miRNA-17-5p、miRNA-103-3p及miRNA-144-3p在急性缺血性脑卒中中的表达及诊断价值研究

目的探讨微小RNA(miRNA)-17-5p、miRNA-103-3p及miRNA-144-3p在急性缺血性脑卒中(AIS)中的表达及临床诊断价值。方法分别收集该院50例非脑卒中患者和50例AIS患者的血清标本作为对照组和病例组。采用实时荧光定量PCR法检测血清中miRNA-17-5p、miRNA-103-3p及miRNA-144-3p的表达水平,同时将血清中miRNA-17-5p、miRNA-103-3p及miRNA-144-3p的水平与研究对象的临床诊断价值进行对比分析。结果病例组血清miRNA-17-5p、miRNA-103-3p及miRNA-144-3p表达水平均显著高于对照组(P<0.001)。AIS患者血清miRNA-17-5p、miRNA-103-3p及miRNA-144-3p与美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)评分呈显著正相关(r=0.605、0.667、0.710,均P<0.05)。miRNA-17-5p、miRNA-103-3p、miRNA-144-3p及三者联合区分AIS患者与非AIS的受试者工作特征曲线下面积分别为0.846(95%CI:0.757~0.935,P<0.001)、0.866(95%CI:0.788~0.945,P<0.001)、0.935(95%CI:0.888~0.982,P<0.001)和0.976(95%CI:0.953~0.999,P=0.000);灵敏度和特异度分别为84%和92%、84%和88%、92%和86%、92%和94%。结论miRNA-17-5p、miRNA-103-3p及miRNA-144-3p是AIS诊断的潜在标志物。

ADPN、MCP-1、miRNA-103在老年反复发作性尿路感染患者中的表达及临床意义

目的分析脂联素(ADPN)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、miRNA-103在老年反复发作性尿路感染患者中的表达及临床意义。方法选取2019年1月至2020年12月该院收治的112例首发老年尿路感染患者作为首发组,134例反复发作性尿路感染患者作为反复发作组,同期选取80例体检健康者作为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定各组血清ADPN、MCP-1表达水平,采用实时荧光定量PCR法测定外周血单个核细胞miRNA-103表达水平。分析3组患者ADPN、MCP-1、miRNA-103表达水平,以及上述指标对老年反复发作性尿路感染的诊断价值。结果反复发作组ADPN水平低于首发组和对照组,MCP-1、miRNA-103高于首发组和对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。随着患者疾病严重程度加重,ADPN表达逐渐降低,MCP-1、miRNA-103表达逐渐升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。预后不良患者ADPN表达低于预后良好患者,MCP-1、miRNA-103表达高于预后良好患者(P<0.05)。相关性分析显示,ADPN与MCP-1呈负相关(r=-0.543,P=0.001),ADPN与miRNA-103呈负相关(r=-0.552,P=0.001),MCP-1与miRNA-103呈正相关(r=0.649,P=0.001)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,ADPN、MCP-1、miRNA-103单独诊断老年反复发作性尿路感染的截断值分别为10.00μg/mL、65.98 pg/mL、0.82,三项联合对反复发作性尿路感染的诊断价值高于单项检测(P<0.05)。结论老年反复发作性尿路感染病ADPN表达降低,MCP-1、miRNA-103表达升高,三者表达水平与患者疾病严重程度及预后相关。

基于生物信息学分析miRNA-103a-3p在子宫内膜癌中表达及临床意义

目的:基于生物信息学分析方法研究miR-103a-3p在子宫内膜癌(endometrial carcinoma, EC)中的表达情况及其对预后的影响,评估其在EC中的临床意义。方法:本研究利用癌症基因图谱(TCGA)数据库分析miR-103a-3p在EC组织中的表达;利用Kaplan-Meier plotter数据库分析miR-103a-3p与EC患者预后相关性;利用miRWalk 2.0数据库获取miR-103a-3p的靶基因,同时采用DAVID 6.8数据库对靶基因进行GO和KEGG富集分析,进一步以Cytoscape 3.7.1软件构建靶蛋白互作(PPI)网络并筛选核心基因,通过数据库对核心基因进一步验证。结果:TCGA数据库分析显示, miR-103a-3p在EC组织中的表达水平显著高于正常组织。Kaplan-Meier生存分析显示, miR-103a-3p低表达EC患者的总生存时间明显多于高表达患者。GO分析显示,miR-103a-3p的靶基因显著富集到蛋白质结合、细胞质、细胞质基质、细胞膜、核质、ATP结合等生物学过程。KEGG分析显示, miR-103a-3p的靶基因显著富集于AMPK、Hippo等关键信号通路。CDC42、BDNF、FBXW7、CDC27、ACTR2、FASN、CDC23、CD40、FLT3、BAIAP2是miR-103a-3p潜在靶基因PPI网络中的核心基因,经数据库验证在EC中仅CD40的mRNA和蛋白水平显著降低。生存分析显示CD40低表达与EC患者预后不良相关。结论:EC组织中miR-103a-3p低表达在子宫内膜癌相关的生物学过程起重要作用,可能通过调控潜在靶基因CD40参与其中,有潜力成为EC诊断标志物、预后指标及治疗靶点。

前列腺增生症术后尿路感染患者血清炎症因子、miRNA-15a、miRNA-34b和miRNA-103及CYP1A2基因多态性研究

目的探讨前列腺增生症术后尿路感染患者血清炎症因子、微小RNA(microRNA,miRNA)-15a、miRNA-34b和miRNA-103及CYP1A2基因多态性相关性。方法选择浙江省医疗健康集团杭州医院于2017年7月-2019年7月收治的前列腺增生症患者112例,均行经尿道前列腺等离子双极电切术(Transurethral plasmakinetics resection of prostate,TUPKRP),根据是否发生术后尿路感染分为感染组(n=27)与非感染组(n=85)。分析两组患者血清炎症因子,外周血miRNA-15a、miRNA-34b和miRNA-103表达,及CYP1A2基因多态性变化。结果感染组血清CRP、TNF-α、IL-6和PCT水平高于非感染组(P<0.05)。感染组外周血miRNA-15a表达低于未感染组,而miRNA34b和miRNA103表达高于未感染组(P<0.05)。感染组CYP1A2基因位点rs2069514-3859等位基因A分布高于非感染组,而G分布低于非感染组(P<0.05)。感染组CYP1A2基因位点rs20695143859基因型AA分布高于非感染组(P<0.05)。结论前列腺增生症术后尿路感染患者血清炎症因子CRP、TNF-α、IL-6和PCT水平升高,血miRNA-15a低表达及miRNA34b和miRNA103高表达参与了术后尿路感染发生、发展,且CYP1A2基因位点rs20695143859等位基因A可能为术后尿路感染易感基因。

miR-103通过抑制LATS2促进肝细胞肝癌侵袭转移的机制

目的研究原发性肝癌中miR-103的表达及对肝癌细胞系转移能力的影响。方法 RT-PCR检测miR-103在肝癌组织及肝癌源性细胞系中的表达。分别转染miR-103 mimic至L02细胞、转染miR-103抑制剂至HepG2细胞,CCK8法检测miR-103对细胞增殖的影响,TUNEL法检测miR-103对细胞凋亡的影响,Transwell实验检测miR-103对肿瘤细胞侵袭和转移的影响。生物信息学分析miR-103的靶基因,western blot验证靶基因表达与rmiR-103的相关性。结果 miR-103在肝癌标本和肝癌源性细胞系中表达上调,miR-103可以促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,Transwell实验结果表明miR-103增加细胞侵袭和转移能力。生物信息学分析表明拉特抑癌基因同源分子2(LA,TS2)为miR-103的潜在靶基因。miR-103的表达与LATS2呈负相关。结论以上数据证明miR-103通过抑制LA,TS2促进肝细胞肝癌侵袭转移,miR-103/LA,TS2失调有可能成为治疗肝癌的新靶点。

2型糖尿病发病进程中血清微小核糖核酸-103表达的临床意义

目的探讨血清微小核糖核酸(miRNA)-103在2型糖尿病(T2DM)前期、新诊断的T2DM以及糖尿病并发症患者中的表达水平及临床意义。方法选取70例研究对象,其中20例为糖耐量正常的个体(NGT组),18例为糖调节受损患者(prediabetes组),18例为新诊断的T2DM并无明显并发症患者(T2DM组),14例为T2DM并发症患者(T2DM伴并发症组)。所有诊断均符合美国糖尿病学会(ADA)糖尿病诊断与分型标准中的诊断标准。应用荧光定量实时逆转录聚合酶链反应(PRPCR)法评价各组受试者血清miRNA-103的表达水平。结果 Pre-diabetes组、T2DM组以及T2DM并发症组血清样本中miRNA-103水平显著高于NGT组(P<0.05);T2DM组血清样本中miRNA-103水平显著高于pre-diabetes组(P<0.05),而miRNA-103在T2DM伴并发症组与T2DM组血清中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论血清miRNA-103有可能用于诊断及预测糖尿病的敏感的生物标志物,对于鉴别高风险患者具有至关重要的意义。

miR-103通过NF-κB通路上调MGMT表达诱导胃癌细胞紫杉醇耐药

目的观察miR-103在胃癌细胞紫杉醇(PTX)耐药中的作用,并探讨其作用机制。方法构建PTX耐药胃癌NCI-N87细胞(N87/PTX);N87/PTX细胞转染miR-103 inhibitor和阴性对照,分别设为miR-103 inhibitor组和阴性对照组(NC),同时以未转染的N87/PTX细胞作为空白对照组(Control)。四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活力;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞miR-103表达水平;生物信息学分析miR-103的靶基因;结晶紫染色法检测细胞贴壁存活率;免疫荧光法检测细胞NF-κB p65定位;蛋白印记法检测p-NF-κB p65、IKBα、MGMT蛋白表达变化。结果N87/PTX细胞耐药指数为27.1。与正常N87细胞比较,N87/PTX细胞miR-103表达水平显著升高(P<0.01)。miR-103 inhibitor可显著降低PTX对N87/PTX细胞的IC50(P<0.01),增强N87/PTX细胞对PTX的敏感性(P<0.01)。IKBα蛋白的编码基因NFKBIA与miR-103存在互补结合位点。与正常N87细胞比较,N87/PTX细胞IKBα表达明显下调,p-NF-κBp65和MGMT表达显著升高(P均<0.01)。抑制miR-103可上调IKBα蛋白表达,下调p-NF-κB p65和MGMT蛋白表达(P均<0.01)。结论miR-103可能通过降解IKBα诱导NF-κB p65入核,NF-κB p65增强MGMT转录表达从而介导胃癌细胞对PTX耐药。