miRNA-138-5p、miRNA-34b在肺癌中的表达及与患者临床特征和预后的关系

目的 探讨miRNA-138-5p、miRNA-34b在肺癌中的表达及与患者临床特征和预后的关系。方法 选取151例肺癌患者,均进行手术切除治疗,取术后肺癌组织及癌旁组织,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测miRNA-138-5p、miRNA-34b水平。比较不同临床特征、不同预后肺癌患者肺癌组织中miRNA-138-5p、miRNA-34b水平,肺癌患者预后的影响因素采用多因素Logistic回归分析。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评估miRNA-138-5p、miRNA-34b单独及联合检测对肺癌患者预后的预测价值。结果 肺癌组织中miRNA-138-5p、miRNA-34b水平均明显低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。肿瘤直径≥2 cm、TNM分期为Ⅲ期、有淋巴结转移、分化程度为低分化的肺癌患者肺癌组织中miRNA-138-5p、miRNA-34b水平分别明显低于肿瘤直径﹤2 cm、TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移、分化程度为中高分化的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。至随访结束,151例肺癌患者中,预后良好119例,预后不良32例。预后不良肺癌患者肺癌组织中miRNA-138-5p、miRNA-34b水平均明显低于预后良好患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。多因素Logistic回归分析结果显示,肿瘤直径≥2 cm、TNM分期为Ⅲ期、有淋巴结转移、分化程度为低分化、miRNA-138-5p水平降低、miRNA-34b水平降低均是肺癌患者预后的独立危险因素(P﹤0.05)。ROC曲线显示,miRNA-138-5p、miRNA-34b联合检测预测肺癌患者预后的AUC为0.951(95%CI:0.918~0.984),高于二者单独检测的0.603、0.572。结论 miRNA-138-5p、miRNA-34b在肺癌组织中异常低表达,且与患者临床特征、预后密切相关,有望成为评估肺癌恶性程度及预后的重要分子标志物。

外周血中miR-34b表达水平对Ⅲb~Ⅳ期NSCLC患者靶向治疗效果及预后的评估价值分析

目的:探究外周血中微小RNA-34b(miR-34b)表达水平对Ⅲb~Ⅳ非小细胞肺癌(NSCLC)患者靶向治疗效果及预后的评估价值。方法:选取2020年1月至2022年1月于我院接受靶向治疗的104例NSCLC患者作为研究对象,根据靶向治疗效果分为有效组(n=40)及无效组(n=64)。所有患者治疗后均接受1年随访,根据预后情况分为生存组(n=32)及死亡组(n=72)。实时定量PCR检测外周血中miR-34b,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析外周血miR-34b表达水平对Ⅲb~Ⅳ期NSCLC患者靶向治疗效果及预后的评估价值,采用Kaplan-Meier生存曲线分析不同外周血miR-34b表达水平与Ⅲb~Ⅳ期NSCLC患者预后的关系。结果:有效组外周血miR-34b表达水平高于无效组(P<0.05);ROC曲线显示,外周血miR-34b表达水平评估Ⅲb~Ⅳ期NSCLC患者靶向治疗效果的AUC为0.856(P<0.05);存活组外周血miR-34b表达水平高于死亡组(P<0.05);ROC曲线显示,外周血miR-34b表达水平评估Ⅲb~Ⅳ期NSCLC患者预后的AUC为0.916(P<0.05);Log-rank检验显示,miR-34b>2.16组和miR-34b≤2.16组患者生存率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:外周血miR-34b表达水平与Ⅲb~Ⅳ期NSCLC患者靶向治疗效果及预后有关,检测外周血miR-34b表达水平有助于评估靶向治疗效果及预后。

miRNA-34b联合PSA检测对前列腺癌的诊断价值

目的探讨miRNA-34b联合前列腺特异抗原(PSA)检测对前列腺癌的诊断价值。方法选取2016年1月至2018年10月广安市人民医院诊治的40例前列腺癌患者和40例良性前列腺增生患者以及40例健康成年人作为研究对象。将其分别设为前列腺癌组、前列腺增生组和正常对照组。采用化学发光法测定tPSA的含量,实时荧光定量PCR法检测miRNA-34b的表达情况,比较三组研究对象的检测结果。结果前列腺癌组患者PSA和miRNA-34b含量明显高于前列腺增生组患者和正常对照组成员,其差异均具有统计学意义(均P<0.05)。前列腺癌组患者miRNA-34b的表达与年龄无关,差异无统计学意义(P>0.05),与是否淋巴结转移、临床分期和病理分级有关,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。miRNA-34b的灵敏度和特异度不如PSA,约登指数低于PSA,但PSA联合miRNA-34b检测的灵敏度和特异度优于PSA。结论miRNA-34b在前列腺癌组患者中有较高的表达,可以作为前列腺癌诊断性血清标志物。PSA联合miRNA-34b对于前列腺癌的诊断效能优于单独检测miRNA-34b、PSA,可以用于前列腺癌的早期诊断。

麦冬皂苷B体外调控非小细胞肺癌A549细胞miRNA-34b表达的研究

目的:本研究主要观察不同方式处理后的非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞中mi RNA?34b表达水平,探讨mi RNA?34b对MET信号通路的调控机制,以及麦冬皂苷B(OPB)抑癌效应的分子机理,探寻治疗NSCLC的新靶点。方法:采用非小细胞肺癌A549细胞、胚肺成纤维细胞MRC?5、A549+OPB细胞、感染过表达慢病毒LV?hsa?mir?34b的A549细胞、以及感染阴性对照CON181B病毒的A549细胞作为研究对象,分别设为CON组、MRC?5组、CON+OPB组、Micro?up组、NC组。采用q RT?PCR方法检测mi R?34b在CON组、MRC?5组、A549+OPB组A549细胞中的表达情况。使用生物信息学软件预测mi RNA?34b可能的下游功能靶基因。使用q RT?PCR的方法定量分析OPB对MET基因表达的影响,用Western blot检测mi RNA?34b和OPB对靶MET蛋白表达的影响。结果:与MRC?5组相比,A549细胞中mi RNA?34b的表达明显减少,加入OPB后mi R?34b的表达增加。生物信息学预测显示MET基因是mi R?34b可能的关键下游靶基因。加入OPB后,MET基因水平和蛋白水平的表达均降低。结论:OPB可能通过上调A549细胞mi RNA?34b表达,抑制下游靶基因MET进而发挥抗癌作用。

粪便SEPT-9和miRNA-34b/c基因甲基化检测在大肠肿瘤筛查中的临床应用

目的评估检测大肠肿瘤患者粪便中SEPT-9和微RNA(miRNA)-34b/c基因甲基化对大肠肿瘤筛查的临床性能。方法采用病例对照研究方法,使用甲基化敏感性高分辨率熔解曲线法检测大肠肿瘤患者(大肠癌组35例、大肠腺瘤组47例)和正常对照人群(正常对照组52名)粪便中SEPT-9和miRNA-34b/c基因是否存在甲基化,来评估其筛查大肠肿瘤的性能。结果大肠癌组SEPT-9和miRNA-34b/c基因的甲基化阳性率分别为68.6%、71.4%,大肠腺瘤组分别为57.4%、63.8%,正常对照组分别为9.6%、11.5%。3组的SEPT-9、miRNA-34b/c基因甲基化阳性率比较差异均有统计学意义(χ^(2)_(SEPT-9)=37.185,χ^(2)_(miRNA-34b/c)=40.040,P均<0.001),利用Bonferroni法进行两两比较,大肠癌组和大肠腺瘤组的甲基化阳性率比较差异无统计学意义,两者与正常对照组比较差异均有统计学意义(P均<0.001)。3组联合检测SEPT-9和miRNA-34b/c基因的甲基化阳性率为88.6%、76.6%、13.5%,大肠癌组和大肠腺瘤组联合检测的甲基化阳性率均高于SEPT-9单基因检测和miRNA-34b/c单基因检测(P均<0.05)。结论检测粪便中SEPT-9和miRNA-34b/c基因甲基化具有效好的大肠肿瘤筛查性能,或许可作为大规模人群筛查大肠肿瘤新的生物标志物组合;多基因甲基化联合检测筛查的性能优于单基因。

miRNA-34b抑制剂通过调控TIA-1-SG通路缓解肾脏纤维化的机制探讨

目的:分析miRNA-34b抑制剂通过调控细胞毒颗粒关联RNA结合蛋白1应激颗粒(TIA-1-SG)通路缓解肾脏纤维化的机制。方法:给予CD1小鼠250 mg/kg叶酸诱导肾间质纤维化,给予其miRNA-34b抑制剂(以下简称“抑制剂”)皮下注射,持续4周,注射2次/周。体外细胞实验,对人肾小管上皮细胞(HK2)分别进行miRNA-34b的过表达处理与沉默处理,均使用巨噬细胞上清液进行培养。对比小鼠在注射抑制剂前后的纤维化指标,对比HK2细胞miRNA-34b过表达处理与沉默处理的纤维化相关指标、肾小管损伤指标、miRNA-34b与TIA-1-SG。结果:与小鼠注射miRNA-34b抑制剂前的情况比较,注射后的纤维化指标TGFβ1、纤维连接蛋白与Ⅳ型胶原蛋白均降低,差异具有统计学意义(P<0.05);过表达处理下HK2细胞的肾小管损伤指标、纤维化相关指标与miRNA-34b表达率高于沉默处理下的HK2细胞,过表达处理下HK2细胞的TIA-1-SG表达率低于沉默处理下的HK2细胞,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:TIA-1-SG对缓解肾脏纤维化具有重要作用,miRNA-34b抑制剂能够抑制miRNA-34b表达,进而对其下调TIA-1-SG的过程产生抑制作用,促进TIA-1-SG的表达,进而降低肾损伤指标、炎性指标及纤维化指标。

非小细胞肺癌组织miRNA-34b/c甲基化及预后相关性

目的探讨miRNA-34b/c在可手术的非小细胞肺癌组织中的甲基化及其与预后的相关性。方法回顾性分析中国医科大学附属盛京医院2009年12月-2015年12月期间行手术治疗的53例非小细胞肺癌患者的临床资料。采用定量RT-PCR检测上述病例肺癌标本中miRNA-34b/c的甲基化水平,应用Kaplan-Meier方法进行单因素生存曲线分析miRNA-34b/c甲基化水平与非小细胞肺癌生存的相关性,Log-rank法进行检验,采用Cox风险比例模型分析预后的独立影响因素。结果非小细胞肺癌miRNA-34b/c甲基化水平较高,生存分析显示miRNA-34b/c甲基化组生存期明显低于非甲基化组(P<0.01),Cox风险比例模型分析显示miRNA-34b/c甲基化可作为非小细胞肺癌患者预后的独立影响因素。结论非小细胞肺癌miRNA-34b/c甲基化水平高,miRNA-34b/c甲基化提示非小细胞肺癌患者预后不良。

miRNA-34b在非小细胞肺癌组织中的表达及其对A549细胞增殖和侵袭能力的影响

目的探讨miRNA-34b(miR-34b)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达情况及其体外对人NSCLC A549细胞增殖、侵袭能力的影响。方法收集2015年6月至2017年3月山西省肿瘤医院40例NSCLC患者癌组织及癌旁正常上皮组织(距癌灶边缘5 cm以上)标本。向A549细胞分别转染miR-34b序列模拟物(实验组)和无关序列(阴性对照组)。采用反转录、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测各组织和各组A549细胞中miR-34b表达情况;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测实验组和阴性对照组A549细胞增殖活性,Transwell法检测两组A549细胞侵袭能力。结果NSCLC组织中miR-34b相对表达量低于癌旁正常上皮组织(0.52±0.06比1.05±0.17),差异有统计学意义(P<0.001)。实验组A549细胞miR-34b相对表达量高于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。MTT法检测显示,实验组A549细胞培养24、48h细胞增殖能力(吸光度值)均低于阴性对照组(均P<0.01)。Transwell法检测显示,实验组侵袭的A549细胞数少于阴性对照组[(49.53±5.03)个比(121.00±12.06)个,P<0.01]。结论miR-34b在NSCLC组织中低表达,miR-34b表达上调可抑制NSCLC A549细胞增殖和侵袭。

荧光定量分析猪睾丸组织中miR-34b的表达规律

运用荧光定量分析方法检测军牧1号白猪不同发育阶段睾丸组织miRNA-34b的表达量差异,结果:miRNA-34b在3月龄前的表达量都非常低,从5月龄开始表达量呈明显上升,7月龄达到峰值后开始明显下降。在猪的发育过程中,miRNA-34b的表达趋势曲线呈先增后降。结果表明miRNA-34b可能与猪雄性生殖发育相关。

孕哺期至成年前持续氟染毒对子鼠空间学习记忆和海马病理改变及miR-204、miR-34b-5P表达的影响

[背景]过量氟可蓄积于脑组织并导致神经系统损伤。微小RNA(miRNA)可通过调控相关蛋白表达,影响学习记忆功能发挥。[目的]探讨孕哺期至成年前氟暴露对子鼠空间学习记忆和海马中miR-204、miR-34b-5P表达的影响。[方法]16只清洁级健康SD孕鼠随机分为4组,每组4只,自由饮水染毒,各组饮水中氟化钠质量浓度(后称浓度)分别为0、60、120、240 mg·L^(-1)。母鼠从妊娠第0天~子鼠出生的第21天(PND21)染毒;各组随机选8只子鼠(雌雄各4只,同一窝别雌雄比为1∶1)在PND22~PND90进行染毒。采用Morris水迷宫实验检测空间学习记忆能力。子鼠处死前收集24 h尿液,心脏采血后处死,测定尿、脑及血清氟,光镜观察海马组织病理变化;分离海马组织保存于-80℃,实时荧光定量PCR检测海马组织中miR-204、miR-34b-5P表达水平。[结果]除出生第6周低氟组外,各染毒组大鼠体重均低于对照组(P<0.05)。Morris水迷宫显示:第2、3、4天子鼠逃避潜伏期与氟化钠的染毒浓度呈正相关(r=0.443、0.519、0.840;均P<0.05);子鼠首次到达平台时间及穿越平台次数分别与氟化钠染毒浓度呈正相关与负相关(r=0.828、-0.599;均P<0.001)。60、120、240 mg·L^(-1)染毒组尿氟浓度分别为(13.08±1.60)、(14.49±1.17)、(25.92±2.38)mg·L^(-1),较对照组[(3.89±0.52)mg·L^(-1)]升高(P<0.001);各染毒组脑氟水平分别(8.20±0.68)、(16.03±0.84)、(25.39±0.62)μg·g^(-1),较对照组(1.28±0.11)μg·g^(-1)升高(P<0.001);各染毒组血清氟浓度分别为(0.04±0.00)、(0.06±0.01)、(0.16±0.12)mg·L^(-1),较对照组[(0.02±0.00)mg·L^(-1)]升高(P<0.001);染毒组子鼠尿、脑及血清氟水平均与氟化钠浓度呈正相关(r=0.948、0.996、0.914;均P<0.001)。HE染色结果显示:与对照组比较,染毒组出现海马神经元体积形态缩小,胞质颜色红染,细胞核固缩,染色加深,结构模糊和核仁消失等病理改变。中、高氟组中miR-204与各染毒组中miR-34b-5P表达水平均较对照组增高(P<0.001),miR-204与miR-34b-5P的表达水平均与氟暴露浓度呈正相关(r=0.984、0.980;均P<0.001)。[结论]持续氟暴露可损害子鼠的学习记忆能力,可能与海马组织中的mi R-204与mi R-34b-5P表达水平升高有关。