miRNA-152在子宫内膜癌中的研究进展

子宫内膜癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一,其发生率有逐年上升的趋势。有研究表明,某些微小RNA(miRNA)与子宫内膜癌的发生发展具有一定相关性。目前有研究报道,miRNA-152的表达与一些恶性肿瘤的发生发展密切相关,但该因子在子宫内膜癌中的相关性研究报道较少。本文对miRNA-152在子宫内膜癌中的研究进行综述。

miRNA-152和miRNA-200s在IL-6诱导的肝胰岛素抵抗中的作用

目的胰岛素抵抗是2型糖尿病的主要发病机制之一。microRNA（miRNA）是-簇长度约为20—24个核苷酸的单链非编码的小分子RNA。它们在转录后水平对下游靶基因进行调控。miRNA广泛表达于各种组织器官中，对组织器官的功能和发育具有重要的作用。miRNA参与糖尿病及其并发症的发生。它们调控胰岛素的合成、分泌、胰岛素信号通路和糖脂代谢等过程。目前，与肝胰岛素抵抗相关的miRNA报道尚少。研究证明miRNA．152和miRNA-200s与肿瘤的发生密切相关，但miR—NA-152和miRNA-200s是否在肝胰岛素抵抗发生中起重要作用？目前尚不清楚。本研究通过建立IL-6诱导的胰岛素抵抗的细胞和动物模型，分析细胞或肝脏组织中miRNA-152和miRNA-200s的表达变化，探讨miRNA-152和miRNA-200s在IL-6诱导的肝胰岛素抵抗中的作用，明确miRNA-152和miRNA．200s调节P13K／AKT信号通路的分子机制。方法（1）以12周龄db／db小鼠作为胰岛素抵抗模型小鼠，收集小鼠肝脏组织，用miRNA芯片分析肝脏中miRNA表达谱变化，并用Real—timePCR进一步验证芯片结果。（2）10斗∥LIL-6处理小鼠肝细胞系NCTCl469和C57BL／6小鼠原代肝细胞24h，建立胰岛素抵抗的细胞模型，检测P13K／AKT信号和miRNA．152、miRNA-200s表达水平；在c57BL／6J小鼠背部皮下埋泵缓释注射IL-61周，建立IL-6诱导的胰岛素抵抗动物模型，观察肝脏中P13K／AKT信号通路和miRNA-152、miRNA-200s表达水平。（3）合成miRNA-152、miRNA-200smimics和inhibitors，并转染入NCTCl469细胞，用Real—timePCR测定细胞中miRNA-152和miRNA．200S的水平，并且检测P13K／AKT信号通路和糖原水平。（4）用生物信息学方法预测miRNA-200s的下游靶基因；以Westernblot分析miRNA-200s对下游基因FOG2和PTEN表达的影响。（5）利用siRNA干扰FOG2和lrFEN的表达，检测P13K／AKT信号通路和糖原合成水平。结果（1）与对照组小鼠相比，12周龄db／db小鼠的体重、血糖、血脂和血清IL-6水平明显升高。在db／db小鼠肝脏中P13K／＇AKT信号通路受到抑制，肝组织糖原含量显著降低。miRNA芯片结果显示，有31个miRNA表达升高，88个miRNA包括miRNA—t52和miRNA-200s表达下降。进一步用Real—timePCR验证芯片的分析结果，结果显示，在db／db小鼠肝组织中miRNA·152和miRNA-200s水平显著低于对照组小鼠。（2）db／db小鼠体内是多因素集合体，无法确定究竟是何种因素导致miRNA·152和miRNA-200s表达的降低。因此，我们用10¨g／LIL-6处理小鼠肝细胞系NCTCl469和小鼠原代肝细胞，以确定IL石与miRNA-152和miRNA-200s之间的关系。结果显示，在小鼠肝细胞系NCTCl469和小鼠原代肝细胞中，IL-6抑制P13K／AKT信号通路和糖原合成，并降低miRNA-152和miRNA-200s的水平。皮下缓释注射IL-61周后C57BL／6J小鼠肝脏中P13K／AKT信号通路和糖原合成受到抑制，miRNA-152和miRNA-200s水平也显著降低。（3）为了确定miRNA-200s的下游靶基因，我们用生物信息学分析预测。结果显示，在FOG2和PTEN3’-UTR上均有miRNA．200s的结合位点。Westernblot结果显示，miRNA-200s能够调控FOG2和PTEN的蛋白水平。（4）进一步确定FOG2和PTEN对胰岛素信号通路和糖原合成的影响。在NCTCl469细胞中，利用siRNA干扰FOG2和PTEN的表达。结果显示，抑制FOG2和PTEN的表达可以逆转IL-6对P13K／AKT信号通路和糖原合成的抑制作用。（5）最后，为了明确miRNA-152对miRNA．200s的调控作用，我们在NCTCl469细胞中转染miRNA-152inhibitors，Real．time结果显示，抑制miRNA．152导致miRNA-200s的水平下降。结论（1）IL-6能够降低miRNA-152和miRNA-200s水平，抑制肝细胞P13K／AKT信号通路和糖原合成。（2）miRNA-152和miRNA-200s可以逆转IL-6对肝细胞P13K／AKT信号通路和糖原合成的抑制作用。（3）miRNA-200s通过下调FOG2和PTEN的表达而调控肝细胞P13K／AKT信号通路和糖原合成。（4）miRNA-152调节miRNA-200s的表达。

miRNA-152在损伤足细胞中异常表达的研究

目的以阿霉素(Adriamycin,ADR)诱导的足细胞损伤模型,来研究miRNA-152在损伤足细胞中的表达,为阐明miRNA-152异常表达导致肾足细胞损伤的机制研究奠定基础。方法将0.00μg/mL,0.05μg/mL,0.10μg/mL,0.20μg/mL,0.40μg/mL,0.80μg/mL浓度的ADR加入已分化培养6 d的足细胞中,诱导培养24 h后,通过足细胞骨架免疫荧光染色和Synaptopodin表达检测,鉴定足细胞的损伤;然后采用Real-time PCR法检测miRNA-152和14-3-3β的表达,分析miRNA-152和14-3-3β的表达关系。结果分化培养6 d的足细胞在加入ADR 24 h后,鬼笔环肽免疫荧光染色结果显示,ADR诱导培养的足细胞中肌动蛋白应力纤维减少,且细胞骨架排列失调;Real-time PCR检测结果表明,ADR诱导培养的足细胞中,Synaptopodin的表达下降。在损伤足细胞中,Real-time PCR法检测结果表明,miRNA-152的表达上调,14-3-3β的表达则下降。结论在损伤足细胞中,miRNA-152表达上调,而14-3-3β的表达则下降,提示了miRNA-152可能直接下调了14-3-3β的表达,进而导致足细胞损伤。

生物信息学分析miRNA-152在非酒精性脂肪肝病中的可能作用

【目的】总结miR-152已有研究结果,并预测其可能参与的生物学过程,为本研究小组深入研究miR-152在非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)形成和相关的调控机制奠定基础。【方法】PubMed检索miR-152相关文献,生物信息学预测miR-152的靶基因,并对其进行功能富集分析和信号通路富集分析。【结果】miR-152已在多个类型肿瘤、先兆子痫等疾病中有报道,但尚无参与脂肪肝的研究,分析结果显示miR-152靶基因功能集中于器官发育、细胞分化、代谢等多种分子功能和生物学过程;信号通路主要富集于多种肿瘤和细胞骨架蛋白、脂肪细胞因子、胰岛素信号及wnt信号通路中。【结论】miR-152在非酒精性脂肪肝病中尚未见报道,其预测的靶基因集合富集于多个生物学过程,为研究miR-152在非酒精性脂肪肝病中的作用提供了研究思路。

miRNA-148/152家族成员在恶性肿瘤中的生物学功能研究进展

microRNA(miRNA)是一类长度约19~25个核苷酸的非编码RNA。在肿瘤中,miRNA能够与靶基因的3'-非翻译区(3'-untranslated region,3'-UTR)完全或不完全配对结合,从而参与调控肿瘤的发生发展等多种生物学过程。microRNA-148/152(miR-148/152)家族成员包括miR-148a、miR-148b和miR-152。与正常组织相比,miR-148/152家族成员在多种恶性肿瘤中低表达,而在少数恶性肿瘤中高表达。近年来,越来越多的研究表明,miR-148/152家族成员在恶性肿瘤的发生发展中发挥极其重要的作用,在多数恶性肿瘤中,miR-148/152家族成员发挥抑癌作用,而在少数恶性肿瘤中,miR-148/152的高表达可能与临床预后不良相关。本文对miR-148/152家族成员在恶性肿瘤中的重要生物学功能和机制进行综述,以期为miRNA治疗靶点提供相关研究信息。

MicroRNA-182和microRNA-152在早期子宫内膜癌组织中的差异性表达

目的检测microRNA-182(miRNA-182)和microRNA-152(miRNA-152)在早期子宫内膜癌组织中的表达情况,探究二者与子宫内膜癌疾病演变的相关性。方法采集2018年3月至2018年8月河北大学附属医院收治的子宫内膜癌患者的肿瘤组织标本和因子宫肌瘤行全子宫切除术患者的正常内膜组织标本各40例。采用实时聚合酶链反应(real-time PCR)检测两组标本中miRNA-182和miRNA-152的表达。结果纳入研究的子宫内膜癌患者及子宫肌瘤患者年龄比较,差异无统计学意义(P>0.05)。miRNA-182在子宫内膜癌组和正常内膜组的表达水平分别为(1.5499±0.4808)和(0.7767±0.4072),miRNA-152在子宫内膜癌组和正常内膜组的表达水平分别为(0.5010±0.2363)和(0.9037±0.2304),差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论miRNA-152在早期子宫内膜癌组织中低表达,而miRNA-182高表达,提示二者分别作为抑癌基因和促癌基因参与子宫内膜癌疾病的发生和演变过程。miRNA-182和miRNA-152有可能作为十分重要的子宫内膜癌肿瘤生物学分子标记物用于疾病的筛查、早期诊断、判断预后及随访观察,同时未来有可能作为子宫内膜癌分子靶向治疗的药物应用于临床。

微小RNA-152对肝癌细胞HepB3与SNU449生物学功能的影响

目的:研究微小RNA-152(miR-152)对肝癌细胞生物学功能的影响。方法:将miR-152阻遏物及模拟物转染至HCC细胞系HepB3及SNU449中,检测HCC细胞生长、凋亡及Caspase3/7活性的变化。结果:miR-152阻遏物可抑制HCC细胞生长、诱发凋亡及促进Caspase3/7活性的增加。结论:miR-152在肝癌的发展中发挥重要作用,并有望成为HCC的新的治疗靶标。

血清外泌体miR-205-5p/miR-152-5p 对早期非小细胞肺癌的诊断价值

目的探索血清外泌体miR-205-5p/miR-152-5p联合相对表达量在早期非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中的水平及诊断价值。方法纳入TNM分期为0-Ⅱ期的NSCLC患者(NSCLC组)83例(包括腺癌组55例和鳞癌组28例)和健康对照(对照组)50例,采集血清标本,提取并检测血清外泌体miR-205-5p/miR-152-5p联合相对表达量。比较NSCLC组和对照组的表达量,比较腺癌组、鳞癌组和对照组的表达量,使用多重线性回归分析表达量与性别、年龄、吸烟史、肿瘤大小、淋巴结转移的关联性,采用ROC曲线评价血清外泌体miR-205-5p/miR-152-5p联合相对表达量的诊断效能。结果对照组、NSCLC组、腺癌组、鳞癌组的miR-205-5p/miR-152-5p相对表达量分别为17.76±4.27、20.52±5.51、21.79±5.12、18.02±5.48;NSCLC组高于对照组(t=3.027,P=0.003),腺癌组、鳞癌组、对照组3组间比较差异有统计学意义(F=10.412,P<0.001),腺癌组高于鳞癌组(P=0.001)和对照组(P<0.001),鳞癌组与对照组间差异无统计学意义(P=0.823)。多元线性回归分析结果显示,淋巴结转移情况与相对表达量存在关联性(P=0.037)。对NSCLC的诊断效能评估,曲线下面积为0.671(95%CI:0.579~0.764),截断值为18.493,灵敏度为73.3%,特异度为64.0%。对肺腺癌的诊断效能评估,曲线下面积为0.738(95%CI:0.642~0.883),截断值为18.495,灵敏度为78.2%,特异度为64.0%。对肺鳞癌的诊断效能评估,曲线下面积为0.541(95%CI:0.399~0.684),无统计学意义。结论血清外泌体miR-205-5p/miR-152-5p联合相对表达量在早期NSCLC(主要为早期肺腺癌)患者中升高,对早期NSCLC诊断具有辅助价值。