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Ku70作为RNA解旋酶调节miR-124的加工成熟及神经细胞的分化
1
作者
黄皑雪
李睿婷
+8 位作者
赵越超
李洁
李慧
丁学锋
王琳
肖参
刘雪梅
秦成峰
邵宁生
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2024年第6期1418-1433,共16页
目的Ku70蛋白主要通过其DNA结合特性参与双链DNA断裂(DSB)的非同源端连接(NHEJ)修复,有报道称其具有RNA结合功能,本文探索Ku70是否具有RNA解旋酶活性并影响miRNA加工成熟。方法利用RNA免疫共沉淀(RIP)测序结合生物信息学分析Ku蛋白结合...
目的Ku70蛋白主要通过其DNA结合特性参与双链DNA断裂(DSB)的非同源端连接(NHEJ)修复,有报道称其具有RNA结合功能,本文探索Ku70是否具有RNA解旋酶活性并影响miRNA加工成熟。方法利用RNA免疫共沉淀(RIP)测序结合生物信息学分析Ku蛋白结合的RNA;蛋白质印迹法(Western blot,WB)结合定量反转录PCR(qRTPCR)检测Ku蛋白与miRNAs的表达关系;生物膜干涉技术(BLI)实验分析Ku蛋白与RNA的结合能力;电泳迁移率变动分析(EMSA)实验确定Ku70及Ku80的RNA解旋酶活性;形态学检测结合WB分析Ku70调节miR-124引起的神经细胞功能变化;免疫荧光结合形态学分析寨卡病毒(ZIKV)感染后Ku70及miR-124的变化与神经元分化关联。结果研究发现,Ku70蛋白具有RNA解旋酶活性,并通过其RNA解旋酶活性影响miRNA加工成熟。Ku70缺失引起许多miRNAs上调,其中包括神经细胞特异的miR-124。在人神经前体细胞(h NPCs)和人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)中敲低Ku70可促进miR-124的成熟,从而导致上述细胞向神经元分化。本文进一步发现,ZIKV感染影响了Ku70及miR-124的表达,导致细胞形态的分化。结论本研究揭示了Ku70的一种新功能,即Ku70有可能参与miRNA的成熟调控和神经细胞的分化,并且可能是ZIKV病毒致小头症的原因之一。
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关键词
KU70
RNA解旋酶
mirna加工成熟
miR-124
神经元分化
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职称材料
题名
Ku70作为RNA解旋酶调节miR-124的加工成熟及神经细胞的分化
1
作者
黄皑雪
李睿婷
赵越超
李洁
李慧
丁学锋
王琳
肖参
刘雪梅
秦成峰
邵宁生
机构
北京基础医学研究所
北京微生物流行病研究所
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2024年第6期1418-1433,共16页
基金
国家自然科学基金(31370794,31601055)
国家杰出青年基金(81925025)
+1 种基金
国家自然科学基金创新研究群体(81621005)
中国医学科学院医学与健康科技创新工程(2019-I2M-5-049)资助项目。
文摘
目的Ku70蛋白主要通过其DNA结合特性参与双链DNA断裂(DSB)的非同源端连接(NHEJ)修复,有报道称其具有RNA结合功能,本文探索Ku70是否具有RNA解旋酶活性并影响miRNA加工成熟。方法利用RNA免疫共沉淀(RIP)测序结合生物信息学分析Ku蛋白结合的RNA;蛋白质印迹法(Western blot,WB)结合定量反转录PCR(qRTPCR)检测Ku蛋白与miRNAs的表达关系;生物膜干涉技术(BLI)实验分析Ku蛋白与RNA的结合能力;电泳迁移率变动分析(EMSA)实验确定Ku70及Ku80的RNA解旋酶活性;形态学检测结合WB分析Ku70调节miR-124引起的神经细胞功能变化;免疫荧光结合形态学分析寨卡病毒(ZIKV)感染后Ku70及miR-124的变化与神经元分化关联。结果研究发现,Ku70蛋白具有RNA解旋酶活性,并通过其RNA解旋酶活性影响miRNA加工成熟。Ku70缺失引起许多miRNAs上调,其中包括神经细胞特异的miR-124。在人神经前体细胞(h NPCs)和人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)中敲低Ku70可促进miR-124的成熟,从而导致上述细胞向神经元分化。本文进一步发现,ZIKV感染影响了Ku70及miR-124的表达,导致细胞形态的分化。结论本研究揭示了Ku70的一种新功能,即Ku70有可能参与miRNA的成熟调控和神经细胞的分化,并且可能是ZIKV病毒致小头症的原因之一。
关键词
KU70
RNA解旋酶
mirna加工成熟
miR-124
神经元分化
Keywords
Ku70
RNA helicase
mirna
maturation
miR-124
neuronal differentiation
分类号
Q522 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Ku70作为RNA解旋酶调节miR-124的加工成熟及神经细胞的分化
黄皑雪
李睿婷
赵越超
李洁
李慧
丁学锋
王琳
肖参
刘雪梅
秦成峰
邵宁生
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
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已选择
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