RNAi沉默Rab5a基因对乳腺癌细胞MCF-7侵袭能力的的影响

目的探讨miRNA表达载体靶向沉默Rab5a表达对人乳腺癌细胞MCF-7侵袭能力的影响。方法设计4条miRNA干扰载体分别转染乳腺癌细胞MCF-7。应用RT—PCR和Western blot筛选出一组抑制效率最高的miRNA干扰载体进行Transwell小室实验检测细胞侵袭能力。结果转染Rab5a-miRNA-2干扰载体对MCF-7细胞Rab5a表达抑制效果最明显，RT—PCR结果显示其对Rab5a基因mRNA抑制率达到（50．01±2．69）％，Western Blot结果显示其对Rab5a蛋白抑制率达到（55．58±3．16）％。选择Rab5a—miRNA-2组干扰载体进行后续实验。Transwell实验显示，Rab5a—miRNA-2组穿膜细胞数为67．8±12．03，与阴性对照组和空白对照组之间均有显著性差异（P〈0．01）。结论RNAi靶向沉默Rab5a基因可以抑制乳腺癌细胞MCF-7的侵袭能力。