血浆miRNA-190 及miRNA-197联合检测可辅助诊断肺血栓栓塞症

目的:探讨血浆miRNA-190和miRNA-197在肺血栓栓塞症(PTE)患者中表达水平及辅助诊断价值。方法:选择2017年7月至2019年6月苏州市第九人民医院PTE患者30例为PTE组,同期匹配心肌梗死患者45例为心肌梗死组,健康体检者45例为正常对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血浆miRNA-190和miRNA-197在所有受试者外周血中的表达水平,并分析其在3组中的表达量差异。应用受试者工作特征曲线(ROC曲线)及曲线下面积(AUC)(95%CI)评估两者单独或联合检测作为PTE诊断指标的意义。结果:血浆miRNA-190在3组中的相对表达量分别为3.01±2.01,1.80±1.02,1.18±0.67;其在PTE组血浆中表达量较心肌梗死组及正常对照组高(t=3.602,t=5.814,P均<0.05)。血浆miRNA-197在3组中相对表达量分别为4.82±3.80,1.88±1.50,1.38±0.83;其在PTE组血浆中表达量较心肌梗死组及正常对照组高(t=4.791,t=5.886,P均<0.05)。作为PTE的诊断指标,血浆miRNA-190的最佳临界值为1.598,敏感度为75.56%,特异度为80.00%,AUC为0.7844,95%CI为0.6858~0.8831;血浆miRNA-197最佳临界值为2.40,敏感度为75.56%,特异度为86.67%,AUC为0.7931,95%CI为0.6870~0.8991。血浆miRNA190和miRNA-197联合检测诊断PTE的敏感度为80.00%,特异度为93.33%,AUC为0.9136,95%CI为0.8516~0.9756;均高于两者单独检测。结论:血浆miRNA-190和miRNA-197在PTE患者外周血血浆中表达量明显升高,两者联合检测敏感度和特异度更高,有助于PTE的辅助诊断。

miR-190对胶质瘤细胞生长及迁移抑制机制研究

目的探讨miR-190对胶质瘤细胞生长及迁移的抑制机制。方法通过实时荧光定量PCR法检测miR-190在人胶质细胞HEB和人胶质瘤细胞U87和U251细胞中的表达情况。细胞计数试剂盒(CCK8)实验和转移小室实验检测miR-190过表达和低表达时,U87和U251细胞的增殖和迁移能力。通过MIRDB软件预测miR-190可以靶向的蛋白质,荧光素酶报告基因实验分析miR-190对ZEB2的靶向作用。采用蛋白免疫印迹法检测miR-190过表达和低表达时,U87和U251细胞中ZEB2蛋白的变化情况。结果实时荧光定量PCR实验检测结果指出,miR-190在胶质瘤细胞系U87和U251中显著下调,明显低于正常胶质细胞HEB(P <0. 05)。miR-190表达上调时U87和U251细胞的生长受到抑制(P <0. 05)。转移小室结果显示,miR-190作用后,U87和U251细胞迁移能力下调(P <0. 05);miR-190受到抑制后,迁移细胞数量增加(P <0. 05)。MIRDB软件分析发现,miR-190与ZEB2的3’非翻译区具有结合位点。荧光素酶报告基因实验显示,miR-190能够下调ZEB2野生型的活性(P <0. 05),但是对ZEB2突变型没有作用(P> 0. 05)。蛋白免疫印迹法检测结果显示,miR-190能够显著抑制ZEB2蛋白水平的表达;miR-190表达受到抑制后,ZEB2蛋白水平上调。结论 miR-190可以通过抑制ZEB2的表达,抑制胶质瘤细胞的生长和迁移。