lncRNA MALAT1通过海绵吸附miRNA-141-3p调控Wnt/β-catenin促进卵巢癌的生长及转移

目的 研究长链非编码RNA MALAT1(lncRNA MALAT1)在卵巢癌中的作用及调控机制。方法 实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)检测MALAT1在人正常卵巢上皮细胞系IOSE80及人卵巢癌细胞系SKOV3、OVCA429和HO-8910PM中的表达,选取SKOV3及HO-8910PM细胞进行后续研究。利用siRNA干扰SKOV3和HO-8910PM细胞中MALAT1表达,CCK-8法检测细胞增殖,划痕及Transwell小室检测细胞迁移及侵袭能力,并通过Western blot法检测上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transformation, EMT)相关指标E-cadherin、N-cadherin的表达。利用生物信息学分析MALAT1与miRNA-141-3p的靶向关系,并利用双荧光素报告基因验证。MALAT1敲低及miRNA-141-3p抑制剂共同作用细胞,检测其对SKOV3及HO-8910PM细胞增殖、侵袭及迁移的影响,并通过Western blot法分析其对Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达调控。结果 与人正常卵巢上皮细胞系IOSE80比较,卵巢癌细胞系内MALAT1表达明显上调(P<0.05);而在SKOV3及HO-8910PM中下调MALAT1表达,细胞增殖、侵袭迁移及EMT均受到抑制,同时miRNA-141-3p表达上调(P<0.05)。双荧光素酶报告基因结果证明MALAT1和miRNA-141-3p具有靶向关系。而在下调MALAT1表达的同时使用miRNA-141-3p抑制剂,则可逆转下调MALAT1的所产生的抑制效应(P<0.05)。进一步的研究发现,MALAT1/miRNA-141-3p轴可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路影响卵巢癌进展。结论 MALAT1可能通过海绵吸附miRNA-141-3从而调控Wnt/β-catenin影响卵巢癌的发生和发展。

地屈孕酮联合硝苯地平对先兆流产患者妊娠结局与血清miRNA-141、miRNA-518e的影响

目的探讨地屈孕酮结合硝苯地平对先兆流产患者妊娠结局及血清miRNA-141、miRNA-518e的影响。方法采用横断面研究,选取陕西省结核病防治院2020年5月至2023年5月收治的117例先兆流产患者开展试验,以电脑编号奇偶数字分为结合组(58例)及参考组(59例)。参考组予以硝苯地平治疗(10 mg/次,3次/d;持续给药3 d后,调整剂量为20 mg/次,3次/d,持续给药直至症状完全消失为止),结合组则于参考组基础上加用地屈孕酮治疗(首次给药剂量40 mg,之后间隔12 h给药1次,调整剂量10 mg/次,持续给药至症状彻底消失)。比较两组妊娠结局、生殖激素水平、子宫动脉血流参数、血清miRNA-141与miRNA-518e水平。采用t检验、χ^(2)检验进行统计比较。结果结合组流产率低于参考组,足月妊娠率高于参考组[3.45%(2/58)比15.25%(9/59)、86.21%(50/58)比64.41%(38/59)],两组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。治疗30 d后两组各项生殖激素水平均高于治疗前1 d,且结合组升高幅度优于参考组,两组比较差异均有统计学意义(均P<0.05);两组各项子宫动脉血流参数均低于治疗前1 d,且结合组下调幅度优于参考组,两组比较差异均有统计学意义(均P<0.05);两组血清miRNA-141、miRNA-518e水平均低于治疗前1 d,且结合组低于参考组[(20.73±1.82)比(24.81±2.09)、(15.97±1.45)比(22.50±2.03)],两组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论地屈孕酮结合硝苯地平能显著改善先兆流产患者妊娠结局、生殖激素及子宫动脉血流,同时可负向调控miRNA-141、miRNA-518e的表达。

miR-141-5p/ZNF705A对慢性粒细胞白血病细胞源外泌体调控骨髓间充质干细胞黏附作用的机制

目的探讨慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)细胞源外泌体(exosome,Exo)中miR-141-5p/ZNF705A对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)黏附作用的影响。方法电镜和NTA粒径分析检测CML患者外周血和K562细胞中的Exo形态大小;qRT-PCR和Western blot检测转染前后K562细胞的Exo、BMSCs标记分子及黏附蛋白的表达情况;细胞黏附实验检测BMSCs的黏附能力;CCK-8法检测BMSCs活性、萤光素酶实验检测miR-141-5p与ZNF705A结合情况等。结果qRT-PCR结果显示,miR-141-5p表达在CML患者和K562细胞源Exo中均明显降低;qRT-PCR和Western blot等结果表明,CML患者中BMSCs的黏附蛋白CD44和CXCL12表达明显降低,且能够吞噬K562细胞源Exo。进一步发现,与CD34^(+)细胞相比,K562源性Exo能够降低Exo促进的BMSCs中CD44和CXCL12表达和黏附作用;同时,双萤光素酶基因报告等验证miR-141-5p与ZNF705A靶向结合;最后发现通过上调K562细胞源Exo中miR-141-5p的表达,靶向抑制ZNF705A,进而促进BMSCs的活性和黏附功能。结论K562细胞下调Exo中miR-141-5p表达,减少对ZNF705A的靶向抑制,进而抑制BMSCs的黏附功能,从而调控CML患者的骨髓造血功能。

miRNA-141、miRNA-145在非小细胞肺癌中的表达及与临床病理的关系

目的通过检测miRNA-141、miRNA-145在非小细胞肺癌中的表达,探讨其与非小细胞肺癌临床病理的关系。方法采用Real time-PCR法对48例非小细胞肺癌组织及正常肺组织的miRNA-141、miRNA-145进行定量分析,结果由2(-△△CT)处理,并分析与临床病理资料的关系。结果 1NSCLC患者肿瘤组织中miRNA-141表达水平明显升高,而且其表达与临床分期、病理类型显著相关(P<0.05),miRNA-141在鳞癌患者肿瘤组织表达高于腺癌(P<0.05),而在不同年龄、性别、肿瘤大小患者间差异无统计学意义(P>0.05)。2NSCLC患者肿瘤组织中miRNA-145表达水平明显下降,而且其表达与临床分期、病理类型显著相关(P<0.05),miRNA-145在腺癌患者肿瘤组织表达低于鳞癌(P<0.05),而在不同年龄、性别、肿瘤大小患者间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miRNA-141高表达及miRNA-145低表达与非小细胞肺癌的临床分期、病理分级密切相关,miRNA-141、miRNA145有可能作为非小细胞肺癌的重要肿瘤标志物。

非小细胞肺癌中miRNA-141的表达及临床意义

目的:探讨miRNA-141在非小细胞肺癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:采用real time-PCR法对54例非小细胞患者,肺癌组织及正常肺组织的miRNA-141表达水平进行定量分析,结果由2-△△CT处理,并分析与临床病理资料的关系。结果:在NSCLC患者肿瘤组织中miRNA-141表达水平明显升高,其表达与临床分期、病理类型显著相关(P<0.05)。而在不同年龄、性别、肿瘤大小、吸烟史患者间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:MiRNA-141高表达与非小细胞肺癌的临床分期、病理分型密切相关,miRNA-141有可能作为非小细胞肺癌的重要肿瘤标志物之一。

miRNA-141在肝癌组织中的表达及其在细胞增殖中的作用与机制研究

目的探讨miRNA-141在肝癌组织中的表达情况及其对细胞增殖的影响和机制。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖抑制情况;采用荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miRNA-141的相对表达量;采用克隆形成实验检测过表达miRNA-141对HepG2细胞增殖能力的影响;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测HOXD-AS1蛋白的表达情况。结果肝癌组织中miRNA-141的相对表达量低于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P﹤0.05)。miRNA-141过表达组、对照组和阴性转染组中miRNA-141的相对表达量比较,差异有统计学意义(P﹤0.01)。对照组和阴性转染组中miRNA-141的相对表达量比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。miRNA-141过表达组中HepG2细胞的增殖抑制率明显高于对照组和阴性转染组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。miRNA-141过表达组、对照组和阴性转染组中HepG2细胞的克隆形成数目比较,差异有统计学意义(P﹤0.01)。miRNA-141过表达组、对照组和阴性转染组中HOXD-AS1蛋白的相对表达量比较,差异有统计学意义(P﹤0.01)。结论 miRNA-141在肝癌组织中低表达,miRNA-141表达水平的下降可能导致肝癌细胞异常增殖,而过表达miRNA-141可以抑制肝癌细胞的增殖,并且其发挥的抑制作用与HOXD-AS1有关。

miRNA-141通过调节TLR4信号通路抑制大鼠血栓形成

目的研究微小RNA(miR)-141对血栓模型大鼠血栓形成、血小板聚集及血浆中一氧化氮(NO)、环磷酸鸟苷(cGMP)和前列环素(PGI2)的影响。方法90只SD雄性大鼠随机进行分组,10只为正常对照组;模型组使用5 g/L的CMC-Na建立大鼠动静脉旁路血栓模型(20只);治疗组在CMC-Na基础上分别静脉注射100 mg/kg阿司匹林(Asp)作为阳性对照(10只)、miR-141的拟似物mimic(20只)、mimic阴性对照mimic-NC(10只)、mimic联合Toll样受体4(TLR4)过表达重组质粒pcDNA3.1-TLR4(mimic+pcDNA3.1-TLR4)(20只),连续4周。观察各组血栓形成的影响,比浊法观察ADP诱导的血小板聚集变化,试剂盒法检测各组血浆中NO,cGMP,PGI2的水平;蛋白免疫印迹法检测TLR4、NF-κB、Rac1、IL-1β的蛋白水平。结果miR-141-mimic可显著抑制血栓形成和血小板聚集率(P<0.05),升高血浆中NO(P<0.05)、cGMP(P<0.05)、PGI2(P<0.05)浓度,miR-141-mimic组效果优于阿司匹林组(P<0.05)。miR-141-mimic可显著抑制NF-κB(P<0.05),Rac1(P<0.05),IL-1β(P<0.05)的蛋白水平。mimic+pcDNA3.1-TLR4组的逆转miR-141-mimic组的效果(P<0.05)。结论miR-141通过抑制TLR4信号通路发挥抗血栓作用。

miRNA-141在结肠癌患者血浆及肿瘤组织中的表达及意义

目的:探讨miRNA-141(miR-141)在结肠癌患者血浆及组织中的表达及意义。方法:选取89例行手术切除的结肠癌患者和60例健康志愿者,利用实时荧光定量PCR技术检测所有研究对象血清及肿瘤组织和癌旁组织中miR-141表达,分析miR-141在血清及肿瘤组织中的表达与临床病理特征之间的相关性。结果:miR-141在结肠癌患者血清中相对表达量(5.97±1.38),显著高于正常对照组(2.13±0.92);miR-141在结肠癌组织中相对表达量(3.64±1.05),显著高于癌旁组织的(1.12±0.67),差异均有统计学意义(P<0.001);miR-141在结肠癌患者血清中的相对表达量与浸润程度、分化程度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期和癌胚抗原水平有关(P<0.05),miR-141在结肠癌组织中的相对表达量与浸润程度、分化程度、淋巴结转移和TNM分期有关(P<0.05);Pearson相关分析显示,miR-141在结肠癌患者血清中的相对表达量与在肿瘤组织中的相对表达量呈正相关(r=0.345,P=0.001)。结论:miR-141在结肠癌患者血清及肿瘤组织中均呈高表达,可能作为癌基因参与结肠癌发生、进展及转移过程,有望成为结肠癌早期诊断的指标及基因治疗的新的靶位。

miRNA-141通过抑制MAP2K4促进大肠癌增殖的研究

目的:探究miRNA-141通过抑制MAP2K4对促进大肠癌增殖的效果。方法:本文共选取2016年2月至2018年2月在本院放射科做MRI检查被诊断为大肠癌的患者24例,提取总RNA,RNA浓度测量使用紫外分光光度法,取5μL RNA样品,运用RNase对离子水进行稀释,在对OD值进行测量时需使用紫外分光光度计进行测量。RT-PCR扩增,cDNA模版的合成主要是应用PCR逆转录反应来实现,RT-PCR扩增主要是应用ALL-in-One试剂盒,具体的步骤及方法应严格按照试剂盒上的说明书开展。结果:大肠癌及肠黏膜的提取方法主要是应用Trizol方法。在对miR-141的相对表达量进行检测时,主要是采用荧光实时定量PCR法。在对细胞转染WT FL质粒进行检验时,主要是使用荧光仪来检测荧光酶的活性,会发现FL活性下降,突变质粒的FL活性未发生明显的变化。结论:在大肠癌诊断中MRI发挥了重要作用,miR-141的表达水平会随着大肠癌TNM分期而增高,miR-141表达上调,说明大肠癌与miR-141之间的发展有直接关系,有助于抑制癌细胞的快速生长。

ZIF-8 SQDs电化学发光传感器超灵敏检测miRNA-141研究

MiRNA-141被认为是临床早期癌症诊断的潜在生物标志物,因此,探索合适的方法对miRNA-141进行超灵敏检测具有重要意义.电化学发光(ECL)是由高能电子转移反应后产生的激发态物质回到基态时放出光子的过程,凭借其超高的灵敏度、低背景噪声以及出色的可控性等优点逐渐在生物分析定量、环境监测及食品安全检测等领域获得了广泛的关注.而发光体在ECL技术中起着电光转换器的重要作用,在各种具有ECL活性的材料中,硫量子点(SQDs)因其优异的水分散性、良好的生物相容性及突出的稳定性等优势成为极具潜力的ECL候选材料.本研究采用硫粉为原料,在纯氧气氛下通过自上而下的方法合成了尺寸均一、呈明亮蓝色荧光的SQDs.进一步以金属有机框架ZIF-8为基质对SQDs进行封装,实现SQDs的富集及稳定性提升.采用扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)、荧光光谱(FL)等方法对其结构和形貌进行表征.以该复合材料作为发光体,利用二茂铁(Fc)对ZIF-8/SQDs的猝灭效应,结合催化发夹自组装(CHA)信号放大策略及金纳米棒(Au NRs)作为共反应促进剂的信号增强作用,实现目标物miRNA-141高灵敏分析检测,检测限低至0.86 fmol/L(S/N=3),有望用于疾病早期诊断miRNA-141表达水平的检测.

miRNA-141在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及其与预后的关系

目的探讨miRNA-141在弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)中的表达及其与预后的关系。方法选取锦州医科大学附属第一医院2017年1月-2019年12月收治的40例DLBCL患者初始治疗前的石蜡包埋组织标本。应用荧光实时定量PCR法检测其中miRNA-141的表达水平。同时按照免疫分型、国际预后指数(IPI评分)等分组,探讨miRNA-141的相对表达量与免疫分型等临床特征之间的关系。另收集性别、年龄相匹配的20例淋巴结反应性增生(reactive hyperplasia of lymph node,RHL)患者的石蜡组织标本作为对照组。结果miRNA-141在DLBCL患者中的表达水平低于RHL组(P<0.05)。DLBCL中miRNA-141高表达组的2年总体生存率(92.2%)高于低表达组(26.2%)(P=0.001)。多因素COX模型分析显示:40例DLBCL中,miRNA-141低表达(P=0.009)、国际预后指数IPI≥3分(P=0.012)分别为各自独立的预后不良的因素。结论miRNA-141在弥漫大B细胞淋巴瘤患者中表达下降,miRNA-141高表达组总体生存率明显高于低表达组,提示miRNA-141可能是辅助诊断及评估预后的另一个标志物。

miR-141及MMP-16对骨性关节炎疼痛及软骨损伤的影响

目的观察miR-141及基质金属蛋白酶-16(MMP-16)对骨性关节炎(OA)疼痛及软骨损伤的影响,并探讨其部分调控机制。方法将30只健康雄性SD大鼠随机分为对照组10只和实验组20只,实验组大鼠利用十字韧带损伤法制作OA模型,分别于术前及手术2周和8周后采用冷痛阈法测定2组大鼠冷痛阈值,HE染色法观察2组大鼠软骨组织结构变化,实时定量PCR法检测大鼠背根神经节组织中miR-141表达情况,免疫组织化学法观察软骨组织中MMP-16蛋白表达情况。结果手术2,8周后,对照组大鼠对冷丙酮刺激的阳性反应次数未见明显变化(P均>0.05);实验组大鼠对丙酮刺激的阳性反应次数明显高于对照组(P<0.05),并且随着时间的延长,阳性反应次明显增加(P<0.05);HE染色显示,手术2周后实验组大鼠软骨细胞结构轻度紊乱伴少量炎性细胞浸润,同时细胞间质出现轻度纤维化;手术8周后,细胞形态基本消失,基质淡染,呈现广泛纤维化。手术2,8周后,实验组大鼠背根神经节组织中miR-141相对表达量和骨组织中MMP-16蛋白表达量均明显高于对照组(P均<0.05),且手术8周后明显高于手术2周后(P<0.05)。结论脊髓背角细胞中的miR-141在OA发展中调节疼痛的发生,而MMP-16促进OA的发展。

lncRNA⁃DINO靶向miR⁃141调控Keap1⁃Nrf2通路促进非小细胞肺癌化疗耐药的机制研究

目的研究lncRNA⁃DINO在非小细胞肺癌(NSCLC)化疗耐药中的作用机制。方法对比耐药的和敏感的NSCLC临床标本,用RT⁃PCR及Western实验检测DINO、miR⁃141、Keap1、Nrf2的表达,探索DINO、miR⁃141的表达与化疗耐药的关系,其次,将A549细胞株和A549/DDP细胞株进行细胞培养,使用Trizol法提取总RNA,用LncRNA芯片对比检测两组细胞株间LncRNA的表达差异。通过在线软件(RNAhybrid)预测和计算,评估DINO与miR⁃141结合可能性的高低。最后将A549细胞株和A549/DDP细胞株进行细胞培养,提取总RNA,RT⁃PCR验证两组细胞株间的DINO、miR⁃141、Keap1、Nrf2、HO⁃1、NQO1。结果耐药的A549/DDP细胞株中DINO表达较敏感的A549细胞显著降低(P<0.05),且DINO是通过与miR⁃141结合而发挥作用的。RT⁃PCR对比检测发现,与A549细胞相比,过表达miR⁃141的A549⁃miR⁃141细胞中Keap1基因表达明显下降(P<0.05),而PTEN和MSH2表达无明显变化。与A549细胞相比,A549⁃miR⁃141细胞中Keap1基因的表达下调,而Nrf2基因和其下游HO⁃1、NQO1基因表达显著上调(P<0.05)。结论非小细胞肺癌中lncRNA⁃DINO可靶向结合miR⁃141,进而调控Keap1⁃Nrf2通路而导致细胞的化疗耐药。

五苓胶囊对前列腺癌循环miRNA-141表达的影响

目的:采用荧光定量PCR法检测前列腺癌循环miRNA-141表达,并研究五苓胶囊对其影响。方法:选取我院泌尿外科收治的前列腺癌患者20例,随机分为A、B两组,各10例;A组给予常规治疗,B组在常规治疗基础上给予加用五苓胶囊治疗。选取同期住院前列腺增生患者20例,正常对照组为同时期体检健康者20例。采用荧光定量PCR法检测正常对照组、前列腺增生组以及前列腺癌组血清miRNA-141的表达情况,以及前列腺癌组治疗前TPSA(前列腺特异性抗原)含量。结果:前列腺癌组的血清miRNA-141的表达水平为正常对照组的(11.22±8.19)倍,明显高于前列腺增生组(1.65±1.73)和正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);前列腺增生组和正常对照组比较无明显差异(P>0.05);前列腺癌组血清miRNA-141的表达水平与TPSA水平呈正相关关系,相关系数r=0.753,有统计学意义(P<0.05)。治疗后,前列腺癌A组与B组的血清miRNA-141的表达水平均有所改善,与A组(5.82±4.51)相比较,B组的miRNA-141的表达水平(1.93±0.67)明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:前列腺癌患者血清中miRNA-141表达水平明显升高,且与TPSA水平呈正相关关系,五苓胶囊能够降低miRNA-141表达。

miRNA-141对胃癌细胞增殖及侵袭的抑制作用

目的探讨miRNA-141对胃癌细胞增殖及侵袭的抑制作用。方法实时荧光定量PCR(realtime PCR)法检测胃癌细胞NCI-N87、SGC-7901、MGC-803、MKN-45、HGC-27、BGC-823及正常人胃黏膜上皮细胞株GES-1中miRNA-141表达,脂质体将miRNA-141mimics和miRNA-141NC转入胃癌细胞中,48h后,real-time PCR法检测miRNA-141表达,甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)流式双染检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)、c-myc、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9表达及磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路激活情况。结果胃癌细胞NCI-N87、SGC-7901、MGC-803、MKN-45、HGC-27、BGC-823中miRNA-141相对表达水平(2.05±0.20、1.76±0.17、1.04±0.10、1.23±0.12、0.89±0.09、0.45±0.04)明显低于GES-1中(2.87±0.30)的表达水平(P<0.01)。与miRNA-141NC组比较,miRNA-141mimics组miRNA-141表达水平明显升高、细胞活力下降、细胞凋亡率升高、细胞侵袭能力降低,PCNA、c-myc、MMP-2、MMP-9、PI3K及磷酸化AKT(p-AKT)表达水平下调,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论上调BGC-823胃癌细胞中miRNA-141表达水平后能明显抑制癌细胞增殖与侵袭,可能与抑制阻断PI3K/AKT信号通路有关。

血清miRNA-141和miRNA-375联合检测用于监测前列腺癌根治术后复发的临床研究

目的检测miRNA-141、miRNA-375在前列腺癌患者血清中的表达水平,分析其在前列腺癌诊断分期及监测根治术后复发中的临床意义。方法收集2015年1月-2020年12月在浙江省人民医院住院和门诊治疗的前列腺癌患者血清标本。包括31例最终行根治术长期跟踪患者,26例良性前列腺增生患者以及30例对照组健康者。检测3组血清中的miRNA-141、miRNA-375表达水平,与前列腺癌患者组的临床特征进行相关性分析,探讨其表达水平的差异及其临床意义,留取前列腺癌患者根治术后不同时间点血清标本,研究miRNA-141.miRNA-375与前列腺癌的复发之间的关系。结果前列腺癌组miRNA-141、miRNA-375的相对表达量高于良性前列腺增生组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而良性前列腺增生组和对照组的差异无统计学意义(P>0.05)。miRNA-141、miRNA-375的表达水平与肿瘤分期显著相关(P<0.05),与血清PSA水平相关(P<0.05),而与Gleason评分、年龄无明显的相关性。前列腺癌手术后随访中发现血清miRNA-141、miRNA-375较术前下降,差异有统计学意义(P<0.05)。随访2年数据显示miRNA-141、miRNA-375在术后1年开始缓慢升高,和PSA升高相关联,和睾酮水平无明显相关性。结论miRNA-141、miRNA-375在前列腺癌患者血清中高表达,与肿瘤分期显著相关,可监测前列腺癌根治术后的疗效与复发,有望成为监测术后复发的新指标。

铂纳米颗粒/石墨烯功能化的场效应晶体管生物传感器高灵敏检测前列腺癌

构建了功能化的石墨烯场效应晶体管生物传感器,特异性高灵敏检测前列腺癌标志物miRNA-141.采用微纳加工技术构建场效应晶体管(field effect transistor,FET)芯片,利用化学还原法得到电学性能良好的还原氧化石墨烯(reduced graphene oxide,RGO),滴涂法层积在芯片源漏电极间形成传感沟道,并在RGO界面沉积金属铂纳米颗粒,利用Pt-S键固定DNA探针,特异性检测miRNA-141.该生物传感器对疾病标志物的响应迅速,检测限可低至10 fmol/L,具有良好的选择性和重复性.

微小RNA-141对肝癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的探讨上调微小RNA-141模拟物（miR-141mimics）表达对肝癌细胞（HepG2）增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法采用实时荧光定量PCR（qPCR）检测正常肝上皮细胞（L02）和肝癌细胞（HepG2）中miR-141的差异表达。以合成的miR-141模拟物转染HepG2细胞作为实验组（miR-141组），以空白对照（CON组）和阴性对照（miR—NC组）作为对照组。采用qPCR检测各组细胞中miR-141表达情况，CCK-8法检测细胞的增殖情况，流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果qPCR结果显示，HepG2中miR-141相对表达（0．64±0．13）明显低于L02（1．00±0．18），差异有统计学意义（P〈0．05）。转染后，miR-141组细胞中miR-141相对表达（3．33±0．66）明显高于CON组（1．00±0．17，P〈0．05）和miR—NC组（1．08±0．14，P〈0．05）。CCK8结果显示，miR-141组在转染后48、72、96h相对吸光度值分别为（0．67±0．07）、（1．17±0．05）、（1．36±0．03），均明显低于CON组[（0．81±0．02）、（1．42±0．03）、（1．73±0．05）]和miR—NC组[（0．78±0．01）、（1．38±0．02）、（1．69±0．01），均P〈0．05]。细胞凋亡检测结果显示，miR-141组细胞凋亡率[（11．81±0．23）％]明显高于CON组[（4．18±0．18）％]和miR—NC组[（4．04±0．08）％]，差异有统计学意义（P〈0．05）。细胞周期检测结果显示，miR-141组S期细胞[（19．89±2．78）％]明显少于CON组[（31．87±1．00）％]和miR—NC组[（30．49±1．73）％]，差异均有统计学意义（均P〈0．05）；而miR-141组GO／G1期细胞[（74．74±2．03）％]明显多于CON组[（60．85±1．69）％]和miR．NC组[（60．93±1．95）％]，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论HepG2细胞中miR-141低表达。上调miR-141表达能明显抑制HepG2细胞增殖，促进细胞凋亡及改变细胞周期的分布。