miR93和miR21联合检测对2型糖尿病视网膜病变进展的预测价值

目的:分析血浆微小核糖核酸(miR)-93和miR21联合检测对2型糖尿病视网膜病变(DR)进展的预测价值。方法:选取本院2013-06/2014-06收治的2型DR患者76例,根据随访结果,将患者分成DR非进展组(34例)和DR进展组(42例),另选取45例健康体检者为对照组。检测三组血清中miR93和miR21水平的变化;分析DR患者预后的独立危险因素;分析其对患者预后的预测价值。结果:DR进展组患者血清中miR93和miR21水平明显高于DR非进展组和对照组(均P<0.01);二者可作为影响DR患者病情进展的独立危险因素;两者联合检测曲线下面积、特异度与敏感度均高于单独检测(P<0.05)。结论:miR93和miR21在DR患者血清中增高,影响DR患者病情进展。

miR⁃93⁃5p对心脏成纤维细胞纤维化的影响

目的miR⁃93⁃5p是心肌梗死中新发现的差异微小RNA(miRNA),探索其在心脏成纤维细胞中的功能机制。方法用差速贴壁法分离心肌梗死小鼠心脏成纤维细胞和心肌细胞;脂质体法将miR⁃NC组(转染miR⁃NC)、miR⁃93⁃5p mimic组(转染miR⁃93⁃5p mimic)、inhibitor⁃NC组(转染inhibitor⁃NC)、miR⁃93⁃5p inhibitor组(转染miR⁃93⁃5p inhibitor)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA⁃弗林蛋白酶(Furin)组(转染pcDNA⁃Furin)、si⁃NC组(转染si⁃NC)、si⁃Furin组(转染si⁃Furin)、miR⁃93⁃5p mimic+pcD⁃NA组载体(共转染miR⁃93⁃5p mimic和pcDNA)、miR⁃93⁃5p mimic+pcDNA⁃Furin组(共转染miR⁃93⁃5p mimic和pcDNA⁃Furin)转染至分离的成纤维细胞。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT⁃PCR)、免疫印迹(Western blot)检测细胞中miR⁃93⁃5p、Furin、胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)、胶原蛋白Ⅲ(CollagenⅢ)、成纤维细胞基质金属蛋白酶抑制物⁃2蛋白(TIMP2)、纤维连接蛋白(Fibronectin)的表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性。结果心肌梗死小鼠心脏成纤维细胞与心肌细胞相比,miR⁃93⁃5p、Furin的表达均显著升高(P<0.05)。过表达miR⁃93⁃5p、敲减Furin能明显抑制成纤维细胞中CollagenⅠ、CollagenⅢ、TIMP2、Fibronectin的表达,而抑制miR⁃93⁃5p、过表达Furin则具有相反的作用。miR⁃93⁃5p直接抑制野生型Furin细胞的荧光素酶活性,并且过表达Furin还可部分逆转miR⁃93⁃5p对心脏成纤维细胞的纤维化调控。结论miR⁃93⁃5p可抑制心肌梗死心脏成纤维细胞的纤维化,其机制与靶向Furin有关。