miR-145体内转染对小鼠骨关节炎模型的影响

[目的]探讨miR-145体内转染对骨性关节炎模型小鼠关节软骨的影响。[方法]8周龄雄性C57小鼠40只,随机分为4组,每组10只。分别为正常对照组(normal control,NC)、骨性关节炎模型组(osteoarthritis model,OAM)、正常动物转染组(transferred normal animal,TNA)及OA模型转染组(transferred OAM,TOAM)。对OAM和TOAM组动物切断全部内侧半月板-胫骨韧带建立OA模型。7、10 d时,对TOAM组和TNA组关节腔内注射载有miR-145的腺病毒液20μl。再过4 d后过度麻醉处死动物。行大体和组织学观察,并采用qPCR和Western blot检测相应标志物。[结果]形态方面,与NC组相比,OAM组关节软骨结构明显紊乱,纤维细胞增生,基质着色主要呈现蓝绿色。TNA组的软骨结构完整,但陷窝中出现空泡,基质着色呈蓝绿色。相比之下,TOAM组软骨结构完整,关节软骨基质着色呈红色,与NC组接近。免疫组化检测显示,与NC组相比,OAM组和TNA组的FRS2、LC3和p62染色的OD值均显著增加(P<0.05);而TOAM组的FRS2、LC3和p62染色的OD值显著低于OAM组和TNA组(P>0.05)。定量检测方面,与NC组相比,OAM组的miRNA-145的mRNA表达水平显著下降(P<0.05),而体内转染后,TNA组和TOAM组的miRNA-145的mRNA表达水平显著高于NC组(P<0.05)。OAM组的LC3II/I比值降低且p62表达水平显著升高(P<0.05)。TOAM组的p62的表达水平显著低于OAM组和TNA组(P<0.05)。[结论]miR-145体内转染可减轻关节失稳状的软骨退变,其机理可能与改变软骨自噬功能有关。