miRNA-15a/16调控Bmi-1蛋白在卵巢癌顺铂化疗耐药中的作用

目的探讨miRNA-15a和miRNA-16在逆转卵巢癌顺铂化疗耐药过程中的作用机制。方法使用miRNA-15a和miRNA-16模拟物转染人卵巢癌顺铂耐药细胞株CoC1/DDP,予顺铂处理,qRT-PCR检测正常培养CoC1/DDP细胞组、顺铂处理组、阴性对照组、转染miRNA-15a组、转染miRNA-16组和过表达的Bmi-1质粒的转染miRNA-15a和miRNA-16组的miRNA-15a、miRNA-16的表达水平,同时应用Western blot检测各组细胞中Bmi-1的表达水平,CCK-8法、Annexin V/PI法检测每组细胞的存活及凋亡情况、γ-H2AX免疫荧光检测细胞凋亡情况。结果卵巢癌顺铂耐药细胞株CoC1/DDP中miRNA-15a和miRNA-16低表达,Bmi-1蛋白高表达。过表达miRNA-15a、miRNA-16水平,Bmi-1蛋白下降(P<0.05),细胞存活率下降(P<0.05),DNA凋亡明显增加(P<0.05),DNA损伤程度更严重(P<0.05)。过表达Bmi-1质粒可提高细胞活度(P<0.05),降低细胞凋亡率(P<0.05)。结论Bmi-1蛋白可能是miRNA-15a和miRNA-16的调节蛋白靶点,高表达miRNA-15a和miRNA-16可以通过降低Bmi-1蛋白来提高顺铂对卵巢癌细胞的敏感性。通过对卵巢癌顺铂化疗耐药性分子标记的预测和对卵巢癌肿耐药性目标的攻克提供了新的思路。

膀胱癌组织miRNA-15a、miRNA-21表达预测经尿道膀胱肿瘤切除术后复发的效能分析

目的:探讨膀胱癌组织miRNA-15a、miRNA-21表达预测经尿道膀胱肿瘤切除术后复发的效能。方法:选取我院2019年3月—2021年6月收治的173例(均完成1年随访)经尿道膀胱肿瘤切除术治疗的膀胱癌患者为研究对象,根据术后1年复发情况将患者分为复发组(35例)和未复发组(138例)。比较两组及不同病理学参数患者术后切除癌组织miRNA-15a、miRNA-21表达水平,分析术后切除癌组织miRNA-15a、miRNA-21表达水平与病理学参数及复发相关性,以及对术后复发的危险度。结果:与复发组相比,未复发组术后切除癌组织miRNA-15a表达水平较高,miRNA-21表达水平较低(P<0.05);术后切除癌组织miRNA-15a表达水平比较:Ta期>T1期、G1/G2级>G3级、有淋巴结转移<无淋巴结转移(P<0.05);术后切除癌组织miRNA-21表达水平比较:Ta期<T1期、G1/G2级<G3级、有淋巴结转移>无淋巴结转移(P<0.05);术后切除癌组织miRNA-15a表达水平与肿瘤分期、肿瘤分级、淋巴结转移、复发呈负相关,术后切除癌组织miRNA-21表达水平与肿瘤分期、肿瘤分级、淋巴结转移、复发呈正相关(P<0.05);术后切除癌组织中miRNA-21高水平患者复发的危险度高于低水平,术后切除癌组织中miRNA-15a高水平患者复发的危险度低于低水平(P<0.05)。结论:膀胱癌组织miRNA-15a、miRNA-21表达与复发风险存在关联性,动态监测其水平变化有助于了解膀胱癌病情,为术后复发风险提供可参考数据。

miRNA-15a在前列腺癌中的表达及诊断意义

目的:检测前列腺癌患者miRNA-15a的表达情况,探讨其在前列腺癌诊断的意义。方法:选择2014年1月至2015年1月本院泌尿外科收治的前列腺癌患者血清及肿瘤组织36例,良性前列腺增生患者(Prostatic hyperplasia,BPH)血清40例,健康对照血清40例。miRNA-15a表达采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测。结果:miRNA-15a在前列腺癌患者、良性前列腺增生患者和健康对照血清的表达量分别为(0.193±0.081)、(0.359±0.04)和(0.376±0.037),miRNA-15a在前列腺癌患者血清中的表达量显著低于良性前列腺增生患者和健康对照(P<0.05),在BPH组和对照组中的表达差异无统计学意义(P>0.05),前列腺癌患者血清miRNA-15a表达在不同PSA表达水平、Gleason评分、临床分期、有无远处转移之间差异有统计学意义(P<0.05),与其他病理因素无关(P>0.05);前列腺癌患者肿瘤组织中的miRNA-15a的表达与PSA表达水平、Gleason评分、临床分期、有无远处转移之间差异有统计学意义(P<0.05),与其他病理因素无关(P>0.05)。结论:miRNA-15a低表达参与了前列腺癌的发生、发展过程,是前列腺癌辅助诊断及治疗的潜在的指标。

多囊卵巢综合征患者外周血miRNA-15a-5p升高及其影响因素

目的探讨初诊多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者外周血白细胞中miRNA-15a-5p水平与PCOS关系。方法采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测PCOS患者外周血白细胞中miRNA-15a-5p表达水平,采用Pearson或者Spearman rank方法分析miRNA-15a-5p与PCOS等一系列变量间的相关性。结果PCOS组患者中miRNA-15a-5p的表达明显高于健康对照组,纠正年龄以及体重指数(BMI)混杂因素后,PCOS组患者miRNA-15a-5p水平与腰围(waist circumference,WC)、胰岛素稳态模型(homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR)、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、餐后2h血糖(2hblood glucose,2hBG)呈正相关,miRNA-15a-5p是PCOS独立影响因素。ROC曲线分析结果提示miRNA-15a-5p可作为PCOS潜在的诊断标志物。结论miRNA-15a-5p与PCOS相关,miRNA-15a-5p可能通过胰岛素抵抗参与PCOS的发生以及发展,miRNA-15a-5p可作为PCOS患者糖代谢紊乱早期阶段潜在的分子标志物。

miRNA-15a通过靶向Wnt3a调控Wnt/β-catenin信号通路抑制卵巢癌的发展和转移

目的:研究在卵巢癌发展转移进程中miRNA-15a的作用,并探讨其作用机制。方法:收集锦州医科大学附属第一医院2012年5月至2015年6月32例卵巢癌患者的手术切除标本,采用RT-PCR检测miRNA-15a表达。将培养的卵巢癌SKOV-3细胞分为转染miRNA-15a模拟物的实验组和转染无义miRNA的对照组,采用CCK8、Transwell及流式细胞术检测细胞增殖、侵袭和凋亡的变化,采用Western blot法检测相关蛋白表达。通过生物信息学方法预测miRNA-15a靶基因,采用双荧光素酶报告基因实验结合Western blot法验证miRNA-15a对靶基因的调控。检测Wnt3a与miRNA-15a模拟物共转染SKOV-3细胞后对细胞增殖和侵袭的影响。结果:与癌旁组织中的miRNA-15a相对表达量0.692±0.228相比,显著低于卵巢癌组织中的0.911±0.209,差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组细胞增殖能力相比,miRNA-15a过表达显著抑制实验组细胞增殖能力,差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组189.667±14.742相比,miRNA-15a过表达显著抑制实验组的细胞侵袭能力96.667±13.614,差异具有统计学意义(P<0.05)。miRNA-15a过表达实验组的细胞凋亡率27.400%±0.854%显著高于对照组细胞凋亡率6.933%±0.379%,差异具有统计学意义(P<0.05)。miRNA-15a模拟物下调Wnt3a和β-catenin的表达,抑制细胞周期蛋白(Cyclin D1)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达,促进E-钙离子依赖的细胞黏附素(E-calcium-dependent adhesion,E-cad)的表达。双荧光素酶报告基因实验和Western blot结果表明miRNA-15a靶向抑制Wnt3a表达。上调Wnt3a能显著降低miRNA-15a对卵巢癌细胞增殖、侵袭和对Wnt/β-catenin信号通路的抑制作用。结论:miRNA-15a通过靶向Wnt3a调控Wnt/β-catenin信号通路的激活以抑制卵巢癌的发展和转移。

血清CA125、miRNA-139-5p、miRNA-15a水平检测在卵巢癌患者中的临床意义

目的:探讨血清糖类抗原125(CA125)、微小RNA-139-5p(miRNA-139-5p)、微小RNA-15a(miRNA-15a)水平检测在卵巢癌患者中的临床意义。方法:选取74例卵巢癌患者作为卵巢癌组,选取同期74名该院健康体检者作为对照组,比较卵巢癌组与对照组、不同分化程度卵巢癌患者、不同病理分期卵巢癌患者血清CA125、miRNA-139-5p、miRNA-15a水平,分析血清CA125、miRNA-139-5p、miRNA-15a水平与卵巢癌分化程度和病理分期的相关性。结果:卵巢癌组CA125、miRNA-139-5p水平均高于对照组,miRNA-15a水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);卵巢癌低分化患者血清CA125、miRNA-139-5p水平均高于中分化和高分化患者,且中分化患者高于高分化患者;卵巢癌低分化患者miRNA-15a水平低于中分化和高分化患者,且中分化患者低于高分化患者,差异有统计学意义(P<0.05);卵巢癌患者血清CA125、miRNA-139-5p水平随着病理分期升高而升高,即Ⅰ期<Ⅱ期<Ⅲ期<Ⅳ期,卵巢癌患者miRNA-15a水平随着病理分期升高而降低,即Ⅰ期>Ⅱ期>Ⅲ期>Ⅳ期,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,CA125、miRNA-139-5p水平与卵巢癌分化程度呈负相关,与病理分期呈正相关,miRNA-15a水平与卵巢癌分化程度呈正相关,与病理分期呈负相关(P<0.05)。结论:卵巢癌患者血清CA125、miRNA-139-5p水平升高,miRNA-15a水平降低,且与卵巢癌分化程度、病理分期存在相关性,血清CA125、miRNA-139-5p、miRNA-15a水平可为临床卵巢癌患者诊治提供参考依据。

前列腺增生症术后尿路感染患者血清炎症因子、miRNA-15a、miRNA-34b和miRNA-103及CYP1A2基因多态性研究

目的探讨前列腺增生症术后尿路感染患者血清炎症因子、微小RNA(microRNA,miRNA)-15a、miRNA-34b和miRNA-103及CYP1A2基因多态性相关性。方法选择浙江省医疗健康集团杭州医院于2017年7月-2019年7月收治的前列腺增生症患者112例,均行经尿道前列腺等离子双极电切术(Transurethral plasmakinetics resection of prostate,TUPKRP),根据是否发生术后尿路感染分为感染组(n=27)与非感染组(n=85)。分析两组患者血清炎症因子,外周血miRNA-15a、miRNA-34b和miRNA-103表达,及CYP1A2基因多态性变化。结果感染组血清CRP、TNF-α、IL-6和PCT水平高于非感染组(P<0.05)。感染组外周血miRNA-15a表达低于未感染组,而miRNA34b和miRNA103表达高于未感染组(P<0.05)。感染组CYP1A2基因位点rs2069514-3859等位基因A分布高于非感染组,而G分布低于非感染组(P<0.05)。感染组CYP1A2基因位点rs20695143859基因型AA分布高于非感染组(P<0.05)。结论前列腺增生症术后尿路感染患者血清炎症因子CRP、TNF-α、IL-6和PCT水平升高,血miRNA-15a低表达及miRNA34b和miRNA103高表达参与了术后尿路感染发生、发展,且CYP1A2基因位点rs20695143859等位基因A可能为术后尿路感染易感基因。

血清miRNA-15b和miRNA-34a的检测对ⅢB、Ⅳ期非小细胞肺癌患者化疗疗效的评估’

目的探讨血清miRNA-15b和miRNA-34a的检测对ⅢB、Ⅳ期非小细胞肺癌患者化疗疗效的评估价值。方法收集2010年1月1日至2016年1月1日于本院化疗的201例ⅢB、Ⅳ期非小细胞肺癌患者化疗前和化疗后血清，另收集20例健康人血清做对照。设计miRNA-15b和miRNA-34a上下游引物，提取血清中总RNA，采用RT—PCR方法检测血清中miRNA-15b和miRNA34a含量水平，记录每份样品检测CT值，分析其与每例患者的治疗疗效相关性。结果①经过2个疗程的化疗后，201例非小细胞癌患者中69例为PR，94例为SD，38例为PD。②健康对照组的血清中miRNA-15b和miRNA-34a的CT值分别为（35．50±2．51）、（36．00±2．00）观察组化疗前、后血清中miRNA-15bCT值分别为（28．43±4．81）、（31．85±7．00）；观察组化疗前、后血清中miRNA-34a的CT值分别为（30．43±5．12）、（32．00±6．28）；与健康对照组相比，观察组化疗前、后血清中miRNA-15b和miRNA-34a含量均处于高水平；差异均具有统计学意义（均P〈0．05）。③与化疗前相比，PR组和PD组两组患者血清中miRNA-15b和miRNA-34aCT值有显著变化，差异均具有统计学意义（均P〈0．05）。结论血清中miRNA-15b和miRNA-34a的检测对ⅢB、Ⅳ期非小细胞肺癌患者的化疗疗效及病情评估具有重要的临床参考价值。

经尿道膀胱肿瘤切除术患者TLR4、GR、miRNA-15a表达与尿道感染的关系

目的 探讨经尿道膀胱肿瘤切除术(TURBT)患者外周血Toll样受体4(TLR4)、白细胞糖皮质激素受体(GR)、微小RNA-15a(miRNA-15a)表达与尿路感染的关系。方法 选取2017年4月-2020年10月江陵县人民医院接受经尿道膀胱肿瘤切除术患者76例作为研究对象。根据是否发生尿路感染分为感染组(26例)及未感染组(50例),统计两组患者的临床特征及外周血TLR4、GR、miRNA-15a水平,受试者工作特征曲线(ROC)分析TLR4、GR、miRNA-15a诊断术后尿路感染的价值,并采用Logistic回归分析尿路感染的危险因素。结果 ROC分析结果表明,TLR4、GR及miRNA-15a对术后尿路感染诊断的曲线下面积(AUC)值分别为0.817、0.847、0.773,低于三者联合诊断的0.912(P<0.05);Logistic回归分析结果表明,糖尿病史、术前留置导尿管、TLR4≥0.208为TURBT术后尿道感染的独立危险因素,GR≥45.943、miRNA-15a≥0.459为TURBT术后尿道感染保护因素(P<0.05)。结论 TURBT术后尿路感染受糖尿病、术前留置导尿管、外周血TLR4、GR、miRNA-15a表达水平等因素影响,TLR4的高表达,GR、miRNA-15a的低表达在术后尿路感染的早期诊断方面具有较高应用价值。

miRNA-15b和成纤维细胞生长因子2(FGF2)在增生型糖尿病视网膜病变患者玻璃体及视网膜增生膜组织中的表达

目的探讨增生型糖尿病视网膜病变(PDR)患者玻璃体、视网膜增生膜组织中miRNA-15b(miR-15b)和成纤维细胞生长因子2(FGF2)的表达情况,并进行相关性研究,初步探讨PDR发生原因。方法选取2016年9月至2019年10月期间在重庆市开州区人民医院眼科住院的PDR患者80例(80眼)作为PDR组,收集其玻璃体及视网膜增生膜组织;选取同期因眼外伤在本院眼科行眼球摘除术的2型糖尿病患者21例(21眼)作为对照组,收集其玻璃体及视网膜组织;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测玻璃体及视网膜组织/视网膜增生膜组织中miR-15b水平,分别通过酶联免疫吸附法(ELISA)、Western blot法检测玻璃体、视网膜组织/视网膜增生膜组织中FGF2蛋白水平表达;通过Pearson相关性分析法分析对照组玻璃体及视网膜组织以及PDR组患者玻璃体及视网膜增生膜组织中miR-15b与FGF2水平相关性;通过二元Logistic回归分析影响糖尿病患者发生PDR的危险因素。结果PDR组糖尿病病程显著长于对照组(P<0.001)。PDR组玻璃体及视网膜增生膜组织中miR-15b相对表达量分别为0.52±0.07和0.76±0.12,均显著低于对照组(1.03±0.19和1.14±0.19),差异均有统计学意义(均为P<0.001);PDR组玻璃体及视网膜增生膜组织中FGF2蛋白表达水平分别为(17.65±4.23)ng·L^-1和0.92±0.23,均显著高于对照组(12.13±3.05)ng·L^-1和0.61±0.15,均为P<0.001)。对照组玻璃体、视网膜组织中miR-15b与FGF2蛋白表达水平均无相关性(均为P>0.05);PDR组玻璃体、视网膜增生膜组织中miR-15b与FGF2蛋白表达水平均呈显著负相关(r=-0.708、-0.705,均为P<0.05);二元Logistic回归分析结果显示,糖尿病病程长及玻璃体、视网膜增生膜组织中miR-15b水平低、FGF2蛋白表达水平高是影响糖尿病患者发生PDR的危险因素(均为P<0.01)。结论玻璃体及视网膜增生膜组织中miR-15b与FGF2蛋白表达水平与PDR的发生密切相关。

miRNA-15b-5p对糖尿病足大鼠溃疡愈合的影响及可能机制

目的探索miRNA-15b-5p对糖尿病足大鼠溃疡愈合的影响及可能机制。方法将54只SD大鼠随机分为对照组、miRNA-15b-5p agomir组、糖尿病组和miRNA-15b-5p antagomir组。RT-qPCR检测对照组和糖尿病组大鼠创面皮肤组织miRNA-15b-5p表达;对比各组大鼠创面形成后第1、4、7、10、14天创面愈合率;TUNEL检测各组大鼠溃疡创面组织细胞凋亡情况;ELISA检测各组大鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-18水平和ICAM-1、E-selectin水平;Western blot法检测各组大鼠创面皮肤组织中IKKβ、IKKα、p-IKKβ、p-IKKα、NF-κB的表达水平。结果miRNA-15b-5p在糖尿病大鼠创面组织中表达上调,miRNA-15b-5p过表达后,创面愈合速率减慢,细胞凋亡率升高,炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-18和黏附分子ICAM-1、E-selectin表达升高,大鼠创面组织中p-IKKβ、p-IKKα、NF-κB蛋白表达水平升高。抑制miRNA-15b-5p表达后,加快创面愈合速率,抑制细胞凋亡,减少炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-18和黏附分子ICAM-1、E-selectin表达,抑制大鼠创面组织中p-IKKβ、p-IKKα、NF-κB蛋白相对表达水平。结论抑制miRNA-15b-5p有助于减轻炎症反应,促进糖尿病足大鼠溃疡愈合,其作用机制可能与调控IKKβ/NF-κB信号通路有关。

MiR-15b及血管内皮生长因子在新生大鼠新型支气管肺发育不良发病机制中的作用

目的探讨miR-15b及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在大鼠新型支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)发病机制中的作用。方法将100只新生SD大鼠随机分为BPD组和对照组各50只,BPD组置于60%氧气浓度的氧舱中,对照组置于常压空气中,分别于生后第1、7、14、21天观察肺组织形态学变化,并测量辐射状肺泡计数(radial alveolar counts,RAC)、肺泡间隔厚度(alveolar septal thickness,AST);实时定量PCR检测miR-15b的表达,Elisa检测肺组织中VEGF表达水平。结果随着氧气暴露时间的延长,BPD组出现肺泡数目减少、逐渐失去正常肺泡结构、肺泡间隔明显增宽等表现。BPD组与对照组相比,第7、14、21天RAC值[(6.19±0.29)个比(6.86±0.92)个、(5.35±0.67)个比(9.75±0.34)个、(3.96±0.45)个比(10.04±0.52)个]均明显降低(P<0.05);BPD组与对照组相比,第7、14、21天AST值[(6.87±0.41)μm比(6.43±0.31)μm、(8.94±0.25)μm比(5.36±0.26)μm、(9.61±0.30)μm比(4.55±0.32)μm]均明显升高(P<0.05);BPD组与对照组相比,在第7、14、21天miR-15b表达水平[(1.12±0.11)比(0.84±0.09)、(1.33±0.09)比(0.73±0.07)、(1.66±0.15)比(0.45±0.10)]均明显升高(P<0.05);BPD组与对照组相比,第7、14、21天VEGF浓度[(10.89±1.67)pg/ml比(23.86±4.38)pg/ml、(8.75±1.28)pg/ml比(53.94±3.49)pg/ml、(4.66±1.12)pg/ml比(70.37±3.10)pg/ml]均明显降低(P<0.05)。结论miR-15b和VEGF共同参与了大鼠新型BPD的发生及发展。

肝细胞癌组织microRNA-15a表达对HepG2细胞侵袭和迁移影响

目的微小RNA-15a(microRNA-15a,miRNA-15a)在多种癌症中的表达均降低,是一类抑癌基因,可在体内外发挥抗肿瘤作用。然而,目前关于miRNA-15a在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及作用机制研究甚少。因此,本研究探讨miRNA-15a在85例HCC组织中的表达及其对HepG2细胞侵袭和迁移的影响。方法选择2017-02-05-2018-08-05在广东医科大学附属医院确诊的HCC患者85例、慢性乙肝患者70例、肝硬化患者72例及健康体检人群64名(健康对照组),采用qRT-PCR法检测各组患者血清中miRNA-15a的表达水平。选择HepG2细胞并分为空白对照组、miRNA-15a阴性对照组和miRNA-15amimic组3组,培养48h。qRT-PCR法检测转染后各组细胞miRNA-15a的表达水平,Transwell侵袭和划痕实验检测细胞侵袭、迁移能力,双荧光素酶靶标实验验证miRNA-15a与GABP的靶向关系,蛋白质印迹法和qRT-PCR法检测各组细胞GABP、Notch1、Hes-1蛋白和mRNA表达水平。多组间均值差异比较采用单因素方差分析,方差齐两两多重比较采用LSD-t方法。方差不齐两两多重比较采用Tamhane’s T2方法;miRNA-15a表达与临床病理参数间的关联采用χ^2检验。结果临床标本测定结果表明,HCC患者血清miRNA-15a相对表达量(0.65±0.02)低于慢性乙肝患者(1.42±0.16)、肝硬化患者(1.45±0.20)和健康对照组(1.53±0.15),差异有统计学意义,F=638.641,P<0.05;miRNA-15a低表达与患者的年龄、性别无关联,而与肿瘤TNM分期(χ^2=11.998,P<0.05)、转移(χ^2=5.406,P<0.05)有关联。细胞实验结果显示,与空白对照组(1.00±0.20)和miRNA-15a mimic NC组(1.01±0.17)相比,miRNA-15amimic组miRNA-15a表达水平(2.80±0.37)升高,F=48.514,P<0.05;miRNA-15amimic组穿透基质胶的细胞数量及迁移率低于空白对照组和miRNA-15amimic NC组,P<0.05。双荧光素酶报告基因实验分析结果显示,GABP是miRNA-15a的靶基因,miRNA-15amimic组GABP蛋白及mRNA表达水平(0.10±0.06和0.38±0.04)与空白对照组(0.65±0.06和1.00±0.15)和miRNA-15amimic NC组(0.58±0.06和1.03±0.26)相比降低,F蛋白=73.663,FmRNA=12.970,均P<0.05。miNRA-15amimic组Notch1、Hes-1蛋白及mRNA表达水平(0.68±0.05和0.63±0.07,0.48±0.11和0.66±0.08)低于正常对照组(0.68±0.05和1.48±0.04,1.00±0.14和1.00±0.11)和miRNA-15amimic NC组(0.70±0.05和1.50±0.05,1.01±0.12和1.00±0.19),FNotch1蛋白=131.462,FHes-1蛋白=332.787,FNotch1mRNA=17.216,FHes-1mRNA=6.010;均P<0.05。结论 HCC患者血清中miRNA-15a低表达,miRNA-15a可靶向GABP通过Notch信号通路抑制HepG2细胞的侵袭和迁移能力。

ICE方案联合甲氨蝶呤对弥漫大B细胞淋巴瘤患者的临床疗效及miR-451a、miR-15a表达的影响

目的探讨ICE方案(异环磷酰胺、卡铂、VP16)联合甲氨蝶呤对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者的临床疗效及miR-451a、miR-15a表达的影响。方法前瞻性选取2013年3月至2018年5月长沙市第三医院56例DLBCL患者作为研究对象,依据随机数字表法分为观察组与对照组,各28例。对照组予以ICE方案治疗,观察组予以ICE方案联合甲氨蝶呤治疗。对比两组肿瘤控制率、毒副反应、治疗前后血清miR-451a及miR-15a表达水平、免疫功能(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))、血清肿瘤标志物[β_(2)微球蛋白(β_(2)-MG)、糖类抗原125(CA125)、乳酸脱氢酶(LDH)]水平,随访6~12个月统计两组生存率。结果观察组肿瘤控制率(92.86%)高于对照组(71.43%)(P<0.05);治疗后两组miR-15a较治疗前降低,miR-451a较治疗前增高,且观察组miR-15a低于对照组,miR-451a高于对照组(P<0.05);治疗后两组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)较治疗前降低,CD8^(+)较治疗前增高(P<0.05),但组间比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后两组CA125、LDH及β_(2)-MG水平较治疗前降低,且观察组低于对照组(P<0.05);观察组毒副反应发生率、治疗后6、9、12个月生存率与对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论ICE方案联合甲氨蝶呤治疗DLBCL可通过调节血清miR-451a、miR-15a表达,进一步提高治疗效果,降低血清肿瘤标志物水平,且毒副反应及对免疫损害小,安全性高。

巴马汀对干扰素γ诱导的HaCaT细胞凋亡和炎症因子影响

目的探讨巴马汀对干扰素γ(IFN-γ)诱导的人角质成细胞(Ha Ca T细胞)凋亡和炎症因子分泌的影响及其机制。方法将Ha Ca T细胞分为12组:空白组(未做任何处理)、模型组(IFN-γ:50 ng·mL^-1处理24 h),较低、低、中、高4个浓度实验组[模型细胞+4个浓度(0.20,0.39,0.78和1.56μg·mL^-1)巴马汀处理],IFN-γ+miR-NC组(IFN-γ50 ng·mL^-1预处理+转染miRNC),IFN-γ+miR-15a-5p组(IFN-γ50 ng·mL^-1预处理+转染miR-15a-5p),低浓度巴马汀+anti-miR-NC组(IFN-γ50 ng·mL^-1预处理+巴马汀0.39μg·mL^-1+anti-miR-NC),低浓度巴马汀+anti-miR-15a-5p组(IFN-γ50 ng·mL^-1+巴马汀0.39μg·mL^-1+转染anti-miR-15a-5p),低浓度巴马汀+pc DNA3.1组(IFN-γ50 ng·mL^-1+巴马汀0.39μg·mL^-1+转染pc DNA3.1),低浓度巴马汀+pc DNA3.1-CXCL10组(IFN-γ50 ng·mL^-1+巴马汀0.39μg·mL^-1+转染pc DNA3.1-CXCL10),CXCL10野生型组(WT-CXCL10和miR-15a-5p共转染至Ha Ca T细胞)和CXCL10突变型组(MUT-CXCL10和miR-15a-5p共转染至Ha Ca T细胞)。以流式细胞术检测细胞凋亡,免疫印迹法检测CXC趋化因子配体10(CXCL10)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白、白细胞介素-6(IL-6)、IL-10蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链反应法测定miR-15a-5p表达水平。结果空白组、模型组、IFN-γ+miR-NC组、IFN-γ+miR-15a-5p组、低浓度巴马汀+anti-miR-NC组、低浓度巴马汀+anti-miR-15a-5p组、低浓度巴马汀+pc DNA3.1组、低浓度巴马汀+pc DNA3.1-CXCL10组和较低、低、中、高4个浓度实验组的细胞凋亡率分别为(7.86±0.82)%,(21.83±2.51)%,(21.64±2.21)%,(13.67±1.42)%,(13.58±1.42)%,(18.56±1.87)%,(14.58±1.42)%,(17.86±1.71)%,(18.86±1.67)%,(13.38±1.41)%,(11.66±1.23)%和(9.97±0.99)%;这12组的IL-6蛋白表达分别为0.24±0.02,0.96±0.09,0.90±0.09,0.52±0.05,0.51±0.05,0.74±0.07,0.50±0.08,0.78±0.07,0.80±0.08,0.50±0.05,0.41±0.04和0.35±0.03;这12组的IL-10蛋白表达分别为0.84±0.08,0.19±0.02,0.20±0.02,0.47±0.04,0.44±0.04,0.30±0.03,0.44±0.09,0.28±0.02,0.27±0.02,0.43±0.04,0.56±0.05和0.63±0.06。上述指标:模型组与空白组相比,或较低、低、中、高4个浓度实验组与模型组相比,或miR-15a-5p组与miR-NC组相比,或低浓度低浓度巴马汀+anti-miR-15a-5p组与巴马汀+anti-miR-NC组相比,或低浓度巴马汀+pc DAN3.1-CXCL10组与低浓度巴马汀+pc DAN3.1组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论巴马汀可抑制IFN-γ诱导的Ha Ca T细胞凋亡,其机制可能是与miR-15a-5p、CXCL10以及炎症因子IL-6和IL-10相关。