神经胶质瘤患者miRNA-193b基因表达水平的改变及其意义

目的探讨神经胶质瘤患者miRNA-193b基因表达水平的改变及其意义。方法对72例神经胶质瘤患者(神经胶质瘤组)和30例脑外伤手术患者(对照组)的脑组织标本进行miRNA-193b基因表达水平的检测。采用甲基化特异性PCR技术对神经胶质瘤患者miRNA-193b启动子区甲基化水平进行检测。对结果进行比较分析。结果对照组miRNA-193b基因表达水平(0.5528±0.1957)明显高于神经胶质瘤组(0.2450±0.1845)(P<0.01)。低级别亚组神经胶质瘤患者miRNA-193b基因表达水平(0.2909±0.1802)明显高于高级别亚组(0.1991±0.1795)(P<0.05)。低甲基化亚组神经胶质瘤患者miRNA-193b基因表达水平(0.2817±0.1883)明显高于高甲基化亚组(0.1615±0.1476)(P<0.01)。结论神经胶质瘤患者miRNA-193b基因表达水平低,且病理级别越高、甲基化水平越高,miRNA-193b基因表达水平越低。该基因表达水平可作为神经胶质瘤早期诊断或病情监测的指标之一。

活化型肝星状细胞中miRNA-193下调α-平滑肌肌动蛋白的表达

目的：研究活化型肝星状细胞（HSC）中miRNA-193（miR-193）下调肝纤维化相关基因的表达。方法：将大鼠miR-193的前体序列（pre-miR-193）克隆到真核表达载体pcDNA3．1（＋）中，经酶切和DNA测序鉴定，获得质粒pcDNA3．1-miR-193；通过脂质体转染法将质粒转染到大鼠的活化型肝星状细胞（HSC-T6）中，采用荧光素酶报告基因分析法和免疫印迹检测肝纤维相关基因的表达。结果：构建的真核表达载体pcDNA3．1-miR-193经酶切鉴定及DNA测序显示，目的片段的大小与预期结果一致；荧光素酶报告基因分析法和免疫印迹检测显示，重组质粒转染到活化型HSC-T6中后，肝纤维化相关基因的α-平滑肌肌动蛋白（a-SMA）的表达呈明显下降趋势，而胶原蛋白IαI和Iα2的下调作用不明显。结论：miR-193能抑制活化型肝星状细胞中肝纤维化相关基因α-SMA的表达。

miRNA-193b、Lp-PLA2、miR-146a与阿尔茨海默病严重程度的关系及预测疗效的价值

目的探讨miRNA-193b、Lp-PLA2、miR-146a与阿尔茨海默病(AD)严重程度的关系及预测疗效的价值。方法选取2016年1月至2019年6月本院收治的114例AD患者,根据病情分为轻度组(n=35)、中度组(n=49)、重度组(n=30),比较各组miRNA-193b mRNA、Lp-PLA2、miR-146a m RNA水平、简易精神状态检查量表(MMSE)、神经精神问卷(NPI)评分,采用Spearman分析各指标与病情分级的相关性,采用Pearson分析各指标与MMSE、NPI评分的相关性,采用接收者操作特征(ROC)曲线及ROC下面积(AUC)分析各指标预测疗效的价值。结果 miRNA-193b mRNA与病情分级呈负相关,与MMSE评分呈正相关;与NPI评分呈负相关;Lp-PLA2、miR-146a m RNA与病情分级呈正相关,与MMSE评分呈负相关,与NPI评分呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05);miRNA-193b m RNA与Lp-PLA2、miR-146a mRNA呈负相关,Lp-PLA2与miR-146a m RNA呈正相关(P<0.05);miR-146a mRNA预测疗效的AUC为0.796,高于miRNA-193b mRNA预测疗效AUC的0.766及Lp-PLA2预测疗效AUC的0.741,但低于3指标联合的AUC(P<0.05)。结论 miRNA-193b、Lp-PLA2、miR-146a与AD严重程度显著相关,3者可相互影响,共同参与AD病情进展,检测3者表达有望成为预测疗效的新型方案。

参地颗粒对C-BSA大鼠肾组织miRNA-193a和WT-1 mRNA表达的干预作用

目的观察参地颗粒对C-BSA大鼠肾组织中miRNA-193a和WT-1 mRNA的干预作用。方法40只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、参地颗粒组、缬沙坦组各10只。参地颗粒组给予参地颗粒水溶液4.0 g/(kg·d)灌胃,缬沙坦组给予缬沙坦胶囊混悬液20 mg/(kg·d)灌胃,正常组、模型组予生理盐水灌胃,每次3 mL,每天1次,连续给药8周后处理动物、留取尿液和肾脏标本。酶联免疫吸附法(ELISA)检测尿白蛋白和尿肌酐浓度、尿Nephrin和Podocalyxin含量,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肾组织中WT-1及miRNA-193a mRNA表达。透射电镜观察肾小球超微结构图,并计算肾小球基底膜(GBM)平均厚度(TGBM)。结果与正常组比较,模型组大鼠的尿白蛋白/尿肌酐比值(UACR)、尿Nephrin和Podocalyxin含量、肾组织miR-193a mRNA表达量、TGBM均显著升高,而WT-1 mRNA表达量显著减少(P<0.05)。与模型组比较,参地颗粒组和缬沙坦组大鼠的UACR、尿Nephrin和Podocalyxin含量、肾组织miR-193a mRNA表达量、TGBM均显著下降,WT-1 mRNA表达量显著增加(P<0.05);且参地颗粒组的UACR、尿Podocalyxin、miR-193a和WT-1 mRNA表达量、TGBM变化均显著优于缬沙坦组(P<0.05)。正常组肾小球足细胞结构正常,模型组足突可见大部分融合或消失,基底膜弥漫性增厚,上皮下可见大块电子致密物沉积。参地颗粒组和缬沙坦组的足细胞结构较模型组有所改善。结论参地颗粒可能通过抑制C-BSA大鼠肾组织中miR-193a表达,并上调WT-1表达,进而减轻足细胞损伤,发挥降低尿蛋白作用。

miRNA-193b、miRNA-5739在多囊卵巢综合征痰湿证颗粒细胞中的表达及意义

目的 分析多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)痰湿证患者卵巢颗粒细胞中miRNA-193b、miRNA-5739的差异表达及其与促排卵结局指标的相关性,探讨多囊卵巢综合征痰湿证的发病机制及二者对卵母细胞质量及早期胚胎发育的影响。方法 选取2016年4月—2018年1月于医院中西医结合生殖与遗传中心行显微受精-胚胎移植(intracytoplasmic sperm injection, ICSI)的多囊卵巢综合征患者48例作为实验组(PCOS组),其中痰湿证20例(痰湿证组)、非痰湿证28例(非痰湿证组),以同期单纯因男方因素不孕的患者14例作为正常对照组。采用实时荧光定量PCR检测所有患者颗粒细胞中miRNA-193b、miRNA-5739的表达量并分析。结果①痰湿组颗粒细胞中miRNA-193b、miRNA-5739相对表达量低于非痰湿组及正常对照组(P<0.05)。②痰湿组颗粒细胞miRNA-5739表达水平与MII卵率、正常受精卵、2PN卵裂率呈正相关(P<0.05),miRNA-193b表达水平与促排卵结局指标间未见显著相关性。③生物学信息分析结果显示miRNA-193b的靶基因可以富集在PI3K-Akt、Ras等18个信号通路上,miRNA-5739的靶基因可以富集在MAPK等11个信号通路上。结论 miRNA-193b、miRNA-5739在PCOS痰湿证患者颗粒细胞中特异性低表达,可能参与了PCOS痰湿证的发病机制,其中miRNA-5739可能对卵母细胞和胚胎发育过程产生不利影响。

miRNA-193b-5p抑制转录调节因子CITED2表达对黑素合成的影响

目的初步探讨miRNA(miR)-193b-5p对黑素合成的影响及可能机制。方法从健康男性包皮环切术后废弃的正常包皮组织中分离培养人原代黑素细胞。分别转染miR-NC模拟物(miR-NC mimics组)和miR-193b-5p模拟物(miR-193b-5p mimics组)至人原代黑素细胞及人黑素瘤MNT1细胞,转染48 h时实时定量PCR(RT-qPCR)检测miR-193b-5p的过表达效率,转染72 h时Western印迹检测黑素合成相关蛋白酪氨酸酶和小眼畸形相关转录因子的表达,转染1周时采用氢氧化钠法测定细胞中黑素含量。通过TargetScan网站预测miR-193b-5p的靶基因并采用双荧光素酶报告实验验证,RT-qPCR及Western印迹检测miR-193b-5p过表达后该靶基因mRNA和蛋白表达水平的变化。两组间比较采用两独立样本t检验。结果人原代黑素细胞及人黑素瘤MNT1细胞中,miR-193b-5p mimics组miR-193b-5p的表达水平均显著高于miR-NC mimics组,t值分别为65.57、22.49,均P<0.001,且miR-193b-5p mimics组黑素含量(0.091±0.007、0.130±0.004)显著低于miR-NC mimics组(0.117±0.002、0.188±0.032),t值分别为5.98、3.24,P值分别<0.01、<0.05。Western印迹检测显示,人原代黑素细胞及人黑素瘤MNT1细胞中,miR-193b-5p mimics组黑素合成相关蛋白酪氨酸酶及小眼畸形相关转录因子的表达均显著低于miR-NC mimics组(均P<0.05)。通过TargetScan预测及双荧光素酶报告实验验证,转录调节因子CITED2的3′非翻译区存在miR-193b-5p的结合位点。人原代黑素细胞及人黑素瘤MNT1中上调miR-193b-5p表达后,CITED2 mRNA及蛋白的表达水平均显著低于miR-NC mimics组(均P<0.05)。结论miR-193b-5p过表达可下调黑素合成相关蛋白酪氨酸酶及小眼畸形相关转录因子的表达,抑制黑素合成,该过程与靶向抑制CITED2的表达有关。

血浆miR-193b和miR-199a在食管癌诊治中的临床价值

目的探讨miRNA-193b和miRNA-199a在血浆中的表达对食管鳞癌的诊治价值。方法选取2014年9月至2015年6月之间食管鳞癌患者56例,同期健康体检者30例。采用qRT-PCR技术(Taq Man探针法)检测食管鳞癌患者和健康者血浆中miRNA-193b、miRNA-199a的表达水平,以及检测食管鳞癌患者术前、术后1w血浆中miRNA-193b、miRNA-199a的表达水平,并结合临床病理资料,探讨它们与食管鳞癌的关系。结果食管鳞癌患者血浆中miR-193b和miR-199a的表达量均明显低于健康体检者(P<0.05);食管癌患者术后血浆中miR-193b和miR-199a的表达量均明显高于术前(P<0.05);血浆中miR-193b的表达与肿瘤TNM分期有关(t=-5.332,P=0.000),表现为随着TNM分期越晚,表达逐渐下调的趋势,与患者年龄、性别、肿瘤分化程度、淋巴结转移无明显关联(P>0.05)。miR-199a的表达与肿瘤分化程度、肿瘤TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05),表现为随着分化程度越低、TNM分期越晚和出现淋巴结转移,表达逐渐下调的趋势,而与患者年龄、性别无明显关联(P>0.05)。结论 miRNA-193b、miRNA-199a在食管鳞癌患者血浆中表达下调,可能作为抑癌基因参与食管鳞癌的发生发展。

MicroRNA-193b与肥胖的研究进展

microRNAs(miRNAs)是近年来新发现的一类大小为20-25个核苷酸的单链非编码小分子RNA,具有内源性、高保守的特点,通过与靶mRNA碱基互补配对,发挥降解或抑制靶mRNA翻译的作用。近期研究发现,miRNA与肥胖、2型糖尿病等代谢性疾病密切相关。肥胖越来越成为一个遍及全球的严重公共健康问题,主要表现为脂肪细胞数量异常增加和体积异常增大,是以机体能量代谢失衡导致脂肪过度积聚为主要特征的一种代谢性疾病。miRNA-193b-365在脂肪细胞分化和肥胖状态下异常表达,推测其可能参与了脂肪细胞分化以及肥胖的发生发展。深入理解脂肪细胞分化机制对于防治肥胖具有重大意义。本文就此领域的研究进展作一综述。