482a 靶基因 荧光定量PCR
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Sl-miR482在番茄果实中的表达分析及STTM沉默载体的构建 被引量:2
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作者 莫显兰 史列琴 +2 位作者 陆秋利 王小敏 任振新 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期50-56,共7页
研究番茄Sl-miR482在果实成熟阶段特殊的表达模式,对其功能进行生物信息学分析并构建STTM沉默载体,为深入阐明Sl-miR482在番茄果实成熟软化中的作用机制奠定基础。采用定量PCR进行基因表达检测;利用启动子分析软件和靶基因预测网站进行... 研究番茄Sl-miR482在果实成熟阶段特殊的表达模式,对其功能进行生物信息学分析并构建STTM沉默载体,为深入阐明Sl-miR482在番茄果实成熟软化中的作用机制奠定基础。采用定量PCR进行基因表达检测;利用启动子分析软件和靶基因预测网站进行生物信息学分析;利用PCR扩增及酶切、连接反应进行STTM载体构建,并转化农杆菌。Sl-miR482在开花期表达量逐渐上升,到未成熟绿期表达量达到最高峰,随后逐渐下降。进一步生物信息学分析结果表明,Sl-miR482启动子中存在乙烯应答元件等。靶基因预测网站结果显示,番茄果胶裂解酶Sl-PL13为Sl-miR482的靶基因;基因表达分析结果表明,Sl-PL13与SlmiR482表达量在果实成熟不同阶段呈现此消彼长的关系。利用PCR扩增及酶切连接方法,成功构建STTM482沉默载体并转化农杆菌。Sl-miR482在果实成熟软化过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 Sl-mir482 STTM 果实成熟与软化 调控机制 载体构建
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大豆miR482家族的生物信息学分析 被引量:1
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作者 樊仔慧 黄慧梅 +1 位作者 王幼宁 李科学 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2021年第6期1769-1777,共9页
为进一步对大豆中的miR482家族有更全面的了解,本研究以大豆miR482家族为研究对象,对大豆中miR482家族的前体及成熟序列的特征、靶基因预测及其表达模式进行分析。在通过miRBase搜索得到的gma-miR482家族成熟序列中,除gma-miR482b/e均位... 为进一步对大豆中的miR482家族有更全面的了解,本研究以大豆miR482家族为研究对象,对大豆中miR482家族的前体及成熟序列的特征、靶基因预测及其表达模式进行分析。在通过miRBase搜索得到的gma-miR482家族成熟序列中,除gma-miR482b/e均位于chr.20以外,其余序列均位于不同染色体。gma-miR482家族成熟序列核心区域具有较高的保守性,进一步分析共预测到24个gma-miR482的候选靶基因,其中大部分属于NBS-LRR家族(Nucleotide binding site leucine-rich repeats)。靶基因表达模式分析表明gma-miR482可能在大豆的不同发育时期发挥作用。本研究相关数据为深入解析大豆miR482家族的功能及分子调控机制提供了支持。 展开更多
关键词 大豆 gma-mir482 生物信息学分析 靶基因
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Overexpression of potato miR482e enhanced plant sensitivity to Verticillium dahliae infection 被引量:16
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作者 Liu Yang Xiaoying Mu +4 位作者 Chao Liu Jinghui Cai Ke Shi Wenjiao Zhu Qing Yang 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2015年第12期1078-1088,共11页
Verticillium wilt of potato is caused by the fungus pathogen Verticillium dahliae. Present sRNA sequencing data revealed that miR482 was in response to V. dahliae infection, but the function in potato is elusive. Here... Verticillium wilt of potato is caused by the fungus pathogen Verticillium dahliae. Present sRNA sequencing data revealed that miR482 was in response to V. dahliae infection, but the function in potato is elusive. Here, we characterized potato miR482 family and its putative role resistance to Verticillium wilt. Members of the potato miR482 superfamily are variable in sequence, but all variants target a class of disease-resistance proteins with nucleotide binding site (NBS) and leucine-rich repeat (LRR) motifs. When potato plantlets were infected with V. dahliae, the expression level of miR482e was downregulated, and that of several NBS-LRR targets of miR482e were upregulated. Transgenic potato plantlets overexpressing miR482e showed hypersensitivity to V. dahliae infection. Using sRNA and degradome datasets, we validated that miR482e targets mRNAs of NBS-LRR disease-resistance proteins and triggers the production of trans-acting (ta)- siRNAs, most of which target mRNAs of defense-relatedproteins. Thus, the hypersensitivity of transgenic potato could be explained by enhanced miR482e and miR482e-derived ta- siRNA-mediated silencing on NBS-LRR-disease-resistance pro- teins. It is speculated that a miR482-mediated silencing cascade mechanism is involved in regulating potato resistance against V. dahliae infection and could be a counter defense action of plant in response to pathogen infection. 展开更多
关键词 mir482 nucleotide binding site leucine-rich repeat
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